朱丹丹，安麗鳳，黃敬文，張麗宏，葛詩(shī)慧，韓 雪

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)佳木斯學(xué)院，黑龍江 佳木斯 150040)

蒺藜為蒺藜科植物蒺藜(TribulusterrestrisL.)的干燥成熟果實(shí)，最早見于《神農(nóng)本草經(jīng)》，稱其蒺藜子。其味辛散、苦泄，微溫，并有小毒，專入肝經(jīng)，具有疏肝解郁、明目平肝、活血止痛、祛風(fēng)止癢等功效，主治肝氣郁結(jié)之頭痛眩暈、經(jīng)閉、胸脅及乳房脹痛等，風(fēng)邪侵襲之目赤疼痛、皮膚風(fēng)疹及瘙癢等癥[1]。蒺藜皂苷是從蒺藜成熟果實(shí)中提取的一種天然化合物，具有抗氧化、抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗菌、抗衰老、改善性功能、保護(hù)心腦血管和修復(fù)神經(jīng)損傷等多種藥理作用。現(xiàn)將蒺藜皂苷的提取、藥理作用及在皮膚病方面的相關(guān)研究情況綜述如下，以期為蒺藜皂苷的臨床應(yīng)用及藥物開發(fā)提供一定參考。

1 蒺藜皂苷的性質(zhì)及提取

1.1蒺藜皂苷的理化性質(zhì) 蒺藜皂苷是以甾體皂苷為主的多種皂苷的混合物，其中包括呋甾醇、螺甾醇等皂苷。顏色為黃色粉末，分子式為C30H26O13，相對(duì)分子質(zhì)量為594.52000，化學(xué)結(jié)構(gòu)見圖1。

圖1 蒺藜皂苷的化學(xué)結(jié)構(gòu)

1.2蒺藜皂苷的提取 由于皂苷類化合物可溶于水及乙醇，易溶于熱的水和乙醇，不溶于乙醚、氯仿及苯。而甾體皂苷的極性較強(qiáng)，一般選擇極性較大的溶液作溶劑提取，常用的有乙醇、水[2]。目前蒺藜皂苷的提取方法主要有水提醇沉法和醇提濃縮法。最近研究還發(fā)現(xiàn)蒺藜皂苷的高效率的提取工藝為 A3B3C3。即用蒺藜粗粉在體積分?jǐn)?shù)75%的乙醇中回流提取3次，每次1.5 h，因而此提取方法為大規(guī)模提取蒺藜皂苷提供了參考依據(jù)[3]。

2 蒺藜皂苷的藥理作用

2.1抗炎作用 抗炎是蒺藜皂苷最基本的藥理作用之一，主要涉及抑制促炎因子和調(diào)控多種相關(guān)信號(hào)通路等機(jī)制。蔡肇栩等[4]研究發(fā)現(xiàn)蒺藜皂苷可通過(guò)抑制白細(xì)胞介素-17(IL-17)分泌和核因子-κB(NF-κB)信號(hào)通路的激活，降低炎癥小鼠體內(nèi)IL-17、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、NF-κB蛋白表達(dá)量，以減輕脂多糖誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。對(duì)于同型半胱氨酸( Hcy)誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)，蒺藜皂苷通過(guò)抑制NADPH氧化酶4(NOX4)的表達(dá)和活性氧簇(ROS)的生成，從而降低氧化應(yīng)激損傷導(dǎo)致的NF-κB通路活化，且能顯著降低基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)蛋白和TNF-α基因的表達(dá)水平，以減少人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的炎癥浸潤(rùn)[5]。研究發(fā)現(xiàn)，蒺藜總皂苷能夠有效提高脂多糖(LPS)損傷的巨噬細(xì)胞的增殖活性，抑制細(xì)胞釋放TNF-α、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、白細(xì)胞介素-2(IL-2)和白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)以及產(chǎn)生NO，表明蒺藜總皂苷可以減少巨噬細(xì)胞的炎癥損傷[6]。陳曉云[7]通過(guò)采用LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞體外抗炎模型的研究，表明蒺藜總皂苷能降低TNF-α和NO的含量及炎癥細(xì)胞的吞噬能力，以發(fā)揮炎癥損傷的保護(hù)作用；采用小鼠急性肺損傷抗炎試驗(yàn)，表明蒺藜總皂苷能顯著降低Toll樣受體4(TLR4)、腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白6(TRAF6)蛋白水平，抑制IκB磷酸化，調(diào)控細(xì)胞 TLR4-NF-κB信號(hào)通路，發(fā)揮其抗炎作用。

2.2抗氧化作用 蒺藜皂苷在機(jī)體組織損傷中通過(guò)抗氧化作用發(fā)揮療效，其抗氧化作用主要涉及升高抗氧化酶活性，清除機(jī)體自由基，調(diào)控過(guò)氧化反應(yīng)等機(jī)制。陳曉云[7]采用ABTS、DPPH自由基清除能力測(cè)定法和鐵離子還原能力測(cè)定法(FRAP)檢測(cè)蒺藜皂苷的體外抗氧化作用，顯示蒺藜皂苷的抗氧化性能是通過(guò)其清除氧化自由基和抗氧化還原性實(shí)現(xiàn)的。對(duì)于Hcy誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷，蒺藜皂苷可通過(guò)提高細(xì)胞的增殖活力，升高超氧化物歧化酶(SOD)活性，降低丙二醛(MDA)含量和ROS表達(dá)而發(fā)揮保護(hù)作用[8]。研究表明，蒺藜皂苷可提高谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性和血清抗氧化(T-AOC)作用，降低血清中MDA含量，以調(diào)節(jié)機(jī)體氧化反應(yīng)，進(jìn)而防止活性氧對(duì)機(jī)體造成損傷[9]。同時(shí)，其可通過(guò)降低MDA含量和升高SOD、GSH-Px的活性，以增強(qiáng)機(jī)體對(duì)氧化應(yīng)激反應(yīng)的能力，進(jìn)而能有效地防治小鼠模型中肝組織的損傷[10]。針對(duì)阿霉素誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞過(guò)氧化反應(yīng)，細(xì)胞損傷，心肌酶的漏出，蒺藜皂苷可使心肌酶減少，SOD活性升高，MDA生成下降，其亦可以抑制由NO升高引起的過(guò)氧化反應(yīng)。且單體B(TTSMB)為蒺藜皂苷中較易獲得的具有心肌保護(hù)作用的單體，能對(duì)抗自由基損傷，抑制心肌細(xì)胞凋亡，其機(jī)制是通過(guò)激活 PKCε/ERK1/2通路，從而抑制細(xì)胞凋亡。在離體實(shí)驗(yàn)中，TTSMB通過(guò)降低乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)及天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)的活性和MDA的含量，增加SOD的活性，進(jìn)而抑制心肌細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化，減輕缺血再灌注所致的心肌細(xì)胞受損[11]。

2.3抗腫瘤作用 蒺藜皂苷可通過(guò)抑制癌細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)其凋亡，在腫瘤研究領(lǐng)域具有應(yīng)用價(jià)值。實(shí)驗(yàn)研究顯示，蒺藜皂苷D可通過(guò)調(diào)控凋亡關(guān)鍵蛋白Bcl-2及Bax的表達(dá)，抑制膀胱癌T24細(xì)胞增殖以及加速其凋亡而發(fā)揮細(xì)胞毒性作用，以達(dá)到治療膀胱癌的作用[12]。其還可有效控制人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的增殖，其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)Bcl-2和Bax蛋白的表達(dá)，影響細(xì)胞周期及使周期發(fā)生停滯而誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡有關(guān)[13]。此外，經(jīng)蒺藜皂苷處理后，肺癌A549細(xì)胞中Cyclin D1蛋白表達(dá)降低，p27、C-Caspase-3、Caspase-3蛋白水平升高，提示蒺藜皂苷可影響細(xì)胞周期進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞凋亡。同時(shí)，蒺藜皂苷可促進(jìn)肺癌A549細(xì)胞中PDCD4蛋白的表達(dá)，以實(shí)現(xiàn)體外抗肺癌A549細(xì)胞的惡性生長(zhǎng)[14]。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)Nin1結(jié)合蛋白(NOB1)可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，因而蒺藜皂苷通過(guò)下調(diào)NOB1以控制胃癌細(xì)胞的增殖，其作用機(jī)制可能與調(diào)控胃癌細(xì)胞增殖的能力和Cyclin D1蛋白的表達(dá)，升高細(xì)胞G1期比例和Cleaved Caspase 3蛋白的表達(dá)有關(guān)[15]。對(duì)于結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞，蒺藜皂苷處理后可抑制細(xì)胞增殖，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，降低CyclinD1、Bcl2蛋白表達(dá)，升高p21、Bax表達(dá)，且通過(guò)調(diào)控IncRNA AGAP2AS1/miR646的表達(dá)抑制結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖、誘導(dǎo)其凋亡[16]。

2.4抗衰老作用 蒺藜皂苷能夠通過(guò)多靶點(diǎn)，多途徑發(fā)揮多方面的抗衰老功效。對(duì)于側(cè)腦室注射Aβ25～35引起的小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙，蒺藜皂苷可能通過(guò)降低NO含量和NOS、iNOS的活性，改善Aβ25～35導(dǎo)致的小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙[17]。研究表明，通過(guò)促進(jìn)衰老小鼠全血中CAT及GSH-Px的酶活化，以增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化活力和免疫功能，從而提高精子密度、精子存活率，提示蒺藜皂苷具有改善衰老小鼠生精功能作用[18]。此外，蒺藜皂苷可降低皮膚MDA含量，提高皮膚SOD活力，增加全血中CAT及GSH-Px的酶活性，升高羥脯氨酸(Hyp)含量，而皮膚HyP含量的減少，說(shuō)明膠原蛋白含量減少，皮膚處于衰老狀態(tài)。提示蒺藜皂苷能有效改善全血和皮膚的生化代謝指標(biāo)，從而具有顯著的抗皮膚衰老作用[19]。同時(shí)，蒺藜皂苷可使皮膚真皮層厚度增加，彈性纖維排列致密，且抑制皮膚組織細(xì)胞的凋亡，表明蒺藜皂苷對(duì)皮膚有一定的抗衰老作用[20]。因此，蒺藜皂苷作為有效的抗衰老藥物，將具有廣泛的臨床應(yīng)用前景。

2.5其他作用 蒺藜皂苷對(duì)心腦血管的作用及機(jī)制的研究，已多見于實(shí)驗(yàn)和臨床研究，且在治療性功能及抑郁癥等方面均有廣闊的治療前景。盧博等[21]通過(guò)構(gòu)建環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide，CP)所致的小鼠睪丸損傷模型，發(fā)現(xiàn)蒺藜皂苷可能通過(guò)促進(jìn)Caspase-8的表達(dá)，拮抗環(huán)磷酰胺引起的生精功能損傷，減少生精細(xì)胞的凋亡，以調(diào)節(jié)生精小管上皮精原細(xì)胞和精子細(xì)胞的發(fā)育，進(jìn)而修復(fù)小鼠睪丸損傷。對(duì)于T2DMED大鼠的勃起功能，蒺藜皂苷可抑制其陰莖海綿體內(nèi)細(xì)胞凋亡，改善大鼠陰莖海綿體內(nèi)皮功能，提高eNOS、NO、cGMP的表達(dá)。提示蒺藜皂苷能夠通過(guò)影響T2DMED大鼠陰莖內(nèi)皮功能，而促進(jìn)NO/cGMP通路的表達(dá)，修復(fù)平滑肌纖維化，抑制細(xì)胞凋亡，從而改善小鼠的勃起功能[22]。同時(shí)，蒺藜皂苷可通過(guò)影響基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑1(TIMP-1)和ROS的表達(dá)水平， 降低裂解的半胱天冬酶3和裂解的半胱天冬酶9的表達(dá)，進(jìn)而改善內(nèi)皮功能，抑制海綿體纖維化，保護(hù)T2DMED大鼠的勃起功能[23]。此外，張偉等[24]發(fā)現(xiàn)蒺藜皂苷可通過(guò)升高大鼠血液中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)5-HT和γ氨基丁酸(GABA)含量，抑制海馬中色氨酸前體酶-吲哚胺2，3-雙加氧酶(IDO)基因和蛋白表達(dá)，影響5-HT前體的消耗，以及調(diào)節(jié)海馬中IL-1β和IL-10炎性基因的表達(dá)等，多途徑發(fā)揮抗抑郁作用?？傊?，蒺藜皂苷通過(guò)其抗炎、抗氧化、抗衰老、抗腫瘤等作用，在各領(lǐng)域有著廣泛的藥用價(jià)值。

3 蒺藜皂苷在皮膚病方面的相關(guān)研究

3.1蒺藜皂苷對(duì)色素性皮膚病的作用 白癜風(fēng)是一種色素性皮膚病。在白癜風(fēng)患者皮損處MDA表達(dá)水平提高，氧SOD表達(dá)水平下降[25]。而SOD和過(guò)氧化氫酶(CAT)是黑素細(xì)胞(MC)內(nèi)清除過(guò)氧化氫(H2O2)的重要酶類。因此，減少CAT和SOD的表達(dá)可使H2O2大量積累，進(jìn)而損傷細(xì)胞核和線粒體、毀壞黑素小體、抑制黑素合成，致使MC發(fā)生氧化應(yīng)激，參與白癜風(fēng)的發(fā)展過(guò)程[26]。蒺藜皂苷具有抗氧化作用，可提高SOD、CAT的活性，降低ROS和H2O2的含量，以減少自由基的產(chǎn)生，穩(wěn)定線粒體膜，保護(hù)氧化應(yīng)激損傷的黑素細(xì)胞，提高黑素細(xì)胞活性和抑制黑素細(xì)胞的凋亡，從而達(dá)到治療白癜風(fēng)的效果[27]。陳樂(lè)樂(lè)等[28]研究表明黑色素是在黑色素細(xì)胞中的黑色素小體上合成，增加酪氨酸酶(TYR)的活性可促進(jìn)黑色素的生成，這與白癜風(fēng)的發(fā)病相關(guān)。在調(diào)控黑素合成的轉(zhuǎn)錄因子中，小眼畸形相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子(MITF)位于調(diào)控黑色素合成相關(guān)通路的中心位置，其通過(guò)調(diào)控黑色素合成過(guò)程的限速酶來(lái)影響黑色素的生成[29]。蒺藜皂苷可促進(jìn)A375細(xì)胞TYR和MITF mRNA的表達(dá)，提高TYR活性，增加黑素合成，進(jìn)而改善了白癜風(fēng)的癥狀[30]，從而達(dá)到治療白癜風(fēng)的作用，這為中藥單體的研究和應(yīng)用奠定了理論基礎(chǔ)。

3.2蒺藜皂苷對(duì)丘疹鱗屑性皮膚病的作用 銀屑病以真皮炎性浸潤(rùn)、角質(zhì)形成細(xì)胞(HaCaT)異常增生為病理學(xué)特點(diǎn)[31]，其中樹突細(xì)胞(DC)、T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞參與銀屑病的炎癥滲透[32]。研究發(fā)現(xiàn)，蒺藜皂苷D可修復(fù)銀屑病樣小鼠皮損處的組織病理改變，減少表皮厚度，抑制HaCaT增殖，下調(diào)DC、淋巴細(xì)胞B和淋巴細(xì)胞T等免疫細(xì)胞的數(shù)量，進(jìn)而改善銀屑病皮損處的炎癥反應(yīng)和免疫反應(yīng)[33]。在銀屑病小鼠模型的研究中發(fā)現(xiàn)，NOX4是一種氧化應(yīng)激標(biāo)記物，NOX4 mRNA表達(dá)的增加與銀屑病的發(fā)展關(guān)系密切[34]。NOX4的異常激活可產(chǎn)生大量ROS，進(jìn)而活化NF-κB信號(hào)通路，促進(jìn)氧化反應(yīng)。提示蒺藜皂苷可能通過(guò)抑制NOX4表達(dá)和ROS生成，進(jìn)而降低NF-κB的活化，以減輕銀屑病的氧化反應(yīng)和炎癥損傷[5]。在蕁麻疹皮膚病的治療中，張海峰等[35]發(fā)現(xiàn)，針刺蕁麻疹患者可激活5-羥色胺(5-HT)，從而抑制信號(hào)傳導(dǎo)以止癢。實(shí)驗(yàn)表明蒺藜皂苷可升高大鼠血液中5-HT含量[24]，提示蒺藜皂苷可能通過(guò)調(diào)節(jié)5-HT以緩減蕁麻疹的皮膚瘙癢癥狀。同時(shí)，在非IgE依賴性的蕁麻疹中，Th2細(xì)胞可以分泌IL-10促進(jìn)肥大細(xì)胞活化脫顆粒，釋放組胺、炎性介質(zhì)等。在慢性蕁麻疹中，IL-6、IL-8、TNF-α及IL-1β等細(xì)胞因子參與皮膚炎癥損傷[36-37]。研究表明，IL-17可激活信號(hào)通路NF-κB、JAKS/STATS等，從而促進(jìn)炎癥的發(fā)生[38]。蒺藜皂苷能明顯上調(diào)抗炎因子IL-10的表達(dá)，能通過(guò)IL-17炎癥通路降低TNF-α、IL-6、IL-1β和NF-κB的表達(dá)水平，從而發(fā)揮對(duì)表皮的氧化應(yīng)激及炎癥損傷的保護(hù)作用[4-5，24]。且臨床中蒺藜消葶湯以蒺藜為君藥，通過(guò)調(diào)節(jié)免疫、抗炎、抗過(guò)敏、止癢等方面對(duì)蕁麻疹的治療起效[39]。

3.3蒺藜皂苷對(duì)炎性濕疹類皮膚病的作用 特異性皮炎(atopic dermatitis，AD)的發(fā)病機(jī)制與Th1和Th2相關(guān)炎癥細(xì)胞因子的水平，如iNOS、環(huán)氧基酶-2(COX-2)、IL-6、TNF-α和IL-8以及NF-κB和MAPK信號(hào)通路有關(guān)，而抗氧化劑通過(guò)調(diào)節(jié)線粒體激活MAPK和NF-κB信號(hào)通路，在AD中具有保護(hù)作用[40-41]。研究顯示，在AD皮損中絲聚合蛋白(Filaggrin，F(xiàn)LG)的表達(dá)明顯降低。而下調(diào)的FLG主要通過(guò)影響角質(zhì)層的機(jī)械強(qiáng)度、pH值及調(diào)控參與角質(zhì)層脂質(zhì)合成酶類的活性以破壞皮膚屏障，進(jìn)而加重病情。故促進(jìn)FLG的表達(dá)能有利于AD癥狀的改善[42]。李桂雙等[43]研究發(fā)現(xiàn)蒺藜皂苷可明顯抑制了TNF-α/IFN-γ刺激后HaCaT細(xì)胞胸腺和活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)、巨噬細(xì)胞衍生的趨化因子(MDC)、激活后調(diào)節(jié)正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌(RANTES)、IL-8、iNOS和COX-2的產(chǎn)生，還通過(guò)調(diào)節(jié)NF-κB和MAPK通路的活化，抑制了炎癥相關(guān)因子的產(chǎn)生，表明蒺藜皂苷有明顯的抗炎、抗氧化作用，進(jìn)而促進(jìn)AD的恢復(fù)；同時(shí)，其還可促進(jìn)了TNF-α/IFN-γ刺激后HaCaT細(xì)胞FLG蛋白的表達(dá)。因此，蒺藜皂苷通過(guò)抗氧化和抗炎作用以治療特異性皮炎。

4 總 結(jié)

蒺藜在臨床中與其他藥物配伍，能起到祛風(fēng)止痛作用，故在治療皮膚病的鱗屑、瘙癢等癥狀中療效較好。蒺藜皂苷作為中藥蒺藜的主要有效成分，其能通過(guò)多靶點(diǎn)、多通路發(fā)揮治療作用。目前對(duì)于蒺藜皂苷的各類基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)和臨床研究仍在繼續(xù)，揭示了這一生物活性物質(zhì)在臨床應(yīng)用的前景，使得蒺藜皂苷在后續(xù)的醫(yī)學(xué)應(yīng)用中顯示出更大的作用。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。