盛天露， 付璐鷺， 許俊申， 尚銳峰， 陳鐘文， 劉 峰， 劉 華*

( 1． 江西中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院， 南昌 330004； 2． 江西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院， 南昌 330006 )

Necroptosis又被稱為程序性細(xì)胞壞死或細(xì)胞壞死性凋亡，是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的一種既受死亡信號(hào)調(diào)控、又出現(xiàn)壞死樣結(jié)構(gòu)特點(diǎn)的細(xì)胞死亡類型。許多研究表明Necroptosis與腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移及對(duì)化療產(chǎn)生耐藥、藥物誘導(dǎo)的肝損傷、神經(jīng)退行性病癥以及心肌梗死、中風(fēng)、胰腺炎、腸炎和皮膚炎等許多疾病的病理性和器質(zhì)性等損傷有關(guān) (Andress et al., 2014)。對(duì)Necroptosis進(jìn)行干預(yù)可能在臨床上減少這些疾病帶來(lái)的損傷(Galluzzi et al.,2012)。

中藥有數(shù)千年治療炎癥和免疫疾病的歷史。蒼耳(Xanthiumstrumarium)為菊科(Compositae)蒼耳屬(XanthiumL.)一年生草本植物。作為民間傳統(tǒng)藥用植物，世界各地民間常用蒼耳治療鼻炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、發(fā)燒、白癜風(fēng)、淋巴結(jié)核、皰疹和癌癥(Ma et al., 2009; Huang et al., 2011; Nibret et al., 2011)?！吨腥A本草》記載蒼耳性寒，味苦、辛，有小毒，具有驅(qū)風(fēng)散寒、解毒殺蟲(chóng)的功效(中藥大詞典，1985)。現(xiàn)代藥理研究表明，蒼耳具有抗炎、抗腫瘤、抗菌、抗氧化等藥理作用(中華人民共和國(guó)藥典，2020)。江西省境內(nèi)該屬植物主要為蒙古蒼耳(X.mongolicum) (付小梅等，2017)。本課題組前期在美國(guó)得州大學(xué)西南醫(yī)學(xué)中心對(duì)自建的江西100種中草藥提取物組分庫(kù)樣品進(jìn)行活性篩選時(shí)發(fā)現(xiàn)，蒙古蒼耳乙醇提物經(jīng)大孔樹(shù)脂乙醇洗脫部位具有抑制程序性細(xì)胞壞死的生理活性。為明確蒙古蒼耳抑制程序性細(xì)胞壞死的活性成分，逐展開(kāi)對(duì)其活性成分的系統(tǒng)化學(xué)成分分離。本研究從大孔樹(shù)脂50%乙醇洗脫部位分離得到的14個(gè)化合物(圖1)。其中，化合物1-4、7-10為首次從蒙古蒼耳中分離得到。

圖 1 化合物1-14結(jié)構(gòu)Fig.1 Structure of compounds 1-14

1 材料與儀器

藥材于2017年7月采于江西南昌，由江西中醫(yī)藥大學(xué)劉賢旺教授鑒定為菊科蒼耳屬植物蒙古蒼耳(X.mongolicum)的地上部分，憑證標(biāo)本保存于江西中醫(yī)藥大學(xué)標(biāo)本室( ZY-20170701)。

2695 Alliance Separations Module 型高效液相色譜儀和1525型制備高效液相色譜儀 [Lichrospher C18制備液相色譜柱(30 mm × 250 mm，10 μm)](美國(guó)Waters公司)，Inova-600型超導(dǎo)核磁共振波譜儀(美國(guó)Varian公司)，AB Triple QUAD 4500 質(zhì)譜儀(美國(guó)AB SCIEX公司)，WFH-203(ZF-1)型三用紫外分析儀(上海精科實(shí)業(yè)有限公司)，AE100型電子分析天平(瑞士梅特勒-托利多公司)。LH-20羥丙基葡聚糖凝膠(Sephadex LH-20，瑞典GE Healthcar公司)，柱色譜及薄層色譜用硅膠(200目，青島海洋化工廠產(chǎn)品)。提取分離用試劑均為分析純，半制備HPLC用甲醇為色譜純(西隴化工股份有限公司)，水為超純水。

活性篩選用的細(xì)胞系為人直腸癌細(xì)胞系HT29，培養(yǎng)基為 DMEM Medium加10% FBS和1% P/S。Cell Titer-Glo 細(xì)胞活性檢測(cè)試劑盒購(gòu)于Promega公司，腫瘤壞死因子TNF-α通過(guò)大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)并純化得到；促凋亡化合物Smac mimetic 和 Caspase 抑制劑 z-VAD.fmk 由北京生命科學(xué)研究所化學(xué)中心合成。

2 研究方法

2.1 提取和分離

自然陰干的10 kg藥材粉碎后過(guò)篩，95 %乙醇冷浸提取，每次7 d，提取3次，合并提取液，減壓回收溶劑后得到提取物總浸膏800 g?？偨嘁赃m量乙醇溶解，拌樣，裝入已處理好的大孔樹(shù)脂柱中，依次以不同濃度乙醇梯度洗脫，得到水洗脫部位(標(biāo)記為A部位)(200 g)、30 %乙醇洗脫部位(標(biāo)記為B部位)(80 g)、50 %乙醇洗脫部位(標(biāo)記為C部位)(120 g)、70%乙醇洗脫部位(標(biāo)記為D部位)(60 g)、90 %乙醇洗脫部位(標(biāo)記為E部位)(150 g)。分別取各組分浸膏20 mg用DMSO配制成20 mg·mL-1儲(chǔ)存液，編號(hào)，于-20 ℃保存，備篩選用。

2.2 活性部位篩選

HT29(人直腸癌)細(xì)胞模型，經(jīng)TSZ(終濃度分別為20 ng·mL-1TNF-α，100 nMSmac和 20 nMz-VAD誘導(dǎo)過(guò)夜后，產(chǎn)生Necroptosis；將配成20 mg·mL-1的樣品加到經(jīng)TSZ處理誘導(dǎo)成細(xì)胞壞死的HT29細(xì)胞模型中，37oC恒溫培養(yǎng)箱放置過(guò)夜；Cell Titer-Glo(Promega)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞ATP水平以確定細(xì)胞存活率。細(xì)胞存活率高的組分說(shuō)明對(duì)TSZ介導(dǎo)的細(xì)胞壞死有抑制作用。

圖中數(shù)據(jù)是使用Cell Titer-Glo試劑盒測(cè)定的ATP水平，反映HT29細(xì)胞誘導(dǎo)壞死后用不同樣品刺激后存活12 h的細(xì)胞數(shù)量。 DMSO. 二甲亞砜； T.腫瘤壞死因子TNF-α； S. 促凋亡化合物Smac mimetic； Z. Caspase 抑制劑 z-VAD. A. 水洗脫部位； B. 30%乙醇洗脫部位； C. 50%乙醇洗脫部位； D. 70%乙醇洗脫部位； E. 90%乙醇洗脫部位。The number of surviving HT29 cells with the indicated stimuli for 12 h was deternmined by measuring ATP levels using the Cell Titer-Glo kit. DMSO. Dimethysulfoxide; T. TNF-α；S. Samc；Z. Z-VAD. A. Water eluted fraction; B. 30% ethanol eluted fraction; C. 50% ethanol eluted fraction; D. 70% ethanol eluted fraction; E. 90% ethanol eluted fraction.圖 2 蒼耳大孔吸附樹(shù)脂各洗脫部位篩選結(jié)果Fig. 2 Screening results of eluted fractions by macroporous resin of Xanthium mongolicum

上述洗脫部位進(jìn)行細(xì)胞程序性壞死抑制實(shí)驗(yàn)，篩選結(jié)果如圖2所示。由圖2可知，經(jīng)TSZ誘導(dǎo)的HT29細(xì)胞的存活率為28%，誘導(dǎo)成necroptosis的HT29細(xì)胞在加入C(50 %乙醇洗脫部位)后將存活率提高到75%，說(shuō)明50%乙醇洗脫部位為活性部位之一。

3 化學(xué)成分分離與結(jié)構(gòu)鑒定

3.1 化學(xué)成分分離

為進(jìn)一步明確其活性成分，將50%乙醇洗脫部位C(120 g)以二氯甲烷∶甲醇(200∶1～0∶1)梯度洗脫，經(jīng)TLC合并相同Rf值，得到C-1～C-11組分。將C-5(15 g)以石油醚∶乙酸乙酯9∶1～0∶1進(jìn)行梯度洗脫，得到C-5-1～ C-5-2組分。將C-5-1(5 g)以二氯甲烷∶甲醇15∶1～0∶1梯度洗脫，得到C-5-1-1～C-5-1-7組分。C-5-1-1出現(xiàn)白色結(jié)晶，重結(jié)晶后得化合物13(33 mg)。C-5-1-5(0.2 g)析出白色晶體，經(jīng)甲醇重結(jié)晶得到化合物8(9 mg)。將其余組分運(yùn)用制備型高效液進(jìn)行分離純化，得到化合物6(5 mg)、10(4 mg)、3(5 mg)。C-5-2(7 g)以二氯甲烷∶甲醇15∶1～0∶1梯度洗脫，得C-5-2-1～C-5-2-5組分。將各組分分別以制備型高效液相柱進(jìn)行色譜分離，得到化合物11(6 mg)、4(3 mg)、6(50 mg)、9(4 mg)、2(5 mg)。C-6(8 g)以二氯甲烷∶甲醇15∶1～ 0∶1梯度洗脫，得到C-6-1～C-6-8組分。將各組分分別用制備型高效液相柱進(jìn)行色譜分離，得到化合物7(4 mg)、11(7 mg)、5(5 mg)、14(10 mg)、1(8 mg)、12(5 mg)。

3.2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1黃色固體(甲醇)，ESI-MSm/z: 199 [M+H]+，分子式為C11H18O3。1H-NMR (600 MHz,Methanol-d4) δ:1.81(d,J= 0.85 Hz, 3H, H-12)，1.95(d,J= 0.75 Hz, 3H, H-11)，1.32～1.01(m, 8H, H-6, 7, 8, 9)，0.91(t,J= 6.8 Hz, 1H, H-10) 。13C-NMR(150 MHz, Methanol-d4)δ:173.16(C-2)，124.28(C-3)，159.11(C-4)，107.73(C-5)， 35.50(C-6)，31.30(C-7)，22.37(C-8)，22.10(C-9)，12.96(C-10)，9.31(C-11)，6.91(C-12)。1H-NMR與13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(蘇麗麗等，2011)報(bào)道一致，故鑒定該化合物為hydroxydihydrobovolide。

化合物2無(wú)色粉末(甲醇)，ESI-MSm/z：163 [M-H]-，分子式為C10H12O2。1H-NMR(600 MHz，Methanol-d4)δ:7.02(2H, d,J= 8.5 Hz，H-2′/6′)，6.70(2H, d,J= 8.5 Hz，H-3′/5′)，2.76(4H, m, H-3, 4)，2.14(3H, s, 1- CH3)。13C-NMR (150 MHz, Methanol-d4)δ:28.6(C-1)，210.0(C-2)，28.6(C-3)，44.9(C-4)，131.8(C-1′)，128.8(C-2′/6′)，114.7(C-3′/5′)，155.2(C-4′)。1H-NMR與13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(Baek et al., 2011)報(bào)道一致，故鑒定該化合物為樹(shù)莓酮(raspberry ketone, RK)，也稱為覆盆子酮。

化合物3淡黃色粉末(水)，ESI-MSm/z：126 [M-H]-，分子式為C7H8O2。1H-NMR(600 MHz，D2O)δ:7.24(1H, dd,J= 7.5 Hz,J= 1.7 Hz, H-3)，7.18(1H, m, H-5)，6.89(1H, m, H-4)，6.84(1H, d,J= 8.1 Hz, H-6)，4.57(2H, s, H-7)。13C-NMR(150 MHz, D2O)δ:153.8(C-1)，126.5(C-2)，129.6(C-3)，120.5(C-4)，129.5(C-5)，115.5(C-6)，59.6(C-7)。1H-NMR與13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(Jensen et al., 1979)報(bào)道一致，故鑒定該化合物為水楊醇。

化合物4無(wú)色粉末(甲醇)，ESI-MSm/z：134 [M-H]-，分子式為C8H8O2。1H-NMR(600 MHz，Methanol-d4)δ：7.87(2H, d,J= 8.5 Hz, H-2, 6)，6.80(2H, d,J= 8.6 Hz, H-3, 5)，2.53(3H，s，8- CH3)。13C-NMR(150 MHz，Methanol-d4)δ：129.2(C-1)，132.2(C-2, 6)，116.3(C-3, 5)，165.9(C-4)，199.4(C-7)，26.2(C-8)。1H-NMR與13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(達(dá)娃卓瑪?shù)龋?008)報(bào)道一致，故鑒定該化合物為對(duì)羥基苯乙酮。

化合物5淡黃色粉末(甲醇)，ESI-MSm/z：123 [M+H]+，分子式為C7H6O2。1H-NMR (600 MHz， Methanol-d4) δ:9.7(1H, s, -CHO)， 7.7(2H, d,J= 8.6 Hz, H-3, 5)， 6.9(1H, d,J= 8.5 Hz, H-2, 6)。13C-NMR (150 MHz, Methanol-d4) δ:191.3(-CHO)， 165.1(C-4)， 132.1(C-2, 6)， 128.3(C-1)，115.8(C-3, 5)。1H-NMR與13C-NMR數(shù)與文獻(xiàn)(徐麗等，2019)報(bào)道一致，故鑒定該化合物為對(duì)羥基苯甲醛。

化合物6淡黃色簇晶(甲醇)，ESI-MSm/z：209 [M+H]+，分子式為C11H12O4。1H-NMR(600 MHz, Methanol-d4)δ:7.52(1H, d,J= 15.9 Hz, H-7)，7.02(1H, d,J= 2.1 Hz, H-2)，6.93(1H, d,J= 8.2 Hz,J= 2.1 Hz, H-6)，6.76(1H, d,J= 8.1 Hz, H-5)，6.24(1H, d,J= 15.9 Hz, H-8)，4.20(2H, q,J= 7.1 Hz, H-10)，1.30(3H, t,J= 7.1 Hz, H-11)。13C-NMR(150 MHz, Methanol-d4)δ：122.9(C-1)，115.1(C-2)，146.7(C-3)，149.5(C-4)，116.5(C-5)，127.7(C-6)，146.8(C-7)，115.3(C-8)，169.3(C-9)，61.4(C-10)，14.6(C-11)。1H-NMR與13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(朱伶俐等，2018)報(bào)道一致，故鑒定該化合物為咖啡酸乙酯。

化合物7淺黃色油狀(甲醇)，ESI-MSm/z：179 [M+H]+，分子式為C10H10O3。1H-NMR (600 MHz, Acetone-d6) δ:9.64 (1H, d,J= 7.7 Hz, H-9)，7.55 (1H, s, H-2)，8.14 (1H, d,J= 15.8 Hz, H-7)， 7.20(1H, dd,J= 8.3, 2.0 Hz, H-6)，7.04(1H, d,J= 8.3 Hz, H-5)，6.59 (1H, dd,J= 15.8, 7.7 Hz, H-8)，3.91 (3H, s, 3-OCH3)。13C-NMR(150 MHz, Acetone-d6)δ:126.6(C-1)，111.4(C-2)，150.5 (C-3)，147.0(C-4)，122.0(C-5)，126.6(C-6)，153.9(C-7)，114.0(C-8)，193.1(C-9)，55.4(3-OCH3)。1H-NMR與13C- NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(Haruna et al., 1982)報(bào)道一致，故鑒定該化合物為阿魏醛。

化合物8白色粉末(甲醇)，ESI-MSm/z：193 [M+H]+，分子式為C10H8O4。1H-NMR(600 MHz， Methanol-d4)δ:7.86 (1H, d,J= 9.5 Hz, H-4)，7.12 (1H, s, H-8 )，6.78 (1H, s, H-5)，6.21 (1H, d,J= 9.4 Hz, H-3)，3.91 (3H, s, H-11)。13C-NMR(150 MHz, Methanol-d4)δ:111.22(C-3)，144.73 (C-4)，102.56(C-5)，106.54(C-8)，55.41(C-11)。1H-NMR與13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(舒任庚等，2010)報(bào)道一致，故鑒定該化合物為異東莨菪素。

化合物9淡黃色油狀物(甲醇)，ESI-MSm/z：335 [M+H]+，分子式為C20H22O6。1H-NMR(600 MHz，Methanol-d4)δ:6.97(2H, d,J= 1.9 Hz, H-5, 5′)，6.83(2H, dd,J= 8.2 Hz,J= 2.0 Hz, H-7, 7′)，6.79(2H, d,J= 8.1 Hz, H-8, 8′)，4.73(2H, d,J= 4.2 Hz, H-4, 4′)，4.25(2H, dd,J= 9.1, 6.9 Hz, H-2a, 2a′)，3.88(6H, s, 6, 6′-OCH3)，3.86(2H, dd,J= 9.5 Hz, 3.9 Hz, H-2b, 2b′)，3.17(2H, m, H-3, 3′)。13C-NMR(150 MHz, Methanol-d4)δ:71.2(C-2, 2′)，54.0(C-3, 3′)，86.1(C-4, 4′)，114.7(C-5, 5′)，147.7(C-6, 6′)，118.6(C-7, 7′)，109.5(C-8, 8′)，145.9(C-9, 9′)，132.4(C-10, 10′)，55.0(OCH3)。1H-NMR與13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(Saleem et al., 1997)報(bào)道一致，故鑒定該化合物為3, 3′-bis(3, 4-dihydro-4-hydroxy- 6-methoxy-2H-1-benzopyran)。

化合物10黃色粉末(甲醇)，ESI-MSm/z：347 [M+H]+，分子式為C17H14O8。1H-NMR (600 MHz, Methanol-d4) δ:7.62 (1H, d,J= 2.2 Hz, H-2′)， 7.52 (1H, dd,J= 8.5, 2.2 Hz, H-6′)， 6.89 (1H, d,J= 8.5 Hz, H-5′)， 6.49 (1H, s, H-8)，3.88 (3H, s, 3′-OCH3)，3.78 (3H, s, 6-OCH3) 。13C-NMR(150 MHz, Methanol-d4)δ：156.72(C-2) 137.83(C-3)，178.89(C-4)， 152.28(C-5)，131.18(C-6)，157.40(C-7)，93.58(C-8)，152.37(C-9)，104.89(C-10)，121.53(C-1′)，115.02(C-2′)，145.07(C-3′)，148.58(C-4′)，115.07(C-5′)，120.94 (C-6′)，59.55(3-OCH3)，59.11(6-OCH3)。1H-NMR與13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(Fadul et al.,2020)報(bào)道一致，故鑒定該化合物為axillarin。

化合物11黃色針晶(甲醇)，ESI-MSm/z：303 [M+H]+，分子式為C15H10O7。1H-NMR(600 MHz，Methanol-d4)δ:7.51(1H, s, H-2′)，7.37(1H, d,J= 8.5 Hz, H-6′)，6.72(1H, d,J= 8.4 Hz, H-5′)，6.24(1H, s, H-8)，6.02(1H，s, H-6)。13C-NMR(150 MHz, Methanol-d4)δ：146.8(C-2)，135.7(C-3)，175.8(C-4)，156.1(C-5)，98.2(C-6)，163.9(C-7)，93.4(C-8)，160.7(C-9)，103.0(C-10)，122.0(C-1′)，115.1(C-2′)，145.1(C-3′)，147.7(C-4′)，115.6(C-5′)，120.0(C-6′)。1H-NMR與13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(曾令峰等，2017)報(bào)道一致，故鑒定該化合物為槲皮素。

化合物12黃色粉末狀晶體(甲醇)，ESI-MSm/z：359 [M+H]+。分子式為C20H22O6。1H-NMR (600 MHz， Methanol-d4) δ:6.97 (2H, d,J= 1.9Hz, H-2, 2′ )，6.93 (2H, dd,J= 8.2, 1.8Hz, H-6, 6′)，6.79 (2H, d,J= 8.1Hz, H-5, 5′)，4.73 (1H, d,J= 4.4 Hz, H-7, 7′)，4.26 (2H, dd,J= 9.0, 6.9 Hz, H-9a, 9′a)，3.86(2H, dd,J= 9.0, 3.2Hz, H-9b, 9′b)，3.88 (各3H, s, 2×-OCH3)。13C-NMR(150 MHz, Methanol-d4)δ:132.3(C-1, 1′)，109.5(C-2, 2′) 147.7(C-3, 3′)，145.9 (C- 4, 4′)，114.6(C-5, 5′)，118.6(C-6, 6′)，86.1(C-7, 7′)，53.9(C-8, 8′)，71.2(C-4, 8)，54.9( 3′, 3′′-OCH3)。1H-NMR與13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(張蓮等，2020)報(bào)道一致，故鑒定該化合物為(+)松脂素。

化合物13無(wú)色針狀結(jié)晶(甲醇)，分子式為C32H56O，10%硫酸-乙醇溶液呈紫色斑點(diǎn)。與對(duì)照品混合后三個(gè)不同體系展開(kāi)Rf值一致，熔點(diǎn)不下降，故鑒定該化合物為β-谷甾醇。

化合物14白色粉末結(jié)晶(甲醇)，ESI-MSm/z：257 [M+H]+，分子式為C16H32O2。1H-NMR (600 MHz， Methanol-d4) δ:0.89(3H, t,J=5.9 Hz, H-2)，1.6(24H, brs, H-4～15)，2.08(2H, m, H-3)，2.29(2H, t,J=5.9 Hz, H-2)。13C-NMR (150 MHz, Methanol-d4) δ：173.7(C-1)，33.2(C-2)，31.7(C-14)，29.6(C-7～12)，29.5(C- 6)，29.4(C-13)，29.3(C- 4)，24.7(C-3)，22.4(C-15)，13.5(C-16)。1H-NMR與13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(朱伶俐等，2018)報(bào)道一致，故鑒定該化合物為棕櫚酸。

4 討論

蒼耳、蒼耳子為同基源不同藥用部位的藥材，系菊科植物蒼耳的干燥地上部分和成熟帶總苞的果實(shí)，分別收載于1989版《江蘇省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》和2020版《中國(guó)藥典》。蒼耳子性溫，具散風(fēng)寒、通鼻鸞、祛風(fēng)濕之功效。而蒼耳性微寒，具清風(fēng)熱、解毒之功效(劉秀娟等，2013)。本課題組前期在美國(guó)得州大學(xué)西南醫(yī)學(xué)中心進(jìn)行活性篩選時(shí)發(fā)現(xiàn)采自江西的蒙古蒼耳具有抑制程序性細(xì)胞壞死的生理活性，確定其大孔樹(shù)脂50%乙醇洗脫部位活性顯著。

從活性部位分離得到的14個(gè)化合物中，化合物1(hydroxydihydrobovolide)為蒙古蒼耳中首次分離得到的α,β-不飽和-γ-內(nèi)酯，具有顯著抗腫瘤(蘇麗麗等，2011)和抗HIV活性(Zhang et al., 2005)?；衔?-7為酚類化合物，其中樹(shù)莓酮具有保肝、保心、抗氧化和抗炎作用(Hamdy et al., 2020; Mir et al., 2021)，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于食品中的調(diào)味劑產(chǎn)品和化妝品美白劑(Lin et al., 2011)。水楊醇具有較好的抗金黃色葡萄球菌活性(杜鵑等，2020)。4-HAP常作為防腐增效劑使用(范培浩等，2020)。4-HBd除了具有抗血栓形成(申婷等，2017)、保護(hù)血腦屏障(祝燕平等，2018)、減輕神經(jīng)炎癥損傷(向彬等，2017)、抗神經(jīng)細(xì)胞凋亡(周曉楠等，2017)等作用以外，還可以誘導(dǎo)小鼠骨髓源性巨噬細(xì)胞的自噬 (Jina et al., 2020)?？Х人嵋阴ゾ哂锌寡?、免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤等活性，是NF-κB信號(hào)通路的特異性抑制劑，具有良好的臨床應(yīng)用前景(馬瑞麗等，2012)。阿魏醛(FRA)多存在于水果和蔬菜的果皮以及不同植物的葉子中，不僅具有抗炎和抗氧化活性(Zhao et al., 2008)，還能抑制脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7中誘導(dǎo)一氧化氮酶的表達(dá)和一氧化氮的合成(Kim et al., 1999)?；衔?(異東莨菪素)為首次從蒙古蒼耳中分離得到的香豆素類化合物。化合物9[3,3′-bis(3,4-dihydro-4-hydroxy-6-methoxy-2H-1-benzopyran)]為首次從蒙古蒼耳中分離得到的聚合物?；衔?0(axillarin)和化合物11(槲皮素)為黃酮類化合物，其中化合物10表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗白色念珠菌(Fatma et al., 2018)、DPPH自由基清除和超負(fù)氧陰離子清除活性(Fadul et al., 2020)，化合物11具有抑制自由基、抗氧化、抗菌、抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗病毒、抗癌等多種生物活性，可能在控制或治療COVID-19方面發(fā)揮有益作用(Khazdair et al., 2021)?；衔?2(松脂素)是一種高價(jià)值的植物源木脂素，能夠顯著抑制人白血病細(xì)胞的增殖能力(Sepporta et al., 2013)，并通過(guò)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞周期阻滯和凋亡來(lái)減弱結(jié)腸癌的進(jìn)展(Fini et al., 2008)。

Necroptosis是一種與機(jī)體炎癥反應(yīng)和免疫功能密切相關(guān)的細(xì)胞死亡類型。以上化合物除化合物8、9、13和14外，其余化合物都表現(xiàn)出各自的抗炎免疫活性。但這些化合物表現(xiàn)的生理活性是否與前期發(fā)現(xiàn)的蒙古蒼耳對(duì)Necroptosis產(chǎn)生抑制作用的活性相關(guān)，是否能從中確定蒙古蒼耳抑制Necroptosis的天然小分子抑制劑，還有待后期進(jìn)行更加系統(tǒng)和深入的研究。