廖廣鳳, 黎云清, 莫柳艷, 劉彩蘭, 盧汝梅
( 廣西中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院, 南寧 530200 )
白花銀背藤(Argyreiaseguinii)又名東京銀背藤、白背藤、白面水雞和滇一匹綢等,為旋花科(Convolvulaceae)銀背藤屬(ArgyreiaLour.)植物,主產(chǎn)于廣西、云南等地。白花銀背藤主要以根、莖入藥,味微澀,性溫,入心、肺二經(jīng),具有駁骨、止血、生肌、收斂、潤(rùn)肺止咳的功效(中藥辭海編寫組,1993)。白花銀背藤是廣西民間常用的壯藥,收載于《中國(guó)壯藥資源名錄》《廣西藥用植物名錄》和《廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn)》中,具有補(bǔ)血虛、調(diào)氣道、續(xù)筋骨、止血的功效(常小龍等,2006)。白花銀背藤單方制劑為白銀宮血靈膠囊,具有益氣化瘀、收斂止血的功效,主要用于治療功能性子宮出血(邱宏聰?shù)龋?011)。
銀背藤屬植物全世界約有90種,主要分布在南亞和東南亞地區(qū),我國(guó)有21種?,F(xiàn)代研究表明,該屬植物具有抗炎、抗菌、保肝和抗腫瘤等活性,其化學(xué)成分豐富多樣,包括香豆素、黃酮、生物堿等(Tofern et al.,1999;Sharma et al.,2015;Lalan et al.,2015)。目前,從白花銀背藤中分離得到的化學(xué)成分包括香豆素(邱宏聰?shù)龋?008;賈薇等,2008)、脂肪酸類(常小龍等,2005)以及生物堿(常小龍等,2006)等,藥理活性研究包括抗炎(邱宏聰?shù)龋?011)、止血(陳海豐等,2008)等活性。其中香豆素類成分東莨菪內(nèi)酯的抗炎活性研究受到較多關(guān)注。本課題組前期從同屬植物白鶴藤(A.acuta)中分離得到一系列結(jié)構(gòu)新穎的香豆素(Li et al.,2021)和生物堿(盧汝梅等,2018)等成分,其中吲哚里西定類新生物堿為白鶴藤堿,初步藥理研究表明其具有較好的抗腫瘤活性。長(zhǎng)期以來,在廣西、云南等地白鶴藤和習(xí)用品白花銀背藤,俗名均為白面水雞、一匹綢,都作為壯藥“一匹綢”藥材使用,屬于民族藥中常見的“同名異物”“地方習(xí)用”現(xiàn)象。那么白花銀背藤是否也具有與白鶴藤類似的具有抗腫瘤活性的生物堿,還有待進(jìn)一步研究。
本文前期研究表明,白花銀背藤的氯仿部位提取物對(duì)肝癌SMMC-7721細(xì)胞株具有較好的細(xì)胞毒活性 [IC50=(42.17 ± 1.05)μg·mL-1]。為進(jìn)一步深入探討白花銀背藤的藥效物質(zhì)基礎(chǔ),本研究對(duì)白花銀背藤的氯仿部位,特別是生物堿成分及其腫瘤細(xì)胞毒活性進(jìn)行了研究,以期為合理開發(fā)利用這一植物資源提供依據(jù)。
白花銀背藤藥材于2019年采自廣西河池市大化縣,經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)韋松基教授鑒定為旋花科銀背藤屬植物白花銀背藤(Argyreiaseguinii)的地上部分。
Bruker AvanceIII 500 MHz核磁共振儀(瑞士Bruker公司);Waters Autospec Premier p776質(zhì)譜儀(美國(guó)Waters公司);Agilent 1100高效液相色譜儀(美國(guó)安捷倫公司);LC-20AR制備液相色譜儀(日本島津公司);中低壓ODS制備液相色譜儀(美國(guó)格雷斯戴維森公司);愛朗CCA-1112A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(東京理化);CPA225D型分析天平(賽多利斯科學(xué)儀器有限公司);ODS柱色譜填料(日本YMC公司);Sephadex LH-20柱色譜填料(美國(guó)Pharmacia公司);硅膠(100~200目、200~300目)及其余化學(xué)試劑(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。二甲基亞砜(以色列生物公司);陽性對(duì)照藥物順鉑(DDP)和紫杉醇(taxol)均購自大連美侖生物技術(shù)有限公司;MTS試劑盒(普洛麥格公司);白血病HL-60、肺癌A549、肝癌SMMC-7721、乳腺癌MCF-7、結(jié)腸癌SW480細(xì)胞株(ATCC細(xì)胞庫)。
1.3.1 提取和分離 取白花銀背藤粗粉20 kg,用75%乙醇浸提3次,合并提取液,減壓回收溶劑,得到乙醇總提取物約1 590 g??偨嘤盟畱腋。来问褂檬兔?60~90 ℃)、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇進(jìn)行萃取,回收溶劑,得到石油醚部位浸膏130 g、氯仿部位浸膏47 g、乙酸乙酯部位浸膏144 g、正丁醇部位浸膏502 g、水部位浸膏500 g。
取氯仿部位浸膏45 g,經(jīng)硅膠柱色譜分離, 石油醚-乙酸乙酯(10∶0 ~ 1∶1)梯度洗脫,分離得到9個(gè)組分Fr.1~Fr.9。Fr.5經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分為3個(gè)組分(Fr.5-1~Fr.5-3)。其中,F(xiàn)r.5-1經(jīng)甲醇重結(jié)晶得到化合物6(白色針晶,7.8 mg),F(xiàn)r.5-2通過半制備HPLC色譜分離得到化合物5(1.5 mg)。Fr.6經(jīng)中低壓ODS制備液相色譜分離,用甲醇-水(10%~100%)梯度洗脫,劃分為4個(gè)組分(Fr.6-1~Fr.6-4)。其中,F(xiàn)r.6-1、Fr.6-3、Fr.6-4分別用半制備HPLC色譜分離,得到化合物1(4.0 mg)、2(4.9 mg)、3(5.0 mg)和化合物9(6.0 mg)。Fr.7經(jīng)中低壓ODS制備液相色譜分離,以甲醇-水(10%~100%)梯度洗脫,劃分為12個(gè)組分(Fr.7-1~Fr.7-12)。其中,F(xiàn)r.7-3、Fr.7-4分別用半制備HPLC色譜分離,得到化合物7(6.0 mg)、8(10.0 mg)。Fr.8經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分為3個(gè)組分(Fr.8-1~Fr.8-3)。其中,F(xiàn)r.8-1經(jīng)半制備HPLC色譜純化得到化合物4(1.5 mg)。
圖 1 化合物1-9的結(jié)構(gòu)式Fig. 1 Structures of compounds 1-9
1.3.2 細(xì)胞毒活性實(shí)驗(yàn) 細(xì)胞毒活性測(cè)試參考Kaunda等(2020)的方法,分別將對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)的白血病HL-60、肺癌A549、肝癌SMMC-7721、乳腺癌MCF-7及結(jié)腸癌SW480細(xì)胞調(diào)整濃度為3×104~1.5×105個(gè)·mL-1的細(xì)胞懸液,接種到96孔板,每孔體積100 μL,培養(yǎng)24 h后棄去舊培養(yǎng)液,PBS清洗,分組給藥,每組3個(gè)復(fù)孔,空白組加入新的完全培養(yǎng)液,實(shí)驗(yàn)組分別加入含待測(cè)樣品的完全培養(yǎng)液每孔200 μL?;衔?-9分別用DMSO溶解,再用培養(yǎng)液稀釋到相應(yīng)濃度,單體化合物初次篩選終濃度為40 μmol·L-1。根據(jù)初篩結(jié)果進(jìn)行復(fù)篩,單體化合物終濃度分別為40、8、1.6、0.32、0.064 μmol·L-1,并設(shè)順鉑(DDP)和紫杉醇(taxol)2個(gè)陽性對(duì)照組。給藥后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h后,棄去貼壁細(xì)胞孔內(nèi)的培養(yǎng)液,分別加入20 μL MTS溶液和100 μL培養(yǎng)液;棄去懸浮細(xì)胞孔內(nèi)培養(yǎng)上清液100 μL,再加入MTS溶液20 μL。設(shè)置加入MTS溶液和培養(yǎng)液分別為20、100 μL的3個(gè)空白復(fù)孔,放入培養(yǎng)箱中繼續(xù)孵育2~4 h后測(cè)定光吸收值。使用多功能酶標(biāo)儀于492 nm波長(zhǎng)處,讀取并記錄各孔光吸收值。初篩數(shù)據(jù)經(jīng)處理后以分離得到的化合物編號(hào)為橫坐標(biāo),腫瘤細(xì)胞抑制率為縱坐標(biāo)繪制細(xì)胞的抑制率圖,復(fù)篩結(jié)果處理后以分離得到的化合物濃度為橫坐標(biāo),腫瘤細(xì)胞存活率為縱坐標(biāo)繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,應(yīng)用Reed和Muench(1938)的方法計(jì)算化合物的IC50值。應(yīng)用GraphPad Prism 7.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,采用ANOVA檢驗(yàn),以α=0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn),P< 0.05表示差異有顯著性?;衔?-9的結(jié)構(gòu)式如圖1所示。
化合物1白色粉末,溶于甲醇。ESI-MSm/z: 290 [M+Na]+;1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 7.54 (2H, m, H-2, 6), 7.37 (3H, m, H-3, 4, 5), 7.52 (1H, d,J= 15.8 Hz, H-7), 6.58 (1H, d,J= 15.8 Hz, H-8), 7.06 (2H, d,J= 8.5, 2.0 Hz, H-2′, 6′), 6.72 (2H, d,J= 8.5, 2.0 Hz, H-3′, 5′), 2.76 (2H, t,J= 7.4 Hz, H-7′), 3.47 (2H, t,J= 7.4 Hz, H-8′);13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 136.3 (C-1), 128.8 (2C, C-2, 6), 129.9 (2C, C-3, 5), 130.7 (C-4), 141.6 (C-7), 121.9 (C-8), 168.6 (C-9), 131.2 (C-1′), 130.8 (2C, C-2′, 6′), 116.3 (2C, C-3′, 5′), 156.9 (C-4′), 35.8 (C-7′), 42.6 (C-8′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(馮文明等,2018)的報(bào)道基本一致,故鑒定為N-反式桂皮酰對(duì)羥基苯乙胺(trans-N-cinnamoyltyramine)。
化合物2淡黃色固體,溶于氯仿。ESI-MSm/z: 306 [M+Na]+;1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 7.40 (2H, d,J= 8.7 Hz, H-2, 6), 6.79 (2H, d,J= 8.7 Hz, H-3, 5), 7.44 (1H, d,J= 15.8 Hz, H-7), 6.38 (1H, d,J= 15.8 Hz, H-8), 7.05 (2H, d,J= 8.6 Hz, H-2′, 6′), 6.71 (2H, d,J= 8.6 Hz, H-3′, 5′), 2.75 (2H, t,J= 7.4 Hz, H-7′), 3.46 (2H, t,J= 7.4 Hz, H-8′);13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 127.7 (C-1), 130.7 (2C, C-2, 6), 116.7 (2C, C-3, 5), 160.5 (C-4), 141.8 (C-7), 118.4 (C-8), 169.2 (C-9), 131.3 (C-1′), 130.5 (2C, C-2′, 6′), 116.2 (2C, C-3′, 5′), 156.9 (C-4′), 35.8 (C-7′), 42.6 (C-8′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(楊炳友等,2010)報(bào)道基本一致,故鑒定為N-反式香豆酰酪胺(trans-N-p-coumaroyltyramine)。
化合物3黃色粉末,溶于甲醇。ESI-MSm/z: 336 [M+Na]+;1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 7.09 (1H, d,J= 1.9 Hz, H-2),6.79 (1H, d,J= 8.2 Hz, H-5), 7.01 (1H, dd,J= 8.2, 1.9 Hz, H-6), 7.43 (1H, d,J= 15.6 Hz, H-7), 6.40 (1H, d,J= 15.6 Hz, H-8), 3.88 (3H, s, 3-OCH3), 7.05 (2H, d,J= 8.6 Hz, H-2′, 6′), 6.72 (2H, d,J= 8.6 Hz, H-3′, 5′), 2.75 (2H, t,J= 7.4 Hz, H-7′), 3.46 (2H, t,J= 7.4 Hz, H-8′);13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 128.2 (C-1), 111.5 (C-2), 149.3 (C-3), 150.0 (C-4), 116.5 (C-5), 123.2 (C-6), 142.0 (C-7), 118.6 (C-8), 169.2 (C-9), 56.3 (3-OCH3), 131.3 (C-1′), 130.7 (2C, C-2′, 6′), 116.3 (2C, C-3′, 5′), 156.9 (C-4′), 35.8 (C-7′), 42.5 (C-8′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(楊洋等,2016)報(bào)道一致,故鑒定該化合物為N-反式阿魏酰酪胺(N-trans-feruloyltyramine)。
化合物4白色無定形粉末,溶于甲醇。ESI-MSm/z: 336 [M+Na]+;1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 7.36 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-2), 6.74 (1H, d,J= 8.2 Hz, H-5), 6.93 (1H, dd,J= 8.2, 2.0 Hz, H-6), 6.61 (1H, d,J= 12.7 Hz, H-7), 5.81 (1H, d,J= 12.7 Hz, H-8), 3.83 (3H, s, 3-OCH3), 7.00 (2H, d,J= 8.5 Hz, H-2′, 6′), 6.69 (2H, d,J= 8.5 Hz, H-3′, 5′), 2.69 (2H, t,J= 7.5 Hz, H-7′), 3.40 (2H, t,J= 7.5 Hz, H-8′);13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 128.5 (C-1), 113.9 (C-2), 148.5 (C-3), 148.6 (C-4), 115.8 (C-5), 124.8 (C-6), 138.4 (C-7), 121.6 (C-8), 170.3 (C-9), 56.4 (3-OCH3), 131.2 (C-1′), 130.7 (2C, C-2′, 6′), 116.2 (2C, C-3′, 5′), 156.9 (C-4′), 35.6 (C-7′), 42.4 (C-8′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(楊炳友等,2017)報(bào)道基本一致,故鑒定化合物4為N-順式阿魏?;野?N-cis-feruloyltyramine)。
化合物5淡黃色針狀結(jié)晶,可溶于甲醇、氯仿。ESI-MSm/z: 146 [M+H]+;1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 9.89 (1H, s, -CHO), 8.10 (1H, s, H-2), 8.16 (1H, d,J= 7.2 Hz, H-4), 7.25 (2H, m, H-5, 6), 7.48 (1H, d,J= 7.8 Hz, H-7);13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 139.7 (C-2), 123.6 (C-5), 122.4 (C-6), 113.1 (C-7), 125.0 (C-8), 187.5 (CHO)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(梁益敏等,2017)報(bào)道一致,故鑒定該化合物為1H-吲哚-3-甲醇(1H-indole-3-carbaldehyde)。
化合物6白色針晶,溶于丙酮、甲醇。ESI-MSm/z: 467 [M+Na]+;1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 2.01 (3H, s, H-1), 3.98 (1H, dd,J= 11.2, 4.4 Hz, H-3a), 3.91 (1H, dd,J= 11.2, 6.1 Hz, H-3b), 4.31 (1H, m, H-4), 4.79 (1H, m, H-7), 3.13 (1H, dd,J= 13.7, 6.9 Hz, H-10a), 2.99 (1H, dd,J= 13.7, 8.4 Hz, H-10b), 2.82 (2H, m, H-11), 7.72 (2H, m, H-2′, 6′), 7.42 (2H, t, m, H-3′, 5′), 7.53 (1H, m, H-4′), 7.15 (2H, m, H-2″, 6″), 7.22 (3H, m, H-3″, 4″, 5″), 7.26 (2H, m, H-2?, 6?), 7.19 (3H, m, H-3?, 4?, 5?);13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 20.8 (C-1), 173.2 (C-2), 66.1 (C-3), 51.2 (C-4), 172.5 (C-6), 56.6 (C-7), 169.9 (C-9), 39.0 (C-10), 38.1 (C-11), 135.3 (C-1′), 129.5 (2C, C-2′, 6′), 128.4 (2C, C-3′, 5′), 132.8 (C-4′), 138.9 (C-1″), 129.5 (2C, C-2″, 6″), 130.3 (2C, C-3″, 5″), 129.5 (C-4″), 138.5 (C-1?), 129.5 (2C, C-2?, 6?), 130.3 (2C, C-3?, 5?), 127.5 (C-4?)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(Mei et al.,2016)報(bào)道一致,故鑒定該化合物為金色酰胺醇酯(aurantiamide acetate)。
化合物7白色針狀結(jié)晶,溶于氯仿、甲醇。ESI-MSm/z: 392 [M+Na]+;1H-NMR (500 MHz, CD3OD )δ: 6.89 (1H, s, H-1), 6.81 (1H, s, H-4), 2.83 (1H, m, H-5α), 1.31 (1H, m, H-5β), 4.90 (1H, dd,J= 11.3, 3.1 Hz , H-6α), 2.90 (1H, m , H-6β), 7.16 (1H, d,J= 8.2 Hz, H-11), 7.07 (1H, d,J= 8.2, 1.1 Hz , H-12), 3.20 (1H, dd,J= 15.4 , 3.2 Hz, H-13α), 2.73 (1H, ddd,J= 15.0 , 13.3,1.2 Hz, H-13β), 4.75 (1H, dd,J= 13.3, 3.2 Hz, H-13a), 3.84 (3H , s, 2-OCH3), 3.83 (3H, s, 3-OCH3), 3.87 (3H, s, 9-OCH3), 3.97 (3H, s, 10-OCH3);13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 111.1 (C-1), 149.5 (C-2), 149.6 (C-3), 112.9 (C-4), 129.2 (C-4a), 30.2 (C-5), 39.7 (C-6), 164.7 (C-8), 123.7 (C-8a), 151.1 (C-9), 154.2 (C-10), 117.1(C-11), 123.8 (C-12), 132.8 (C-12a), 39.6(C-13), 56.5 (C-13a), 128.7(C-13b), 56.7 (2-OCH3), 56.7 (3-OCH3), 61.9 (9-OCH3), 56.5 (10-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(喻蓉等,2003)的報(bào)道一致,故鑒定該化合物為8-氧-四氫巴馬亭(8-oxotetrahydropalmatine)。
化合物8黃色針狀結(jié)晶,溶于氯仿、甲醇。ESI-MSm/z: 390 [M+Na]+;1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 7.36 (1H, s, H-1), 7.03 (1H, s, H-4), 2.91 (2H, t,J= 6.2 Hz, H-5), 4.90 (1H, dd,J= 6.9, 5.6 Hz, H-6), 7.46 (1H, d,J= 8.7 Hz, H-11), 7.41 (1H, d,J= 8.7 Hz, H-12), 7.02 (1H, s, H-13), 3.91 (3H, s, 2-OCH3), 3.87 (3H, s, 3-OCH3), 3.88 (3H, s, 9-OCH3), 3.91 (3H, s, 10-OCH3);13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 109.4 (C-1), 150.0 (C-2), 151.9 (C-3), 111.9 (C-4), 130.0 (C-4a), 28.9 (C-5), 40.9 (C-6), 162.0 (C-8), 123.4 (C-8a), 150.1 (C-9), 152.7 (C-10), 120.6 (C-11), 124.1 (C-12), 134.0 (C-12a), 103.1 (C-13), 136.8 (C-13a), 119.6 (C-13b), 56.8 (2-OCH3), 56.5 (3-OCH3), 61.9 (9-OCH3), 57.2 (10-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(許穎,2012)報(bào)道一致,故鑒定該化合物為8-oxypalmatine。
化合物9黃色針狀結(jié)晶,溶于甲醇。ESI-MSm/z: 376 [M+Na]+;1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 6.83 (1H, s, H-1), 6.71 (1H, s, H-4), 2.83 (1H, m, H-5α), 1.32 (1H, m, H-5β), 4.84 (1H, m, H-6α), 2.95 (1H, m , H-6β),7.17 (1H, d,J=8.3 Hz, H-11), 7.07 (1H, dd,J=8.3, 1.1 Hz, H-12), 3.16 (1H, m, H-13α), 2.75 (1H, m, H-13β), 4.75 (1H, dd,J=13.3, 3.2 Hz, H-13a), 3.86 (3H, s, 9-OCH3), 3.87 (3H, s, 10-OCH3);13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 107.3 (C-1), 148.3 (C-2), 148.1 (C-3), 109.3 (C-4), 129.8 (C-4a), 30.3 (C-5), 39.7 (C-6), 164.7 (C-8), 123.6 (C-8a), 151.1 (C-9), 154.2 (C-10), 117.2 (C-11), 123.8 (C-12), 132.7 (C-12a), 39.7 (C-13), 56.7 (C-13a), 130.1 (C-13b), 56.8 (9-OCH3), 61.9 (10-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(Pinho et al.,1992;劉丙蕊,2011)的報(bào)道一致,故鑒定該化合物為12,13-dihydro-8-oxoberberine。
化合物7和化合物8對(duì)肝癌細(xì)胞SMMC-7721具有一定的抑制率,其半抑制濃度(IC50)值分別為(15.50 ± 0.76)、(14.24 ± 0.72)μmol·L-1,陽性對(duì)照藥物順鉑和紫杉醇分別為(10.28 ± 0.49)、(0.16 ± 0.01)μmol·L-1,其余化合物在40 μmol·L-1濃度下對(duì)5種腫瘤細(xì)胞(白血病HL-60、肺癌A549、肝癌SMMC-7721、乳腺癌MCF-7及結(jié)腸癌SW480細(xì)胞)均未顯示出細(xì)胞毒活性。與對(duì)照組相比,化合物7和化合物8能夠顯著抑制肝癌SMMC-7721細(xì)胞的增殖,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
本研究對(duì)白花銀背藤氯仿部位的化學(xué)成分進(jìn)行研究,共獲得9個(gè)生物堿成分,除化合物2和化合物3外,其余均為首次從該植物中分離得到。其中化合物7-9為異喹啉類生物堿,此類生物堿在小檗科黃連(Tang et al.,2009)、防己科細(xì)圓藤(Yan et al.,2008)以及旋花科青風(fēng)藤(Kou & Wang,2008)等植物中均有分布,具有抗腫瘤活性且作用機(jī)制復(fù)雜。例如,小檗堿可以通過阻滯細(xì)胞分裂周期、刺激Fas/FasL信號(hào)通路及線粒體/半胱天冬酶通路、抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶和NF-κB及其他核轉(zhuǎn)錄因子等多種途徑,從而引起腫瘤細(xì)胞DNA損傷、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡(Tang et al.,2009; 錢平和楊秀偉,2014)。
本研究細(xì)胞毒活性結(jié)果表明,化合物7和化合物8顯示出較好的腫瘤細(xì)胞增殖抑制活性,而化合物9在40 μmol·L-1濃度下未顯示細(xì)胞毒活性,其主要結(jié)構(gòu)區(qū)別在于化合物9的C-2、C-3位為亞甲二氧基,推測(cè)可能與亞甲二氧基的取代影響拓?fù)洚悩?gòu)酶I和II的選擇性有關(guān)(Kobayashi et al.,1995)。此外,通過對(duì)比發(fā)現(xiàn)白花銀背藤與白鶴藤的生物堿類成分有一定相似性,如均具有N-反式對(duì)香豆酰基酪胺等生物堿,但生物堿的類型存在一定差異,白鶴藤中抗腫瘤活性成分為吲哚里西啶類生物堿,而白花銀背藤中主要為異喹啉類生物堿。本研究結(jié)果為進(jìn)一步探討白花銀背藤的化學(xué)成分和藥理活性奠定了基礎(chǔ),為厘清壯藥“一匹綢”的藥材基原提供了一定依據(jù)。