段博芳，相德才，李志敏，史本宏，周 俊，曾邦權(quán)，趙煥云，楊名龍，張文東*

(1.云南省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，云南昆明 650225；2.云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，云南昆明 650224；3.大理州動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，云南大理 671000；4.祥云縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，云南大理 671000；5.大理市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，云南大理 671000)

豬偽狂犬病(PR)是由皰疹病毒科的偽狂犬病病毒引起的豬的一種急性傳染病，以發(fā)熱和腦脊髓炎為特征[1-3]，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將PR 列為必須報(bào)告的疫病，我國將其列為二類動(dòng)物疫病。PR的暴發(fā)嚴(yán)重影響了養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。通過實(shí)施控制與根除計(jì)劃，美國、英國、丹麥、荷蘭、德國、日本等國家已經(jīng)在家畜或全部區(qū)域內(nèi)實(shí)現(xiàn)了該病的根除[4]。

近年來，我國各地規(guī)?；i場普遍應(yīng)用高效基因缺失疫苗進(jìn)行免疫，使豬偽狂犬病的感染率下降，但隨著新流行毒株的抗原性發(fā)生變異，傳統(tǒng)的“免疫—檢測—淘汰”凈化技術(shù)并不能有效應(yīng)對病毒的傳播與感染，豬場偽狂犬病反復(fù)發(fā)生，沒有形成偽狂犬病凈化的長效機(jī)制。特別是2018年以后，在非洲豬瘟疫情全球肆虐的情況下，為了防控非洲豬瘟疫情，檢測僅集中在非洲豬瘟上，豬場停用各類疫苗導(dǎo)致豬場疫病反彈，給豬場帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。筆者通過對規(guī)?；N豬場實(shí)施偽狂犬病凈化技術(shù)，比較凈化前后該場的經(jīng)濟(jì)效益，探索豬場偽狂犬病凈化和非洲豬瘟防控的相互關(guān)系，為云南省乃至全國種豬企業(yè)疫病綜合防控提供了理論依據(jù)、實(shí)踐探索和技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1試驗(yàn)豬場。云南某規(guī)?；N豬場，基礎(chǔ)母豬群曾祖代1 200頭，祖代900頭，種公豬60頭，年出欄3萬余頭；采取自繁育、小單元中效豬舍、全進(jìn)全出(4周批次生產(chǎn))的生產(chǎn)模式；對豬群進(jìn)行豬口蹄疫、豬瘟、偽狂犬病、細(xì)小病毒病、流行性乙型腦炎、豬藍(lán)耳病疫苗免疫，其中種豬群偽狂犬病實(shí)施全群普免，3次/年，母豬跟胎次免疫，1.5頭份劑量/次。未開展凈化前豬群開展不定期檢測，2017—2018年檢測結(jié)果豬群偽狂犬病gE血清抗體檢測結(jié)果為陰性。

1.1.2試驗(yàn)試劑。偽狂犬病gB抗體檢測試劑盒、偽狂犬病gE抗體檢測試劑盒、豬瘟抗體檢測試劑盒、豬藍(lán)耳病抗體檢測試劑盒購自IDEXX公司；豬口蹄疫O型抗體檢測試劑盒購自MEDIAN公司；豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬O型口蹄疫、非洲豬瘟病毒核酸試劑盒購自青島立見公司；豬偽狂犬病gE基因缺失滅活疫苗購自上海海利公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1凈化措施。

1.2.1.1摸底調(diào)查。調(diào)查內(nèi)容包括養(yǎng)殖場的人員管理、結(jié)構(gòu)布局、欄舍設(shè)置、衛(wèi)生環(huán)保、無害化處理、消毒管理、生產(chǎn)管理、防疫管理、種源管理、監(jiān)測凈化、場群健康等覆蓋豬群生物安全的各個(gè)環(huán)節(jié)，并對豬群進(jìn)行扁桃體和血液樣品平行采樣，檢測豬群重要疫病免疫和感染狀況，綜合評估養(yǎng)殖場本底情況。摸底調(diào)查參照中國動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心《規(guī)?；N豬場主要?jiǎng)游镆卟艋u估(2017版)》執(zhí)行。

1.2.1.2建立生物安全管理體系。①成立疫病凈化管理團(tuán)隊(duì)。公司最高管理層、場長、專業(yè)獸醫(yī)、生物安全主管、實(shí)驗(yàn)室主管等豬場核心人員組成管理團(tuán)隊(duì)。②硬件升級改造。改建凈道與污道，外移出豬臺，場區(qū)實(shí)行專車專用，建立緩沖區(qū)，增加消毒設(shè)施設(shè)備，進(jìn)行豬舍密閉性改造，建防鼠墻，設(shè)防鼠網(wǎng)，利用豬舍周圍的地質(zhì)條件設(shè)天然防鼠帶。③劃分風(fēng)險(xiǎn)等級，建立五分區(qū)、3道防線。建立由高風(fēng)險(xiǎn)到低風(fēng)險(xiǎn)的紫、紅、橙、黃、綠分區(qū)管理制度，在紅橙區(qū)、橙黃區(qū)、黃綠區(qū)過渡處設(shè)3道消毒防線；制定人、物、水、車、豬流動(dòng)管理制度。調(diào)整生產(chǎn)管理模式：場內(nèi)堅(jiān)持自繁育體系；采取兩點(diǎn)式飼養(yǎng)(斷奶即送到選育場和育肥場)，場內(nèi)僅保留500頭的后備豬培育生產(chǎn)線，對場內(nèi)疫病多發(fā)、瀕臨淘汰、性能不滿足要求的生豬實(shí)施清群；實(shí)施4周批次生產(chǎn)，全進(jìn)全出制度。④控制疫病傳播媒介。種豬場周圍3 km內(nèi)禁止建其他養(yǎng)豬場；定期驅(qū)蟲、滅鼠、滅蚊蠅；定期清理雜草；建立車輛清洗消毒管理制度。⑤建立嚴(yán)格的防疫體系。確保生豬得到有效的防疫和隔離，避免接觸到傳染源而發(fā)生感染，開展科學(xué)免疫(調(diào)整豬藍(lán)耳病免疫程序，其余病種免疫程序按原計(jì)劃執(zhí)行)，科學(xué)開展定期消毒，定期開展豬群健康評估，建立健全衛(wèi)生防疫制度和應(yīng)急預(yù)案。

1.2.1.3制定監(jiān)測凈化計(jì)劃。每年對該場開展不低于3次采樣，每次抽檢頭數(shù)不少于30頭，抽樣覆蓋種豬群、后備豬群。

開展凈化病種和非凈化病種豬群重要的疫病檢測，2019年后增加了非洲豬瘟病毒核酸的檢測。后備豬偽狂犬病gE 抗體陽性者立即淘汰，偽狂犬病gB抗體陰性者補(bǔ)免后2周重新檢測，抗體合格者入群，仍為陰性者淘汰。

1.2.1.4凈化評估和年審。場群健康和疫病情況評價(jià)指標(biāo)要求如下：凈化病種豬偽狂犬病免疫抗體陽性率≥85%，感染抗體陽性率為0；非凈化病種豬瘟、豬藍(lán)耳病、口蹄疫等重要疫病免疫抗體合格率≥70%，非洲豬瘟病毒核酸檢測為陰性。根據(jù)每年的監(jiān)測結(jié)果和年審結(jié)果，監(jiān)控凈化效果。

1.2.2采樣及實(shí)驗(yàn)室檢測。樣品的采樣、保存和運(yùn)輸嚴(yán)格按照有關(guān)規(guī)程進(jìn)行。結(jié)合監(jiān)測凈化方案對豬群進(jìn)行前腔靜脈采血，登記采樣豬只背景信息，常規(guī)方法分離血清后保存于無菌離心管中，做好標(biāo)記后進(jìn)行相關(guān)檢測，血清于-20 ℃下凍存。

實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員對送檢的樣品嚴(yán)格按照檢測試劑盒步驟要求進(jìn)行偽狂犬病gB抗體、偽狂犬病gE抗體、豬瘟抗體、豬藍(lán)耳病抗體、豬口蹄疫O型抗體檢測；豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬O型口蹄疫、非洲豬瘟病毒核酸檢測。

2 結(jié)果與分析

2.1 摸底調(diào)查情況經(jīng)調(diào)查，該場地處山地，遠(yuǎn)離城區(qū)，具有天然隔離屏障；結(jié)構(gòu)布局合理，有配套的獸醫(yī)室、隔離區(qū)以及畜禽糞便、雨污分離等設(shè)施設(shè)備；擁有專業(yè)的管理團(tuán)隊(duì)以及生產(chǎn)管理規(guī)范，2017年實(shí)驗(yàn)室檢測偽狂犬病gE抗體陰性，種豬群豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬口蹄疫O型病原檢測為陰性，豬藍(lán)耳病抗體陽性率為28.0%，豬瘟抗體、豬口蹄疫O型抗體、偽狂犬病gB抗體陽性率均大于85.0%(表1～2)。結(jié)構(gòu)布局上污道、凈道存在部分交叉，未達(dá)到分點(diǎn)飼養(yǎng)條件，無防鳥、防蟲媒設(shè)施，病死動(dòng)物剖檢場所和無害化處理制度執(zhí)行不符合生物安全要求，健康巡查、獸醫(yī)診療、用藥、剖檢記錄不完善，傳染病應(yīng)急預(yù)案、監(jiān)測方案不完善，階段性豬群健康分析總結(jié)和定期凈化評估不完善，無本場公豬精液檢測報(bào)告，凈化方案針對性不強(qiáng)、不完整。

表1 云南某規(guī)?；N豬場豬群重要疫病摸底檢測結(jié)果Table 1 The detection results of important epidemic diseases of pig herd in a large-scale breed pig farm in Yunnan

2.2 凈化后檢測結(jié)果根據(jù)摸底調(diào)查的結(jié)果，建立豬場的綜合生物安全管理體系，調(diào)整豬藍(lán)耳病免疫程序，定期對豬群按監(jiān)測方案開展檢測，檢測結(jié)果見表3～4。從檢測結(jié)果來看，對豬場實(shí)行凈化措施后，凈化病種豬偽狂犬病免疫抗體陽性率逐年升高，抗體3年平均陽性率達(dá)到91.6%，感染抗體陽性率為0；非凈化病種豬瘟、豬O型口蹄疫等重要疫病免疫抗體平均陽性率分別為94.4%和88.7%，病原學(xué)檢測結(jié)果為陰性；豬藍(lán)耳病抗體平均陽性率為73.1%，較摸底調(diào)查結(jié)果提高了45.1百分點(diǎn)；非洲豬瘟病原和抗體檢測結(jié)果均為陰性。開展疫病凈化后，豬場內(nèi)種豬群和后備豬群重要疫病抗體陽性率整齊，保持在較高且穩(wěn)定水平，豬群健康。

2.3 疫病凈化后經(jīng)濟(jì)效益對比疫病凈化后，本場生物安全體系更加健全，疫病防控意識明顯提升，豬群健康狀況明顯改善，種豬生產(chǎn)性能明顯提升，年均斷奶仔豬數(shù)由凈化前的21.8頭提高到凈化后的23.6頭，疫病死淘率明顯下降。獸藥使用量大幅度下降，年度同期使用量慶大霉素注射液由凈化前的71 223支下降到凈化后的64 527支，青霉素使用量從64 500瓶下降到44 100瓶。2019年非洲豬瘟全國防控嚴(yán)峻形勢下該場利用凈化措施中分區(qū)防控的優(yōu)勢，實(shí)現(xiàn)科學(xué)消毒，生產(chǎn)區(qū)的消毒藥用量下降，整個(gè)場區(qū)非洲豬瘟等疫病風(fēng)險(xiǎn)處于可控狀態(tài)(表5～7)。

表2 云南某規(guī)?；N豬場豬群重要疫病摸底檢測結(jié)果Table 2 The detection results of important epidemic diseases of pig herd in a large-scale breed pig farm in Yunnan

表3 云南某規(guī)?；N豬場凈化后豬群抗體檢測結(jié)果Table 3 The detection results of antibody in pig herd after the purification in a large-scale breed pig farm in Yunnan

表4 云南某規(guī)?；N豬場凈化后豬群疫病病原檢測結(jié)果Table 4 The pathogen detection results of pig epidemic diseases after the purification in a large-scale breed pig farm in Yunnan

表5 云南某規(guī)?；N豬場偽狂犬病凈化前后豬群生產(chǎn)性能對比Table 5 Comparison of the production performance of pig herd before and after the pseudorabies purification in a large-scale breed pig farm in Yunnan

表6 云南某規(guī)模化種豬場偽狂犬病凈化前后豬群獸藥使用量對比Table 6 Comparison of the usage of veterinary drugs in the pig herd before and after the purification of pseudorabies in a large-scale breed pig farm in Yunnan

表7 云南某規(guī)?；N豬場偽狂犬病凈化前后豬群生產(chǎn)區(qū)內(nèi)消毒藥使用量對比Table 7 Comparison of disinfectant usage in pig production area before and after the pseudorabies purification in a large-scale breed pig farm in Yunnan

3 討論

3.1 豬場凈化結(jié)果分析從凈化結(jié)果來看，豬場軟硬件提升后，凈化病種豬偽狂犬病免疫抗體陽性率達(dá)到91.6%，感染抗體陽性率為0；非凈化病種豬瘟、豬O型口蹄疫等重要疫病免疫抗體平均陽性率分別為94.4%和88.7%，病原學(xué)檢測結(jié)果為陰性；非洲豬瘟病原和抗體檢測結(jié)果均為陰性。種豬生產(chǎn)性能明顯提升，年均斷奶仔豬數(shù)由凈化前的21.8頭提高到凈化后的23.6頭，疫病死淘率明顯下降，獸藥使用量大幅度下降。以上結(jié)果表明，場內(nèi)種豬群和后備豬群健康水平較高且穩(wěn)定，建立生物安全體系開展豬場偽狂犬病的凈化效果顯著，可見凈化方案是有效的。

3.2 豬場凈化效益分析該規(guī)模場開展疫病凈化后，經(jīng)測算，與未凈化前相比，同樣的母豬群體每年可多向社會(huì)提供優(yōu)質(zhì)種豬5 727頭，每頭按售價(jià)3 000元計(jì)，新增經(jīng)濟(jì)效益約1 718萬元；年均用藥成本節(jié)約10萬元。生豬的生產(chǎn)性能明顯提升，獸藥使用量大幅度下降，同時(shí)偽狂犬病凈化明顯提高了生豬質(zhì)量，其價(jià)格具有明顯的競爭優(yōu)勢，經(jīng)濟(jì)效益顯著。該研究結(jié)果與劉玉梅等[5]研究結(jié)果相一致，且在非洲豬瘟肆虐的背景下該場為社會(huì)持續(xù)穩(wěn)定地提供大量優(yōu)良種豬，對云南省乃至全國生豬恢復(fù)生產(chǎn)、豬肉產(chǎn)品供應(yīng)及社會(huì)穩(wěn)定發(fā)揮了積極作用。

3.3 生物安全體系建設(shè)許多學(xué)者在新疆[6]、長沙[7]、廣西[8-9]、浙江[10]、云南[11]等地區(qū)采取傳統(tǒng)的“免疫—檢測—淘汰”技術(shù)對當(dāng)?shù)匾?guī)?；N豬場開展偽狂犬病凈化工作并取得了一定的效果，但很難維持凈化效果和提升豬群的品質(zhì)，豬場對其他疫病的防控沒有從根本上改變，在非洲豬瘟防控上進(jìn)行了探索和改進(jìn)。該場通過偽狂犬病凈化，重新構(gòu)建規(guī)?；N豬場綜合生物安全管理體系后，在我國各地暴發(fā)非洲豬瘟疫情后成功控制住疫情的同時(shí)，為豬場豬瘟、豬藍(lán)耳病和豬口蹄疫等疫病的凈化創(chuàng)造了條件。非洲豬瘟疫情發(fā)生后，隨著生物安全標(biāo)準(zhǔn)的不斷提高，客觀上又為疫病凈化提供了條件。該場防疫實(shí)踐表明，在疫病凈化條件下的生物安全體系能成功阻止豬場受非洲豬瘟的危害，做到科學(xué)防控、穩(wěn)定生產(chǎn)，有效提高養(yǎng)殖場的產(chǎn)出水平。

綜上所述，該試驗(yàn)所評估豬場的豬偽狂犬病防控效果顯著，為我國規(guī)?；N豬場開展豬偽狂病凈化積累了經(jīng)驗(yàn)，并為我國開展豬偽狂犬病區(qū)域凈化和非洲豬瘟無疫小區(qū)建設(shè)創(chuàng)造了條件。