蔡明元

廣西北流市動物疫病預(yù)防控制中心，廣西北流 537400

牛結(jié)核病（bovine tuberculosis）是由牛型結(jié)核分枝桿菌引起的一種人畜共患的慢性傳染病，我國將該病列為二類動物疫病，OIE 將該病列為B 類疫病。牛對牛型菌易感，特別是奶牛最易感，不僅影響奶牛業(yè)的發(fā)展，而且還由病畜的尸體及乳汁感染人。

北流市位于廣西東南部，北緯22°08'～22°55'N，東經(jīng)110°07'～110°47'E，與廣東省信宜市、高州市、化州市接壤；屬南亞熱帶季風(fēng)氣候區(qū)，年無霜期351 d、平均氣溫21.7 ℃；作物飼草豐富茂盛，四季長青，飼養(yǎng)奶畜青綠飼料資源豐富；經(jīng)濟綜合實力居廣西十強縣（市）前列，城鄉(xiāng)居民對奶品需求不斷增長，鮮乳18～20 元/kg，暢銷無剩。飼養(yǎng)奶牛供應(yīng)鮮奶具有較大消費市場和較高回報，成為市民創(chuàng)業(yè)就業(yè)致富好項目。但由于養(yǎng)殖業(yè)主飼養(yǎng)管理欠規(guī)范，存在潛在疫病防控、乳品質(zhì)量及公共衛(wèi)生安全問題。2022年4 月，根據(jù)《動物防疫法》《乳品質(zhì)量安全管理條例》，按照《2022 年廣西壯族自治區(qū)動物疫病監(jiān)測與流行病學(xué)調(diào)查實施方案》（桂農(nóng)廳發(fā)[2022]33 號）《牛結(jié)核病防治技術(shù)規(guī)范》要求，廣西北流市動物疫病預(yù)防控制中心組織相關(guān)技術(shù)人員，應(yīng)用提純牛型結(jié)核菌素皮內(nèi)反應(yīng)診斷，開展奶牛結(jié)核病流行病學(xué)調(diào)查研究，旨在為科學(xué)防控結(jié)核病提供依據(jù)。

1 監(jiān)測方法和判定

1.1 人員及分工

本中心抽派技術(shù)人員5 人，為減少人為操作誤差，每個監(jiān)測環(huán)節(jié)固定同一人操作，即1 個人采血、1 個人剪剃毛和測皮厚、1 個人登記、1 個人酒精消毒、1 個人注射結(jié)核菌素，奶牛業(yè)主完成牛只保定。

1.2 器材與試劑

1）人員防護材料：一次性防護服、口罩、鞋套、手套、帽等。

2）器材：游標(biāo)卡尺、1 mL 注射器、理發(fā)器、胡須刨、酒精棉拭子。

3）試劑：酒精、碘伏，提純牛型結(jié)核菌素（中牧：20 頭份/瓶）。

1.3 操作方法

1）牛只保定。保持待檢牛正常站立姿態(tài)，用繩子將牛頭統(tǒng)一向左側(cè)固定。

2）注射部位及術(shù)前處理。檢測部位統(tǒng)一在頸右側(cè)中部上1/3 處，先剪毛再剃毛、直徑10 cm，用卡尺測量術(shù)部中央皮皺厚度，做好記錄。作為術(shù)后炎性反應(yīng)皮皺厚度比較基數(shù)。

3）注射劑量。20 頭份/瓶的中牧提純牛型結(jié)核菌素，先用生理鹽水稀釋2 mL，即10 頭份/mL；不論牛大小，每頭牛皮內(nèi)注射0.1 mL。

4）注射方法。先用75%酒精綿以術(shù)部中心圓圈向外捈抹消毒，待干爽后皮內(nèi)注入牛型提純結(jié)核菌素0.1 mL，注射后局部應(yīng)出現(xiàn)小泡。

5）皮內(nèi)注射后，在48、72、96 h 觀察術(shù)部有無熱痛腫脹等炎性反應(yīng)，并用卡尺測量術(shù)部皮皺厚度，做好詳細(xì)記錄。并與術(shù)前皮皺厚度比較差值，作為判定依據(jù)。

1.4 判 定

1）陽性反應(yīng)。局部有明顯的炎性反應(yīng)，在3 個測量小時點的測量值中，只要有1 個點測量值皮厚差≥4 mm，判為陽性。

2）疑似反應(yīng)。局部炎性反應(yīng)不明顯，只要有1 個檢測時點測量值皮厚差為2.1～3.9 mm，判為可疑。

3）陰性反應(yīng)。無炎性反應(yīng)，皮厚差≤2 mm。

凡判定為疑性反應(yīng)的牛只，于第1 次檢疫間隔42 d 進(jìn)行復(fù)檢，如仍為疑似，則判為陽性。

2 調(diào)查監(jiān)測結(jié)果

2.1 監(jiān)測基本情況

2022 年4 月19 日-6 月18 日，采用提純牛型結(jié)核菌素（PPD）皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)診斷監(jiān)測，結(jié)果顯示：奶水牛養(yǎng)殖戶4 戶，共存欄奶水牛360 頭，檢測結(jié)果全為陰性；黑白花奶牛陽性奶牛分布在6 個場（戶），疫點概況如下。

①木棉奶牛場，東經(jīng)110°24'94"E，北緯22°70'72"N，業(yè)主為張某登。建場時間為2000 年，從南寧市賓陽縣奶農(nóng)引進(jìn)產(chǎn)奶奶牛2 頭，自此人工配種，自繁自養(yǎng)。4 月24 日采用提純牛型結(jié)核菌素（PPD）變態(tài)反應(yīng)診斷檢測。

②鄒某孟養(yǎng)殖戶，東經(jīng)110°37'62"，北緯22°74'20"，業(yè)主為鄒某孟。建欄時間為2016 年，并于當(dāng)年從北流市奶牛場（因城市擴建停營）引進(jìn)奶牛6 頭，從此自繁自養(yǎng)，并收集犢牛養(yǎng)育種牛和商品肉牛。4 月25 日用提純牛型結(jié)核菌素（PPD）變態(tài)反應(yīng)診斷監(jiān)測。

③北流市正順養(yǎng)殖有限公司，東經(jīng)110°24'E，北緯22°48'N，業(yè)主為吳某炎。建場時間為2016 年，由原縣城郊區(qū)養(yǎng)殖點因城市擴建整體搬遷到此，自繁自養(yǎng)，也收集犢牛養(yǎng)育。5 月7 日用提純牛型結(jié)核菌素（PPD）變態(tài)反應(yīng)診斷監(jiān)測。

④柯某軍養(yǎng)殖戶，東經(jīng)110°24'E，北緯22°48'N，業(yè)主為柯某軍。建場時間為2006 年，當(dāng)年由中介從南寧賓陽縣奶農(nóng)引進(jìn)懷胎奶牛4 頭，從此自繁自養(yǎng)。5 月8 日用提純牛型結(jié)核菌素（PPD）變態(tài)反應(yīng)診斷檢測。

⑤徐某靜養(yǎng)殖戶，東經(jīng)110°21'E，北緯22°41'N，業(yè)主為徐某靜。建欄時間為1996 年，當(dāng)年從同村奶農(nóng)彭某琨戶（2020 年停營）引進(jìn)奶牛3 頭，此后自繁自養(yǎng)。5 月17 日用提純牛型結(jié)核菌素（PPD）變態(tài)反應(yīng)診斷檢測。

⑥傅某海養(yǎng)殖戶，東經(jīng)110°19'E，北緯22°47'N，業(yè)主為傅某海。建場時間為2015 年，當(dāng)年由欽州市合浦縣奶農(nóng)運進(jìn)奶牛2 頭，從事收集其他奶戶犢牛喂牛奶養(yǎng)育為主。5 月23 日經(jīng)提純牛型結(jié)核菌素（PPD）變態(tài)反應(yīng)試驗檢測。

6 個陽性場，建欄引進(jìn)奶牛都無檢疫和落地報告等調(diào)運手續(xù)，因不具備申報《動物防疫合格證》條件，市畜牧獸醫(yī)部門沒有備案。本次檢出陽性的14頭奶牛，都是原來在場內(nèi)的奶牛。各場點監(jiān)測結(jié)果詳見表1。

表1 奶牛結(jié)核病監(jiān)測情況 頭

續(xù)表1

2.2 追溯追蹤調(diào)查

通過排查陽性場點現(xiàn)場、問詢和查閱相關(guān)記錄等方式，對6 個陽性場點進(jìn)行調(diào)查。

1）陽性場點基本情況。所有陽性場點均未取得動物防疫合格證，屬于散養(yǎng)戶，基本都位于距村居500 m 內(nèi)的位置。如木棉奶牛場位于村道傍；北流市正順養(yǎng)殖有限公司位于山坡果園中；傅某海養(yǎng)殖戶位于離村道邊50 m 的農(nóng)田上；柯某軍養(yǎng)殖戶位于村民集居群間；徐某靜養(yǎng)殖戶位于村民居邊竹林中，離主干路50 m；鄒某孟養(yǎng)殖戶位于離村邊200 m 田野中。

養(yǎng)殖場設(shè)施簡易：欄舍都是閑置豬欄、倉庫改造棚舍，低矮陰暗潮濕，通風(fēng)透氣不良，場點周圍有簡易的物理隔斷，養(yǎng)殖場出入口沒有設(shè)置消毒池，沒有隔離欄，沒有露天運動場，設(shè)置有化糞池。部分養(yǎng)殖戶周邊菜農(nóng)可隨意出入到化糞池挑糞水淋菜。

飼養(yǎng)方式均是以圈養(yǎng)的形式飼養(yǎng)，飼料以牧草、甘蔗尾、玉米稈、玉米衣、菠蘿渣、稻秸及部分成品料為主。

2）以往監(jiān)測情況。6 個陽性場（戶），在引進(jìn)奶牛時都無檢疫和流行病學(xué)檢測，無法證明來源健康。由于年份較遠(yuǎn)，初始引進(jìn)奶牛已經(jīng)做淘汰處理，都沒有向檢疫機構(gòu)報檢記錄。2021 年3 月，廣西北流市動物疫病預(yù)防控制中心曾對這6 個陽性場點進(jìn)行結(jié)核病監(jiān)測，當(dāng)時檢測結(jié)果為陰性。

3）奶牛調(diào)出調(diào)入情況。6 個陽性場點都是在建好欄舍時調(diào)入奶牛，沒有經(jīng)過動物防疫機構(gòu)檢疫和流行病檢測。調(diào)入奶牛后都是人工授精、自繁自養(yǎng)，所產(chǎn)犢牛自行培育，母犢培養(yǎng)后備奶牛，再也沒有調(diào)入奶牛。并更新?lián)Q代把老弱初始奶牛作為肉牛淘汰。淘汰奶牛時也未向當(dāng)?shù)貦z疫機構(gòu)報檢，沒有調(diào)出檢疫報告。產(chǎn)奶奶牛向牛奶暢銷的養(yǎng)殖戶間互動時有發(fā)生，但沒報動檢疫。從2021 年3 月至今沒有奶牛從市內(nèi)外調(diào)出調(diào)入。

4）糞便處理情況。6 個陽性場（戶）點都建設(shè)有化糞池，用于牛尿及清洗場地污水凈化；牛糞一直都是收集經(jīng)發(fā)酵后作牧草肥料自用。

5）牛奶銷售及處理情況。產(chǎn)出的牛奶全部經(jīng)巴氏滅菌或高溫消毒的熟奶進(jìn)行銷售，消費群體主要以鄰近居民為主，目前沒有收到因喝這6 個陽性場點的牛奶感染結(jié)核桿菌的人間病例。結(jié)核病檢測結(jié)果為陽性后，陽性場點也沒有再出售過牛奶，所產(chǎn)出的牛奶都被以高溫消毒的方式進(jìn)行無害化處理。

根據(jù)以上情況，廣西北流市動物疫病預(yù)防控制中心綜合分析認(rèn)為：①6 個陽性場點的結(jié)核病來源無法查明；②陽性場點對外散播病原的可能性較低。

3 處置情況

按照《牛結(jié)核病防治技術(shù)規(guī)范》的技術(shù)要求，對陽性場點進(jìn)行了如下處置。

3.1 同群牛的處置

對陽性場點的所有牛只進(jìn)行就地隔離，禁止出入。同時，對可疑牛只單獨隔離，并派專人監(jiān)督畜主執(zhí)行到位，并且在42 d 后進(jìn)行復(fù)檢。

3.2 陽性奶牛的處置

對14 頭陽性奶牛進(jìn)行淘汰，無害化處理。4 月29 日，淘汰木棉奶牛場的陽性奶牛3 頭和鄒某孟養(yǎng)殖戶的陽性奶牛3 頭；5 月13 日，淘汰北流市正順養(yǎng)殖有限公司的陽性奶牛3 頭和柯某軍養(yǎng)殖戶的陽性奶牛2 頭；5 月27 日，淘汰徐某靜養(yǎng)殖戶的陽性奶牛1 頭和傅某海養(yǎng)殖戶的陽性奶牛2 頭。所有淘汰陽性奶牛都送至陸川縣國環(huán)病害動物無害化處理有限公司進(jìn)行無害化處理。同時，已經(jīng)開始按照相關(guān)文件規(guī)定對被撲殺的奶牛進(jìn)行撲殺補助申請程序。

3.3 消 毒

分別向6 個陽性場點發(fā)放60 kg 二氯異氰脲酸鈉粉，指導(dǎo)畜主用二氯異氰脲酸鈉消毒水對飼養(yǎng)場所、用具及相關(guān)物品進(jìn)行清洗消毒，對場內(nèi)可能被污染的飼料、墊料及雜物采取挖坑焚燒處理，對當(dāng)時場內(nèi)牛糞進(jìn)行堆積密封或化糞池發(fā)酵處理，每天對隔離場地采用二氯異氰脲酸鈉消毒水進(jìn)行噴灑消毒，在飼養(yǎng)場出入口處設(shè)置消毒池并放置消毒水。

4 結(jié)果分析

1）從表2 可以看出，術(shù)后炎性反應(yīng)峰值在48 h監(jiān)測點的有6 頭奶牛，占31.58%；峰值在72 h 監(jiān)測點有12 頭奶牛，占63.16%；峰值在96 h 監(jiān)測點的有1 頭奶牛，占5.26%；如有可能，增加24、120 h監(jiān)測點，準(zhǔn)確獲得炎性反應(yīng)峰值，對監(jiān)測陽性牛可能性更有幫助。本診斷沒有按術(shù)后炎性反應(yīng)72 h監(jiān)測值為判定，是否妥當(dāng)有待商榷。

表2 監(jiān)測為陽性與可疑奶牛情況

2）結(jié)核桿菌在100 ℃可瞬滅，牛奶沸點為107 ℃；結(jié)核病菌感染人主要通過消化道。6 個陽性牛場（戶）的從業(yè)人員及家屬做醫(yī)學(xué)檢查，沒發(fā)現(xiàn)有患結(jié)核病人員；表明牛奶經(jīng)巴氏滅菌或高溫消毒的熟奶進(jìn)行銷售，對外散播病原感染人的可能性較低。

3）北流市屬于南亞熱帶季風(fēng)氣候區(qū)，夏季悶熱、冬季濕冷。表1 中5 個全為陰性的奶牛養(yǎng)殖戶，共同點是欄舍通風(fēng)透氣良好，都有適當(dāng)露天運動場，每天按時擠奶、供料飽食后，開栓獲解繩自由活動，然后清潔欄舍并每周消毒1 次。調(diào)查結(jié)果顯示，當(dāng)機體抵抗力增強，則原發(fā)性病灶包囊化，形成瘢痕或鈣化而痊愈的觀點相吻合。

4）奶水牛養(yǎng)殖戶4 戶，共存欄奶水牛360 頭，檢測結(jié)果全為陰性。表明，奶水牛在廣西北流市悶熱潮濕環(huán)境適應(yīng)性強和對結(jié)核病菌易感性低。

5 結(jié) 語

1）北流市奶業(yè)是以小散戶養(yǎng)殖奶牛為主體，近期內(nèi)無法改變。建議每年進(jìn)行1 次結(jié)核變態(tài)反應(yīng)檢疫，對陽性牛進(jìn)行無害化處理；結(jié)核病人不能飼養(yǎng)牲畜；每季度對陽性場點的所有牛只進(jìn)行監(jiān)測，淘汰陽性牛，確保牛群健康。

2）加強對奶牛養(yǎng)殖業(yè)主的牛結(jié)核病防控宣傳工作。需調(diào)入奶牛，須有近期布魯氏菌病、結(jié)核病等流行病監(jiān)測結(jié)果為陰性，方可調(diào)入，并做落地報告和備案。派遣技術(shù)人員，定期或不定期到場（戶）組織業(yè)主進(jìn)行奶牛疫控技術(shù)培訓(xùn)；宣傳有關(guān)法律法規(guī)、支持奶業(yè)發(fā)展政策等信息，接受養(yǎng)殖戶的相關(guān)咨詢。

3）引導(dǎo)社會游資投入，按動物防疫要求，規(guī)范選址，科學(xué)布局，高起點建設(shè)欄舍通風(fēng)透氣良好、配套露天運動場、管理規(guī)范的奶牛養(yǎng)殖示范場，示范帶動社會奶農(nóng)科學(xué)養(yǎng)殖，確保乳品質(zhì)量和公共衛(wèi)生安全。