樊曉紅

內(nèi)蒙古烏蘭察布市察哈爾右翼前旗動物疫病預(yù)防控制中心，內(nèi)蒙古烏蘭察布 012200

雞腸炎型大腸桿菌病是禽大腸桿菌病的一種，常見癥狀為腸炎性腹瀉、免疫力低下，極易引起其他病原體繼發(fā)感染，嚴重制約集約化養(yǎng)禽場的健康發(fā)展[1]。因此，對于雞腸炎型大腸桿菌病感染的防治至關(guān)重要。目前，對于該病的防治策略主要是使用抗菌藥物，然而抗菌藥物的濫用很可能帶來細菌耐藥性增加以及藥物在動物體內(nèi)長期殘留等問題。隨著科技的發(fā)展，養(yǎng)禽業(yè)逐漸步入現(xiàn)代化，但雞大腸桿菌病的感染仍困擾著大部分養(yǎng)殖場，需要以結(jié)合臨診和實驗室診斷方法為基礎(chǔ)，研究出更有效的防治方法來減少該病帶來的損失。

1 病原學(xué)

大腸桿菌是一種革蘭氏陰性菌，大多數(shù)大腸桿菌菌株有鞭毛，因此具有較強的運動性，據(jù)報道被記錄的大腸桿菌血清型超過1 000 種，但與家禽疾病有關(guān)的大腸桿菌血清型較少。大腸桿菌通常存在于腸道、黏膜表面和羽毛中，雞的腸道中每克糞便約含有106個大腸桿菌菌落。大腸桿菌分為致病和非致病類型，其中雞腸炎型大腸桿菌病是致病性禽大腸桿菌病的一種，在雞養(yǎng)殖中較為常見，發(fā)病廣泛[2]。

2 流行病學(xué)

任何年齡和品種的雞均可感染雞腸炎型大腸桿菌病，幼齡時最為易感，四季均可發(fā)病，特別在春季和冬季受氣候變化的影響，雞舍內(nèi)寒冷潮濕，通風(fēng)頻率減少，易于病發(fā)[3]。雞腸炎型大腸桿菌的傳播方式主要包括水平傳播和垂直傳播2 種方式，水平傳播即通過被雞腸炎型大腸桿菌污染的空氣、器具、飼料及水源等方式進行傳播；垂直傳播即感染雞腸炎型大腸桿菌的母雞經(jīng)種蛋傳播給后代。雞腸炎型大腸桿菌多因飲水或飼料被污染，大腸桿菌經(jīng)口進入腸道引發(fā)，因此環(huán)境因素對其感染與流行有重要影響，氣溫驟變、飼養(yǎng)密度高、雞舍臟污、糞便堆積、氨氣過多、溫差過大等條件均可加速雞腸炎型大腸桿菌的暴發(fā)和傳播[4]。

3 臨床癥狀及剖檢

腸炎型大腸桿菌感染雞的臨床癥狀主要是腹瀉，糞便惡臭，黃色，不成型，感染嚴重時在病雞糞便中可見脫落的腸黏膜。雞肛門下方羽毛潮濕粘連，沾有黃白色或者黃綠色的粥樣糞便[5]。除了消化道癥狀外，病雞后期還表現(xiàn)全身癥狀，如精神沉郁、食欲不振、羽毛雜亂、扎堆久站等，同時出現(xiàn)生長遲緩、肉雞體重下降和蛋雞產(chǎn)蛋率降低等現(xiàn)象。剖檢可見腸內(nèi)容物稀薄呈流動狀，腸道內(nèi)有卡他性炎癥，腸黏膜脫落嚴重，腸管內(nèi)明顯充氣擴張變?yōu)榘胪该鳡?，小腸充血出血等。

4 診 斷

雞腸炎型大腸桿菌病感染后的臨床癥狀主要為胃腸道癥狀，且常伴隨呼吸道疾病的臨床特征，與新城疫、傳染性支氣管炎、禽流感和傳染性鼻炎等疾病特點相似，因此需要分離鑒定、血清學(xué)鑒定或分子生物學(xué)鑒定等方法綜合判斷，確診該病。

4.1 病原分離鑒定

雞群有發(fā)病跡象時養(yǎng)殖場一般采取就地取材的方法，分為活體取樣和解剖取樣，活體取鼻腔和氣管內(nèi)分泌物，解剖取肝臟、脾臟和心包液等器官。病料無菌處理后，用涂布棒在麥康凱瓊脂固體培養(yǎng)基進行涂布，37 ℃過夜培養(yǎng)24 h，觀察麥康凱瓊脂固體培養(yǎng)基上形成紅色、圓形隆起、光滑濕潤、邊緣整齊、直徑1.5～2.5 mm 的小菌落；也可將病料涂布于伊紅美蘭瓊脂固體培養(yǎng)基上，37 ℃過夜培養(yǎng)24 h，觀察培養(yǎng)基上長出紫黑色、具有金屬光澤的小菌落[6]。挑取單個菌落抹片于載玻片上，固定后用草酸銨結(jié)晶紫染1 min，用蒸餾水沖洗，加碘液覆蓋涂面染約1 min，流水沖洗后吸干水分，滴加95%乙醇脫色20～30 s，流水沖洗后吸干水分，番紅染色液染1 min 后，流水沖洗后吸干水分，將染色切片使用低倍顯微鏡觀察，可見大量兩端鈍圓、紅色的革蘭氏小桿菌即可確診。但是此方法耗時較長，效率較低，出于成本考慮，在養(yǎng)殖場應(yīng)用占比較少。

4.2 血清學(xué)診斷

血清學(xué)方法廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖場。常用的方法有酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）、酶聯(lián)免疫斑點試驗（ELISpot）、血清平板凝集試驗（SPA）、膠體金和血凝抑制試驗（HI）等。ELISA 法只需抗原抗體特異性結(jié)合，就能快速、靈敏、高效、便捷地確診雞大腸桿菌感染。ELISpot 法特異性強，靈敏度高，假陽性少，結(jié)果可復(fù)查。SPA 法僅需少量血清，加入等量抗原，就能快速高效地確診感染。膠體金方法使用方便、成本低、檢測結(jié)果直觀，可快速確診感染。HI 法經(jīng)濟、快速、便捷，可批量確診感染，但可重復(fù)性差。血清學(xué)方法鑒定具有取材方便、操作簡單、高效快速、靈敏度高等優(yōu)點，逐漸成為確診雞大腸桿菌的主流方法。

4.3 分子生物學(xué)鑒定

分子生物學(xué)方法是養(yǎng)殖場確診MG 感染的重要方法，常用的方法有聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）、熒光定量PCR（RT-PCR）、蛋白質(zhì)免疫印跡（WB）等[7]。PCR 法可快速復(fù)制病原DNA，具有極高的靈敏度和特異性，是診斷中最準確和常用的方法。RT-PCR 法僅需微量DNA 即可進行定量檢測，適用性廣，靈敏度高，但對引物要求較高，一般為實驗室診斷方法。WB 法重復(fù)性高、特異性強、認同度高，但是操作復(fù)雜，容易失誤。分子生物學(xué)具有準確、快速、高效等優(yōu)點，但是儀器造價較高，不適合小型養(yǎng)殖場。

5 防 治

5.1 加強飼養(yǎng)管理

雞場要控制大腸桿菌感染雞群，需要有良好的飼養(yǎng)、隔離和防疫環(huán)境，飼料配比科學(xué)，飼養(yǎng)密度合理，建立完善的消毒制度，定期交叉使用消毒藥對雞舍和用具進行消毒，盡量避免應(yīng)激因素的產(chǎn)生。針對感染雞進行分籠飼養(yǎng)，將病死雞及時進行無害化處理[8]。通過改善飼養(yǎng)管理條件，科學(xué)提升飼料中營養(yǎng)配比，增強雞群免疫功能，才能有效減少該病的感染幾率。

5.2 疫苗接種

疫苗接種是較為有效的預(yù)防大腸桿菌感染的措施，目前國內(nèi)外廣泛使用滅活疫苗進行預(yù)防。接種滅活疫苗能誘導(dǎo)家禽體內(nèi)產(chǎn)生大量抗體，抑制大腸桿菌感染和其他疾病的產(chǎn)生，相對活疫苗來說安全性更好。但滅活苗沒有清除病禽體內(nèi)野生毒株的能力，無法抵抗毒性較強的菌株侵襲機體，且一般需要接種2 次才能達到預(yù)期效果，極易引起雞群應(yīng)激[9]。

5.3 藥物防治

我國主要使用抗生素藥物來防治雞腸炎型大腸桿菌病感染，目前臨床上常用的藥物有磺胺類以及呋喃類藥物如恩諾沙星等。由于大腸桿菌對許多抗生素敏感，抗生素在治療該病感染方面有非常重要的作用，但隨著近年來抗生素的濫用、錯用，導(dǎo)致耐藥菌株在藥物暴露壓力下數(shù)量持續(xù)增加，減弱了抗生素對雞腸炎型大腸桿菌病的治療效果[10]，且存在停藥后復(fù)發(fā)和藥物殘留等問題。

中藥有著副作用少、不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點，近年來用中藥治療雞腸炎型大腸桿菌感染的研究日益增多。研究[11]發(fā)現(xiàn)，由中藥配伍組方加工而成的中藥制劑對于雞腸炎型大腸桿菌感染有著良好的治療效果，呂顏枝等[11]通過試驗證明傳統(tǒng)中醫(yī)白頭翁湯可以有效治療雞大腸桿菌病，且療效呈劑量依賴性。同時，在家禽的日常飼料中混飼增強免疫力、健脾養(yǎng)胃的中藥添加劑可以有效提高病雞的日均采食量，增強病雞自身免疫力和抵抗力。

6 結(jié) 語

雞腸炎型大腸桿菌病作為一種臨床常見的雞細菌病，嚴重危害雞群的健康生長，制約了養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。因此，養(yǎng)殖場應(yīng)加強飼養(yǎng)管理，做好綜合防治措施，科學(xué)防控雞腸炎型大腸桿菌病，以促進養(yǎng)殖行業(yè)的綠色健康發(fā)展。