裴利宏，王國戧

(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 衛(wèi)輝 453100)

多發(fā)性硬化癥(multiple sclerosis,MS)通常被認(rèn)為是遺傳易感性和包括肥胖、飲食、生活習(xí)慣等各種環(huán)境因素相互作用導(dǎo)致的神經(jīng)免疫炎性損傷[1-2]。病理表現(xiàn)為 T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的多種炎癥因子參與、最終導(dǎo)致機(jī)體免疫功能異常的一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)免疫性炎癥性疾病，主要累及脊髓和大腦白質(zhì)，常伴有神經(jīng)脫髓鞘、軸突喪失[3-4]。目前，MS的確切病因尚不完全清楚，本研究旨在探討輔助性T細(xì)胞(helper T cell,Th)17、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cell,Tr)及其相關(guān)炎癥因子和血清鐵蛋白水平在MS發(fā)生發(fā)展中的變化和臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2018年1月至2021年12月新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科收治的46例MS患者為MS組，其中男29例，女17例；年齡16～70(56.3±13.8)歲，體質(zhì)量指數(shù)25.1～33.4(27.8±2.6)kg·m-2；復(fù)發(fā)進(jìn)展期18例，緩解期28例；所有患者符合MS診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，并排除其他病原體感染、自身免疫性疾病等。另選擇同期體檢健康者46例為對(duì)照組，其中男27例，女19例；年齡 18～70(57.1±12.2)歲，體質(zhì)量指數(shù)25.3～33.7(28.2±2.7)kg·m-2。2組受試者的性別、年齡及體質(zhì)量指數(shù)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究通過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(批準(zhǔn)文號(hào)：20180105)，所有受試者簽署知情同意書。

1.2 檢測指標(biāo)抽取所有受試者晨起空腹肘靜脈血3 mL，3 000 r·min-1離心5 min，取上層血清，采用免疫比濁法檢測血清鐵蛋白水平(試劑盒購自北京九強(qiáng)生物技術(shù)有限公司)，磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法檢測血清腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平(試劑盒購自北京熱景生物技術(shù)股份有限公司)，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。抽取所有受試者晨起空腹肘靜脈血3 mL，置于乙二胺四乙酸二鉀抗凝管，采用流式熒光法檢測Th17細(xì)胞和Tr細(xì)胞水平(Navios 流式細(xì)胞儀及配套試劑購自美國貝克曼庫爾特公司)，并計(jì)算Th17細(xì)胞與Tr細(xì)胞的比值(Th17/Tr)。

2 結(jié)果

2.1 2組受試者外周血Th17、Tr細(xì)胞水平及Th17/Tr比較結(jié)果見表1。MS組患者外周血Th17細(xì)胞水平及Th17/Tr顯著高于對(duì)照組，Tr細(xì)胞水平顯著低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；復(fù)發(fā)進(jìn)展期MS患者外周血Th17細(xì)胞水平及Th17/Tr顯著高于緩解期患者，Tr細(xì)胞水平顯著低于緩解期患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；緩解期MS患者外周血Th17、Tr細(xì)胞水平及Th17/Tr與對(duì)照組受試者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表1 2組受試者外周血Th17、Tr細(xì)胞水平及Th17/Tr比較

2.2 2組受試者血清TNF-α、IL-6和鐵蛋白水平比較結(jié)果見表2。MS組患者血清TNF-α、IL-6水平顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；2組受試者血清鐵蛋白水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。復(fù)發(fā)進(jìn)展期MS患者血清TNF-α、IL-6水平顯著高于緩解期患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；復(fù)發(fā)進(jìn)展期與緩解期MS患者血清鐵蛋白水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。緩解期MS患者血清TNF-α、IL-6和鐵蛋白水平與對(duì)照組受試者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表2 2組受試者血清TNF-α、IL-6和鐵蛋白水平比較

2.3 MS患者外周血Th17、Tr細(xì)胞水平及Th17/Tr與血清TNF-α、IL-6水平的相關(guān)性結(jié)果見表3。MS患者外周血Th17/Tr與血清TNF-α、IL-6水平均呈正相關(guān)(P<0.05)，MS患者外周血Th17、Tr細(xì)胞水平與血清TNF-α、IL-6水平無顯著相關(guān)性(P>0.05)。

表3 MS患者外周血Th17、Tr細(xì)胞水平及Th17/Tr與血清TNF-α 、IL-6水平的相關(guān)性

3 討論

MS的病因目前尚不清楚，肥胖、飲食結(jié)構(gòu)、體育鍛煉等因素近年來備受研究者關(guān)注[6-9]，其中肥胖可導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)鐵代謝的異常，鐵是人體代謝必需的微量元素，但過多的鐵可以通過調(diào)節(jié)自由基的釋放對(duì)人體組織和器官造成損傷，繼而導(dǎo)致多種臟器病變。鐵主要以鐵蛋白的形式儲(chǔ)存，因此，血清鐵蛋白水平可以反映機(jī)體內(nèi)鐵的整體代謝狀態(tài)。研究顯示，MS患者中樞神經(jīng)系統(tǒng)灰質(zhì)內(nèi)鐵蛋白過量沉積[10]。究竟是鐵蛋白在腦實(shí)質(zhì)局部沉積導(dǎo)致神經(jīng)脫髓鞘病變，還是脫髓鞘后神經(jīng)膜損傷導(dǎo)致鐵蛋白沉積，目前尚存在爭議，但腦組織局部鐵蛋白的沉積可能會(huì)影響疾病的遷延、復(fù)發(fā)及慢性化過程[11]。本研究結(jié)果顯示，2組受試者血清鐵蛋白水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，復(fù)發(fā)進(jìn)展期與緩解期MS患者血清鐵蛋白水平比較差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；提示MS患者腦組織內(nèi)鐵過量沉積與機(jī)體整體鐵的代謝狀態(tài)無相關(guān)性，因此，鐵蛋白在腦組織內(nèi)過度沉積與MS發(fā)生發(fā)展的關(guān)系還有待進(jìn)一步研究。

不管是遺傳還是肥胖、飲食習(xí)慣、生活方式等因素，大多數(shù)情況下均通過調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞、激活免疫系統(tǒng)進(jìn)而影響機(jī)體。MS在病理機(jī)制上呈現(xiàn)出具有時(shí)間多發(fā)性與空間多發(fā)性特征的慢性中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥、免疫性脫髓鞘疾病，其病理過程主要是脫髓鞘改變、軸索損傷及炎癥細(xì)胞浸潤，臨床表現(xiàn)以中樞神經(jīng)系統(tǒng)累及的部位不同而呈現(xiàn)多樣性。Th17細(xì)胞是一種不同于Thl和Th2的免疫細(xì)胞，其具有強(qiáng)大的促炎作用。Th17細(xì)胞與Tr細(xì)胞有密切聯(lián)系，二者在功能方面相互拮抗，而在分化過程中卻具有同源性，二者的數(shù)量及功能異?？蓪?dǎo)致機(jī)體免疫功能異常，最終參與某些疾病的發(fā)生發(fā)展過程。本研究結(jié)果顯示，MS組患者外周血Th17細(xì)胞水平及Th17/Tr顯著高于對(duì)照組，Tr細(xì)胞水平顯著低于對(duì)照組；復(fù)發(fā)進(jìn)展期MS患者外周血Th17細(xì)胞及Th17/Tr顯著高于緩解期患者，Tr細(xì)胞水平顯著低于緩解期患者；提示MS患者機(jī)體內(nèi)Th17細(xì)胞與Tr細(xì)胞的比例失衡，免疫功能異常，且與MS的病情程度有關(guān)。有研究顯示，機(jī)體內(nèi)Th17細(xì)胞過量可能是造成MS患者血-腦脊液屏障損傷的因素之一，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)Th17細(xì)胞數(shù)量的局部增加亦可誘發(fā)神經(jīng)炎癥[12]。近年來，針對(duì)MS患者開展的自體造血干細(xì)胞移植可重建正常的免疫系統(tǒng)功能，循環(huán)系統(tǒng)中自身反應(yīng)性、效應(yīng)性Th17減少，新的胸腺T細(xì)胞出現(xiàn)，使機(jī)體內(nèi)環(huán)境得以重新恢復(fù)[13]，且體內(nèi)存在較強(qiáng)的活性免疫炎癥狀態(tài)的MS患者受益更大[14]，這在一定程度上也證實(shí)免疫活性失衡在MS發(fā)生發(fā)展中的作用。

細(xì)胞因子在免疫炎癥疾病中發(fā)揮調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)及炎癥反應(yīng)的多重性作用，Th17細(xì)胞通過分泌 IL-17 參與固有免疫和某些炎癥反應(yīng)的發(fā)生，招募中性粒細(xì)胞，促進(jìn)多種炎癥因子的釋放。Tr細(xì)胞是一類特異性表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子、具有免疫負(fù)性調(diào)節(jié)功能的CD4+T細(xì)胞，其可通過分泌抑制性炎癥因子而發(fā)揮抗炎和維持自身免疫耐受的作用[15]。本研究結(jié)果顯示，MS組患者血清TNF-α、IL-6水平顯著高于對(duì)照組，復(fù)發(fā)進(jìn)展期MS患者血清TNF-α、IL-6水平顯著高于緩解期患者，且MS患者外周血Th17/Tr與血清TNF-α、IL-6水平均呈正相關(guān)，可見相關(guān)細(xì)胞因子的分泌水平與MS病理狀態(tài)是相伴隨的，提示MS患者Th17細(xì)胞與Tr細(xì)胞的比例失衡及相關(guān)炎癥因子水平異常在MS的發(fā)生發(fā)展起一定的作用。

綜上所述，Th17細(xì)胞與Tr細(xì)胞的比例失衡可能在MS的免疫病理過程中發(fā)揮重要作用，Th17細(xì)胞和Tr細(xì)胞的比例升高會(huì)誘導(dǎo)TNF-α、IL-6等炎癥因子表達(dá)，過表達(dá)的炎癥因子會(huì)促進(jìn)炎癥反應(yīng)遷延不斷，因此，Th17細(xì)胞與Tr細(xì)胞比例失衡及相關(guān)炎癥因子水平異?？赡芘cMS的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。