孫會(huì) 陳卉

深靜脈血栓為靜脈血液聚集于深靜脈血管引發(fā)的病癥,為臨床多發(fā)血管病變,其發(fā)病與血流速度緩慢、靜脈壁損傷、血液高凝關(guān)系密切［1,2］。深靜脈血栓發(fā)病初期無典型臨床癥狀,但隨疾病進(jìn)展,可出現(xiàn)肢體突發(fā)腫脹、局部疼痛等,若患者未得到及時(shí)有效干預(yù),則血栓可能會(huì)脫落,造成肺栓塞,并遺留靜脈瘀滯性潰瘍、皮炎、繼發(fā)性靜脈曲張、下肢水腫等后遺癥,對(duì)患者生命健康、生活質(zhì)量威脅極大［3-5］。因此,對(duì)深靜脈血栓進(jìn)行準(zhǔn)確評(píng)估極為重要。纖維蛋白原(fibrinogen,FIB)是血液中重要蛋白質(zhì)類型,為血液凝固因子,可快速檢測體內(nèi)凝血和纖維溶解功能狀態(tài)［6］。此外,靜脈血栓形成和炎性因子表達(dá)情況關(guān)系密切,血液內(nèi)腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)異常增高可促使細(xì)胞大量分泌白細(xì)胞介素(interleukin,IL)等,誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞中大量淋巴細(xì)胞聚集,其可對(duì)血管產(chǎn)生刺激性作用,引發(fā)深靜脈血栓,且血液內(nèi)炎性因子可造成血管損傷,而血管內(nèi)皮功能和深靜脈血栓具有密切相關(guān)性［7,8］。為此,本研究擬選取本院96 例深靜脈血栓患者進(jìn)行分析研究,旨在明確其IL、TNF-α、FIB 表達(dá)特征及其與血管損傷情況的關(guān)聯(lián)性。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020 年2 月～2021 年12 月本院收治的96 例深靜脈血栓患者設(shè)為研究組,另選取96 例同期健康體檢者設(shè)為對(duì)照組。研究組男51 例,女45 例；年齡38～69 歲,平均年齡(56.04±10.98)歲；體質(zhì)量指數(shù)18.7～26.9 kg/m2,平均體質(zhì)量指數(shù)(22.79±3.22)kg/m2；血栓位置：腘靜脈14 例,股靜脈31 例,髂靜脈51 例。對(duì)照組男53 例,女43 例；年齡39～69 歲,平均年齡(55.62±12.11)歲；體質(zhì)量指數(shù)18.3～27.3 kg/m2,平均體質(zhì)量指數(shù)(23.04±3.05)kg/m2。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ①研究組符合《深靜脈血栓形成的診斷和治療指南(第三版)》［9］中深靜脈血栓診斷標(biāo)準(zhǔn)；②年齡＜70 歲；③患者及其家屬對(duì)研究內(nèi)容知曉,簽署同意書；④研究組疾病處于急性期,發(fā)病至入院時(shí)間＜14 d；⑤研究組為首次發(fā)病。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ①存在腎肝等臟器器質(zhì)性病變者；②哺乳期、妊娠期女性；③存在精神系統(tǒng)疾病者；④伴有感染性疾病者；⑤納入研究前1 個(gè)月內(nèi)接受輸血治療者；⑥存在內(nèi)分泌系統(tǒng)、代謝系統(tǒng)、自身免疫系統(tǒng)疾病者；⑦存在全身炎癥疾病者；⑧既往存在血栓病史者；⑨納入研究前采取抗凝、抗血小板聚集等治療者；⑩存在其他血液系統(tǒng)疾病者；?存在惡性腫瘤者；?長期應(yīng)用免疫抑制劑、糖皮質(zhì)激素等治療者。

1.3 方法

1.3.1 FIB 檢測 抽取兩組研究對(duì)象外周靜脈血4 ml,采取全自動(dòng)凝血分析儀(ACL TOP 500 CTS 型)測定FIB 水平。

1.3.2 炎癥因子指標(biāo)檢測 抽取兩組研究對(duì)象外周血4 ml,離心處理(3500 r/min,10 min,離心半徑9.5 cm),取上層清液,經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附法測定IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α 水平,試劑盒購于上海酶聯(lián)生物科技有限公司。

1.3.3 外周血CECs 檢測 取兩組研究對(duì)象外周血標(biāo)本,通過CECs 提取試劑盒(Active Motif 公司)提取CECs,嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作執(zhí)行,通過流式細(xì)胞儀對(duì)CECs 進(jìn)行計(jì)數(shù)。

1.3.4 血管損傷程度評(píng)估 通過LGIQ9 彩色多普勒超聲儀對(duì)病變血管實(shí)施超聲檢查,評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：①二維及加壓檢查提示血管腔徹底壓閉為0 分,血管腔部分壓閉或可見血栓回聲為1 分,血管腔不能壓閉且可見血栓回聲為2 分；②經(jīng)彩色多普勒血流顯像(color Doppler flow imaging,CDFI)檢查可見血流明亮充盈、無缺損為0 分,血流部分缺損為1 分,血流無充盈為2 分；③經(jīng)灰階血流成像(gray scale blood flow imaging,B-Flow)檢查可見血流均勻、明亮、充盈、血管壁存在清晰結(jié)構(gòu)為0 分,血管腔充盈缺損、可見血栓、血流緩慢、血管壁缺乏清晰結(jié)構(gòu)為1 分,血管壁缺乏清晰結(jié)構(gòu)、血流無充盈為2 分；④經(jīng)頻譜多普勒(spectral Doppler,PWD)檢查血流速度、頻譜形態(tài)正常為0 分,血流頻譜存在異常為1 分,無血流頻譜為2 分；相關(guān)檢查結(jié)果均由2 名具有豐富臨床經(jīng)驗(yàn)的超聲科醫(yī)師獨(dú)立評(píng)估,若評(píng)估結(jié)果存在差異則商討最終結(jié)果,分值越高表明血管損傷情況越嚴(yán)重。

1.3.5 PTS 評(píng)估 依據(jù)Villalta 評(píng)估研究組不同PTS情況,共33 分,Villalta 分值≥5 分評(píng)定為PTS。

1.4 觀察指標(biāo) 比較兩組IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、FIB 及超聲評(píng)分、CECs 計(jì)數(shù),比較研究組不同PTS 情況患者IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、FIB 及超聲評(píng)分、CECs 計(jì)數(shù),分析IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、FIB與超聲評(píng)分、CECs 計(jì)數(shù)、Villalta 分值的相關(guān)性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù),計(jì)量資料采取Bartlett 方差齊性檢驗(yàn)與Kolmogorov-Smirnov 正態(tài)性檢驗(yàn),均確認(rèn)具備方差齊性且近似服從正態(tài)布,以()表示,組間比較行獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn),組內(nèi)比較行配對(duì)t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采取χ2檢驗(yàn)；血清IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、FIB 水平與超聲評(píng)分、CECs 計(jì)數(shù)、Villalta 分值間關(guān)聯(lián)性進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、FIB 水平及超聲評(píng)分、CECs 計(jì)數(shù)比較 研究組IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、FIB、超聲評(píng)分、CECs 計(jì)數(shù)均高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 兩組IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、FIB 水平及超聲評(píng)分、CECs 計(jì)數(shù)比較()

表1 兩組IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、FIB 水平及超聲評(píng)分、CECs 計(jì)數(shù)比較()

注：與對(duì)照組比較,aP＜0.05

2.2 研究組不同PTS 情況患者IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、FIB 水平及超聲評(píng)分、CECs 計(jì)數(shù)比較 研究組96 例深靜脈血栓患者中,24 例發(fā)生PTS,其余72 例未發(fā)生PTS,發(fā)生PTS 患者血清IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、FIB、超聲評(píng)分、CECs 均高于未發(fā)生PTS 患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

表2 研究組不同PTS 情況患者IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、FIB 水平及超聲評(píng)分、CECs 計(jì)數(shù)比較()

表2 研究組不同PTS 情況患者IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、FIB 水平及超聲評(píng)分、CECs 計(jì)數(shù)比較()

注：與未發(fā)生PTS 比較,aP＜0.05

2.3 血清IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、FIB 水平與超聲評(píng)分、CECs 計(jì)數(shù)、Villalta 分值的相關(guān)性分析 經(jīng)Pearson 檢驗(yàn)可知,血清IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、FIB 水與超聲評(píng)分、CECs 計(jì)數(shù)、Villalta 分值間存在顯著正相關(guān)關(guān)系(P＜0.05)。見表3。

表3 血清IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、FIB 水平與超聲評(píng)分、CECs 計(jì)數(shù)、Villalta 分值的相關(guān)性分析

3 討論

炎癥因子可參與諸多疾病病理過程,既往臨床已證實(shí),深靜脈血栓形成過程中血清炎性因子含量異常增高,通過炎癥信號(hào)通路可加劇血管內(nèi)皮損傷,而深靜脈血栓形成則能進(jìn)一步活化炎癥信號(hào)通路,引起、加劇炎性損傷。TNF-α 為炎性反應(yīng)過程中發(fā)生改變最早的炎性因子類型,可直接參與炎性損傷,且可于局部募集諸多炎性細(xì)胞,TNF-α 異常高表達(dá)狀態(tài)可促使IL-2、IL-6、IL-10等相關(guān)淋巴因子活化,引發(fā)淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等諸多細(xì)胞激活,加劇血管內(nèi)皮損傷,加速深靜脈血栓,引起血管損傷［10］。同時(shí),IL-2 可促使FIB沉積,對(duì)纖溶予以抑制；IL-6 可增加凝血因子、FIB、組織因子含量,活化內(nèi)皮細(xì)胞,下調(diào)凝血抑制因子、上調(diào)血小板,導(dǎo)致機(jī)體處于高凝狀態(tài),增加深靜脈血栓形成及血管損傷風(fēng)險(xiǎn)；IL-10 可對(duì)血管內(nèi)皮產(chǎn)生保護(hù)作用,主要經(jīng)外周血單核細(xì)胞(PBMCs)發(fā)揮作用,PBMCs 上分布有能特異性結(jié)合IL-10 的受體CD210,若IL-10 結(jié)合于CD210,可激活酪氨酸激酶與Jak 激酶,激活轉(zhuǎn)錄因子及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),對(duì)NF-kβ 活化予以抑制,以此調(diào)節(jié)TNF-α、IL-6 等表達(dá),其增高幅度與血管損傷情況關(guān)系極為密切。此外,FIB 為肝臟合成的具有凝血功能的一種蛋白質(zhì)物質(zhì),機(jī)體出現(xiàn)損傷后,其可通過和血小板作用提升血漿與全血粘滯度,加速血栓形成,可引起繼發(fā)性纖維溶解功能障礙,上調(diào)D-二聚體表達(dá)情況。研究指出,如果血漿中FIB 水平異常增高,則深靜脈血栓發(fā)生率會(huì)增加4 倍左右,復(fù)發(fā)率則會(huì)增高1.7 倍左右,因此被認(rèn)為是深靜脈血栓的重要危險(xiǎn)因素。同時(shí),FIB含量增高可顯著影響血流動(dòng)力學(xué)狀態(tài)及剪切力程度,對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生不同程度損傷,加快深靜脈血栓形成及血管損傷［11,12］。

綜上所述,深靜脈血栓患者IL、TNF-α、FIB 表達(dá)水平明顯增高,且增高幅度和血管損傷程度間存在正相關(guān)關(guān)系,臨床實(shí)際可根據(jù)其表達(dá)情況對(duì)深靜脈血栓及血管損傷程度進(jìn)行評(píng)估。