高松城 王惠潔 黃智勇

近年來(lái),我國(guó)育齡夫婦生育年齡逐漸升高,但女性生育能力與年齡呈反比,不孕不育風(fēng)險(xiǎn)也隨之較高,輔助生殖需求逐漸升高,需進(jìn)一步提升輔助生殖技術(shù)水平［1］。短時(shí)IVF 是臨床常用的輔助生殖技術(shù),促排卵過(guò)程中注射HCG 可模擬體內(nèi)激素變化,有助于促進(jìn)卵母細(xì)胞成熟,并促進(jìn)受精胚胎發(fā)育,但是注射HCG 后受精時(shí)機(jī)的選擇仍存在一定差異,需進(jìn)一步探明更為可靠的受精時(shí)機(jī),改善受精效果,改善胚胎發(fā)育和妊娠結(jié)局［2,3］。當(dāng)前,臨床公認(rèn)的短時(shí)IVF 最佳受精時(shí)間為注射HCG 后38～40 h,但是不同時(shí)間對(duì)受精效果、妊娠結(jié)局的影響尚不明確,有必要探明不同受精時(shí)機(jī)對(duì)短時(shí)IVF 的影響。為此本文分析了注射HCG 后不同受精時(shí)機(jī)對(duì)短時(shí)IVF 妊娠結(jié)局的影響,現(xiàn)總結(jié)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性選取2021 年1 月～2022 年6 月在本院接受短時(shí)IVF 助孕的585 例患者作為研究對(duì)象,共納入585 個(gè)周期,其中HCG 后38 h 組292 例,HCG后40 h 組293 例。HCG 后40 h 組合計(jì)293 個(gè)周期,女方平均年齡(35.96±2.02)歲,平均不孕年限(5.12±2.03)年；平均體質(zhì)量指數(shù)(23.42±7.09)kg/m2；平均抗繆勒管激素(2.52±0.32)ng/ml；基礎(chǔ)促黃體生成素(LH)(3.79±0.98)mIU/ml、基礎(chǔ)卵泡刺激素(FSH)(8.13±1.12)mIU/ml、基礎(chǔ)雌二醇(E2)(34.69±4.66)pg/ml；促排時(shí)間(9.46±1.56)d、促排總支數(shù)(30.56±7.63)支,平均獲卵數(shù)(8.75±2.02)枚；平均胚胎移植個(gè)數(shù)(1.65±0.23)個(gè)。HCG 后38 h 組合計(jì)292 個(gè)周期,女方平均年齡(35.86±2.10)歲,平均不孕年限(5.15±2.17)年；平均體質(zhì)量指數(shù)(23.41±7.14)kg/m2；平均抗繆勒管激素(2.59±0.28)ng/ml；基礎(chǔ)LH(3.81±0.85)mIU/ml、基礎(chǔ)FSH(8.08±1.20)mIU/ml、基 礎(chǔ)E2(34.71±4.52)pg/ml；促排時(shí)間(9.46±1.41)d、促排總支數(shù)(30.53±7.42)支,平均獲卵數(shù)(8.85±2.10)枚；平均胚胎移植個(gè)數(shù)(1.65±0.36)個(gè)。兩組一般資料比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：符合IVF 助孕治療指征;女方年齡＜40 歲；促排周期中獲卵數(shù)≥5 枚;男方精液常規(guī)檢查正常［4］；患者夫妻雙方均簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn):重要臟器功能異常者；陰道分泌物異常者或合并盆腔疾病者［5］；合并精神障礙者；生殖系統(tǒng)發(fā)育畸形者；治療前6 個(gè)月使用影響生殖系統(tǒng)藥物者；凝血功能障礙者；循環(huán)功能障礙者等。

1.3 方法 兩組均采用第一周期長(zhǎng)效長(zhǎng)方案進(jìn)行促排卵治療,達(dá)到垂直降調(diào)節(jié)標(biāo)準(zhǔn)時(shí)開(kāi)始應(yīng)用促性腺激素促排卵,促排卵期間動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)E2、LH 等激素水平,超聲監(jiān)測(cè)卵泡發(fā)育情況,適時(shí)注射HCG 5000～6000 IU,行超聲引導(dǎo)下經(jīng)陰道穿刺取卵術(shù),洗滌回收的卵母細(xì)胞；患者丈夫禁欲2 d 后,女方取卵日上午獲取精液,精液充分液化后采用梯度離心加上游法處理；卵細(xì)胞與精液處理完成后實(shí)施IVF,精子終濃度均為1.0×106/ml,受精后4～6 h 觀察受精情況,存在受精障礙者,必要時(shí)進(jìn)行補(bǔ)救ICSI 受精。HCG 后40 h 組患者在注射HCG后40 h 行短時(shí)受精,卵子體外培養(yǎng)時(shí)間為(40.13±0.21)h。HCG 后38 h 組患者在注射HCG 后38 h 行短時(shí)受精,卵子體外培養(yǎng)時(shí)間為(38.15±0.17)h。隨后進(jìn)行胚胎培養(yǎng)及胚胎移植。受精后第18～19小時(shí)進(jìn)行原核觀察,培養(yǎng)65～68 h 評(píng)估卵裂期胚胎質(zhì)量,依據(jù)中心制定卵裂胚胎評(píng)分方法,根據(jù)患者情況選擇D3 優(yōu)質(zhì)胚胎(正常受精來(lái)源,7～9 細(xì)胞,Ⅰ～Ⅱ級(jí)的胚胎)1～2 枚進(jìn)行移植,剩余胚胎根據(jù)患者情況進(jìn)行冷凍和(或)囊胚培養(yǎng)。

1.4 觀察指標(biāo)

1.4.1 受精情況 觀察并統(tǒng)計(jì)兩組患者正常受精率、異常受精率、優(yōu)質(zhì)胚胎率及早期補(bǔ)救ICSI 率。

1.4.2 妊娠情況及妊娠結(jié)局 患者移植術(shù)后14 d 抽血檢驗(yàn)人絨毛膜促性腺激素的β 亞基(β-HCG)；術(shù)后30 d 超聲監(jiān)測(cè)患者臨床妊娠情況(孕囊及心管搏動(dòng)),記錄胚胎著床率、臨床妊娠率,并追蹤患者后續(xù)妊娠結(jié)局,記錄兩組患者早期流產(chǎn)率。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者受精情況比較 HCG 后40 h 組正常受精率、優(yōu)質(zhì)胚胎率均顯著高于HCG 后38 h 組,異常受精率、早期補(bǔ)救ICSI 率顯著低于HCG 后38 h 組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組患者受精情況比較(%)

2.2 兩組患者妊娠情況及妊娠結(jié)局比較 HCG 后40 h組胚胎著床率64.95%、臨床妊娠率49.49%均顯著高于HCG 后38 h 組的48.42%、38.01%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；HCG 后40 h 組臨床妊娠患者的早期流產(chǎn)率8.97%顯著低于HCG 后38 h 組的29.73%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表2。

表2 兩組患者妊娠情況及妊娠結(jié)局比較(%)

3 討論

三胎政策出臺(tái)后,希望生育夫妻占比逐漸升高,但較多夫婦已經(jīng)錯(cuò)過(guò)最佳生育年齡,自然妊娠成功率顯著降低,需要借助輔助生殖技術(shù)提升妊娠成功率。當(dāng)前,輔助生殖技術(shù)不斷優(yōu)化、改進(jìn),有效提升了妊娠成功率,但部分患者妊娠結(jié)果仍不理想,需進(jìn)一步提升技術(shù)水平,以改善患者妊娠結(jié)局［6］。

短時(shí)IVF 是臨床常用的輔助生殖技術(shù),注射HCG可促進(jìn)促卵冠丘復(fù)合體的成熟和顆粒細(xì)胞的疏松化,對(duì)于卵母細(xì)胞成熟、受精和胚胎發(fā)育均具有較好的促進(jìn)作用［7］；HCG 注射后38～40 h 是臨床公認(rèn)的最佳受精時(shí)間,但是短時(shí)IVF 助孕患者容易出現(xiàn)促排卵困難問(wèn)題,獲得的卵母細(xì)胞成熟度差,IVF 難度較大,需積極提升其受精效果,改善胚胎發(fā)育效果,以改善患者預(yù)后［8］。短時(shí)IVF 臨床研究發(fā)現(xiàn),HCG 注射后不同受精時(shí)間的IVF、胚胎移植結(jié)果存在一定差異,應(yīng)對(duì)治療周期中患者不同受精時(shí)機(jī)對(duì)短時(shí)IVF 妊娠結(jié)局的影響展開(kāi)分析［9,10］。IVF 治療周期相關(guān)臨床研究發(fā)現(xiàn),HCG 注射后受精時(shí)機(jī)與受精結(jié)果存在密切相關(guān)性,注射HCG 后39～40 h 受精率相對(duì)更高,與注射HCG 后38 h 受精者相比,正常受精率可進(jìn)一步提升2%～15%,異常受精率顯著降低,可有效降低早期補(bǔ)救ICSI 實(shí)施率,并可更好的促進(jìn)胚胎發(fā)育,可用胚胎率和優(yōu)質(zhì)胚胎率均可顯著提升,為胚胎移植創(chuàng)造了良好的條件［11,12］。本次研究對(duì)比分析不同受精時(shí)機(jī)的受精效果也發(fā)現(xiàn),HCG 后40 h 組正常受精率92.57%、優(yōu)質(zhì)胚胎率54.01%均顯著高于HCG 后38 h 組的85.57%、40.20%,異常受精率7.43%、早期補(bǔ)救ICSI 率3.04%顯著低于HCG 后38 h 組的14.43%、10.57%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。提示注射HCG 后40 h,IVF 效果更佳,有助于降低早期補(bǔ)救ICSI 實(shí)施率,并可提升其胚胎發(fā)育效果,可為輔助生殖提供更多的優(yōu)質(zhì)胚胎。但是,當(dāng)前臨床尚未探明不同受精時(shí)機(jī)對(duì)短時(shí)IVF 妊娠結(jié)局的影響,因此本文追蹤調(diào)查了患者妊娠結(jié)局,結(jié)果發(fā)現(xiàn),HCG 后40 h 組胚胎著床率64.95%、臨床妊娠率49.49%均顯著高于HCG 后38 h 組的48.42%、38.01%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；HCG 后40 h組臨床妊娠患者的早期流產(chǎn)率8.97%顯著低于HCG 后38 h 組的29.73%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)?？梢?jiàn)注射HCG 后38 h 行短時(shí)IVF 妊娠結(jié)局差于注射HCG后40 h,注射HCG 后40 h 進(jìn)行受精可有效促進(jìn)胚胎種植,提升臨床妊娠率,并可降低早期流產(chǎn)率,有效改善了患者妊娠結(jié)局,有助于提升輔助生殖成功率。

綜上所述,注射HCG 后38 h 行短時(shí)受精結(jié)局差于注射HCG 后40 h,尤其是早期補(bǔ)救ICSI 比例有所上升,應(yīng)優(yōu)先考慮注射HCG 后40 h 受精,以改善受精效果,提高臨床妊娠率,并改善患者妊娠結(jié)局。