董立學(xué) 解綬啟 周 亮 陸 星 田 娟 喻麗娟 文 華肖江蓉 蔣 明

(1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院長江水產(chǎn)研究所, 武漢 430073; 2.中國科學(xué)院水生生物研究所, 武漢 430064;3.武昌首義學(xué)院, 武漢 430064)

水產(chǎn)養(yǎng)殖為我國居民提供了優(yōu)質(zhì)的動物性蛋白, 滿足了食品多樣化的需求但離膳食指南推薦差距較大[1]。聯(lián)合國糧農(nóng)組織FAO計(jì)算出, 17%的動物源蛋白來自水產(chǎn)養(yǎng)殖, 預(yù)計(jì)到2025年需要增加水產(chǎn)飼料3.7×107kg, 到2030年水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)量達(dá)1×108kg[2,3]。隨著國家“大食物觀”向江河湖海要食物戰(zhàn)略的提出, 且水產(chǎn)養(yǎng)殖每生產(chǎn)1 kg干物質(zhì)消耗的飼料僅為畜禽蛋奶類的1/2—1/5, 發(fā)展水產(chǎn)養(yǎng)殖可在增加水產(chǎn)動物性蛋白供給的同時, 降低糧食資源的消耗[4]。我國非糧蛋白質(zhì)飼料資源豐富, 種類繁多, 包括動物性蛋白源、植物性蛋白源、藻類及其加工產(chǎn)品、微生物蛋白資源、糟渣類產(chǎn)品及其副產(chǎn)品等[5]。加快飼料糧替代原料營養(yǎng)價(jià)值評價(jià)與應(yīng)用, 可降低水產(chǎn)飼料對糧食類飼料資源的需求。

草魚(Ctenopharyngodon idella)是我國產(chǎn)量最大的淡水養(yǎng)殖品種, 年產(chǎn)量達(dá)到5.5×109kg[6]。豆粕是草魚飼料中的一種主要蛋白飼料原料, 然而近年來, 豆粕價(jià)格上漲幅度較大, 且主要依賴進(jìn)口, 因此亟須開展替代豆粕的新型蛋白資源的開發(fā)和利用。乙醇梭菌蛋白是發(fā)酵制備乙醇過程中生產(chǎn)的一種綠色環(huán)保的單細(xì)胞蛋白源[7]。黃粉蟲作為一種優(yōu)質(zhì)的昆蟲蛋白源, 富含蛋白質(zhì)和亞油酸, 在動物飼料中的應(yīng)用歷史悠久[8]。小球藻屬普生性單細(xì)胞綠藻, 其生長速度快、蛋白質(zhì)含量高, 在食品和飼料等方面具有廣泛的應(yīng)用[9]。棉籽濃縮蛋白經(jīng)脫酚去除了棉酚等有害物質(zhì), 在水產(chǎn)飼料中可替代或與魚粉、豆粕搭配使用[10]。已有研究表明, 乙醇梭菌蛋白、黃粉蟲、棉籽濃縮蛋白和小球藻等可作為水產(chǎn)飼料蛋白源, 并具有一定的應(yīng)用潛力[11—14]。

養(yǎng)殖密度是影響魚類生長、攝食和飼料利用效率的重要因素。養(yǎng)殖密度過低, 會導(dǎo)致飼料利用率和生產(chǎn)效益降低; 養(yǎng)殖密度過高, 魚類競爭飼料和空間, 產(chǎn)生應(yīng)激等方面的脅迫, 導(dǎo)致魚類生長緩慢甚至死亡[15]。有研究表明, 養(yǎng)殖密度和飼料蛋白質(zhì)水平對魚類的生長性能具有一定的影響[16,17]。草魚是典型的草食性魚類, 也是良好的魚類營養(yǎng)與飼料研究對象。因此, 本試驗(yàn)以草魚為研究對象,分別以豆粕、乙醇梭菌蛋白、黃粉蟲、棉籽濃縮蛋白和小球藻為單一蛋白源配制五種試驗(yàn)飼料, 研究在0.11、0.16和0.21 kg/m3三種養(yǎng)殖密度下對草魚生長性能、體成分和血清生化指標(biāo)的影響, 旨在為豆粕、乙醇梭菌蛋白、黃粉蟲、棉籽濃縮蛋白和小球藻在水產(chǎn)飼料中的合理應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料的設(shè)計(jì)與配制

分別以豆粕、乙醇梭菌蛋白、黃粉蟲、棉籽濃縮蛋白和小球藻為單一蛋白源, 玉米淀粉和木薯淀粉為糖源, 魚油和豆油為脂肪源, 配制5種等氮等能飼料。試驗(yàn)飼料的配方和基本營養(yǎng)成分及必需氨基酸見表1。飼料原料經(jīng)粉碎通過60目的試驗(yàn)篩, 按表1配比混合均勻, 少量的組分采用逐級擴(kuò)大法混合, 加魚油、豆油和水后混勻, 用膨化機(jī)制成直徑1.0 mm的膨化顆粒飼料。試驗(yàn)飼料由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所飼料創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)制作。試驗(yàn)飼料的水分、粗蛋白、粗脂肪、灰分及氨基酸分別按照GB/T 6435-2006、GB/T 6435-2006、GB/T 6435-2006、GB/T 6435-2006及GB/T 18246-2019的方法測定。

表1 試驗(yàn)飼料組成及營養(yǎng)成分Tab.1 Composition and nutritional composition of experimental feed (%)

1.2 試驗(yàn)魚與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)用草魚購買自洪湖市一草魚苗種養(yǎng)殖戶,試驗(yàn)地點(diǎn)為長江水產(chǎn)研究所山坡養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)基地(武漢市江夏區(qū)山坡鄉(xiāng)和尚橋村)。試驗(yàn)魚運(yùn)回后, 先放入池塘網(wǎng)箱中暫養(yǎng)4周, 使草魚恢復(fù)體質(zhì)適應(yīng)池塘養(yǎng)殖環(huán)境。采用雙因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì), 2個因素分別為飼料蛋白源和養(yǎng)殖密度, 其中飼料蛋白源為豆粕、乙醇梭菌蛋白、黃粉蟲、棉籽濃縮蛋白和小球藻, 初始養(yǎng)殖密度為0.11、0.16和 0.21 kg/m3(對應(yīng)為20、30和40尾/網(wǎng)箱), 共15個試驗(yàn)組, 每組設(shè)3個重復(fù)。正式試驗(yàn)開始前, 將草魚饑餓24h, 選取1350尾[初始體質(zhì)量為(5.36±0.18) g]規(guī)格均一、體表健康的草魚, 隨機(jī)分配到45個試驗(yàn)網(wǎng)箱(1.0 m×1.0 m×1.5 m)。每個網(wǎng)箱中設(shè)一圓形懸浮框, 下掛圓形網(wǎng)盤, 飼料投至浮框內(nèi), 每天(8: 00和17: 00)投喂兩次, 投喂量為魚體總質(zhì)量的3%, 持續(xù)60d。記錄每天試驗(yàn)魚攝食及死亡情況, 每20天稱體質(zhì)量一次, 根據(jù)體質(zhì)量變化調(diào)整投喂量。

養(yǎng)殖期間, 每個網(wǎng)箱用1個曝氣頭進(jìn)行連續(xù)曝氣。水下30 cm的溫度為25—30℃, pH 6.5—7.2, 溶氧大于3 mg/L, 氨氮濃度小于0.05 mg/L。該池塘水面面積約為7000 m2, 水深3 m, 池塘中間設(shè)3 kW葉輪式增氧機(jī)一臺, 試驗(yàn)期間, 晴天中午1點(diǎn)和凌晨4點(diǎn), 各開機(jī)2h。陰雨天氣, 定時檢測溶氧, 當(dāng)溶氧低于3 mg/L時, 開機(jī)增氧。

1.3 樣品采集

在養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束時, 所有試驗(yàn)魚饑餓24h。然后稱量每個網(wǎng)箱中試驗(yàn)魚的最終體質(zhì)量并計(jì)數(shù)存活的個體數(shù)。每個養(yǎng)殖箱中, 隨機(jī)挑選3尾草魚測量其體長和體質(zhì)量, 然后置于–20℃冰箱中保存, 測定全魚的基本營養(yǎng)成分。每個網(wǎng)箱中另取3尾魚用75 mg/L MS 222麻醉, 尾靜脈采血樣4 mL, 常溫下保存2h后離心10min(960g, eppendorf 5417R)分離血清。隨后將此3尾魚進(jìn)行解剖, 將內(nèi)臟(包括肝臟)與肝臟進(jìn)行分離稱重, 計(jì)算肝體比(Hepatosomatic index, HSI)與臟體比(Viscerosomatic index,VSI)。草魚的飼養(yǎng)、處理和取樣均按照中國水產(chǎn)科學(xué)院長江水產(chǎn)研究所動物福利委員會批準(zhǔn)的動物飼養(yǎng)規(guī)范進(jìn)行。

1.4 實(shí)驗(yàn)指標(biāo)測定與計(jì)算

用真空冷凍干燥機(jī)對全魚樣品進(jìn)行冷凍干燥(Christ Beta 2-4 LD plus LT; Marin Christ Corporation, 德國), 測定水分。經(jīng)凱氏定氮自動分析儀(Kjelflex K-360; BUCHI Labortechnik AG, 瑞士)測定粗蛋白(GB/T 5009.5-2016); 采用索氏提取法(GB/T 5009.6-2016)測定粗脂肪; 采用550℃馬弗爐灼燒法測定灰分(GB/T 5009.4-2016)。血清生物化學(xué)參數(shù): 堿性磷酸酶(ALP)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、血清白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、總蛋白(TP)、總膽固醇(T-CHO)和葡萄糖(GLU)用全自動生化分析儀(BX-3010, SYSMEX, 日本)測定。

根據(jù)以下公式, 計(jì)算增重率(Weight gain rate,WGR)、 特定生長率(Specific growth rate, SGR)、飼料系數(shù)(Feed conversion ratio, FCR)、蛋白質(zhì)效率(Protein efficiency rate, PER)、成活率(Survival rate,SR)、肥滿度(Condition factor, CF)、肝體比(Hepatosomatic index, HSI)和臟體比(Viscerosomatic index, VSI)。

增重率(WGR, %)＝(Wt–W0)/W0×100

特定生長率(SGR, %/d)=[ln(Wt/Nt)–ln(W0/N0)]×100/t

飼料系數(shù)(FCR)=F/(Wt–W0)×100

蛋白質(zhì)效率(PER, %)=(Wt–W0)/F×P

成活率(SR, %)=Nt/N0×100

肥滿度(CF, g/cm3)=W/L3×100

肝體比(HSI)=Wh/W×100

臟體比(VSI)=Wv/W×100

式中,N0為初始魚尾數(shù),Nt為終末魚尾數(shù);W0為初始魚平均體質(zhì)量(g),Wt為終末魚平均體質(zhì)量(g);W為每尾魚個體質(zhì)量(g);t為養(yǎng)殖時間(d);F為飼料攝入總質(zhì)量(g);P為飼料中粗蛋白質(zhì)含量(%),Wh為肝臟質(zhì)量(g),Wv為內(nèi)臟質(zhì)量(g),L為體長(cm)。

1.5 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析(SPSS, Chicago IL USA)。數(shù)據(jù)以3次重復(fù)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD,n=3)表示。采用雙因素方差分析(Two-way ANOVA), 當(dāng)差異顯著時(P<0.05)采用 Tukey檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較, 當(dāng)兩個因素有交互作用時, 則固定一個因素, 對另一個因素進(jìn)行Tukey多重比較。

2 結(jié)果

2.1 飼料蛋白源和養(yǎng)殖密度對草魚生長性能的影響

如表2所示, 草魚成活率為85.00%—92.50%,各組之間無顯著差異(P>0.05)。隨著養(yǎng)殖密度的增加, 飼料系數(shù)(FCR)呈增加趨勢, 特定生長率(SGR)、增重率(WGR)和蛋白質(zhì)效率(PER)呈降低趨勢。在3種養(yǎng)殖密度下, 黃粉蟲組FCR均顯著高于其他蛋白源組(P<0.05), FBW、SGR、WGR和PER均顯著低于其他蛋白源組(P<0.05)。當(dāng)養(yǎng)殖密度為0.11 kg/m3時, 乙醇梭菌蛋白組SGR和WGR最高, 棉籽濃縮蛋白組PER最高; 當(dāng)養(yǎng)殖密度為0.16 kg/m3時, 乙醇梭菌蛋白組SGR和WGR最高, 豆粕組PER最高; 當(dāng)養(yǎng)殖密度為0.21 kg/m3, 黃粉蟲組SGR和PER均最低,WGR顯著低于其他試驗(yàn)組(P<0.05)。不考慮養(yǎng)殖密度, 黃粉蟲組FCR最高, SGR、WGR和PER效率均為最低, 而其他四組蛋白源之間差異不顯著(P>0.05)。不考慮蛋白源, 0.21 kg/m3密度組FCR最高,SGR、WGR和PER均為最低; 0.11 kg/m3密度組WGR顯著高于其他密度組(P<0.05)。飼料蛋白源和養(yǎng)殖密度對草魚WGR的交互作用顯著(P<0.05)。

表2 飼料蛋白源和養(yǎng)殖密度對草魚生長性能的影響Tab.2 Effects of different dietary protein source and stocking density on growth performance of grass carp (mean±SD, n=3)

飼料蛋白源對草魚的肝體比(HSI)和臟體比(VSI)無顯著影響(P>0.05), 黃粉蟲組草魚末體質(zhì)量(FBW)低于其他蛋白源組; 黃粉蟲組草魚肥滿度(CF)與棉籽濃縮蛋白組無顯著差異(P>0.05), 均顯著低于豆粕組、乙醇梭菌蛋白組和小球藻組(P<0.05)。養(yǎng)殖密度對草魚的VSI和CF無顯著影響(P>0.05),0.21 kg/m3組草魚FBW和HSI顯著低于其他密度組,0.11 kg/m3草魚HSI顯著高于其他密度組(P<0.05)。飼料蛋白源和養(yǎng)殖密度對草魚HSI的交互作用顯著(P<0.05)。養(yǎng)殖密度為0.21 kg/m3時, 黃粉蟲組草魚FBW和HSI最低; 養(yǎng)殖密度為0.16 kg/m3時, 棉籽濃縮蛋白組草魚CF最低。

2.2 飼料蛋白源和養(yǎng)殖密度對草魚體成分的影響

如表3所示, 飼料蛋白源對草魚全魚水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分含量無顯著影響(P>0.05)。養(yǎng)殖密度對草魚全魚水分、粗蛋白和灰分含量無顯著影響(P>0.05), 而0.21 kg/m3組粗脂肪含量顯著低于0.11和0.16 kg/m3組(P<0.05)。養(yǎng)殖密度為0.16 kg/m3時, 乙醇梭菌蛋白組灰分含量最高, 黃粉蟲組灰分含量最低, 乙醇梭菌蛋白組粗脂肪含量最高; 養(yǎng)殖密度為0.11 kg/m3時, 黃粉蟲組粗蛋白含量最低; 養(yǎng)殖密度為0.21 kg/m3時, 黃粉蟲組粗脂肪最低, 豆粕組粗蛋白含量最高。飼料蛋白源和養(yǎng)殖密度對草魚全魚水分、粗蛋白和粗脂肪含量交互作用不顯著(P>0.05), 對灰分含量交互作用顯著(P<0.05)。

表3 飼料蛋白源和養(yǎng)殖密度對草魚基本營養(yǎng)成分的影響Tab.3 Effects of different dietary protein source and stocking density on basic nutrients of grass carp (%, mean±SD, n=3)

2.3 飼料蛋白源和養(yǎng)殖密度對草魚血清生化指標(biāo)的影響

如表4所示, 經(jīng)過8周的生長試驗(yàn), 飼料蛋白源對草魚血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、總蛋白(TP)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TCHO)和葡萄糖(GLU)的水平無顯著影響(P>0.05),小球藻組血清白蛋白(ALB)的水平顯著高于乙醇梭菌蛋白組、黃粉蟲組和棉籽濃縮蛋白組(P<0.05);黃粉蟲組堿性磷酸酶(ALP)的水平顯著高于乙醇梭菌蛋白組(P<0.05), 與豆粕組、乙醇梭菌蛋白組和小球藻組無顯著差異(P>0.05)。養(yǎng)殖密度為對草魚血清中TP、ALB、ALP、TG、T-CHO和GLU的水平無顯著影響(P>0.05), 0.21 kg/m3組AST、ALT和GLU水平顯著高于其他兩組(P<0.05), 0.11 kg/m3組ALT的水平顯著低于其它兩組(P<0.05)。隨著養(yǎng)殖密度的增加, 黃粉蟲組草魚血清AST、ALT和TG的水平呈增加趨勢, 而TP、ALP和T-CHO的水平呈降低趨勢; 豆粕組TP、ALB、AST、ALT和ALP的水平均呈增加趨勢; 乙醇梭菌蛋白組、棉籽濃縮蛋白組和小球藻組AST的水平均呈增加趨勢。飼料蛋白源和養(yǎng)殖密度對草魚血清中ALT、ALP、TG、T-CHO和GLU水平的交互作用顯著(P<0.05)。

表4 飼料蛋白源和養(yǎng)殖密度對草魚血清生化指標(biāo)的影響Tab.4 Effects of different dietary protein source and stocking density on serum biochemical indexes of grass carp (mean±SD, n=3)

3 討論

3.1 飼料蛋白源和養(yǎng)殖密度對草魚生長性能的影響

養(yǎng)殖魚類的特定生長率和增重率是評價(jià)其生長性能的重要指標(biāo)[16]。有研究指出, 魚類養(yǎng)殖密度存在一定的閾值, 當(dāng)養(yǎng)殖密度超過閾值時, 魚類的生長性能開始下降[18]。在團(tuán)頭魴(Megalobrama ambylcephala)[19]、紅羅非魚(Oreochromis mossambicus×O.niloticus)[20]、中華鱘幼魚(Acipenser sinensis)[21]、黃鱔(Monopterus albus)[22]等的研究中發(fā)現(xiàn)魚類生長性能隨著養(yǎng)殖密度增加而下降。在本研究中, 不考慮飼料蛋白源, 高密度組(0.21 kg/m3)草魚的特定生長率、增重率和肝體比顯著低于低密度組(0.11 kg/m3)和中密度組(0.16 kg/m3), 在高養(yǎng)殖密度條件下, 草魚的生長受到了抑制, 可能是因?yàn)椴蒴~攝食與活動空間受到了限制, 密度造成的擁擠脅迫影響了魚體的生長[23]。肝體比、臟體比和肥滿度可以反映魚類對飼料中營養(yǎng)物質(zhì)的吸收狀態(tài), 營養(yǎng)素和能量攝入的增加通常會導(dǎo)致魚類肝體比的上升, 養(yǎng)殖密度與魚體肝體比呈負(fù)相關(guān)[24]。隨著養(yǎng)殖密度的增加, 魚體脂肪可能被消耗以供能,導(dǎo)致肝臟中脂肪蓄積量下降, 肝體比降低。

飼料中必需氨基酸的組成平衡性越好, 魚類對蛋白質(zhì)的利用效率越高[25]。本研究中, 5種蛋白源飼料氨基酸組成具有一定的差異, 精氨酸、異亮氨酸和蛋氨酸含量普遍較低, 且含有抗?fàn)I養(yǎng)因子, 這可能是導(dǎo)致試驗(yàn)組草增重率普遍不高的原因。將蛋白源組與組之間進(jìn)行比較, 黃粉蟲組草魚生長性能最差, 蛋白質(zhì)效率最低。除去氨基酸組成不平衡之外, 黃粉蟲適口性差也是導(dǎo)致生長緩慢的原因之一。研究表明, 黃粉蟲替代魚粉比例超過60%會導(dǎo)致黑雕幼魚(Acanthopagrus schlegelii)攝食量下降[26];除黃粉蟲組外, 其他蛋白源組生長性能較為接近,乙醇梭菌蛋白組特定生長率和增重率最高, 棉籽濃縮蛋白組蛋白質(zhì)效率最高, 小球藻組魚體肥滿度最高。這表明乙醇梭菌蛋白、棉籽濃縮蛋白和小球藻作為單一蛋白源在草魚飼料中與豆粕具有相近的飼料價(jià)值。

在本研究中, 飼料蛋白源和養(yǎng)殖密度對草魚的增重率存在顯著的交互作用。除小球藻外, 各蛋白源組密度為0.11 kg/m3的草魚生長性能均優(yōu)于密度為0.21 kg/m3的, 說明降低養(yǎng)殖密度, 在一定程度上能夠提高草魚對豆粕、乙醇梭菌蛋白、黃粉蟲和棉籽濃縮蛋白的利用效率。Timalsina等[17]研究發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖密度和飼料蛋白源組成對虹鱒(Oncorhynchus mykiss)的增重率和特定生長率無顯著影響, 這與本研究的結(jié)果不同, 可能是由于該研究中的養(yǎng)殖密度并未達(dá)到對魚類的生長產(chǎn)生不利影響的程度。

3.2 飼料蛋白源和養(yǎng)殖密度對草魚體成分的影響

營養(yǎng)成分是評價(jià)養(yǎng)殖魚類肌肉品質(zhì)的重要指標(biāo), 其往往受到養(yǎng)殖環(huán)境和飼料種類等因素的影響[28]。魚類對營養(yǎng)物質(zhì)吸收利用能力不同, 飼料組分的差異可能會導(dǎo)致魚體蛋白質(zhì)和脂肪含量產(chǎn)生變化[29]。研究表明, 在飼料中使用乙醇梭菌蛋白替代豆粕或棉籽蛋白替代魚粉, 對草魚全魚粗灰分、粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量無顯著影響[30,31]。本研究與以上結(jié)果相似, 以豆粕、乙醇梭菌蛋白、黃粉蟲、棉籽濃縮蛋白和小球藻為蛋白源, 對草魚全魚水分、粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量未產(chǎn)生影響; 當(dāng)養(yǎng)殖密度升高到0.21 kg/m3時, 草魚粗脂肪含量顯著下降。密度是一種重要的環(huán)境因子, 高密度的養(yǎng)殖模式下魚類會出現(xiàn)擁擠脅迫, 導(dǎo)致能量消耗增加, 不利于營養(yǎng)物質(zhì)的積累[32]。隨著養(yǎng)殖密度的增加, 養(yǎng)殖魚類個體間競爭加劇, 易引起應(yīng)激反應(yīng), 導(dǎo)致運(yùn)動耗能增加[33]。脂肪作為生物體內(nèi)儲能和供能的重要物質(zhì), 在高養(yǎng)殖密度下, 魚類會通過甘油三酯的分解給機(jī)體供能[34],這可能是導(dǎo)致魚體粗脂肪含量下降的原因。

本研究中發(fā)現(xiàn), 飼料蛋白源和養(yǎng)殖密度對草魚全魚粗蛋白和粗脂肪含量不存在顯著的交互作用,類似的結(jié)果在黃金鳊(Notemigonus crysoleucas)[35]和虹鱒[17]等養(yǎng)殖密度和飼料蛋白質(zhì)水平的研究中也有發(fā)現(xiàn)。

3.3 飼料蛋白源和養(yǎng)殖密度對草魚血清生化指標(biāo)的影響

高密度養(yǎng)殖環(huán)境造成的擁擠脅迫會引起魚體的應(yīng)激反應(yīng), 導(dǎo)致血清生化指標(biāo)發(fā)生變化[36]。谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶是反映肝臟功能的重要生理代謝酶, 參與機(jī)體氨基酸和乳酸的代謝, 其主要存在于肝細(xì)胞內(nèi), 當(dāng)肝細(xì)胞受損時, 轉(zhuǎn)氨酶便會釋放到血液里, 使血清中轉(zhuǎn)氨酶活性升高。葡萄糖是機(jī)體生命活動的主要能量來源, 在一定范圍內(nèi), 血糖的升高能增強(qiáng)機(jī)體抗逆能力, 提高免疫力[37]。在本研究中, 隨著養(yǎng)殖密度的增加, 草魚血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和葡萄糖的水平增加，這與團(tuán)頭魴[38]、褐牙鲆(Paralichthys olivaceus)[39]和大口黑鱸(Micropterus salmoides)[40]等養(yǎng)殖密度的研究結(jié)果相似。研究結(jié)果表明, 養(yǎng)殖密度的增加, 可能導(dǎo)致草魚肝臟器官受到損害, 因此血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶的水平升高。同時, 應(yīng)激狀態(tài)下的機(jī)體能耗增加, 促進(jìn)了糖原分解來滿足能量的需求,導(dǎo)致血清葡萄糖含量升高[41]。

血清白蛋白主要在肝臟中合成, 具有維持血漿膠體滲透壓和運(yùn)輸代謝產(chǎn)物的功能; 堿性磷酸酶是一種重要的非特異性免疫酶, 機(jī)體肝臟受到損傷時其活性升高[42]。在本研究中, 小球藻組血清白蛋白的水平最高, 乙醇梭菌蛋白組堿性磷酸酶的水平最低, 而黃粉蟲組草魚血清白蛋白的水平最低而堿性磷酸酶的水平最高。有研究表明, 隨著飼料中黃粉蟲比例的增加, 羅氏沼蝦(Macrobrachium rosenbergii)血清堿性磷酸酶的水平增加[43]。這可能是因?yàn)辄S粉蟲組草魚肝臟受到損傷, 使得堿性磷酸酶水平升高, 同時肝臟功能異常導(dǎo)致蛋白合成能力下降,因此血清白蛋白水平降低。血糖和血脂是反映機(jī)體能量代謝的重要指標(biāo)[16]。在本研究中, 與中密度(0.16 kg/m3)相比, 高密度(0.21 kg/m3)下黃粉蟲組和小球藻組草魚血清甘油三酯水平升高, 乙醇梭菌蛋白組和小球藻組血清葡萄糖水平升高, 這表明高密度脅迫可能導(dǎo)致了魚類脂肪和葡萄糖代謝增加, 以滿足機(jī)體對能量的需求。

4 結(jié)論

綜上所述, 在本試驗(yàn)條件下, 養(yǎng)殖草魚幼魚(5.36±0.18) g的密度達(dá)到0.21 kg/m3時, 飼料效率顯著降低, 血清生化指標(biāo)發(fā)生變化, 生長受到抑制。乙醇梭菌蛋白、棉籽濃縮蛋白和小球藻作為單一蛋白源在草魚飼料中與的豆粕具有相近的飼料價(jià)值。以蛋白質(zhì)效率和增重率為評價(jià)指標(biāo), 草魚對5種蛋白源的利用能力為乙醇梭菌蛋白=小球藻=棉籽濃縮蛋白=豆粕>黃粉蟲。