高文浩 彭樹(shù)鋒 廖春燕 董曉慧 譚北平 王 嘉 遲淑艷

(1.廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料實(shí)驗(yàn)室, 湛江 524088; 2.中國(guó)漁業(yè)協(xié)會(huì)金鯧魚(yú)分會(huì), 湛江 524000;3.愷勒司(上海)商務(wù)信息咨詢有限公司, 上海 200060)

隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展和人民群眾對(duì)優(yōu)質(zhì)水產(chǎn)品的需求增加, 水產(chǎn)養(yǎng)殖品種對(duì)所依賴的魚(yú)粉等優(yōu)質(zhì)飼料原料的需求增加。然而, 據(jù)FAO統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示, 近20年來(lái), 由于過(guò)度捕撈, 全球魚(yú)粉總產(chǎn)量呈逐年波動(dòng)下降趨勢(shì)[1], 2000年產(chǎn)量7.0×109kg,2012—2020年維持在4.7×109kg[2]。秘魯和日本等國(guó)家生產(chǎn)的優(yōu)質(zhì)魚(yú)粉價(jià)格高的同時(shí)難以滿足飼料工業(yè)和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)快速發(fā)展的需求[3]。因此, 尋求部分或完全替代魚(yú)粉的蛋白源是水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料研究現(xiàn)階段關(guān)注的主要目標(biāo)[4]。

飼料蛋白源按原料來(lái)源可分為動(dòng)物蛋白源、植物蛋白源和單細(xì)胞蛋白源, 其中單細(xì)胞蛋白源又可分為細(xì)菌蛋白和真菌蛋白。細(xì)菌可利用天然氣、工業(yè)廢氣及生活污水等發(fā)酵, 生產(chǎn)菌體蛋白。生產(chǎn)原料來(lái)源廣泛且價(jià)格低廉, 生產(chǎn)效率高成本低,代表性產(chǎn)品如乙醇梭菌蛋白、甲烷氧化菌蛋白和一些光合細(xì)菌蛋白等[3,5]。適宜比例的菌體蛋白飼料代替魚(yú)粉飼喂肥育豬, 有利于提高試驗(yàn)豬的增重率和飼料利用率及維持豬皮毛光潔度, 并降低了養(yǎng)豬成本[5]。但是, 利用天然氣發(fā)酵生產(chǎn)的菌體蛋白替代20%魚(yú)粉, 對(duì)大西洋鮭生長(zhǎng)性能無(wú)負(fù)面影響,但會(huì)降低消化率[6,7]。

莢膜甲基球菌(Methylococcus capsulatus, Bath)是一種甲烷氧化菌, 可利用天然氣中的甲烷與少量異養(yǎng)細(xì)菌混合發(fā)酵生產(chǎn)莢膜甲基球菌蛋白(MBM),粗蛋白含量可達(dá)70%, 氨基酸平衡[6], 粗脂肪含量約為8%, 其中主要脂肪酸為棕櫚酸(占總脂肪酸的43.44%)和棕櫚油酸(占總脂肪酸的23.00%)[8]。在大西洋鮭(Salmo salar)飼料中添加MBM可以預(yù)防或治療由高含量的豆粕引起的腸炎[8,9], 改善其腸道菌群結(jié)構(gòu), 提高抗病力[9]; 替代10%的魚(yú)粉可以激活大口黑鱸(Micropterus salmoides)TLR2誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞因子的產(chǎn)生來(lái)增強(qiáng)免疫反應(yīng), 有利于腸道健康[10];MBM替代魚(yú)粉量達(dá)30%, 不會(huì)影響五條鰤(Seriola quinqueradiata)的生長(zhǎng)性能[11], 替代45%的魚(yú)粉可以提高凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus Vannamei)肝胰腺的抗氧化能力。

卵形鯧鲹(Trachinotus ovatus), 是硬骨魚(yú)綱、鱸形目、鲹科、鯧鲹屬魚(yú)類, 俗稱黃臘鯧、金鯧魚(yú),其肉質(zhì)鮮美細(xì)嫩, 營(yíng)養(yǎng)豐富, 是我國(guó)南方沿海人工養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)魚(yú)類之一[12]。本實(shí)驗(yàn)以卵形鯧鲹為實(shí)驗(yàn)對(duì)象, 用MBM替代飼料中一定比例的魚(yú)粉, 研究其在卵形鯧鲹飼料中的適宜添加量, 為卵形鯧鲹飼料的研發(fā)及MBM在水產(chǎn)飼料中的應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料及方法

1.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及配方

在基礎(chǔ)飼料(魚(yú)粉含量35%, MBM0)中分別添加3.5%、7%和10.5%的MBM, 替代10%、20%和30%的魚(yú)粉, 記為MBM10、MBM20和MBM30組。[斐康?蛋白,愷勒司(上海)商務(wù)信息咨詢有限公司]。根據(jù)配方(表1), 飼料原料粉碎后過(guò)60目篩, 按配方稱量好各種原料, 逐級(jí)混合均勻后用雙螺桿擠條機(jī)(華南理工大學(xué)科技實(shí)業(yè)總廠, F75型)制得粒徑為2.0和2.5 mm的條狀沉性飼料。自然風(fēng)干后用封口袋分裝編號(hào), 置于–20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

表1 飼料配方及組成(%干物質(zhì))Tab.1 Formulation and proximate of experimental diets (% dry matter)

1.2 飼養(yǎng)管理

實(shí)驗(yàn)共4個(gè)處理, 每個(gè)處理3個(gè)重復(fù), 每個(gè)重復(fù)40尾魚(yú), 于近海(廣東省湛江市坡頭區(qū)南三島五里村, 21°15′6″N, 110°27′31″E)浮筏式網(wǎng)箱中(1 m×1 m×2 m)進(jìn)行56d的養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)。日投喂兩次(06:00和18:00), 根據(jù)攝食情況調(diào)整投喂至表觀飽食, 并做好記錄。養(yǎng)殖期間, 海水溫度30—32℃, 鹽度24‰—26‰,溶解氧≥6 mg/L。

1.3 樣品采集

養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)結(jié)束, 禁飼24h后, 對(duì)每個(gè)網(wǎng)口計(jì)數(shù)、稱重。每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽取3尾測(cè)量體重、體長(zhǎng)、肝臟重量和內(nèi)臟團(tuán)重量用于計(jì)算生長(zhǎng)性能指標(biāo)。隨機(jī)抽取3尾魚(yú)用于體常規(guī)分析; 隨機(jī)抽取6尾魚(yú)用于尾靜脈采血, 取肝臟、腸道和肌肉分別用于測(cè)定抗氧化酶活性和消化酶活性。血液于4℃冰箱中保存靜置24h后4000 r/min離心10min, 取上層血清, 用于測(cè)定血清生化指標(biāo)。放于–80℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 飼料、全魚(yú)及背肌常規(guī)養(yǎng)分含量測(cè)定

水分測(cè)定采用烘箱105℃干燥法測(cè)定(GZX-9146MBE干燥箱, 上海); 粗蛋白質(zhì)測(cè)定采用杜馬斯燃燒法測(cè)定(PrimacsSN-100杜馬斯定氮儀, 荷蘭);粗脂肪測(cè)定采用索式抽提法測(cè)定(ANKOM-XT15i自動(dòng)脂肪分析儀, 美國(guó)); 粗灰分采用高溫灼燒法測(cè)定(SX2-4-10N馬弗爐, 上海)。

1.5 生理生化指標(biāo)測(cè)定

血清甘油三酯、總膽固醇、白蛋白、總蛋白、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、總抗氧化能力、超氧化物歧化酶、丙二醛; 肝臟甘油三酯和總膽固醇及抗氧化指標(biāo); 腸道抗氧化指標(biāo)、消化酶均采用試劑盒(南京建成生物工程研究所)測(cè)定, 用酶標(biāo)儀(Thermofisher Multiskan GO, 美國(guó))讀取吸光度, 具體操作方法參照試劑盒使用說(shuō)明書(shū)。腸道胰蛋白酶和肝臟過(guò)氧化氫酶用紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)(Thermofisher Evolution 220, 美國(guó))讀取吸光度。

1.6 肝臟切片

取肝臟樣品固定在40%甲醛溶液中, 用于制作蘇木精-伊紅染色切片(武漢塞維爾生物科技有限公司), 每個(gè)處理組選取3張(每個(gè)重復(fù)1張)組織切片,使用顯微鏡(Eclipse Ci-L)測(cè)量200倍視野內(nèi)空泡像素面積并用Image-Pro Plus 6.0分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

1.7 計(jì)算公式

存活率(Survival rate, SR, %)=實(shí)驗(yàn)?zāi)~(yú)尾數(shù)/初始魚(yú)尾數(shù)×100;

增重率(Weight gain rate, WGR, %)=100 ×(終末均重–初始均重)/初始均重;

飼料系數(shù)(Feed conversion ratio, FCR)=攝食飼料質(zhì)量/(末重–初重);

特定生長(zhǎng)率(Specific growth rate, SGR, %/d)=100×(ln末重–ln初重)/實(shí)驗(yàn)天數(shù);

攝食率(Ingestion rate, IR, %/d)=投喂量/[飼養(yǎng)天數(shù)×(終末體重+初始體重)/2];

肝體比(Hepatosmatic index, HSI)=100×肝重/魚(yú)體重;

臟體比(Visceral index, VSI)=100×內(nèi)臟重/魚(yú)體重;

肥滿度(Condition factor, CF, g/cm3)=100×魚(yú)體重/體長(zhǎng)3;

空泡面積百分比(Percentage of void area, PVA%)=空泡像素面積/組織像素面積×100;

1.8 數(shù)據(jù)分析

使用SPSS 26.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析, 得到的數(shù)據(jù)結(jié)果用(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)的形式來(lái)表示, 當(dāng)各個(gè)實(shí)驗(yàn)組間有顯著性差異時(shí)(P<0.05),再進(jìn)行Duncan檢驗(yàn)。使用Prism8對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行皮爾森(Pearson correlation 2-tailed)相關(guān)性分析, 顯著水平為P<0.05。

2 結(jié)果

2.1 生長(zhǎng)性能

如表2所示, 經(jīng)過(guò)56d的養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn), MBM替代魚(yú)粉的水平在10%—30%的各處理組, 實(shí)驗(yàn)魚(yú)末均重、存活率、肝體比、臟體比、飼料系數(shù)與對(duì)照組相比均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。增重率和特定生長(zhǎng)率逐漸降低, 但各組間無(wú)顯著性差異(P>0.05); 肥滿度隨替代比例的增大而提高, MBM30組顯著高于MBM0組(P<0.05)。

表2 MBM替代魚(yú)粉對(duì)卵形鯧鲹生長(zhǎng)性能的影響Tab.2 Effects of MBM on growth performance of Trachinotus ovatus (n=3)

2.2 全魚(yú)及背肌營(yíng)養(yǎng)成分

如表3所示, 隨著MBM替代魚(yú)粉的量增加, 各組全魚(yú)粗蛋白、水分和背肌水分含量均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。MBM20組全魚(yú)粗脂肪和背肌粗脂肪含量顯著高于MBM0組(P<0.05), 與MBM0組相比, MBM30組背肌粗蛋白未見(jiàn)顯著性差異(P>0.05),但粗脂肪含量顯著升高(P<0.05)。如表4所示, 全魚(yú)粗脂肪與MBM替代比例無(wú)顯著相關(guān)關(guān)系(P>0.05),背肌粗脂肪與MBM替代比例呈顯著正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。

表3 MBM替代魚(yú)粉對(duì)卵形鯧鲹體組分的影響Tab.3 Effects of MBM replaces fishmeal on body composition of Trachinotus ovatus (n=3)

表4 MBM替代比例與卵形鯧鲹體粗脂肪組成的相關(guān)性分析Tab.4 Correlation between MBM replaces fishmeal ratio and crude fat composition of Trachinotus ovatus (n=3)

2.3 血清生理生化指標(biāo)

如表5所示, MBM20和MBM30組血清甘油三酯顯著低于MBM0組(P<0.05)。MBM20組總膽固醇含量與MBM0組相比差異不顯著(P>0.05), MBM10和MBM30組則顯著高于MBM0組(P<0.05)。MBM20組血清谷草轉(zhuǎn)氨酶顯著高于其余各組(P<0.05)。MBM0組白蛋白顯著低于MBM10組(P<0.05), 與其余各組無(wú)顯著性差異(P>0.05)。各組間血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和總蛋白含量無(wú)顯著性差異(P>0.05)。如表6所示, 血清甘油三酯與MBM替代魚(yú)粉的比例呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系(P<0.05), 血清總膽固醇與MBM替代比例無(wú)顯著相關(guān)關(guān)系(P>0.05)。

表5 MBM替代魚(yú)粉對(duì)卵形鯧鲹血清生化指標(biāo)的影響Tab.5 Effects of MBM replaces fishmeal on serum biochemical indices of Trachinotus ovatus (n=3)

表6 MBM替代魚(yú)比例卵形鯧鲹血清脂質(zhì)成分的相關(guān)性分析Tab.6 Correlation between MBM replaces fishmeal and serum lipid composition of Trachinotus ovatus (n=3)

2.4 腸道消化酶活性

如圖1所示, 各實(shí)驗(yàn)組腸道胰蛋白酶和脂肪酶活性無(wú)顯著差異(P>0.05)。

圖1 MBM替代魚(yú)粉對(duì)卵形鯧鲹腸道消化酶活性的影響Fig.1 Effects of MBM on intestinal digestive enzyme activities of Trachinotus ovatus

2.5 組織抗氧化指標(biāo)變化

如圖2所示, MBM20組血清總抗氧化能力與MBM0無(wú)顯著性差異(P>0.05), 顯著高于MBM10和MBM30組(P<0.05), 各組間超氧化物歧化酶和丙二醛無(wú)顯著性差異 (P>0.05)。

圖2 MBM替代魚(yú)粉對(duì)卵形鯧鲹血清抗氧化指標(biāo)的影響Fig.2 Effects of MBM on serum antioxidant indices of Trachinotus ovatus

如圖3所示, MBM20組腸道超氧化物歧化酶活性顯著高于其余各組(P<0.05), MBM10組丙二醛含量顯著低于其余各組(P<0.05)。

圖3 MBM替代魚(yú)粉對(duì)卵形鯧鲹腸道抗氧化指標(biāo)的影響Fig.3 Effects of MBM on intestinal antioxidant indices of Trachinotus ovatus

如圖4所示, MBM20和MBM30組肝臟過(guò)氧化氫酶活性與MBM0組無(wú)顯著性差異(P>0.05), MBM30組顯著高于MBM10組(P<0.05)。各組間總抗氧化能力和丙二醛含量無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

圖4 MBM替代魚(yú)粉對(duì)卵形鯧鲹腸道肝臟抗氧化指標(biāo)的影響Fig.4 Effect of MBM instead of fishmeal on antioxidant indexes of intestine and liver of Trachinotus ovatus

2.6 肝臟脂質(zhì)含量及組織形態(tài)變化

如圖5所示, MBM替代10%—30%的魚(yú)粉時(shí),肝臟甘油三酯含量均顯著高于MBM0組(P<0.05),總膽固醇含量呈下降趨勢(shì), MBM20組和MBM30組顯著低于MBM0組, MBM20組最低(P<0.05)。如表7所示, 肝臟甘油三酯與MBM替代比例呈極顯著正相關(guān)關(guān)系(P<0.01)?？偰懝檀寂cMBM替代比例呈極顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系(P<0.01)。

表7 MBM替代比例與卵形鯧鲹肝臟脂質(zhì)成分的相關(guān)性分析Tab.7 Correlation between MBM substitution ratio and liver lipid composition of Trachinotus ovatus (n=3)

圖5 MBM替代魚(yú)粉對(duì)卵形鯧鲹肝臟生化指標(biāo)的影響Fig.5 Effects of MBM on liver biochemical indices of Trachinotus ovatus

如圖6A所示, 從肝組織H&E切片可以看出,MBM0組肝細(xì)胞形態(tài)正常, 細(xì)胞間界限明顯, 細(xì)胞核清晰可見(jiàn)。但隨著MBM替代魚(yú)粉比例的升高,肝細(xì)胞形態(tài)輪廓逐漸模糊, 細(xì)胞核減少。如圖6B所示在相同倍鏡視野內(nèi)替代魚(yú)粉正在10%—30%的組, 肝臟空泡化面積顯著高于MBM0組(P<0.05), 統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果顯示MBM10組空泡面積百分比最高。

圖6 MBM替代魚(yú)粉對(duì)卵形鯧鲹肝臟的影響(×200)Fig.6 Effects of MBM on liver of Trachinotus ovatus (×200)

3 討論

3.1 MBM替代魚(yú)粉對(duì)卵形鯧鲹生長(zhǎng)性能和脂質(zhì)沉積的影響

單細(xì)胞蛋白的來(lái)源主要為藻類、真菌和非致病性細(xì)菌等單細(xì)胞微生物[13], 早在20世紀(jì)80年代中期, 就在食品加工和飼料生產(chǎn)中得到普遍應(yīng)用。單細(xì)胞蛋白的粗蛋白含量可達(dá)50%—85%, 氨基酸構(gòu)成豐富且均衡, 與魚(yú)粉氨基酸組成相似, 可利用率高[13,14]。莢膜甲基球菌是一種非致病性的革蘭氏陰性菌, 普遍存在于土壤等環(huán)境中, 可利用甲烷、甲醇和甲醛等碳源作為能源, 發(fā)酵形成MBM, 其與魚(yú)粉相比, 粗蛋白和核酸含量更高, 研究發(fā)現(xiàn)MBM替代魚(yú)粉比例為9%時(shí), 大比目魚(yú)(Hippoglossus hippoglossus)生長(zhǎng)性能與對(duì)照組無(wú)顯著性差異, 超過(guò)18%后生長(zhǎng)新能開(kāi)始下降[15]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示, 隨著飼料中MBM替代比例的升高, 各實(shí)驗(yàn)組卵形鯧鲹腸道胰蛋白酶活性和脂肪酶活性無(wú)顯著性差異,終末均重、存活率、增重率、特定生長(zhǎng)率、臟體比和飼料系數(shù)等指標(biāo)均未產(chǎn)生顯著變化, 這與MBM替代魚(yú)粉在虹鱒(Oncorhynchus mykiss)[16]和凡納濱對(duì)蝦[9]實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。在MBM替代魚(yú)粉后, 卵形鯧鲹對(duì)飼料蛋白和脂質(zhì)的消化能力及生長(zhǎng)性能未造成負(fù)面影響, 這可能是因?yàn)镸BM的氨基酸組成均衡[17], 且與魚(yú)粉相似。肥滿度可用于評(píng)價(jià)機(jī)體生長(zhǎng)和攝食等狀況[18], 在本實(shí)驗(yàn)條件下, 肥滿度整體呈現(xiàn)出上升的趨勢(shì), MBM30顯著高于對(duì)照組, 飼料系數(shù)和攝食率各組間均無(wú)顯著性差異, 但呈下降趨勢(shì);增重率無(wú)顯著性差異, 由肥滿度計(jì)算公式可知, 所以在相同體重下。體長(zhǎng)越小, 肥滿度越大, 因此MBM替代魚(yú)粉后魚(yú)體長(zhǎng)生長(zhǎng)小于對(duì)照組, 表明MBM替代部分魚(yú)粉可使魚(yú)體型更加肥滿。

魚(yú)類攝食飼料會(huì)對(duì)其機(jī)體成分產(chǎn)生一定程度的影響[19]。在本實(shí)驗(yàn)中, MBM替代不同的水平的魚(yú)粉并未對(duì)卵形鯧鲹全魚(yú)和背肌的水分及全魚(yú)的粗蛋白產(chǎn)生顯著的影響。然而, 卵形鯧鲹全魚(yú)和背肌粗脂肪含量隨著MBM替代魚(yú)粉比例的提高而有上升趨勢(shì), 這與肥滿度的趨勢(shì)一致。MBM的氨基酸組成和魚(yú)粉相近, 飽和脂肪酸含量高于魚(yú)粉[17],有研究表明, 大口黑鱸對(duì)MBM的表觀消化率略高于魚(yú)粉[20], 結(jié)合本研究結(jié)果推斷, MBM替代魚(yú)粉可能影響機(jī)體脂質(zhì)的利用。MBM不飽和脂肪酸含量不及魚(yú)粉的多[17], 因此魚(yú)體攝入飽和脂肪酸相對(duì)增多[21], 導(dǎo)致在魚(yú)體脂肪及肌間脂肪含量上升, 從而提高肥滿度, 并且可提升魚(yú)肉保水性和嫩滑的口感。在肝臟中, 隨著替代量的增加, 總膽固醇無(wú)顯著變化, 但是甘油三酯的含量顯著升高, 通過(guò)皮爾森相關(guān)性分析可知, 肝臟中甘油三酯含量與MBM替代比例呈正相關(guān)關(guān)系, 總膽固醇呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,這與血清中相反, 提示總膽固醇優(yōu)先于甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)到血液中參與循環(huán)代謝, 甘油三酯在肝臟儲(chǔ)備。與MBM0組相比, 替代魚(yú)粉達(dá)10%—30%組的魚(yú)體肝細(xì)胞都存在空泡化現(xiàn)象, 還觀察到肝細(xì)胞核減少。在發(fā)酵豆粕高水平替代魚(yú)粉后, 大黃魚(yú)(Larimichthys crocea)幼魚(yú)肝細(xì)胞崩解劇烈, 細(xì)胞核大面積消失[22], 高糖飼料導(dǎo)致糖類在卵形鯧鲹幼魚(yú)肝臟轉(zhuǎn)化為脂肪, 使肝臟的空泡面積增加[23]。結(jié)合血清指標(biāo)和生長(zhǎng)性能數(shù)據(jù)分析, MBM替代魚(yú)粉水平升高會(huì)使卵形鯧鲹的肝臟產(chǎn)生一定程度的脂肪蓄積,但是對(duì)魚(yú)體的生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響。

魚(yú)類的血液指標(biāo)與魚(yú)體的營(yíng)養(yǎng)健康狀況緊密相關(guān)。本試驗(yàn)中MBM20和MBM30組血清甘油三酯含量均顯著低于MBM0組, 表明飼料中添加MBM替代魚(yú)粉達(dá)20%—30%時(shí)有利于降低血清中甘油三酯的含量。在本實(shí)驗(yàn)中, 隨著MBM替代魚(yú)粉水平的升高, 卵形鯧鲹各組間谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性沒(méi)有顯著變化, 血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性在MBM20組顯著升高, 在對(duì)五條鰤的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示, 谷丙轉(zhuǎn)氨酶各組間無(wú)顯著性差異, 替代量為20%時(shí)谷草轉(zhuǎn)氨酶顯著低于其余各組[11], 相對(duì)于MBM0組、MBM20和MBM30組對(duì)卵形鯧鲹血清總蛋白和白蛋白含量的變化并不顯著, 血清總蛋白和白蛋白含量以及轉(zhuǎn)氨酶活性均可以作為肝功能變化的指標(biāo)[24—26]。綜上, 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明替代20%—30%魚(yú)粉后, 卵形鯧鲹的肝臟功能有一定程度的影響, 但是血清指標(biāo)的綜合顯示這種變化不影響整體代謝。

3.2 MBM替代魚(yú)粉對(duì)卵形鯧鲹抗氧化能力的影響

生物體內(nèi)的抗氧化酶可以保護(hù)細(xì)胞抵抗自由基造成的氧化損傷[27], 從而起到維持機(jī)體正常生理功能的作用[28]。超氧化物歧化酶在魚(yú)體內(nèi)可以起到清除超氧陰離子自由基和預(yù)防生物分子損傷的作用, 丙二醛是脂質(zhì)過(guò)氧化的最終分解產(chǎn)物, 在生物體內(nèi)含量過(guò)高對(duì)機(jī)體有毒害作用[29,30]。已有研究表明, 在飼料中添加MBM能提高建鯉(Cyprinus carpiovar.Jian)和吉富羅非魚(yú)(GIFT)血清中的總抗氧化能力并降低丙二醛含量, 對(duì)超氧化物歧化酶無(wú)顯著性影響[31,32]; 而不同含量MBM的各飼料處理組間黑鯛(Acanthopagrus schlegelii)血清超氧化物歧化酶和丙二醛則無(wú)顯著性差異[33]; 對(duì)凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei)的研究則顯示這3個(gè)指標(biāo)皆隨MBM替代魚(yú)粉的比例升高而增高[9], 因此不同物種以及飼料配方的組成均可對(duì)MBM 的使用產(chǎn)生不同的效果。本實(shí)驗(yàn)中, MBM20組腸道超氧化物歧化酶活性顯著高于MBM0組, 血清和肝臟總抗氧化能力與MBM0組相比無(wú)顯著性差異, MBM20組血清, 腸道和肝臟丙二醛含量與MBM0組相比亦無(wú)顯著差異, 即替代20%的魚(yú)粉時(shí), 可以起到提高魚(yú)腸道清除超氧陰離子的能力, 效果優(yōu)于低替代量和高替代量。

4 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明, 當(dāng)基礎(chǔ)飼料中魚(yú)粉含量為35%時(shí), 莢膜甲基球菌蛋白添加量為7%—10.5%, 替代魚(yú)粉的比例為20%—30%時(shí), 可以提高全魚(yú)和肌肉的脂肪含量, 肝臟空泡化程度顯著增加但不會(huì)對(duì)卵形鯧鲹幼魚(yú)的生長(zhǎng)和抗氧化能力產(chǎn)生負(fù)面影響。