何鮮艷 高曉峰 李振濤 程建貞 胡榮晉

阿爾茨海默?。ˋlzheimer's disease，AD）是一種神經(jīng)系統(tǒng)退化性疾病，對(duì)患者本人及家庭造成了巨大痛苦[1]。多奈哌齊是一種相對(duì)特異性的可逆性乙酰膽堿酯酶抑制劑，可改善患者認(rèn)知功能[2]，但相關(guān)研究指出，其對(duì)于部分患者認(rèn)知功能的改善尚不理想[3]。有報(bào)道發(fā)現(xiàn)，腸道菌群異常與AD 的發(fā)生密切相關(guān)[4]。目前對(duì)于益生菌制劑聯(lián)合多奈哌齊治療對(duì)AD 的臨床療效尚處于探索階段。故本次研究旨在探究益生菌制劑聯(lián)合多奈哌齊治療中重度AD 患者的臨床療效及對(duì)炎癥因子的影響?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2021 年1 月至2022 年1 月衢州市第三醫(yī)院80 例中重度AD 患者為研究對(duì)象，其中男性48 例、女性32 例；年齡56～82 歲，平均年齡（70.94±4.39）歲；病程0.5～6 年，平均（1.92±0.26）年；納入標(biāo)準(zhǔn)包括：①符合有關(guān)中重度AD 的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；②患者或其家屬知情同意且簽署同意書；③病程≥6 個(gè)月。并剔除：①既往有腦卒中病史者；②先天性智力障礙患者；③合并腦血管畸形患者；④合并嚴(yán)重炎癥疾病患者；⑤合并嚴(yán)重胃腸道疾病患者；⑥其他疾病引起的認(rèn)知功能障礙者；⑦合并嚴(yán)重免疫功能異常者。本次研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批，采用隨機(jī)數(shù)字表法將患者分為觀察組和對(duì)照組，每組40 例。觀察組中男性25 例、女性15 例；年齡56～81 歲，平均（70.85±4.47）歲；病程0.5～6 年，平均（1.94±0.27）年；文化程度：初中以下10 例、初中及高中22 例、大專及以上8 例。對(duì)照組中男性23 例、女性17 例；年齡59～82 歲，平均（71.02±4.31）歲；病程0.5～5年，平均（1.89±0.26）年；文化程度：初中以下8 例、初中及高中21 例、大專及以上11 例。兩組比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。

1.2 方法 對(duì)照組給予多奈哌齊片[由衛(wèi)材（中國(guó)）藥業(yè)有限公司生產(chǎn)] 5 mg 口服治療，每日1 次，共治療3 個(gè)月。觀察組在對(duì)照組基礎(chǔ)上給予益生菌制劑（由米雅利桑株式會(huì)社生產(chǎn)）聯(lián)合治療，益生菌制劑2片口服，每日3 次，共治療3 個(gè)月。

1.3 監(jiān)測(cè)指標(biāo) ①臨床療效：根據(jù)治療前及治療3 個(gè)月后的簡(jiǎn)易精神狀態(tài)量表（mini-mental state examination，MMSE）評(píng)分變化情況評(píng)定治療療效[6]，療效指數(shù)=治療前后MMSE 評(píng)分變化值/治療前MMSE評(píng)分×100%。顯效為療效指數(shù)＞20%，有效為療效指數(shù)12%～20%，無效為療效指數(shù)＜12%。②認(rèn)知功能：采用MMSE 及AD 評(píng)估量表認(rèn)知次量表（Alzheimer's disease assessment scale-cognitive subscale，ADAS-Cog）評(píng)價(jià)患者治療前及治療3 個(gè)月后的認(rèn)知功能[7]，MMSE 主要包括時(shí)間定向、地點(diǎn)定向等方面，共30 項(xiàng)，分值范圍為0～30 分，得分越低表示認(rèn)知障礙越嚴(yán)重；ADAS-Cog 包括單詞回憶測(cè)試、物體和手指命名等14 項(xiàng)目，每項(xiàng)0～5 分，得分越高表示認(rèn)知功能越差，0 分為無癡呆，70 分為完全無認(rèn)知功能。③日常生活能力：采用AD 評(píng)估量表日常生活能力次量表行為量表（Alzheimer's disease assessment scale-activity of daily living scale，ADASADL）評(píng)價(jià)患者治療前及治療3 個(gè)月后的日常生活質(zhì)量[8]，共23 項(xiàng)，分值范圍為0～78 分，得分越高表示患者日常生活能力越強(qiáng)。④炎癥因子：于治療前及治療3 個(gè)月后采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)患者血清腫瘤壞死因子-α（tumour necrosis factor-α，TNFα）、白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白介素-6（interleukin-6，IL-6）。⑤氧化應(yīng)激指標(biāo)：采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)患者治療前及治療3 個(gè)月后的超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）及丙二醛水平。⑥腸道菌群檢測(cè)：所有患者于治療前及治療3 個(gè)月后采集約0.5 g 新鮮糞便，使用10 倍稀釋法連續(xù)稀釋至109，滴種于選擇性培養(yǎng)基上，應(yīng)用法國(guó)生物梅里埃公司VITEK Compact 型全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)及配套試劑檢測(cè)患者主要菌群（雙歧桿菌、腸球菌、腸桿菌），結(jié)果以對(duì)數(shù)值（lg 菌落數(shù)/g）表示。⑦不良反應(yīng)：統(tǒng)計(jì)兩組患者治療期間惡心嘔吐、嗜睡等不良反應(yīng)發(fā)生情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示。計(jì)量資料組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。設(shè)P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床療效比較見表1

表1 兩組臨床療效比較

由表1 可見，兩組治療總有效率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.72，P＞0.05）。

2.2 兩組治療前后的認(rèn)知功能及日常生活能力比較見表2

表2 兩組治療前后的認(rèn)知功能及日常生活能力比較/分

由表2 可見，兩組治療前MMSE、ADAS-Cog 和ADAS-ADL評(píng)分比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t分別=0.36、1.83、1.81，P均＞0.05）。治療后，觀察組患者M(jìn)MSE、ADAS-ADL評(píng)分均高于對(duì)照組，ADAS-Cog評(píng)分低于對(duì)照組（t分別=2.92、2.37、-2.78，P均＜0.05）。

2.3 兩組治療前后的炎癥因子水平比較見表3

表3 兩組治療前后的炎癥因子水平比較

由表3 可見，兩組治療前TNF-α、IL-1β、IL-6水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t分別=0.92、1.50、1.06，P均＞0.05）。治療后，觀察組TNF-α、IL-1β、IL-6 水平低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t分別=4.17、6.30、3.36，P均＜0.05）。

2.4 兩組治療前后的氧化應(yīng)激反應(yīng)比較見表4

表4 兩組治療前后的氧化應(yīng)激反應(yīng)比較

由表4 可見，兩組治療前SOD、GSH-Px 和丙二醛水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t分別=0.23、1.39、1.09，P均＞0.05）。治療后，觀察組SOD、丙二醛水平低于對(duì)照組，GSH-Px水平高于對(duì)照組（t分別=3.69、3.24、-2.28，P均＜0.05）。

2.5 兩組治療前后的腸道菌群比較見表5

由表5 可見，兩組治療前雙歧桿菌數(shù)量、腸球菌、腸桿菌數(shù)量比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t分別=0.75、1.35、1.56，P均＞0.05）。治療后，觀察組雙歧桿菌數(shù)量多于對(duì)照組，腸球菌、腸桿菌數(shù)量少于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t分別=-2.49、2.31、3.76，P均＜0.05）。

表5 兩組治療前后腸道菌群比較（lg菌落數(shù)/g）

2.6 兩組不良反應(yīng)發(fā)生率比較見表6

表6 兩組不良反應(yīng)發(fā)生率比較

由表6 可見，兩組不良反應(yīng)發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.72，P＞0.05）。

3 討論

AD是老年人中常見的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，以廣泛的神經(jīng)元丟失所導(dǎo)致的進(jìn)行性記憶喪失和全面的認(rèn)知功能障礙為主要臨床表現(xiàn)，嚴(yán)重影響了患者及其家屬的生活質(zhì)量[9]。目前，臨床上多采用多奈哌齊等抑制膽堿酯酶活性藥物進(jìn)行治療，可增加大腦皮層乙酰膽堿含量，利于緩解臨床癥狀，改善患者認(rèn)知功能。但相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，單藥治療中重度AD的臨床療效欠佳[10]。臨床資料顯示，腸道微生物可通過菌群-腸腦軸影響大腦功能及行為[11]。腸道菌可通過產(chǎn)生神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)調(diào)節(jié)劑，來激活G 蛋白偶聯(lián)受體，而影響大腦各個(gè)區(qū)域，提示通過調(diào)節(jié)腸道菌群或可起到改善患者認(rèn)知功能異常的作用。本次研究結(jié)果顯示，對(duì)中重度AD 患者給予益生菌聯(lián)合多奈哌齊治療，可改善患者認(rèn)知功能及日常生活能力，這主要是因?yàn)橐嫔赏ㄟ^促進(jìn)神經(jīng)遞質(zhì)的合成或受體表達(dá)調(diào)節(jié)大腦活動(dòng)。大量研究表明，腸道菌可通過產(chǎn)生神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)調(diào)節(jié)劑，來激活G 蛋白偶聯(lián)受體，而影響大腦各個(gè)區(qū)域[12,13]。本次研究結(jié)果顯示，益生菌聯(lián)合多奈哌齊治療中重度AD患者，可改善腸道菌群，這或?yàn)樵撍幬锬芨纳苹颊哒J(rèn)知功能的主要因素，其原因在于，益生菌可通過間接調(diào)節(jié)腸道菌群或直接合成神經(jīng)遞質(zhì)及衍生物來誘導(dǎo)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子表達(dá)，從而調(diào)節(jié)突觸傳遞和神經(jīng)元可塑性。

近年來研究發(fā)現(xiàn)，老年AD 患者不僅出現(xiàn)了明顯的神經(jīng)退行性病變，還伴有小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞激活，提示患者存在腦內(nèi)炎癥反應(yīng)[14]。相關(guān)研究也指出，中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥反應(yīng)與AD 發(fā)病存在一定程度的相關(guān)性[15]。研究發(fā)現(xiàn)，大腦皮質(zhì)層和海馬區(qū)細(xì)胞外β-淀粉樣肽合成過量、沉積是AD 的重要病理特征和發(fā)病中心環(huán)節(jié)，在AD 患者病理早期階段，其易感神經(jīng)元中即已出現(xiàn)氧化損傷。且相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，氧化損傷是AD 發(fā)病的早期因素。益生菌具有抗炎作用，可抑制患者促炎細(xì)胞因子升高[16]。本次研究結(jié)果顯示，對(duì)中重度AD患者給予益生菌聯(lián)合多奈哌齊治療，可減輕機(jī)體炎癥狀態(tài)，降低氧化應(yīng)激水平。其原因在于，益生菌衍生的阿魏酸可逆轉(zhuǎn)神經(jīng)炎癥，降低海馬和皮質(zhì)Aβ 原纖維水平，可通過清除氧自由基阻止AD 發(fā)展。另外，本次研究發(fā)現(xiàn)，兩組不良反應(yīng)發(fā)生率對(duì)比無明顯差異，說明在多奈哌齊的基礎(chǔ)上，給予益生菌治療不會(huì)增加不良反應(yīng)，提示該藥物治療的安全性較高。

綜上所述，益生菌制劑聯(lián)合多奈哌齊治療中重度AD，可調(diào)節(jié)患者腸道菌群，降低炎癥反應(yīng)，改善機(jī)體氧化應(yīng)激狀態(tài)。本次研究尚存在不足之處，納入樣本量有限，后期需增加樣本量以進(jìn)一步分析聯(lián)合治療對(duì)中重度AD的治療效果。