于 磊，王竹軍，李冰冰，張 宇

（1.赤峰市農(nóng)牧業(yè)綜合檢驗檢測中心，內(nèi)蒙古 赤峰 024000；2.紹興市柯橋區(qū)畜牧獸醫(yī)所；3.阜新市轉(zhuǎn)型升級服務(wù)中心；4.南陽市動物疫病預(yù)防控制中心）

1 病毒特性

偽狂犬病病毒（PRV）是一種甲型皰疹病毒，與單純皰疹病毒1 型（HSV1）和水痘帶狀皰疹病毒（VZV）相關(guān)。偽狂犬病是由皰疹病毒家族成員偽狂犬病病毒（PRV）引發(fā)的一種常見的傳染病，具體傳染特點表現(xiàn)為傳播迅速、急性傳染、地方流行性顯著、死亡率較高。病毒寄生的主要宿主為豬，被感染偽狂犬病毒的豬會在不同時間段內(nèi)出現(xiàn)病理性壞死，病理性壞死是細胞程序性死亡的一種炎癥形式，感染偽狂犬病毒后，這種病毒以誘導(dǎo)細胞死亡的形式導(dǎo)致細胞死亡。PRV感染是通過與細胞受體結(jié)合以允許穿透細胞而開始的。到達細胞核后，病毒基因組引導(dǎo)一個受調(diào)控的基因表達級聯(lián)，最終導(dǎo)致病毒DNA 復(fù)制和新病毒成分的產(chǎn)生，最后，子代病毒粒子自我組裝并離開宿主細胞。除了豬這個主要宿主外，也有不少學(xué)者發(fā)現(xiàn)該病可通過家鼠感染其他動物，甚至也出現(xiàn)人類感染偽狂犬病毒的案例。因為這種病對新生仔豬有100%的致死率，并且對養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的破壞，經(jīng)濟遭受巨大損失。

2 流行病學(xué)

豬偽狂犬病有季節(jié)性，像普通的大多數(shù)病一樣多發(fā)生在寒冷的季節(jié)，冬末春初是該病的高發(fā)時間段，因為寒冷的季節(jié)更有利于病毒的傳播，延長了病毒的存活時間，但其他季節(jié)也有發(fā)生。豬場是偽狂犬病毒的溫泉，病毒在豬場中肆虐傳播。病豬、帶毒豬、帶毒豬場、帶毒家鼠是該病毒的重要傳染源。病毒通過空氣及體液接觸進行傳播是該病毒傳播的重要途徑。病毒擴散類型除了空氣傳播、體液傳播外，病豬可通過精液和胎盤傳播［1］。該病表現(xiàn)為易感率高、發(fā)病急。在豬場內(nèi)，病豬的體液、糞便可直接將病毒排出，相鄰豬圈因空氣流動直接患病，整個豬場也會因此將整個疫情擴散。不少學(xué)者認為，牛、羊、犬、貓、野生動物、肉食動物等感染該病與接觸豬、鼠有關(guān)［2］。

3 臨床癥狀和致病機理

感染偽狂犬病毒后，不同年齡的豬有不同的反應(yīng)，年齡越大發(fā)病率和死亡率越低，新生仔豬有著相當高的致死率，最高可達100%，而成年豬因為其較高的抵抗力，因此多呈現(xiàn)為隱性感染?；钕聛淼淖胸i到了哺乳期，雖不發(fā)病但是長期帶毒導(dǎo)致免疫力低下，各種有害應(yīng)激反應(yīng)會直接或間接引起該病病癥發(fā)作。仔豬表現(xiàn)為高熱、昏迷、嗜睡、四肢泳動、轉(zhuǎn)圈、角弓反張、共濟失調(diào)、抽搐、后肢麻痹、口流泡沫狀液、嘔吐、拉稀、咳嗽、打噴嚏、流鼻涕，育肥豬表現(xiàn)為高熱厭食、呼吸道癥狀、偶有神經(jīng)癥狀、增重受阻和發(fā)育障礙、飼料報酬率低，種豬表現(xiàn)為繁殖障礙和呼吸癥狀，妊娠母豬表現(xiàn)為木乃伊胎、死胎、流產(chǎn)，母豬表現(xiàn)為屢配不孕、返情率高，公豬表現(xiàn)為睪丸腫脹、萎縮、精液質(zhì)量變差，喪失種用能力。PRV 編碼的糖蛋白都是很容易被機體識別并排斥的靶標，這些有毒蛋白質(zhì)大約被分為3 類，分別是囊膜蛋白、病毒DNA 代謝酶、病毒結(jié)構(gòu)蛋白，這3 類蛋白質(zhì)決定了PRV 毒力的大小。研究PRV囊膜表面糖蛋白，對于了解其致病機理有很大的意義。在分子層面上，是病毒宿主與病毒的相互作用機制。眾所周知，囊膜蛋白是機體識別抗原的重要成分，現(xiàn)今已發(fā)現(xiàn)11種PRV的囊膜蛋白，這11種囊膜蛋白是機體識別的主要成員，也與病毒毒力存在一定關(guān)系。有研究表明病毒增殖的過程中必須要有糖蛋白的參與，非必須糖蛋白決定毒理的大?。?］。

4 臨床診斷

可根據(jù)病豬的內(nèi)臟等病理特征進行初步診斷，由于目前的病豬存在多種交錯復(fù)雜的病理病癥，一般采用常見的PCR檢測、血清學(xué)檢測等簡單易行的檢測方法。

4.1 PCR檢測

根據(jù)偽狂犬病毒的穩(wěn)定特殊序列設(shè)計出引物，目前擴增試驗一般采集腦部組織作為病料進行PCR擴增快速檢測。反應(yīng)條件：95 ℃持續(xù)5 min，然后在94 ℃進行35個周期，40 s，52 ℃進行60 s，72 ℃進行1 min，最后在72 ℃延長10 min。PCR產(chǎn)物用溴化乙錠染色，并在1.5%瓊脂糖凝膠上用紫外光進行可視化。

4.2 血清學(xué)檢測

酶聯(lián)免疫吸附試驗，簡稱ELISA，在大樣本量的病毒篩選檢測中，成本低、成效快、特異性高、靈敏度強，也可以作為實驗室檢測的一種常規(guī)有效的檢測方法。

5 疫苗免疫研究進展

目前尚無針對偽狂犬病的特效治療藥，疫苗免疫作為經(jīng)濟高效的防控依然是主要措施。從低毒力現(xiàn)場分離物獲得的經(jīng)典減毒活疫苗開始，根據(jù)疫苗類型不同，又主要分為滅活疫苗和減毒疫苗。基因工程疫苗目前正在研發(fā)中，AD疫苗通過首次使用缺乏毒力決定基因的基因工程活病毒疫苗和DIVA的概念，開創(chuàng)了動物疾病控制的新策略，即通過使用標記疫苗和相應(yīng)的伴隨診斷試驗，將接種疫苗的動物與田間病毒感染動物進行血清學(xué)鑒別。活疫苗中使用最廣的是Bartha-K61 株，目前有40 家生產(chǎn)廠家獲批生產(chǎn)。

筆者發(fā)現(xiàn)甘草多糖（GCP）在體外具有抗PRV 感染活性，600 μg/ml GCP可以完全阻斷病毒感染。在PRV感染的同時或感染后添加GCP對PRV有顯著的抑制作用。在病毒生命周期的不同階段添加GCP主要抑制PRV的附著和內(nèi)化，但不影響病毒的復(fù)制和釋放。研究結(jié)果表明，GCP作為一種抗PRV感染的藥物具有很大潛力。我國目前每年需要免疫的豬有8億頭份，疫苗研發(fā)有著巨大的市場，相信在這么大的需求刺激下，未來經(jīng)過疫苗研發(fā)公司的努力可以達到偽狂犬病毒徹底的防控和凈化。

6 防控措施

目前大多數(shù)疫苗因為豬場陽性率太高，導(dǎo)致疫苗的免疫保護作用甚微。除了偽狂犬病毒外，其他病毒也因為陽性率過高導(dǎo)致豬只抵抗力差，在各種病毒不斷的攻擊下，呈現(xiàn)出較低的防御力，因此大多數(shù)豬場采取的防控措施都是提高豬只抵抗力。

目前的商業(yè)疫苗無法提供針對PRV 感染的完全保護，因此，抗病毒藥物可以作為控制和預(yù)防PRV的替代方法。研究了解到美克利嗪在分子機制上對PRV有潛在的抑制作用。在病毒感染之前、同時或之后添加美克利嗪對PRV表現(xiàn)出顯著的抑制作用。美克利嗪的抑制作用發(fā)生在病毒進入和細胞間擴散期間，而不是在病毒附著到PK-15 細胞時。美克利嗪還抑制感染后期的病毒顆粒釋放。在小鼠身上測試了美克利嗪的抗病毒作用，結(jié)果表明美克利嗪降低了PRV攻擊后臨床癥狀的嚴重程度和組織中的病毒載量，并延遲了死亡。以上結(jié)果表明美克利嗪對PRV有抑制作用。該研究結(jié)果將有助于開發(fā)針對PRV感染的潛在治療藥物。