楊 延，毛 曌，李干武，江豐偉

（中國農業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所，黑龍江 哈爾濱 150069）

細菌非編碼小RNA（Small non-coding RNAs，sRNAs）是一類長度介于40 nt～500 nt 不編碼蛋白質的RNA 分子，其半衰期短，常作為基因表達的調節(jié)物。sRNAs 多由一段多變的靶標結合序列、保守序列和不依賴于Rho 因子的轉錄終止序列等3 部分組成[1]，其形成的二級結構多存在莖環(huán)結構，該結構顯著提高了sRNAs 的穩(wěn)定性[2]。sRNAs 與靶基因的配對方式多樣，根據配對方式的不同，可以將細菌sRNAs 分為順式編碼的sRNAs（Cis-encoded sRNAs）和反式編碼的sRNAs（Trans-encoded sRNAs）。順式編碼的sRNAs 存在于質粒、染色體、轉座子等多種位置，由調控靶基因的反義鏈編碼而來，能與靶基因的mRNA 完全互補配對。反式編碼的sRNAs 是由與編碼靶標mRNA 的基因完全不同的基因組位置轉錄而來，這些sRNAs 與靶標mRNAs 的互補性較小且多依賴Hfq、ProQ、CsrA 等RNA 伴侶蛋白來維持其結構穩(wěn)定性和功能的發(fā)揮[3]。作為細菌眾多調控網絡中的重要分支，sRNAs 通過直接或間接的作用方式在轉錄后水平調控靶基因的表達，進而對外界環(huán)境刺激做出迅速的反應。由于sRNAs 在調控基因表達方面存在耗能低、反應快等優(yōu)勢，因此針對sRNAs 及其生物學功能的研究一直是近年來的研究重點。

1984年，Mizuno等首次發(fā)現大腸桿菌（Escherichia coli，E. coli）中存在一個174 nt 的sRNAmicF，可以在環(huán)境脅迫條件下通過RNA/RNA 堿基配對的方式抑制外膜孔蛋白OmpF 的翻譯[4]。但是，大腸桿菌sRNAs 的研究受制于傳統(tǒng)的序列分析及實驗技術因而進展緩慢，在近30 年的時間里僅發(fā)現了4 種sRNAs[5]。21 世紀以后，隨著對sRNAs 結構及靶標序列特征的深入研究，研究者開發(fā)了許多高精度識別sRNAs 的生物信息學分析程序，比如SIPHT 和NAPP等[6]。2001 年Liron 等首次在大腸桿菌全基因組水平篩選并驗證了14 個新型sRNAs[7]，生物學技術的發(fā)展推動了sRNAs的不斷發(fā)現。這些生物信息學算法及后續(xù)的熒光定量PCR（RT-qPCR）和Northern blot 等能夠準確反映生物體內sRNAs 的實際表達情況，使得sRNAs的發(fā)現迅速加快。截止目前，在sRNAmap數據庫已記載了數百種sRNAs，其中以大腸桿菌和沙門氏菌中發(fā)現的最多。因此，發(fā)現并驗證sRNAs 的存在已經不能阻礙sRNAs 的研究，有關sRNAs 的研究更傾向于對sRNAs 生物學功能的探究、靶基因的鑒定、sRNAs調控靶基因的分子作用機制以及sRNAs 的應用前景等方面。

近年來隨著多組學技術的迅速發(fā)展，sRNAs 在調控致病性大腸桿菌毒力基因表達中發(fā)揮的重要作用也得到了探究，同時也發(fā)現了許多新的作用機制。本文主要對致病性大腸桿菌sRNAs 的生物學功能、sRNAs 靶基因的篩選、sRNAs 對靶基因調控的分子作用機制等方面進行系統(tǒng)的闡述，旨在明確sRNAs在大腸桿菌致病過程中發(fā)揮的作用，為研究致病性大腸桿菌sRNAs 在調控毒力基因表達方面提供新視野，為防控該類疫病提供理論基礎。

1 靶基因確定

隨著生物學技術的發(fā)展，研究者在全基因組水平高精度預測并證實了數百種sRNAs。但有關sRNAs 靶基因的研究仍相對較少，遠遠跟不上sRNAs的發(fā)現速度，因此極大地限制了sRNAs作用機制的研究。究其原因，一方面是因為sRNAs 與mRNAs 發(fā)生有限的堿基互補配對且不存在雜交熱點區(qū)域；另一方面是因為在不同環(huán)境刺激下，同一種sRNA 往往靶向不同的mRNAs，增加了靶基因尋找的難度。為了能夠更好的從分子水平解析sRNAs的作用機制，靶基因的尋找是實現這一目標的關鍵。目前對于靶基因的尋找方法，主要歸結為以下4 類：

1.1 生物信息學方法預測靶基因sRNAs 靶基因的篩選可以通過生物信息學的方法進行預測，常用的生物信息學軟件包括TargetRNA 2[8]和CopraRNA[9]等。TargetRNA 2 可在線預測細菌sRNAs 調控的mRNAs 靶標及其結合位點。該預測軟件根據細菌sRNAs 的保守性、sRNAs 的二級結構、候選靶基因的二級結構以及sRNAs 與每個候選靶標之間的雜交能量，對可能的調控靶標進行篩選，進而快速、準確地識別sRNAs 的作用靶標[10]。但由于其數據庫內參考菌株較少，對于非參考菌株sRNAs 靶基因的篩選存在不確定性。CopraRNA 是一種將系統(tǒng)發(fā)育信息整合到基因組水平上進而預測sRNAs 靶標的比較預測算法。該算法根據不同生物體中同源靶標的保守性，通過功能富集分析和網絡分析后重建調控網絡，進而精準識別sRNAs 的靶基因。分析表明，CopraRNA 可以極大改善靶基因的生物信息學預測水平，與Target-RNA 2 相比假陽性率顯著降低，且該方法適用于非參考細菌sRNAs 靶基因的識別[11]。

盡管這些生物信息學預測的方法可以有效地篩選候選靶標，極大地降低尋找靶標的盲目性。但是由于這些預測方法多是基于堿基配對的基本原則，針對mRNA 中的堿基位點進行預測，忽視了sRNAs可以通過與蛋白直接互作的方式調控靶基因。因此，該方法在預測sRNAs 的靶標方面具有一定的局限性。另一方面，生物信息學方法預測的結合靶標是否真實可靠，經軟件預測的互作又是否在細菌體內真實發(fā)生，這些情況均需要在生物體內進一步驗證。為此，研究者開發(fā)了一系列實驗技術用以篩選sRNAs 的靶標。

1.2 通過Hfq 蛋白篩選sRNAs 調控的靶基因大腸桿菌中約40%的已知sRNAs 需要通過分子伴侶蛋白Hfq 的橋梁作用與靶基因相互作用。Hfq 通過與細菌sRNAs 的富含AU 的單鏈區(qū)緊密結合，對sRNAs 產生很強的保護作用，顯著促進了sRNAs 的穩(wěn)定性，同時Hfq 還能與sRNA 的靶標mRNA 結合，促進sRNA與其靶標mRNA 的相互作用[12]。因此，根據免疫共沉淀（Co-IP）的原理，通過在hfq基因C-端添加FLAG 標簽的方式構建3×FLAG-hfq標簽菌株，FLAG標簽能與吸附在親和介質上的FLAG 抗體相互作用，從而將與Hfq 特異性互作的RNA 沉淀下來，再通過轉錄組測序的技術對洗脫并純化的mRNA/sRNA 測序，完成對分子伴侶Hfq 蛋白參與下的sRNAs 靶向位點的篩選[13]。但是，由于Co-IP 本身存在非特異性結合的缺點，常導致后期的篩選困難；而且由于這類依賴Hfq 輔助的sRNAs 通常利用反式編碼的方式與靶基因形成不完全互補的堿基配對，忽視了那些與sRNA 形成順式編碼互作的靶基因，因此該方法在進行sRNAs 靶標篩選時存在一定的局限性。

1.3 轉錄組測序篩選靶基因轉錄組測序篩選靶基因，是通過比較野生株、sRNAs 缺失株以及sRNAs過表達菌株中差異表達的基因進而篩選靶基因的方法。該方法將目標sRNAs 克隆在異源質粒PBAD的啟動子之后，通過阿拉伯糖對sRNAs 進行短時間（10 min～15 min）誘導，誘導生成的sRNAs 能夠直接靶向mRNAs，進而通過轉錄組測序技術比較sRNAs過表達菌株和野生株之間差異表達的基因。該方法能夠避免長時間誘導sRNAs 所導致的間接調控效應[14]，同時可以結合生物信息學預測的方法，顯著縮小候選靶標的篩選范圍。

通過這種方式，Choi 等將sRNAsdsR克隆至質粒pHM4T 中構建了重組質粒psdsR，在利用阿拉伯糖誘導sRNAsdsR短時間過表達后，通過轉錄組測序技術篩選出sRNAsdsR過表達菌株與野生株中存在2 倍以上表達差異的209 種mRNAs。最后，結合CopraRNA軟件及構建人工sRNAs 的方法，篩選并驗證了sRNAsdsR在大腸桿菌MG1655 生長穩(wěn)定期調控的靶基因—yhcB[12]。

1.4 蛋白質組學技術篩選與sRNAs 直接相互作用的靶基因蛋白質組學技術一般用于分析sRNAs 在整體層面上調節(jié)轉錄后基因表達水平的變化，該方法有助于識別出翻譯水平上受sRNAs 調控的靶分子，以及在轉錄組分析過程中被忽視的靶分子。該方法通過iTRAQ 和LC-MS 技術尋找那些在sRNAs 缺失株和野生株中顯著差異表達的蛋白質，進而根據差異表達蛋白的特性篩選出sRNAs 的靶向位點。在大腸桿菌HMS174 sRNAS-20的研究中，研究者利用蛋白質組學技術，通過比較野生株和誘導sRNAS-20表達菌株在對數生長期差異表達的蛋白質，發(fā)現了存在明顯差異表達的蛋白TrpB和GlyRS，這兩種蛋白質分別調控氨基酸合成和甘氨酰-tRNA 的合成。在此基礎上研究者通過體外翻譯實驗驗證了sRNAS-20對trpB、glyRS基因表達具有直接調控的作用，從而證實了S-20通過對這些靶基因的調控進而介導對大腸桿菌的生長抑制[15]。

此外，核糖體圖譜（Ribo-seq）[16]、差異性RNAseq（dRNA-seq）[17]、通過連接和測序進行sRNA 靶標識別（GRIL-Seq）[18]等技術也先后應用于sRNAs 靶基因的預測，這些方法顯著地提高了sRNA 靶基因的尋找速度，具有廣泛的應用前景。

2 作用機制

原核生物由于自身結構的特異性，其基因的轉錄和翻譯是偶聯在一起的。因此前期的研究認為在原核生物中，轉錄水平上的調控相對于轉錄后水平的調控更加高效，是原核生物基因表達的主導調控方式。但隨著對基因表達調控方面研究的深入，發(fā)現原核生物也存在許多與真核生物類似的microRNA調控、蛋白質調控等轉錄后水平的調控現象。這些調控方式通過解除轉錄和翻譯的偶聯來微調基因表達，在基因表達調控中同樣發(fā)揮著不可替代的作用，也因此成為近年來的研究熱點。相對于蛋白質介導的翻譯水平的調控，sRNAs 介導的轉錄后調控具有生成速度快、耗能低、易降解等特點，在細菌應對外界環(huán)境壓力時表現出明顯的優(yōu)勢，因此引起研究者的廣泛關注。有研究表明，sRNAs 不僅可以通過與其靶標之間的相互作用直接促進或抑制基因的表達，還可以作為誘餌與RNA 結合或與蛋白結合，間接調控基因的表達[19]。目前，原核生物sRNAs的作用機制可按照其調控靶基因的方式分為直接調控、間接調控以及構建調控網絡進行調控等。

2.1 直接調控

2.1.1 sRNAs 與mRNAs 通過堿基互補形式發(fā)揮直接調控作用 隨著生物信息學預測軟件的發(fā)展更新，使得高精度識別sRNAs 的靶標mRNAs 并尋找mRNA中的堿基互補位點得以實現。細菌sRNAs 與mRNAs通過互補配對的方式調控靶基因的表達已成為現階段研究最為廣泛的sRNAs 介導的調控機制。sRNAs與mRNAs 的堿基互補區(qū)域也從單一的核糖體結合位點（Ribosome binding site，RBS）擴展到5'非翻譯區(qū)（Untranslated region，UTR）、3'UTR 等一至多個區(qū)域。在大腸桿菌MG1655 中，順式編碼的sRNAryeA的堿基序列能夠與sdsR-pphA雙順反子5'UTR 完全堿基互補，抑制sRNAsdsR和PphA 蛋白的表達，影響磷酸酶的產生[20]。另外，反式編碼的sRNAgadY通過與mRNAgadX的3'UTR 進行堿基互補配對，進而抑制RNase 對gadX基因的降解，促進GadX 的表達，使得大腸桿菌可以抵御外界的酸性環(huán)境[21]。

2.1.2 sRNAs 與蛋白質相互作用 sRNAs 除了通過與靶基因mRNA 直接進行堿基互補配對發(fā)揮作用以外，還可以通過直接結合靶蛋白發(fā)揮作用。相對于sRNAs 與mRNAs 的互作方式，sRNAs 與蛋白質的直接互作由于缺乏相應的生物信息學預測方法，導致有關sRNAs 與蛋白直接互作的研究相對較少且進展緩慢，但已有的研究表明這種調控方式在細菌適應環(huán)境刺激方面發(fā)揮著重要的作用。例如，在大腸桿菌中，CsrA 作為一種具有全局性調控作用的RNA 結合蛋白，可以結合多種靶mRNAs 的5'UTR GGA 基序，進而影響靶mRNAs 的穩(wěn)定和（或）翻譯。而sRNAcsrB能夠在細菌生長對數期或營養(yǎng)缺陷的情況下被誘導表達，直接與CsrA 蛋白的多個亞基結合，從而遮蓋了CsrA 的活性位點，導致CsrA 活性降低進而影響細菌的核心碳通量[22]、生物被膜（Bacterial biofilms，BF）[23]、運動性[24]等多種生物表型。

2.2 間接調控研究發(fā)現，sRNAs 除了通過與靶位點直接結合發(fā)揮生物學作用外，還可以利用sRNAs間的相互作用，消除阻遏物sRNAs，進而激活其靶mRNAs 的翻譯，間接調控基因表達。這類sRNAs，通過與具有潛在沉默子功能的特定sRNAs 堿基互補配對，阻礙特定sRNAs 發(fā)揮沉默基因的功能，減輕阻遏物sRNAs 對靶mRNAs 的抑制作用進而促進蛋白質合成。例如，大腸桿菌中編碼谷氨酸/天冬氨酸ABC 轉運蛋白的gltIJKL 操縱子，能夠在gltI-gltJ的順反子間隔產生一個不依賴Rho 的RNA，該RNA 在RNase E 的參與下產生一個長160 nt 的sRNAsroC[25]。sRNAsroC可以通過堿基互補配對的方式與抑制gltIJKL 操縱子活性的sRNAgcvB相互作用，進而解除了受sRNAgcvB抑制的整簇基因的表達[26]。Choi 等人2018 年在大腸桿菌首次發(fā)現一種新型的毒素-抗毒素（T/A）系統(tǒng)，其毒素SdsR 和抗毒素RyeA 均為sRNAs，且由同一基因非編碼間區(qū)的DNA不同鏈編碼而來。毒素SdsR可抑制編碼內膜蛋白的基因—yhcB的表達，引起細胞絲化進而導致細菌死亡，抗毒素RyeA 可以通過與sRNA SdsR 形成完全堿基互補配對的sRNAsRNA 二聚體結構進而抑制sRNA SdsR 殺菌功能的發(fā)揮，從而保證大腸桿菌的正常生存[20]。

2.3 調控網絡隨著研究的深入，研究者發(fā)現，細菌的適應性調控不僅可以通過單個sRNA 直接影響單個或多個基因的表達，而且還存在多個sRNAs 共同作用調控細菌適應性的復雜調控網絡系統(tǒng)。其中研究較為清楚的有兩種：（1）sRNAs 分級調控系統(tǒng)，即第一個sRNA 結合并充分重排其靶標，從而為第二個sRNA 提供結合位點。這種調控級聯中，兩個或多個不同sRNAs 與它們的靶標之間發(fā)生順序相互作用從而調控基因表達的方式稱為分級調控[27]。例如，在大腸桿菌中sRNAglmY和sRNAglmZ組合形成調節(jié)級聯，依次調控mRNAglmS的表達，進而促進編碼氨基糖代謝中的一種必需酶—氨基葡萄糖-6-磷酸合成酶GlmS 的合成[28]。（2）多種sRNAs 分別調控同一基因表達。在大腸桿菌中，sRNAomrA、oxyS和arcZ均可以抑制編碼大腸桿菌鞭毛合成的fhlDC操縱子的表達且不存在功能冗余[29]。

3 生物學功能

sRNAs 作為細菌響應外界環(huán)境變化的一種適應性調控機制，對細菌的生長、增殖具有重要的調節(jié)作用。在致病性大腸桿菌中，它們的主要功能表現在調控毒力基因的表達、參與BF 形成、參與環(huán)境應答調控等多個方面。

3.1 調控毒力基因的表達致病性大腸桿菌在侵入機體后，為應對宿主的殺傷機制，會產生sRNAs 以迅速調控毒力基因的表達，促進細菌的粘附和侵襲，進而增強細菌對宿主的適應能力。近年來，有關腸道外致病性大腸桿菌（Extraintestinal pathogenicE. coli，ExPEC）sRNA 的報道逐漸增多，sRNA 在調控大腸桿菌毒力基因表達方面的作用也越發(fā)明顯。在腸出血性大腸桿菌（EnterohemorrhagicE. coli，EHEC）O157:H7 菌株中，腸細胞抹除位點（Locus of enterocyte effacement，LEE）致病基因島和志賀氏毒素作為研究最為深入的毒力因子，其表達情況受到多水平的調控，sRNAs 在其中也起著不可或缺的作用。例如，sRNAdicF可以感知宿主結腸內的低氧環(huán)境進而通過結合于mRNApchA的核心編碼區(qū)（Coding sequence，CDS）以促進mRNApchA的表達，進而促進LEE 致病基因島的表達，導致腸上皮細胞發(fā)生明顯的脫落病變，引起血性腹瀉和溶血性尿毒癥綜合征的暴發(fā)[30]。此外，Wang 等發(fā)現sRNAcsrB/C也可以通過調控csrA基因的轉錄，從而促進LEE 致病島上ler（LEE 基因的主要調控子）、escT（LEE1 編碼基因）、escC（LEE2 編碼基因）等基因的表達[31]。Brandon等發(fā)現，編碼志賀氏毒素的stx1A基因上游存在一個長為74 nt 的sRNA—stxS，該sRNA 可以在Hfq 蛋白的參與下，直接結合于志賀氏毒素基因stx1B的核糖體結合位點進而抑制志賀氏毒素在細菌溶源期的表達[32]。

近期的研究發(fā)現sRNAs 在調控尿路致病性大腸桿菌（UropathogenicE. coli，UPEC）致病過程中也發(fā)揮著重要作用。Porcheron 等在2014 年首次發(fā)現UPEC CFT073 菌株中的sRNAryhB，對于UPEC 在膀胱中的持久性定植起到關鍵作用。在小鼠感染模型中，sRNAryhB通過調節(jié)產氣菌素相關mRNAiucD的表達，進而調控鐵載體總量的表達，最終使得UPEC在宿主泌尿道內定植[33]。Khandige 等在研究中發(fā)現，UTI89 在侵染膀胱上皮細胞PD07i 后，促使sRNApapR在菌體內富集，該sRNA 在Hfq 的參與下與靶基因papI進行堿基互補配對進而調控P 菌毛的表達，從而促進UPEC 在膀胱上皮的黏附和侵襲[34]。

新生兒腦膜炎大腸桿菌（Neonatal meningitisE.coli，NMEC）作為一種嚴重威脅人類健康的ExPEC，可造成新生兒出現腦膜炎癥狀，具有極高的致死率，其毒力基因的表達也受到sRNA 的調控。孫浩等在研究中發(fā)現NMEC RS218 在yfdP-orf基因間區(qū)存在一個新型的sRNA—sRNA17。該sRNA 在氧氣感應調節(jié)因子ArcAB 的調控下，通過感知血液內的微氧條件進而下調自身的表達，從而促進glnP基因的表達，導致NMEC 在血液中的存活能力增強并有利于其穿越血腦屏障[35]。

3.2 參與BF 的形成細菌BF 是由細菌分泌到細胞外的多糖、蛋白質、核酸、脂質和生物表面活性劑等成分聚合形成的膜狀結構。該結構可以直接影響細菌的一系列生理行為，包括生物發(fā)光、毒力因子的表達、對抗生素的抗性以及浮游和固著生活方式之間的轉變[36]。研究表明，BF 的形成受到多個水平的調控，sRNA 所介導的轉錄后水平調控在其中也發(fā)揮著不可替代的作用。在大腸桿菌中，許多sRNAs（omrA、omrB、mcaS、rprA、gcvB、rydC和rybB）都可以將信號傳送到遺傳網絡中形成復雜的調控網絡，以非冗余的形式調控csgD基因的表達，csgD基因是編碼大腸桿菌胞外纖維狀蛋白的重要組成部分，可以直接影響B(tài)F 的形成。其中sRNAsomrA、omrB、rydC、rybB通過抑制核糖體的結合進而抑制csgD的表達，而sRNAmcaS通過招募核糖核酸內切酶裂解csgD基因5' UTR 的A/U 富集區(qū)進而抑制其表達[37]。這些sRNAs 通過調控大腸桿菌BF 的形成，進而增強其抵御外界不良環(huán)境的能力并提高其對抗生素的耐受能力，更有利于大腸桿菌在動物機體的定植并發(fā)揮致病作用。

3.3 參與環(huán)境應答調控為了實現在動物體內的定植，腸道內致病性大腸桿菌（Intestinal pathogenicE. coli，IPEC）必須適應機體內不斷變化的環(huán)境壓力，比如胃腸道內的低氧、低pH、低離子環(huán)境等，sRNAs 在其中發(fā)揮著重要的作用。Lay 等在2012 年證實sRNAsarcZ、omrA、omrB、oxyS、sdsR和gadY等可以抑制大腸桿菌的移動，而sRNAsmcaS、micA可以促進大腸桿菌的移動，這些sRNAs 可以協同調控大腸桿菌的運動性使菌體向適宜的生存條件移動[29]。Bak 等發(fā)現，大腸桿菌MG1655 在酸性環(huán)境下（pH5）可以誘導sRNAdsrA和rprA的表達，進而上調轉錄活化因子RpoS 的表達，導致Ⅱ型酸耐受系統(tǒng)（Acid resistance 2，AR2）的活化，從而增強大腸桿菌對胃酸等低pH 環(huán)境的適應能力[38]。在大腸桿菌K12株的Csr 信號通路中，sRNAcsrC和其同源類似物sRNAcsrB可以直接與CsrA 蛋白相互作用并抑制其功能的發(fā)揮，一方面可以促進糖原的合成和分解代謝[39]、糖異生[40]和BF 形成[23]；另一方面可以抑制糖酵解運動[41]、鞭毛合成[24]和乙酸酯代謝[40]。通過sRNA 調控生物合成代謝的過程，使細菌能夠迅速響應外界環(huán)境的變化，進而完成其生長和增殖等生命過程。

4 小結與展望

sRNAs 介導的轉錄后調控具有合成快、半衰期短、功能多樣等特點，是細菌響應外界環(huán)境變化進而做出迅速應答的適應性調控機制，一直是人們研究的熱點。近年來，隨著sRNAs 篩選及其靶點鑒定相關技術的不斷發(fā)展與更新，使得越來越多的sRNAs 及其作用機制被揭示。同時，sRNAs 的實際應用價值也得到了逐步開發(fā)，最新的研究顯示，人工合成的sRNAs 已經被用以改造大腸桿菌以提高免疫球蛋白IgG 的產量，該產物在治療自身免疫性疾病和腫瘤相關疾病方面發(fā)揮重要的作用[42]。同時，通過向工程菌導入質粒介導的人工合成的sRNAs，極大地提高了苯酚、1, 5-戊二胺、腺苷甲硫胺酸、正丁醇、N-乙酰氨基葡糖（GlcNAc）等工業(yè)用品的產量，并且部分改造的工程菌已經成功應用于工業(yè)生產中，產生了巨大的經濟價值。但有關sRNAs 對病原菌毒力基因表達調控方面的研究還相對較少，在這方面的應用價值仍待進一步發(fā)掘。因此，從sRNAs角度揭示病原菌的致病機制，解析sRNAs 在毒力基因表達中所發(fā)揮的作用將是下一步的研究重心，這將為疫病的防控提供重要的理論基礎，為開發(fā)新的藥物靶點提供新思路。