劉英杰，齊六衛(wèi)，董彥龍，羿 巖

（沈陽(yáng)偉嘉生物技術(shù)有限公司，遼寧 沈陽(yáng) 110027）

豬藍(lán)耳病，又被稱為豬繁殖與呼吸綜合征，因其具有極高的傳染性，我國(guó)將其列為一類傳染病。2021年中國(guó)豬病流行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)顯示：我國(guó)豬場(chǎng)有87.81%處于亞健康狀態(tài)，商品豬場(chǎng)豬藍(lán)耳病陽(yáng)性率高達(dá)90%以上，發(fā)病率高達(dá)30%～40%。豬場(chǎng)一旦感染豬藍(lán)耳病，母豬流產(chǎn)率可高達(dá)30%以上，仔豬死亡率高達(dá)50%以上。豬藍(lán)耳病以其高傳播性和高死亡率的特點(diǎn)致使其難以防控，從而給豬場(chǎng)帶來(lái)了不可估量的損失。日常防控措施包括完善的生物安全管理措施、疫苗接種預(yù)防、定期的實(shí)驗(yàn)室抗體水平檢測(cè)和藥物防治等。藥物治療基于兩個(gè)核心點(diǎn)：提升免疫力和控制繼發(fā)感染，常用黃芪多糖和杜仲提取物等提升免疫力和抗生素聯(lián)合應(yīng)用防治豬藍(lán)耳病。經(jīng)臨床驗(yàn)證，聯(lián)合應(yīng)用已在豬場(chǎng)取得了不錯(cuò)的效果。本文以吉林某規(guī)?；i場(chǎng)藥物防治前后的豬藍(lán)耳病抗原抗體分析報(bào)告為例，闡述藥物防治豬藍(lán)耳病和定期實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)抗體的重要性，旨在幫助規(guī)?；i場(chǎng)能更好地防控豬藍(lán)耳病，在養(yǎng)殖過(guò)程中獲得更好的收益。

1 材料與方法

1.1 豬場(chǎng)背景

吉林省遼源市楊木林鎮(zhèn)某小規(guī)模豬場(chǎng)，母豬存欄30頭，保育豬存欄50頭，采取自繁自養(yǎng)，場(chǎng)內(nèi)一直沒(méi)有進(jìn)行過(guò)豬藍(lán)耳病疫苗免疫。母豬大群健康，個(gè)別食欲差；40日齡保育豬有呼吸道癥狀，發(fā)病率6%～10%。隨機(jī)挑選癥狀明顯的保育豬10頭，進(jìn)行樣本的采集及藥物的治療。

1.2 血樣采集

治療方式采取杜仲提取物連續(xù)飼喂21 d，隨機(jī)選取整齊度差、精神狀態(tài)差的保育豬10頭進(jìn)行抗原抗體檢測(cè)分析。具體方法如下：分別于給藥前、給藥后，進(jìn)行豬前腔靜脈采血3～5 mL，按3 000 r/ min離心10 min，分離血清。

1.3 檢測(cè)方法

通過(guò)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)豬繁殖與呼吸綜合征病毒核酸（豬藍(lán)耳病毒抗原），采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒方法檢測(cè)抗體（豬藍(lán)耳病毒抗體），操作方法和結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)均參照試劑盒說(shuō)明書(shū)。

1.4 判定方法

豬藍(lán)耳病抗體的判定：通過(guò)豬藍(lán)耳病抗體檢測(cè)到樣本和對(duì)照的吸光度值換算出每個(gè)樣本的樣本 / 陽(yáng)性對(duì)照比率（S/ P），根據(jù) S/ P值進(jìn)行判定抗體。當(dāng) S/ P 值大于等于 0.4判定為陽(yáng)性；當(dāng) S/ P 值小于 0.4 判定為陰性，體內(nèi)無(wú)抗體的存在。

豬藍(lán)耳病抗原Ct值的判定：通過(guò)試劑盒Ct值及曲線形狀對(duì)標(biāo)本結(jié)果進(jìn)行判定。當(dāng)標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果Ct值在35及以下或有明顯指數(shù)增長(zhǎng)期時(shí)判定為陽(yáng)性；當(dāng)標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果Ct值在35～38范圍內(nèi)。此時(shí)應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)，如重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果Ct值仍在35～38范圍內(nèi)，有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)期，則判定為陽(yáng)性，否則為陰性；當(dāng)樣本檢測(cè)結(jié)果Ct值大于38或無(wú)Ct值判定為陰性。

2 檢測(cè)結(jié)果與統(tǒng)計(jì)分析

2.1 給藥前抗原抗體檢測(cè)結(jié)果分析

在給杜仲提取物治療豬藍(lán)耳病之前，抗原檢測(cè)結(jié)果顯示：10份血清經(jīng)合樣之后形成3份混合樣本，3份均為陰性；抗體分析結(jié)果顯示：所檢測(cè)的10份血清樣本，血清抗體陽(yáng)性率為70%。通過(guò)檢測(cè)結(jié)果可知，因?yàn)樨i群一直沒(méi)有進(jìn)行過(guò)疫苗免疫，抗原陰性，抗體陽(yáng)性，說(shuō)明豬群以前感染過(guò)豬藍(lán)耳病毒后出現(xiàn)了自愈的情況。因保育豬出現(xiàn)了腹式呼吸的癥狀，推測(cè)目前處于排毒狀態(tài)，但豬藍(lán)耳病毒數(shù)量比較少，且自身出現(xiàn)了一定量的抗體來(lái)抵御病毒。具體結(jié)果如表1—表3。

2.2 連續(xù)飼喂21 d杜仲提取物后抗原抗體檢測(cè)結(jié)果

連續(xù)飼喂21 d杜仲提取物后抗原抗體檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表4—表6。

表4 檢測(cè)結(jié)果

表6 給藥后豬繁殖與呼吸障礙綜合征抗體酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)情況

2.3 連續(xù)飼喂21 d杜仲提取物后抗原抗體檢測(cè)統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果

連續(xù)飼喂21 d杜仲提取物后抗原抗體檢測(cè)統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果見(jiàn)表7。

表7 給藥前后抗原抗體水平整體變化

2.4 抗體值spss分析結(jié)果

對(duì)給藥前及給藥后豬繁殖與呼吸綜合征病毒（豬藍(lán)耳病病毒）抗體的S/P值采用SPSS軟件進(jìn)行樣本配對(duì)t檢驗(yàn)，分析結(jié)果如表

8—表10所示。

表1 檢測(cè)結(jié)果

表10 成對(duì)樣本檢驗(yàn)

3 討論與分析

從使用杜仲提取物前后抗原抗體變化情況可以看出使用前后抗體差異明顯，抗體全部轉(zhuǎn)陰，豬藍(lán)耳病得到凈化，由以前的陽(yáng)性穩(wěn)定場(chǎng)轉(zhuǎn)為雙陰場(chǎng)。具體分析如下：1）通過(guò)21 d杜仲提取物的使用將豬藍(lán)耳病抗體的陽(yáng)性率從70%降低到0，離散度從36.84降低到0，豬場(chǎng)由豬藍(lán)耳病陽(yáng)性場(chǎng)轉(zhuǎn)為豬藍(lán)耳病雙陰場(chǎng)。因此可以看出使用杜仲提取物能促進(jìn)豬藍(lán)耳病毒的清除及大群凈化，有利于豬藍(lán)耳病毒的整體防控。2）SPSS軟件配對(duì)t檢驗(yàn)分析結(jié)果證實(shí)飼喂杜仲提取物前后抗體差異極其顯著（P＜0.01）。

4 小結(jié)

目前在集約化養(yǎng)殖的大背景下，中小散戶在豬藍(lán)耳病的防控上普遍存在意識(shí)薄弱的現(xiàn)象，通常不會(huì)使用豬藍(lán)耳病疫苗進(jìn)行定期預(yù)防和抗原抗體監(jiān)測(cè)。誠(chéng)然豬藍(lán)耳病疫苗在豬藍(lán)耳病的防治上存在一定的劣勢(shì)，可能出現(xiàn)弱毒疫苗的排毒重組現(xiàn)象及滅活毒疫苗免疫效果不理想，但豬藍(lán)耳病疫苗一定程度上能減少豬藍(lán)耳病暴發(fā)的重癥。若不使用豬藍(lán)耳病疫苗進(jìn)行防控，一旦出現(xiàn)豬藍(lán)耳病的暴發(fā)，會(huì)造成豬群中重癥感染的增多進(jìn)而造成更大的損失。因此，小規(guī)模養(yǎng)殖戶若不能做到疫苗的定期防控和抗原抗體監(jiān)測(cè)，則需要做到加強(qiáng)日常飼養(yǎng)管理工作和做好豬場(chǎng)整體環(huán)境衛(wèi)生工作。除了以上兩點(diǎn)，更要注重豬群的整體免疫力的提升。平時(shí)可使用維生素C和黃芪多糖及杜仲提取物進(jìn)行定期的飼喂。一旦出現(xiàn)豬藍(lán)耳病感染，可使用頭孢菌素、替米考星等控制繼發(fā)感染，同時(shí)使用中藥提取物板藍(lán)根、魚(yú)腥草、雙黃連、杜仲揮發(fā)油等進(jìn)行治療。

表2 給藥前豬繁殖與呼吸綜合征抗原熒光PCR定量檢測(cè)情況

表5 給藥后豬繁殖與呼吸障礙綜合征抗原熒光PCR定量檢測(cè)情況

表8 成對(duì)樣本統(tǒng)計(jì)量

表9 成對(duì)樣本相關(guān)系數(shù)