侯 鑫，龐立健，鄒吉宇，吳 桐，張 寧，姜 鑫，張 澤，王琳琳

(1.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 沈陽(yáng) 110847；2.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，遼寧 沈陽(yáng)110032)

慢性阻塞性肺疾病(Chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一種常見(jiàn)的呼吸科慢性疾病，隨著老齡化加劇，COPD發(fā)病率不斷增長(zhǎng)，本病具有較高發(fā)病率、病死率[1-2]。COPD穩(wěn)定期癥狀雖明顯緩解，但肺功能存在惡化趨勢(shì)，因此延緩肺功能惡化，改善患者生活質(zhì)量是目前治療COPD穩(wěn)定期主要目的[3-4]。西醫(yī)治療以對(duì)癥為主，糖皮質(zhì)激素治療容易導(dǎo)致高血糖、骨質(zhì)疏松等不良反應(yīng)，使其應(yīng)用受到限制[5]。磷脂酰肌醇激酶3/蛋白激酶B(Phosphatidylinositol 3/kinase and protein kinase B,PI3K/Akt)信號(hào)通路在炎癥和免疫反應(yīng)調(diào)控方面具有重要作用。臨床研究發(fā)現(xiàn)，PI3K/Akt信號(hào)通路與呼吸系統(tǒng)疾病發(fā)生、發(fā)展具有一定相關(guān)性[6-7]，但關(guān)于PI3K/Akt信號(hào)通路與COPD的研究較少。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為COPD屬“肺脹”“喘證”“咳嗽”等范疇，肺位最高，外邪來(lái)犯，必先受之，常因外邪損傷肺氣，致使宣降失司，水道失調(diào)而痰飲泛濫；脾為生化之源，肺為生氣之主，肺脾既損，形成氣虛證，應(yīng)以補(bǔ)肺健脾為治療法則。隨著近年來(lái)中醫(yī)藥深入研究，本課題組也進(jìn)行了相關(guān)研究，觀察了補(bǔ)肺健脾方聯(lián)合茚達(dá)特羅格隆溴銨對(duì)老年COPD穩(wěn)定期患者療效及對(duì)PI3K/Akt信號(hào)通路和炎癥因子的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2020年1月至2022年1月我院收治的老年COPD穩(wěn)定期患者122例，采用隨機(jī)表法分為兩組，各61例。對(duì)照組：男37例，女24例；年齡61～75歲，平均(68.92±4.51)歲；體重42～84 kg，平均(61.22±8.28)kg；病程3～18年，平均(10.24±2.18)年。治療組：男39例，女22例；年齡60～75歲，平均(68.56±3.67)歲；體重41～87 kg，平均(61.78±8.54)kg；病程3～17年，平均(10.35±2.97)年。兩組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。西醫(yī)診斷：參照《慢性阻塞性肺疾病基層診療指南》[8]標(biāo)準(zhǔn)。肺脾氣虛證：咳嗽，或氣短，或喘息，動(dòng)則加重，惡風(fēng)，易受涼感冒，神疲乏力，食少或納呆，胃脘脹滿或腹脹，舌體胖大，苔白膩或薄白，脈細(xì)弱或沉緩或沉細(xì)[9]。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：符合COPD診斷標(biāo)準(zhǔn)，患者病情處于穩(wěn)定期；患者年齡≥60歲；肺功能分級(jí)GOLD為1～2級(jí)；簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：COPD急性加重期；近期應(yīng)用糖皮質(zhì)激素藥物者；伴其他呼吸系統(tǒng)疾病者；嚴(yán)重精神疾病者；肝臟嚴(yán)重異常者；對(duì)本研究用藥過(guò)敏者。

1.2 治療方法

1.2.1 對(duì)照組：所有患者均采用抗炎，控制感染，祛痰，解痙平喘等常規(guī)治療。每次吸入1粒茚達(dá)特羅格隆溴銨(規(guī)格110 μg/粒，注冊(cè)證號(hào)H20170391)，1 次/d。

1.2.2 觀察組：在對(duì)照組基礎(chǔ)上給予補(bǔ)肺健脾方。組成包括：黨參20 g，白術(shù)、白芍、茯苓各15 g，陳皮、法半夏、紅景天、百合各10 g，甘草6 g。辨證加減：兼陰虛者，加用玄參、麥冬各15 g；若兼血瘀者，加用丹參、紅花、桃仁各10 g。水煎，每日1劑,180 ml/次，3次/d。兩組治療療程均為8周。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察兩組治療前后肺功能變化。觀察兩組治療前后COPD評(píng)估測(cè)試(COPD Assessment Test,CAT)問(wèn)卷評(píng)分和6 min步行距離(6-minute walking distance,6MWT)，CAT總分40分，生存質(zhì)量與CAT評(píng)分呈負(fù)相關(guān)，記錄患者6 min步行距離。觀察兩組治療前后血清PI3K、Akt水平變化，采集靜脈血4 ml，以10 cm半徑、2000 r/min，離心8 min，收集血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清PI3K、Akt水平。觀察兩組治療前后PI3K和Akt蛋白表達(dá)變化，采集治療前與治療8周肘靜脈血4 ml，以10 cm半徑、2000 r/min，離心8 min，取上清液，加入總蛋白提取液，轉(zhuǎn)入EP管中，離心8 min，轉(zhuǎn)速1000 r/min，總蛋白濃度采用Bradford法測(cè)定，稀釋濃度為5 mg/L，取蛋白液20 μl，變性后上樣，采用SAS-PAGE電泳分離，隨后轉(zhuǎn)膜，加入兔抗人PI3K(1∶500)、Akt(1∶500)一抗，過(guò)夜，再加入辣根過(guò)氧化酶標(biāo)記二抗(1∶1000)，顯色，Image-Qua NT軟件測(cè)量光密度，計(jì)算各組蛋白相對(duì)β-actin表達(dá)量。觀察兩組治療前后炎癥因子變化，采集治療前與治療8周肘靜脈血4 ml，以10 cm半徑、2000 r/min，離心8 min，收集血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-8(Interleukin-8,IL-8)、白介素-15(Interleukin-15,IL-15)水平。

1.4 療效標(biāo)準(zhǔn) 顯效：患者咳嗽、呼吸困難、咳痰、肺部濕啰音等癥狀、體征基本消失。有效：患者咳嗽、呼吸困難、咳痰、肺部濕啰音等癥狀、體征好轉(zhuǎn)。無(wú)效：未達(dá)上述標(biāo)準(zhǔn)者?？傆行?顯效率+有效率。

2 結(jié) 果

2.1 兩組患者臨床療效比較 見(jiàn)表1。兩組患者經(jīng)過(guò)8周連續(xù)治療后，觀察組總有效率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.52，P<0.05)。

表1 兩組患者臨床療效比較[例(%)]

2.2 兩組患者肺功能指標(biāo)比較 見(jiàn)表2。治療后，兩組COPD穩(wěn)定期患者第1秒用力呼氣容積(Forced expiratory volume in one second,FEV1)、呼氣流量峰值(Peak expiratory flow,PEF)和FEV1/用力肺活量(Forced vital capacity,FVC)均高于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且觀察組各項(xiàng)高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表2 兩組患者肺功能指標(biāo)比較

2.3 兩組患者CAT評(píng)分和6MWT比較 見(jiàn)表3。治療后，兩組患者CAT評(píng)分均低于治療前，且觀察組低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。治療后，兩組患者6MWT高于治療前，且觀察組高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表3 兩組患者CAT評(píng)分和6MWT比較

2.4 兩組患者血清PI3K和Akt水平比較 見(jiàn)表4。治療后，兩組患者血清PI3K、Akt水平均低于治療前，且觀察組低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表4 兩組患者血清PI3K和Akt水平比較(ng/ml)

2.5 兩組患者PI3K和Akt蛋白表達(dá)灰度值比較 見(jiàn)表5。治療后，兩組患者PI3K和Akt蛋白表達(dá)灰度值低于治療前，且觀察組低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。

表5 兩組患者PI3K和Akt蛋白表達(dá)灰度值比較

2.6 兩組患者炎癥因子比較 見(jiàn)表6。治療后，兩組血清TNF-α、IL-8、IL-15水平較治療前降低，且觀察組低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。

表6 兩組患者炎癥因子比較(pg/ml)

3 討 論

COPD病情復(fù)雜，呈進(jìn)行性加重，為呼吸系統(tǒng)疾病預(yù)防治療的重點(diǎn)[10-11]。多名學(xué)者認(rèn)為，及早診療老年COPD患者尤為關(guān)鍵[12-13]。中醫(yī)學(xué)將COPD歸屬“喘證”“肺脹”等范疇，最早記載見(jiàn)于《內(nèi)經(jīng)》。COPD穩(wěn)定期表現(xiàn)為本虛標(biāo)實(shí)，病機(jī)變化以正虛為主[14]。正虛表現(xiàn)主要為腎、脾、肺三臟的功能失調(diào)和虧虛，且以瘀血、水飲、痰濁等病理產(chǎn)物為標(biāo)，其中病理產(chǎn)物也可成為致病因素，而使本虛加重，由此可見(jiàn)本虛與標(biāo)實(shí)互為因果。中醫(yī)理論認(rèn)為肺為華蓋，經(jīng)口鼻與外界相通，外邪侵襲，首先犯肺，肺失宣降則表現(xiàn)為喘咳。肺為脾之子，病累及與脾，脾主運(yùn)化，肺主行水，相互為用，相互配合，肺脾兩虛，則會(huì)造成津液代謝輸布失常，形成痰飲、水濕等。痰飲、水濕停聚，則會(huì)使肺氣宣降受影響，肺失宣降，水道不暢，水濕困脾，形成惡性循環(huán)[15-17]，因此應(yīng)以補(bǔ)脾健脾為治療法則。補(bǔ)肺健脾方中，黨參健脾益肺；白術(shù)健脾益氣，燥濕利水；茯苓健脾，可助黨參補(bǔ)氣，又可利水滲濕；陳皮行氣化滯；法半夏燥濕化痰，合茯苓加強(qiáng)祛濕化痰之功；百合養(yǎng)陰潤(rùn)肺止咳；紅景天益氣活血；甘草補(bǔ)脾益氣，調(diào)和諸藥，祛痰止咳?？v觀全方可奏補(bǔ)肺健脾之功。現(xiàn)代藥理研究表明，補(bǔ)肺健脾方可提高機(jī)體的抗缺氧和抗應(yīng)激作用，具有免疫調(diào)節(jié)作用，達(dá)到抑制炎癥作用，增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能，擴(kuò)張支氣管及止咳平喘作用，減輕肺部炎癥。茚達(dá)特羅格隆溴銨是新型的復(fù)方支氣管擴(kuò)張藥，具有較高的內(nèi)在活性，主要通過(guò)作用于氣道平滑肌細(xì)胞上的β2-腎上腺素受體而發(fā)揮舒張支氣管平滑肌作用[18]。茚達(dá)特羅是一種長(zhǎng)效的β2受體激動(dòng)藥，具有起效迅速且作用時(shí)間長(zhǎng)的特點(diǎn)，其起效速度明顯優(yōu)于沙美特羅[19]。本研究表明，觀察組總有效率高于對(duì)照組，F(xiàn)EV1、PEF和FEV1/FVC高于對(duì)照組，CAT評(píng)分低于對(duì)照組，6MWT高于對(duì)照組，由此可見(jiàn)補(bǔ)肺健脾方聯(lián)合茚達(dá)特羅格隆溴銨治療可取得良好療效，改善患者肺功能、生活質(zhì)量、運(yùn)動(dòng)耐力。

PI3K/Akt信號(hào)通路可誘導(dǎo)炎癥介質(zhì)形成和釋放，引發(fā)氣道變應(yīng)性疾病。PI3K/Akt信號(hào)通路可調(diào)控多種免疫細(xì)胞的分化、活化，參與氣道變應(yīng)性疾病的病理生理過(guò)程。研究發(fā)現(xiàn)，PI3K參與哮喘的慢性氣道炎癥過(guò)程，并且在哮喘相關(guān)炎癥因子的產(chǎn)生及哮喘淋巴細(xì)胞活化、分化中發(fā)揮重要作用[20]。本研究表明，治療后觀察組血清PI3K和Akt水平低于對(duì)照組，PI3K和Akt蛋白表達(dá)灰度值低于對(duì)照組，由此可見(jiàn)補(bǔ)肺健脾方聯(lián)合茚達(dá)特羅格隆溴銨可下調(diào)PI3K/Akt信號(hào)通路表達(dá)。呼吸道炎癥反應(yīng)是COPD主要病理特征[21]。TNF-α主要由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞分泌，可啟動(dòng)炎癥反應(yīng)，誘導(dǎo)氣道上皮細(xì)胞、白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞，產(chǎn)生多種炎癥介質(zhì)，加劇局部炎性浸潤(rùn)，增強(qiáng)氣道高反應(yīng)性[22]。IL-8可促進(jìn)肺泡淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞趨化，加劇氣道局部炎癥反應(yīng)，增強(qiáng)氣道高反應(yīng)性。IL-15主要是白細(xì)胞分泌的一種炎癥因子，可刺激多種炎癥因子產(chǎn)生，加劇炎癥反應(yīng)。本研究表明，治療后觀察組血清TNF-α、IL-8和IL-15水平低于對(duì)照組，由此可見(jiàn)補(bǔ)肺健脾方聯(lián)合茚達(dá)特羅格隆溴銨可減輕細(xì)胞炎癥反應(yīng)。

綜上所述，補(bǔ)肺健脾方聯(lián)合茚達(dá)特羅格隆溴銨對(duì)老年COPD穩(wěn)定期患者療效良好，可改善患者肺功能、生活質(zhì)量、運(yùn)動(dòng)耐力，下調(diào)PI3K/Akt信號(hào)通路表達(dá)，減輕細(xì)胞炎癥反應(yīng)。