邵 帥，趙 晶，張 嵐，王瑞雪，張 筠, ，初 眾

（1.黑龍江東方學院食品工程學院，黑龍江哈爾濱 150066；2.中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院香料飲料研究所，海南萬寧 571533）

仙人掌果（Opuntia ficus-indica）是仙人掌屬（Opuntia）植物的果實，源自美洲大陸的一種多漿植物，廣泛分布于南非，該植物主產(chǎn)于我國熱帶地區(qū)，例如海南、云南、廣西，具有氣候耐受性。仙人掌果具有較高的營養(yǎng)價值，但是其鮮銷和保存都比較困難，所以為了最大限度利用仙人掌果，提取其生物活性物質進行產(chǎn)品化利于保存與運輸。仙人掌果中存在大量的生物活性物質如花色苷、多糖類、蛋白質等。花色苷在漿果中含量最為豐富，它是花色素與糖以糖苷鍵結合而成，屬于類黃酮類化合物，是天然水溶性物質[1]。

近年來花色苷通過調節(jié)腸道微生物從而促進人體健康已成為研究熱點[2]?；ㄉ赵跀z入后經(jīng)歷復雜的代謝，未被消化的花色苷和花色苷的分解代謝產(chǎn)物到達結腸對腸道微生物進行作用[3]。花色苷對腸道微生物的調節(jié)作用表現(xiàn)在兩方面，一是腸道菌群通過代謝活動，使其具有直接的生理活性功能（例如調節(jié)糖尿病、肥胖癥）[4]，二是改變了腸道微生物的數(shù)量與構成，對人體發(fā)揮健康促進作用[5]，對此研究者們進行大量研究。Wu等[6]研究發(fā)現(xiàn)，從桑葚中提取得到的花色苷能夠顯著抑制高脂膳食誘導引起的C578BL/6小鼠體重的增加并同時降低痩素和脂聯(lián)素分泌以及胰島素抵抗。Norberto等[7]通過對比研究發(fā)現(xiàn)，習慣性攝入藍莓花色苷會減少二型糖尿病的發(fā)作把血糖控制在安全的水平。Gowd等[8]通過建立體外消化模型模擬口腔、胃-腸道消化來研究花色苷的消化吸收的程度，結果表明花色苷與腸道細菌相互作用使其呈現(xiàn)出劑量梯度。Walujkar等[9]研究了潰瘍性結腸炎患者腸道菌群的變化，發(fā)現(xiàn)潰瘍性結腸炎患者腸道存在生態(tài)失調和專性厭氧菌失調。

迄今為止，花色苷的生物利用度和健康益處已被廣泛記載[10]，但是由于目前研究者們普便利用藍莓、藍靛果、紫馬鈴薯等研究花色苷，而利用仙人掌果少之又少，對于仙人掌果中花色苷的研究還不夠完全和深入[11]，所以為了進一步預估仙人掌果花色苷在人體中發(fā)生的潛在作用，本文以仙人掌果果實為原料，從中提取花色苷進行模擬體外消化實驗和體外發(fā)酵實驗。通過pH示差法，評價消化過程中仙人掌果花色苷的消化率，Novaseq 6000測序和氣相色譜（GC）分析腸道菌群以及短鏈脂肪酸的變化，為仙人掌果果實中花色苷作為膳食補充劑調節(jié)人體健康提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

無水乙醇、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、碳酸氫鈉、七水合硫酸鎂、六水合氯化鈣、吐溫80、硫酸、乙醚、氯化鉀、氯化鈉、六水合氯化鎂、碳酸銨、濃鹽酸、氫氧化鈉 分析純，天津市光復科技發(fā)展有限公司；蛋白胨、酵母膏、豬膽鹽 分析純，北京奧博星生物技術有限公司；氯化血紅素、維生素K1、L-半胱氨酸、α-淀粉酶（4000 U/g）、胃蛋白酶（250 U/mg）、胰蛋白酶（3000 U/mg） 分析純，上海源葉生物科技有限公司；6種水溶性脂肪酸混標 色譜純，壇墨質檢科技股份有限公司；糞便DNA試劑盒 型號D3141，廣州美基生物科技有限公司；仙人掌果 購買于海南；糞便樣品 來源于2位健康的志愿者，過去三個月內(nèi)沒有消化系統(tǒng)疾病、沒有使用任何的抗生素和益生菌（18～30歲、1位女士和1位男士），實驗前已經(jīng)和志愿者闡述利害關系，試驗均在志愿者同意下進行。

Magnetic stirrer磁力攪拌器 意大利Velp公司；Allegra 64R Compact Centrifuge離心機 貝克曼庫爾特公司；UV1800紫外可見分光光度計 上海棱光技術有限公司；RE-25AA旋轉蒸發(fā)儀 上海亞榮生化有限公司；FDU-1100真空冷凍干燥機 日本東京理化儀器有限公司；BSD-TX345搖床 上海啟閔生物技術有限公司；7890A氣相色譜 安捷倫科技有限公司；Vortex.Genie2漩渦振蕩 上海邁旗環(huán)?？萍加邢薰荆籅actron Ⅱ厭氧培養(yǎng)箱 美國Shellab公司；ABI StepOnePlus RealTime PCR System Life Technologies 美國ABI。

1.2 實驗方法

1.2.1 仙人掌果花色苷提取物的制備 準確稱取一定質量過40目篩的原料粉末，用51%的乙醇溶液（pH2）進行提取，料液比為1:25 g/mL，于55 ℃磁力攪拌提取70 min。4500 r/min，15 min離心，取上清液于50 ℃減壓濃縮得到花色苷溶液，凍干成粉末[12]。

1.2.2 體外消化模型的建立 以Minekus等[13]的方法為基礎稍做調整，制備模擬唾液（SSF）、模擬胃液（SGF）和模擬腸液（SIF）電解質儲備溶液，如表1。

表1 消化電解質液原液的配制Table 1 Configuration of digestive juice

模擬口腔消化：取10 mg/mL的仙人掌果花色苷粗提物5 mL，依次加入3.5 mL SSF電解質液、25 μL CaCl2·2H2O、0.5 mL活力值為1200 U/mL的α-淀粉酶，最后用超純水定容至10 mL。在恒溫搖床37 ℃、120 r/min、避光進行2 min。消化完成后立即轉入-80 ℃冰箱滅酶。

體外模擬胃消化：將口腔消化產(chǎn)物（10 mL）加入7.5 mL SGF電解質液、1.6 mL活力值為24000 U/mL的胃蛋白酶、5 μL CaCl2·2H2O溶液，用HCl調pH為3后，加超純水至20 mL。對照組：僅將模擬未消化中1.6 mL胃蛋白酶使用SGF電解質液等量代替。在恒溫搖床37 ℃、120 r/min、避光進行胃消化，分別在1、2、3 h，取消化產(chǎn)物于-80 ℃冰箱滅酶。

體外模擬腸消化：將胃消化產(chǎn)物（20 mL）中加入11 mL SIF電解液、5 mL活力值為1000 U/mL的胰蛋白酶、4%豬膽鹽2.5 mL、40 μL 0.3 mol/L CaCl2·2H2O溶液，用NaOH調pH為7后，加超純水至40 mL。對照組：僅將模擬腸消化中腸蛋白酶和豬膽鹽用7.5 mL SIF電解液代替。在恒溫搖床37 ℃、120 r/min避光進行腸消化，分別在1、2、3 h，取腸消化產(chǎn)物于-80 ℃冰箱滅酶[14-17]。

1.2.3 模擬體外消化過程中花色苷含量和消化率的測定 采用pH示差法對消化過程中仙人掌果花色苷含量變化的測定，取兩份2.0 mL的仙人掌果花色苷溶液，分別用0.025 mol/L，pH1.0氯化鉀緩沖液和0.4 mol/L，pH4.5醋酸鈉緩沖液定容至25 mL的容量瓶中。靜置60 min，分別在535和700 nm下測定吸光值，根據(jù)公式，計算出花色苷的含量[18]，公式如下：

式中：W為花色苷的含量，mg/g；Mw為矢車菊素-3-葡萄糖苷的摩爾質量，449.2 g/moL；A為花色苷吸光度，A=（A535pH1.0-A700pH1.0）-（A535pH4.5-A700pH4.5）；DF為稀釋倍數(shù)；V為定容的體積，mL；ε為矢車菊素-3-葡萄糖苷的摩爾消光系數(shù)，26900 L/（mol·cm）；L為比色皿的寬度（1 cm）；M為樣品質量，g。

消化率的計算公式如下：

1.2.4 仙人掌果實花色苷體外發(fā)酵實驗 基礎厭氧培養(yǎng)基配制[19]：酵母提取物（2.0 g）、蛋白胨（2.0 g）、NaHCO3（2.0 g）、膽汁鹽（0.5 g）、L-半胱氨酸（0.5 g）、NaCl（0.1 g）、K2HPO4（0.04 g）、KH2PO4（0.04 g）、氯化血紅素（0.02 g）、MgSO4·7H2O（0.01 g）、CaCl2（0.01 g）、維生素K1（10 μL）、吐溫80（2.0 mL）溶于1.0 mL蒸餾水，將基礎營養(yǎng)培養(yǎng)基的pH調節(jié)至7.0，121 ℃高壓蒸汽滅菌15 min。

磷酸鹽緩沖液（PBS）配制：氯化鈉（2.0 g）、磷酸二氫鉀（0.2 g）、磷酸氫二鈉（2.9 g）、氯化鉀（0.2 g），溶于1 L超純水中，滅菌冷卻調節(jié)pH7.4，于4 ℃冷藏備用。

試驗當天取健康成年人（1男1女）（身體健康，無胃腸道疾病且近三個月未服用過抗生素）糞便，將收集好的糞便樣品轉入?yún)捬跖囵B(yǎng)箱進行處理，在電子天平上稱取糞便樣品各10 g，與磷酸鹽緩沖溶液以1:10（w/v）的比例混勻（采用一男一女得到更豐富的菌群，以構建腸道菌群模型），紗布過濾備用。在三角瓶中加入27 mL厭氧培養(yǎng)基，3 mL過濾的糞便懸濁液，1 mL不同濃度的花色苷溶液分為L組（低劑量5 mg/mL）、M組（中劑量10 mg/mL）、H組（高劑量15 mg/mL），K組（空白）使用等量無菌水代替花色苷溶液。于37 ℃恒溫厭氧培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h[19-20]。

1.2.5 氣相色譜檢測體外發(fā)酵后短鏈脂肪酸含量前處理：將發(fā)酵24 h后的樣品在條件為12000 r/min、4 ℃、5 min下離心，沉淀于冰箱保存?zhèn)溆?。取上清? mL依次加入0.5 mL 50%的硫酸溶液以及5 mL乙醚，混勻旋渦振蕩2 min后，于4 ℃，10000 r/min，5 min下進行離心，取上層乙醚層，過0.22 μm有機相濾膜后存于氣相小瓶進行檢測[21]。

氣相色譜條件：色譜柱為10mDB-WAX毛細管柱，進樣口溫度為220 ℃，分流比為10:1，柱流量為1.5 mL/min，氮氣橫流，程序升溫第一階段為70 ℃，1 min；第二階段以15 ℃/min升至160 ℃，6 min；第三階段以30 ℃/ min升至210 ℃保持5 min，采用氫火焰檢測器（FID）檢測器溫度為250 ℃[20-21]。

1.2.6 菌群多樣性構成分析 K組、L組、M組以及H組共12例人類糞便與花色苷厭氧培養(yǎng)物樣品中腸道微生物總DNA提取以及高通量測序委托廣州基迪奧生物科技有限公司進行；采用糞便DNA試劑盒提取DNA；對目標片段16S rDNA V3～V4區(qū)域進行PCR擴增，以第一個引物中的barcode作為特異引物擴增得到目標產(chǎn)物；將目標片段中PCR擴增的產(chǎn)物經(jīng)電泳檢測后，切膠回收目標片段，采用熒光定量PCR擴增產(chǎn)物；使用AMPure XP Beads對第二輪擴增產(chǎn)物進行純化，用ABI StepOnePlus RealTime PCR System（Life Technologies，產(chǎn)地美國）進行定量；根據(jù)Novaseq 6000的PE250模式pooling上機測序。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 17.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析（P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義），Origin 2021進行作圖。高通量測序的原始數(shù)據(jù)進行質控、過濾、去嵌合體，得到的有效數(shù)據(jù)，進行分類操作單元的劃分以及系統(tǒng)發(fā)育學分析，菌群結構差異及差異微生物種類采用Usearch分析。

2 結果與分析

2.1 模擬消化過程對花色苷含量的變化

仙人掌果花色苷在模擬胃消化過程中含量的變化結果見圖1。經(jīng)胃消化3 h后花色苷含量與初始量相比顯著下降（P＜0.05），其消化率為11.4%；模擬胃消化組與胃消化空白組相比，花色苷含量稍有降低，但不具有顯著性差異（P＞0.05）。由于胃消化空白組未添加胃蛋白酶，因此該結果表明花色苷在消化過程中不受胃蛋白酶的影響，但受胃酸和胃液的影響較大[22]。仙人掌果花色苷在模擬腸消化過程中含量的變化結果見圖2，經(jīng)腸消化4 h后花色苷含量急劇下降（P＜0.05），其消化率為23.5%；模擬腸消化組與腸消化空白組相比，花色苷含量具有顯著性差異（P＜0.05）。腸消化空白組未添加胰蛋白酶和膽鹽，因此該結果表明花色苷在腸消化過程中受膽汁、胰蛋白酶的影響較大，花色苷在pH較高的腸液中不穩(wěn)定，易被消化[22-23]。仙人掌果實花色苷經(jīng)由胃-腸的總消化率為34.9%。絕大部分花色苷剩余，不會被上消化道消化[24]。

圖1 仙人掌果花色苷在模擬胃消化過程中含量的變化Fig.1 Changes of anthocyanins in Opuntia ficus-indica during simulated gastric digestion

圖2 仙人掌果花色苷在模擬腸消化過程中含量的變化Fig.2 Changes of anthocyanins in Opuntia ficus-indica during simulated intestinal digestion

2.2 氣相色譜檢測體外發(fā)酵后短鏈脂肪酸含量的變化

短鏈脂肪酸（Short chain fatty acids，SCFAs）是由腸道微生物在結腸內(nèi)發(fā)酵未被消化的物質，包括碳水化合物、多糖低聚糖、膳食纖維以及其他植物營養(yǎng)素在腸道中獲得的碳原子數(shù)為1～6個的飽和脂肪酸[25]。由圖3可知與K組相比，H組、M組、L組總短鏈脂肪酸含量均顯著升高（P＜0.05），分別為K組的7.8、5.0和1.1倍。與K組相比，L組乙酸、丙酸和丁酸含量上具有顯著差異性（P＜0.05），分別上升1.1、1.3和1.2倍，異丁酸、異戊酸和戊酸含量無顯著性差異（P＞0.05）。與K組相比M組、H組均具有顯著差異性（P＜0.05），M組在乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、異戊酸和戊酸的含量均明顯升高，分別為空白組的5.9、2.9、6.5、4.2、4.4和6.5倍；H組在乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、異戊酸和戊酸的含量均明顯升高，分別為K組的10.0、4.6、10.7、4.7、5.6和7.8倍。從圖3中還可知，仙人掌果實花色苷與人類糞便共培養(yǎng)后產(chǎn)生的乙酸、丙酸、丁酸其含量比較高。分析得出花色苷在一定程度上會影響短鏈脂肪酸的產(chǎn)生，擬桿菌門促進乙酸的產(chǎn)生，厚壁菌門促進丁酸的產(chǎn)生，放線菌門促進丙酸的產(chǎn)生[26]。隨著花色苷濃度的增加短鏈脂肪酸含量升高，可能是由于花色苷與腸道上的微生物進行相互作用[25-27]。

圖3 仙人掌果花色苷在厭氧發(fā)酵中短鏈脂肪酸的變化Fig.3 Changes of short-chain fatty acids in prickly pear anthocyanins during anaerobic fermentation

2.3 體外發(fā)酵仙人掌果實花色苷對腸道菌群的影響

2.3.1 菌群Alpha多樣性分析 Alpha多樣性與物種數(shù)目也就是均勻度以及生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)的多樣性兩個因素有關，描述群落均勻度的指標主要包括Chao1、ACE指數(shù)，指數(shù)越小，群落均勻度低，多樣性就越高；描述群落多樣性的指數(shù)有Shannon、Simpson指數(shù)，指數(shù)其值越高，表明群落多樣性越高。由表2所示，與K組相比L組、M組以及H組Chao1與ACE指數(shù)均顯著減少（P＜0.05），而Shannon指數(shù)與Simpson指數(shù)均顯著增加（P＜0.05）。使得腸道菌群內(nèi)豐多樣性的升高，表明添加花色苷會改變腸道內(nèi)的菌群的多樣性。

表2 花色苷對腸道微生物群α多樣性指數(shù)的影響Table 2 Effects of anthocyanins on the alpha diversity index of gut microbiota

2.3.2 菌群Beta多樣性分析 PCoA（principal coordinates analysis）是樣本間的差異分析。每一個點代表一個樣本，相同顏色的點來自同一個分組，兩點之間距離越近表明兩者的群落構成差異越小，距離越遠，差異比例越大。由圖4a可以得出，各個樣本之間完全分離，說明各個樣品中微生物菌落發(fā)生改變且差異明顯，表明此次結果能夠較好的描述樣本特征，M組與K組距離最遠，相似度最低，表明微生物群落相似度最低差異大，而L組與H組距離最近相似度最大，微生物群落相似度差異小。NMDS（Nonmetric multidimensional scaling）由圖4b可以得出應力函數(shù)值strees=0.00＜0.05表明具有很好的代表性。

圖4 仙人掌果實花色苷微生物菌群主坐標以及多維尺度分析Fig.4 Principal coordinates and multidimensional scale analysis of anthocyanin microbial flora in opuntia ficus-indica

2.4 仙人掌果實花色苷對腸道菌群物種組成的影響

2.4.1 物種組成分析 通過四組樣品每組三個樣本共12個樣品，這12個樣品的平均測序深度為128163±3388 reads，按照97%的相似性下每個樣本有476±33 OTUs，VENN圖表示樣品之間共有和差異物種或基因的情況，反映了各組之間共有的和特有的OTUs數(shù)目。根據(jù)圖5所示L組、M組以及H組共同擁有而K組未出現(xiàn)的為92個OTU。L組、M組、H組以及K組共有177個OTU。K組和L組、M組、H組獨特OTU分別為282、130、121、135。表明仙人掌果花色苷改變了糞便腸道微生物群的組成。

圖5 物種豐富VENN圖Fig.5 VENN diagram of species enrichment

2.4.2 門水平下物種組成分析 由圖6可知，各樣本的腸道微生物主要有厚壁菌門（Firmicutes）、擬桿菌門（Bacteroidetes）、變形菌門（Proteobacteria）、放線菌門（Actinobacteria）、疣微菌門（Verrucomicrobia）這5大門類[20-21]，占樣本豐富度的97%以上。其中K組變形菌門含量占比最多，添加仙人掌果實花色苷后L組、M組、H組分別顯著降低43.5%、44.0%、43.4%（P＜0.05），變形菌門包括絕大多數(shù)病原菌，如大腸桿菌、埃希氏菌、沙門氏菌、幽門螺旋桿菌、空腸彎曲桿菌[27]。與K組相比，L組、M組、H組的擬桿菌門增加43.5%、30.4%、28.1%，擬桿菌門促進乙酸以及異戊酸的產(chǎn)生，參與人體結腸中的代謝活動，通過代謝獲得碳源與能量，厚壁菌門促進丁酸的產(chǎn)生，加花色苷組丁酸含量增多與厚壁菌門占比增加有關[8]。如圖7所示，與K組相比，L組、M組以及H組厚壁菌門/擬干菌門（Firmicutes/Bacteroidetes，F(xiàn)/B值）的比例均顯著降低74.1%、35.1%、35.5%（P＜0.05），有利于減少肥胖的發(fā)生，高脂飲食、暴飲暴食會引起F/B值過高，該值越高表明發(fā)生肥胖的幾率就越高，被作為肥胖的有效生物標記物[28-31]。Wu等[25]利用黃秋葵多糖進行體外發(fā)酵，發(fā)現(xiàn)能夠降低變形菌門，增加擬桿菌門的豐富度，F(xiàn)/B值降低7.2%。Chen等[32]利用黑米花色苷，研究抑郁癥小鼠，發(fā)擬桿菌屬、厚壁菌門的水平增加，和變形菌門減少，其F/B值降低23.5%。由此可知，仙人掌果實中的花色苷的對腸道菌群的調節(jié)具有更好的作用。

圖6 仙人掌果實花色苷厭氧發(fā)酵下腸道菌群門水平相對豐度的變化Fig.6 Relative abundance of gut microflora phylum levels under anaerobic fermentation of anthocyanins from Opuntia ficus-indica

圖7 腸道菌群擬桿菌門/厚壁菌門的比例Fig.7 Ratio of Bacteroidetes/Firmicutes in the intestinal flora

2.4.3 屬水平下物種組成分析 由圖8可知，在仙人掌果實花色苷厭氧發(fā)酵下，K組主要有大腸桿菌志賀屬（Escherichia-Shigella）、鏈型桿菌屬（Catenibacterium）、脫硫弧菌屬（Desulfovibrio）占比較多。而在加入花色苷后，則以普氏菌屬（Prevotella）、光岡菌屬（Mitsuokella）、乳酸桿菌屬（Lactobacillus）、雙歧桿菌屬（Bifidobacterium）為主。

圖8 仙人掌果實花色苷厭氧發(fā)酵下腸道菌群物種豐富熱圖Fig.8 Heat map of species enrichment of gut microbiota under anaerobic fermentation of anthocyanins from Opuntia ficus-indica

從圖9中可以得到，與K組相比，L組、M組以及H組大腸桿菌志賀屬占比顯著下降41.0%、41.2%、41.1%（P＜0.05），但L組、M組以及H組之間變化差異不大，大腸桿菌志賀屬中存在著很多已發(fā)現(xiàn)的病原體，會引起腸道炎癥等，對人體腸道菌群危害很大[33-34]。脫硫弧菌屬也被稱為硫酸鹽還原菌（SRB）屬于變形菌門。這類細菌可以“呼吸”硫酸鹽而不是氧氣。由于硫化氫（H2S）的產(chǎn)生，SRB被認為會對腸道上皮細胞具產(chǎn)生毒性，導致胃腸道疾病[35-36]，與K組相比，L組、M組以及H組脫硫弧菌占比顯著下降18.9%、19.6%以及19.9%（P＜0.05），花色苷可能通過破壞細菌細胞膜/細胞壁，促進其裂解死亡，從而抑制致病菌的生長。

圖9 仙人掌果實花色苷厭氧發(fā)酵下腸道菌群屬水平相對豐度的變化Fig.9 Relative abundance of gut microflora genus levels under anaerobic fermentation of anthocyanins from Opuntia ficus-indica

與K相比，L組、M組以及H組普氏菌屬占比顯著上升24.1%、40.7%、38.2%（P＜0.05），普氏菌屬存在于人類中，幫助分解蛋白質和碳水化合物食物，可以參與合成多種維生素，促進人體健康[26,37-38]。與K相比，L組、M組以及H組乳酸桿菌屬和雙歧桿菌屬的總含量增加（P＜0.05），分別增加了4.6%、5.8%、12.88%，L組、M組以及H組之間變化呈梯度增加，乳酸桿菌與雙歧桿菌作為公認的益生菌，可以使腸道微生物維持穩(wěn)定狀態(tài)，乳酸桿菌屬可利用精氨酸生產(chǎn)L-鳥氨酸，促進腸粘膜形成，調節(jié)腸道粘膜穩(wěn)態(tài)[39-42]。與K組相比，L組、M組以及H組光岡菌屬均增加，分別增加了36.0%、27.7%、27.2%（P＜0.05），而光岡菌屬豐富度的增加，能提高機體發(fā)酵碳水化合物、多糖的能力，對于減輕肥胖有很大益處[27,41]。

3 結論

仙人掌果實花色苷在在模擬體外消化過程中，經(jīng)胃部少量消化,在腸中大量消化，經(jīng)過胃-腸的消化率34.9%，最終65.1%到達大腸。表明大部分的仙人掌果實花色苷，不會被人體消化，可能抵達大腸被腸道菌群所利用。

在體外厭氧發(fā)酵24 h后，仙人掌果實花色苷促使乙酸、丙酸、異丁酸、丁酸、異戊酸和戊酸六種短鏈脂肪酸含量顯著上升（P＜0.05），呈現(xiàn)劑量關系，其中仙人掌果實花色苷對乙酸、丙酸、丁酸的促進作用最為明顯。表明添加仙人掌果實花色苷能夠增加短鏈脂肪酸的產(chǎn)生，可能是使腸道菌群發(fā)生改變，從而促進了該短鏈脂肪酸產(chǎn)生菌的生長。

仙人掌果實花色苷干預可以改變腸道微生物群的多樣性和組成。在門水平上，主要是減少了變形菌門，增加了擬桿菌門、厚壁菌門以及放線菌門的增長。在屬水平上，增加了普氏菌屬、乳酸桿菌屬、雙歧桿菌屬、光岡菌屬等腸道有益菌的相對豐度，降低了大腸埃希菌和脫硫弧菌屬腸道有害菌的相對豐度。因此，仙人掌果實花色苷能夠調節(jié)腸道微生物的組成與多樣性，抑制有害菌，促進有益菌生長。仙人掌果實花色苷具有促進腸道健康的潛力，可以作為益生元進行探索。