陳長福

（龍巖市動物疫病預防控制中心，福建龍巖 364000）

病毒性腹瀉是仔豬死亡的重要原因之一。常見的豬致瀉性病毒主要有豬流行性腹瀉病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）、豬傳染性胃腸炎病毒（transmissible gastroenteritis virus，TGEV）、豬輪狀病毒（porcine rotavirus，PoRV）和豬德爾塔冠狀病毒（porcine delta corona virus，PDCoV）[1]。PoRV 在電鏡下形態(tài)似車輪，因此被命名為輪狀病毒。PoRV 基因組長約18 500 bp，編碼6 種結構蛋白（VP1～4、VP6 和VP7）和5 種非結構蛋白（NSP1～5）[2]。其中VP1～3 位于病毒核心，外層由VP7（37 kDa）形成光滑層，VP4（88 kDa）形成顆粒表面延伸的尖峰，VP6 位于中間層，對病毒有保護作用，參與病毒轉錄?；赩P6 的抗原特征，PoRV 分為A 到J 9 種，其中A 是最常見的，致病性強，遺傳變異性高，其次是C 和B。

近年來，PoRV 受到養(yǎng)殖戶的廣泛關注。豬只感染后胃內有凝乳塊，內容物呈灰黃色或灰黑色，腸道中的絨毛腸細胞變鈍變短，微絨毛不規(guī)則，引發(fā)電解質失衡、腸道吸收不良、腹瀉、脫水等癥狀，嚴重的可能死亡[3]。新生仔豬和斷奶仔豬由于缺乏保護性免疫最容易被PoRV 感染，成年豬感染一般無臨床癥狀。仔豬的易感性和成年豬的無癥狀感染特性使該病的防控工作更加復雜化[4-5]。本研究采集了一腹瀉豬場不同階段豬群的糞便、口腔拭子和環(huán)境、人員外表等樣本，利用熒光PCR 方法對病毒載量進行了檢測，證實引起該場腹瀉病的病原為PoRV。而后針對PoRV 感染提出了有效防治措施，以期為PoRV 感染防控提供參考。

1 豬場發(fā)病情況及臨床表現

福建省某規(guī)?；B(yǎng)豬場地處山區(qū)，豬場外圍生物安全措施嚴格。總存欄母豬1 000 頭左右，采用自繁自養(yǎng)的連棟養(yǎng)豬模式。

2021 年3 月15 日，該豬場B 棟豬舍定位欄母豬和產房仔豬出現腹瀉病例，經熒光PCR 檢測為PoRV 陽性，PEDV、TGEV 陰性；3 月20 日，A 棟產房仔豬暴發(fā)腹瀉，24 h 內發(fā)病率極高，7 日齡以下仔豬病死率高達100%，經再次檢測，確認為PoRV 強陽性，PEDV、TGEV 陰性；之后該病全場傳播，發(fā)病豬群涵蓋仔豬到成年豬的各年齡段；最后傳播至保育豬、育肥豬和公豬群。產房7 日齡仔豬主要癥狀為嘔吐加水樣腹瀉，體重減輕，治療無效后脫水死亡，死亡率接近100%，10 日齡以上仔豬死亡率為50%，個別個體耐過后恢復，但大部分成為僵豬。

該場共飼養(yǎng)豬2 000 頭，發(fā)生腹瀉的約有300頭。曾免疫PEDV、TGEV 和PoRV 三聯弱毒苗，免疫程序為產前40 d、產前20 d 各免疫1 次，后備母豬基礎免疫3 次。該場3 年內未發(fā)生過腹瀉病。腹瀉發(fā)生后，對患病豬群使用“利克太?！?、阿莫西林、硫酸黏菌素進行治療，但是效果不明顯。

2 臨床剖檢癥狀

對瀕死仔豬進行剖檢發(fā)現，胃和小腸內有大量凝乳塊或淡黃色胃內容物，腸壁變薄，腸道鼓氣，部分腸壁伴有彌漫性出血點，腸系膜淋巴結腫大，腸內容物散發(fā)腥臭味。

3 實驗室檢測

分別采集配懷母豬、產房母豬、產房仔豬、保育豬、育肥豬、公豬等豬群的糞便、口腔拭子及人員外表、環(huán)境樣本，使用核酸提取儀提取樣本核酸（購自南京諾唯贊生物科技公司），使用PoRV-A 熒光PCR 檢測試劑盒（購自廣州維伯鑫生物科技公司）對所有樣本進行病原檢測。Ct ＞40判定為PoRV 陰性，否則判定為陽性。參考10 個相同規(guī)模豬場的不同PoRV 載量陽性率（表1），即病毒載量＞104的病豬發(fā)生PoRV 感染陽性率＞90%，因此本研究以病毒載量＞104為界限，評估感染情況。

表1 10 個豬場不同PoRV 病毒載量的陽性率 單位：%

4 結果與分析

4.1 配懷母豬

結果（表2）顯示，配懷母豬唾液樣品的陽性檢出率為96.58%，顯著高于糞便檢出率（P＜0.05）。由于唾液比糞便更早排毒，說明該階段豬群有可能處于感染早期。糞便樣本中病毒載量高于104比例有15.56%，說明配懷母豬群感染PoRV 后，腹瀉比例較低。

表2 配懷母豬不同PoRV 病毒載量陽性率 單位：%

4.2 產房母豬

結果（表3）顯示，產房母豬糞便樣品的陽性檢出率為83.27%，顯著高于唾液檢出率（P＜0.05），表明該階段豬群處于感染中后期。產房母豬糞便樣品的病毒載量較低，但是有22.44%的病毒載量高于104，提示產房母豬感染PoRV（潛伏帶毒）后可能不會出現腹瀉癥狀，但是產房仔豬由于免疫系統(tǒng)不完善，可能被感染，需做好糞便管理。

表3 產房母豬不同PoRV 病毒載量陽性率 單位：%

4.3 產房仔豬

結果（表4）顯示，產房仔豬糞便樣品的陽性檢出率為82.50%，說明大部分產房仔豬被感染。產房仔豬糞便樣本病毒載量高于104的比例有22.50%，并且超高病毒載量（＞105）的比例有7.50%，說明此時產房仔豬有兩種情況，一種屬于感染中期，疫病即將大規(guī)模暴發(fā)，另一種可能屬于發(fā)病后康復期。

表4 產房仔豬不同PoRV 病毒載量陽性率 單位：%

4.4 保育豬

結果（表5）顯示，保育豬糞便樣品的陽性檢出率為41.67%，說明接近一半的保育豬群被感染。結合有33.34%比例的糞便樣品病毒載量高于104，并且超高病毒載量（＞105）的比例為25.00%，說明此時部分保育豬處于暴發(fā)期，出現腹瀉癥狀，而另外一部分保育豬還未被感染或者已康復，需做好已發(fā)病保育舍的隔離消毒工作。

表5 保育豬不同PoRV 病毒載量陽性率 單位：%

4.5 育肥豬

結果（表6）顯示，育肥豬糞便樣品的陽性檢出率為90.00%，說明大部分豬群被感染。結合有80.00%比例的糞便樣本病毒載量高于104，并且超高病毒載量（＞105）的比例為50.00%，說明此時育肥豬處于腹瀉暴發(fā)期，需要及時介入處理。

表6 育肥豬不同PoRV 病毒載量陽性率 單位：%

4.6 公豬

結果（表7）顯示，公豬的唾液樣品陽性檢出率（100%）高于糞便（64.70%），說明公豬幾乎都被感染。結合有11.76%比例的糞便樣本病毒載量高于104，推測公豬群很可能處于感染前中期，此時公豬腹瀉的比例雖然不高，但需及時干預，防止疫病進一步暴發(fā)。

表7 公豬不同PoRV 病毒載量陽性率 單位：%

4.7 產房人員和環(huán)境

結果（表8）顯示，產房人員外表的陽性檢出率顯著高于生產環(huán)境（P＜0.05），說明該場存在較大人員機械傳播風險，發(fā)病期更需要對進入生產區(qū)的工作人員實施嚴格的消毒管理措施。

表8 產房人員外表和環(huán)境中不同PoRV 病毒載量陽性率 單位：%

5 防控措施

確認病原為PoRV 后，場內第一時間對所有母豬緊急補免了PEDV、TGEV、PoRV 三聯弱毒苗，并嚴格按照母豬產前洗澡消毒、做好產房糞便管理、仔豬靜默生產、7 日齡內發(fā)病仔豬無害化處理等生產流程進行管理。實施以上防控措施1 個月后，至4 月中旬，全場病情趨于穩(wěn)定，新生仔豬未再出現腹瀉；定位欄中個別母豬食欲較低，但未發(fā)生腹瀉；保育豬、后備豬和公豬均沒有出現腹瀉，給食正常，精神狀態(tài)良好。

6 討論

生豬養(yǎng)殖是我國畜牧業(yè)的重要組成部分，是居民主要的肉食品來源。隨著養(yǎng)殖規(guī)模的擴大，豬腹瀉疫病防控形勢趨于復雜。腹瀉病毒在豬群中傳播，導致料肉比升高，并且引發(fā)的仔豬高發(fā)病率和死亡率，嚴重威脅著豬群健康，給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大經濟損失[6]。近年來，PoRV 在我國的檢出率呈上升趨勢，已受到養(yǎng)殖場和相關從業(yè)人員的廣泛重視。而PoRV 感染與其他腹瀉病毒感染在臨床上的表現往往很相似，從臨床剖檢或臨床癥狀上很難進行診斷，需要進行實驗室檢測確診[7-8]。

疫苗免疫是預防PoRV 感染的措施之一。目前，PoRV 商業(yè)疫苗（滅活苗和弱毒苗）已被證實可以有效預防PoRV 感染。此外，還需制定科學有效的針對性防控管理措施。第一，進入秋冬季后，PoRV 感染呈高發(fā)態(tài)勢，需在提前對配懷母豬的唾液及糞便中的PoRV 載量進行測定，做到提前預警，及早發(fā)現潛在發(fā)病豬群，如發(fā)現排毒量大的豬群，應及時進行疫苗補免。第二，對進入產房前的懷孕母豬應洗澡消毒，確保清除母豬體表的PoRV，以免仔豬出生后通過接觸感染。第三，加強產房的消毒與管理，人員進入產房前應對衣物和鞋子進行徹底消毒，防止通過人員機械傳播病毒；產房應有兩套清潔工具，一套用于產房清潔，另一套用于走道清潔，避免交叉，降低病毒傳播風險；第四，產房如出現發(fā)病豬只，則實行靜默生產，并及時對發(fā)病豬只進行無害化處理。