趙京京，郭君麗★，錢宇佳，李園春，郭君紅

（1. 南京醫(yī)科大學(xué)附屬婦產(chǎn)醫(yī)院，南京市婦幼保健院，江蘇 南京 210004 ；2. 寶雞市婦幼保健院，陜西 寶雞721000 ；3. 開封市婦產(chǎn)醫(yī)院，河南 開封 475000）

子宮內(nèi)膜異位癥(Endometriosis, EMs) 是指具有侵襲生長能力的子宮內(nèi)膜的基質(zhì)及腺體出現(xiàn)在子宮腔被覆內(nèi)膜以外的部位，從而引起月經(jīng)異常、慢性盆腔痛、性交困難和不孕等[1]，給育齡女性帶來生活和健康上的困擾和影響[2-3]。但EMs 發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，病灶多樣，且具有易侵襲和易復(fù)發(fā)的惡性生物學(xué)特性，其發(fā)病機(jī)制尚不明確。本研究通過檢測EMs 組織中細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子（CD147）、水通道蛋白1(Aquaporin1，AQP1)、血小板源性生長因子（platelet-derived growth factor，PDGF）的表達(dá)及其相關(guān)性，探討其在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機(jī)制中的作用。

1 對象與方法

1.1 研究對象

EMs 組：2018 年1 月 至2019 年5 月 因EMs 在我院行手術(shù)的患者60 例，年齡26 ～40 歲，平均年齡（36.54±3.15）歲；卵巢型34 例，腹膜型21 例，會陰型5 例。均符合EMs 的診斷標(biāo)準(zhǔn)。對照組：同期其他原因就診的非EMs 患者30 例，年齡30 ～43歲，平均年齡（37.41±2.10）歲。其中黏膜下子宮肌瘤12 例，子宮縱膈9 例，子宮內(nèi)膜息肉9 例。兩組的年齡相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。兩組患者術(shù)前3 個月內(nèi)未曾使用曼月樂環(huán)或服用任何激素類藥物，且無其他內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病。為避免體內(nèi)激素水平在不同月經(jīng)周期中的變化對檢測結(jié)果的影響，兩組患者手術(shù)時間均選擇卵泡期。研究對象的入選標(biāo)準(zhǔn)：1）患者有規(guī)律月經(jīng)周期；2）年齡＜45 歲；3）符合卵巢型、腹膜型及會陰型子宮內(nèi)膜異位癥診斷標(biāo)準(zhǔn)；4）對照組患者自愿參與病理組織學(xué)檢測。本研究已經(jīng)過我院醫(yī)學(xué)倫理委員會的審核并得到批準(zhǔn)。

1.2 標(biāo)本處理

所有標(biāo)本用生理鹽水沖洗干凈后，均以10% 甲醛固定，行石蠟包埋，連續(xù)切片（3μm），采用免疫組化法檢測CD147、AQP1 及PDGF 在不同組織中的含量，并計算陽性表達(dá)率。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用SPSS21.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的χ2 檢驗和Spearman 相關(guān)性分析，檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 EMs 組及對照組中CD147、AQP1 及PDGF的表達(dá)

EMs 組CD147、AQP1 及PDGF 的陽性表達(dá)率均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 CD147、AQP1 及PDGF 在不同組別子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)[例(%)]

2.2 在子宮內(nèi)膜異位組織中CD147、AQP1、PDGF表達(dá)的相關(guān)性

分 析 顯 示， 在EMs 組 織 中，CD147 與AQP1的 表 達(dá) 呈 正 相 關(guān)（r=0.991，P＜0.05）；CD147 與PDGF 的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.983，P＜0.05）；AQP1與PDGF 相對表達(dá)量無相關(guān)性（r=0.198，P＞0.05）。

3 討論

子宮內(nèi)膜異位癥可能是一種與細(xì)胞因子誘發(fā)的過度炎癥反應(yīng)、激素水平紊亂、機(jī)體免疫異常等相關(guān)的良性疾病，表現(xiàn)為異位子宮內(nèi)膜良性增殖的生長[4]，但卻具有類似惡性腫瘤的生物學(xué)行為[5]。其發(fā)病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是異位內(nèi)膜的黏附-侵襲-血管形成，此過程是多因素參與的交聯(lián)式、多步驟的復(fù)雜反應(yīng)過程。

CD147 在多種腫瘤細(xì)胞中呈高表達(dá)[6]，可通過誘導(dǎo)生成血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）來促進(jìn)腫瘤血管增生，誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞產(chǎn)生金屬基質(zhì)蛋白酶（MMPs）水解Ⅳ型膠原蛋白，破壞腫瘤細(xì)胞周圍基質(zhì)，抗失巢凋亡[7]，從而影響腫瘤細(xì)胞的生長、浸潤和轉(zhuǎn)移。目前臨床上對其在子宮內(nèi)膜異位癥中作用機(jī)制的研究不足。Wang C 等[8]報道CD147 廣泛表達(dá)在人子宮內(nèi)膜間質(zhì)和腺上皮中，且在月經(jīng)周期增生期的表達(dá)明顯增加，提示 CD147 可能參與了子宮內(nèi)膜細(xì)胞增殖的調(diào)控。金愛紅等[9]研究發(fā)現(xiàn)，卵巢子宮內(nèi)膜異位病灶組織中CD147 的表達(dá)明顯增高，研究證明在體外子宮內(nèi)膜細(xì)胞中加入CD147 抗體后，可抑制子宮內(nèi)膜細(xì)胞的遷移，加速細(xì)胞的凋亡。本研究同樣顯示，CD147 在子宮內(nèi)膜異位組織中呈高表達(dá)，并且使異位子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞的活性增加，提示其對于子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展有一定的促進(jìn)作用。且部分研究報道，VEGF 和 MMPs 抑制劑已進(jìn)入臨床試驗階段，而CD147 作為其上游主要調(diào)節(jié)分子發(fā)揮著極其重要的作用，相信通過阻斷其表達(dá)或抑制其功能，將可有效阻斷子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展，為我們更有效地遏制子宮內(nèi)膜異位癥進(jìn)展提供新思路、新靶點。

AQP1 是一種高選擇性水轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，具有調(diào)節(jié)跨膜細(xì)胞內(nèi)外滲透壓平衡及血管形成等重要作用[10]，廣泛分布于哺乳動物的生殖系統(tǒng)。正常情況下AQP1主要表達(dá)于子宮內(nèi)膜間質(zhì)的微血管和小血管。李瑩瑩等[11]的研究顯示，內(nèi)異癥患者異位內(nèi)膜AQP1的mRNA 及其蛋白質(zhì)表達(dá)水平要顯著高于正常子宮內(nèi)膜及在位內(nèi)膜，提示 AQP1 可通過增加血管的滲透性和組織間隙壓力差，促進(jìn)大量子宮內(nèi)膜細(xì)胞的外移、遷徙及新生血管形成，在某種程度上參與了EMs 的發(fā)生發(fā)展。本研究同樣提示：異位內(nèi)膜組織中AQP1 表達(dá)明顯高于正常內(nèi)膜組織，對比有統(tǒng)計學(xué)差異，推測AQP1 在EMs 發(fā)生發(fā)展中具有重要意義。國內(nèi)鮮見相關(guān)報道。阻斷AQP1 有望成為EMs 治療的新策略。

PDGF 能在體外誘導(dǎo)平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的分裂增殖，而且在促進(jìn)外周血管細(xì)胞重建以及細(xì)胞增殖、遷移中起著重要作用[12]。有研究表明，異位病灶中內(nèi)膜的血管化作用不僅僅由VEGF 調(diào)控，而且依賴于PDGF、VEGF、FGF 等多種分子之間的相互協(xié)同作用[13]，并證實EMs 的發(fā)生、發(fā)展與新生血管的形成密切相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，PDGF 不僅能明顯誘導(dǎo)異位內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的分裂增殖，同時也加速了平滑肌細(xì)胞遷移，這與既往嚴(yán)玲等[14]的研究結(jié)果一致。

本研究中，我們檢測了異位內(nèi)膜組織中CD147、AQP1 及PDGF 的表達(dá)水平，結(jié)果顯示，三者在EMs組中的表達(dá)水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，結(jié)果 證 實CD147、AQP1 及PDGF 可 能 參 與 了EMs 的發(fā)生發(fā)展。且本研究還表明，CD147 表達(dá)和AQP1 和PDGF 表達(dá)均呈顯著正相關(guān)，提示CD147 可能通過某種傳導(dǎo)通路促進(jìn)AQP1 和PDGF 表達(dá)，從而在EMs 的發(fā)生發(fā)展中存在互相協(xié)同的作用，共同促進(jìn)異位內(nèi)膜新生血管的形成，促進(jìn)EMs 的進(jìn)展。當(dāng)然，具體的作用機(jī)制還需要進(jìn)一步研究。總之，CD147、AQP1及PDGF 在EMs 中的過表達(dá)可參與EMs 的發(fā)生發(fā)展，這可能與它們能夠促進(jìn)細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移及新生血管形成有關(guān)，但具體的調(diào)控機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。