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        口蹄疫免疫抗體檢測及分析

        2022-12-07 09:18:59米日古力依布拉音
        獸醫(yī)導(dǎo)刊 2022年2期
        關(guān)鍵詞:血清

        米日古力·依布拉音

        (喇嘛昭鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)(畜牧業(yè))發(fā)展服務(wù)中心,新疆塔城 834600)

        0 引言

        雖然我國是一個農(nóng)業(yè)大國,但是由于我國的人口優(yōu)勢,我國對于肉制品以及肉類產(chǎn)品的需求量很大,這為很多家禽家畜業(yè)的發(fā)展提供了契機(jī)。但是家禽家畜業(yè)的發(fā)展也面臨著有些威脅,譬如口蹄疫[1]。口蹄疫因?yàn)樗膫魅舅俣戎?、發(fā)病率之多、死亡率之高而被列為一類傳染病。這種疾病不僅在我國不被忽視,而且在世界范圍內(nèi)也得到了相對程度上的重視。世界衛(wèi)生組織將口蹄疫命名為烈性傳染病之一。

        1 基本材料

        1.1 病理危害

        口蹄疫是一種發(fā)病率非常高的疾病,雖然口蹄疫的死亡率并不是特別高,據(jù)不完全統(tǒng)計,口蹄疫的死亡率不超過3%,但是會嚴(yán)重影響動物的生長,尤其是在一些規(guī)?;酿B(yǎng)殖場中,如果有一頭豬得了口蹄疫,那么很快就會傳染給其他豬[2]。被感染的豬剛開始會長出一些比較小的白色水泡,并不容易被發(fā)現(xiàn),直到口蹄疫感染的后期,會出現(xiàn)豬蹄腐爛,很容易被誤解為是皮膚疾病,容易導(dǎo)致誤診,誤診可能會影響最佳救治時間??谔阋叩娜谝话銥槿茏笥?,會嚴(yán)重影響豬的出欄時間,從而影響?zhàn)B殖場的經(jīng)濟(jì)收益。

        1.2 實(shí)驗(yàn)對象

        我國食用肉產(chǎn)品以及加工的肉類產(chǎn)品的主要來源是豬肉,而口蹄疫也主要發(fā)生在豬的身上,口蹄疫的發(fā)病率非常高,而且周期短。從發(fā)病到死亡之間的時間非常短。這種來勢洶洶而且死亡率非常之高的病毒已經(jīng)被世界衛(wèi)生組織列為最危險的傳染病之一??谔阋叩陌l(fā)生給畜牧業(yè)的經(jīng)濟(jì)帶來巨大的損失,而且口蹄疫一旦在一頭豬身上發(fā)生,很快便可以席卷整個養(yǎng)豬場,豬的大量死亡會造成肉價飛漲,不利于社會穩(wěn)定和人民生活水平的提高[3]。因此為了預(yù)防和治療這種疾病,自從2017年開始,我國的很多地區(qū)便開始對口蹄疫進(jìn)行針對性的檢測和相應(yīng)的疫苗的研發(fā)。

        2017年的上半年,我國把對口蹄疫的檢測提上了日程。我國的衛(wèi)生組織把口蹄疫的檢測點(diǎn)設(shè)立在我國的河北地區(qū)。因?yàn)楹颖钡貐^(qū)是一個相對重要的豬肉產(chǎn)品加工和檢測地區(qū),尤其是在河北省的張家口市,養(yǎng)豬已經(jīng)形成了一定的規(guī)模和專業(yè)化的生產(chǎn)方向。因此我國政府對于該省該市的口蹄疫檢測和防疫具有很高的重視度。

        1.3 實(shí)驗(yàn)途徑

        針對豬身上發(fā)生的口蹄疫傳染病,我國大部分地區(qū)所認(rèn)定的相對權(quán)威的實(shí)驗(yàn)試劑是產(chǎn)自蘭州生物藥廠的O型合成肽疫苗。這種疫苗已經(jīng)得到了國家相關(guān)部門以及醫(yī)學(xué)上的認(rèn)可,是一種具有很高的權(quán)威性以及在當(dāng)前市場上流通度很高的一種藥劑。除了這種藥劑之外,還有另外一種配合使用的疫苗是產(chǎn)自洛陽萊普生信息科技的一種藥劑。只有這兩種藥劑產(chǎn)品比對使用,才能達(dá)到比較好的抑制和免疫效果。但是在對這兩種藥劑的比對使用的過程中,對于兩種藥劑的使用比例和使用方法仍然有待考證和進(jìn)行進(jìn)一步的精確化的分析。

        2 實(shí)驗(yàn)方法

        2.1 血清采樣

        把要作為實(shí)驗(yàn)樣本進(jìn)行分析的豬進(jìn)行血清采樣,并對其血清進(jìn)行離心分離,從而分離出血清中所含有的病毒樣本。因?yàn)槿绻梢噪x心出病毒樣本,那么可以了解到病毒的分子結(jié)構(gòu),更好的提出相對性的措施來抑制病毒,除此之外,相對于直接在豬的身上進(jìn)行疫苗測試的方法,通過血清樣本來測試的方法不僅節(jié)約資源,而且比較容易實(shí)施,受自然的干擾比較小,分析的結(jié)果具有更高的科學(xué)性和精準(zhǔn)度,有利于提出更具有針對性的措施。因此對豬的血清進(jìn)行采樣來進(jìn)行對免疫抗體的檢測對口蹄疫的檢測及免疫具有主要價值和意義[4]。

        2.2 檢測結(jié)果分析

        實(shí)驗(yàn)通過對七種不同血清的提取,在進(jìn)行一系列的實(shí)驗(yàn)之后,通過對科學(xué)顯微鏡一下抗原所表現(xiàn)出不同狀態(tài)的觀察分析可得,不同的血型受口蹄疫病毒的影響不同,有的血型瘦口蹄疫病毒的影響比較小,但相對的這種血型受抗原的影響也比較少,有的血型受口蹄疫病毒影響比較大,很容易被這種病毒所感染,但是受抗原的影響也比較大。通過對多種血型受口蹄疫病毒的影響及受抗原影響的比較,分析之后發(fā)現(xiàn),最容易受到口蹄疫病毒感染的是O型血。O型血,因?yàn)檠偷奶厥庑?,因?yàn)镺型血和A型血或者是B型血都可以相容,它的相容性是比較強(qiáng)的,因此,當(dāng)O型血受到病毒干擾之后,會和病毒相結(jié)合,變異,從而產(chǎn)生新的毒株,這為戰(zhàn)勝病毒,研發(fā)出新的抗原帶來了巨大的挑戰(zhàn)。

        O型血在和口蹄疫的病毒結(jié)合之后,產(chǎn)生了新的毒株,由于這種新的毒株是基于原始口蹄疫病毒而分化而來,因此這種新的毒株被命名為泛亞株,這種毒株的抗原研發(fā)比傳統(tǒng)的口蹄疫病毒的抗原研發(fā)更困難,而且這種新的毒株更難從血清中提取出來,它的分子結(jié)構(gòu)也更難離析。這種毒株的傳播速度和發(fā)病率比傳統(tǒng)的口蹄疫病毒更高,也更難控制。

        2.3 對口蹄疫病毒病理綜述

        口蹄疫病毒的原理歸屬上屬于小RNA病毒,它的類潛伏期很長,而且不容易被發(fā)現(xiàn),口蹄疫病毒的患病初期表象與其他病理病癥在表象上具有交叉之處,到目前為止,口蹄疫病毒已經(jīng)發(fā)展、衍化出七十多種病毒類型,而且這種病毒的生命力頑強(qiáng),對外界環(huán)境的適應(yīng)力很強(qiáng),很容易與不同的血清類型結(jié)合,從而衍生出新的病毒類型。據(jù)研究表示,口蹄疫病毒的結(jié)構(gòu)主要是5UTR、3UTR和ORF,在這三個主要結(jié)構(gòu)中又含有其他的小分支,在ORF結(jié)構(gòu)中含有與VP1一樣的解構(gòu),不僅如此,還含有VP2、VP3等與VP1結(jié)構(gòu)不一樣的結(jié)構(gòu)基因,除此之外,這三個結(jié)構(gòu)的起始密碼號以及終止密碼子都各不相同。病毒的主要抗原點(diǎn)是VP1??谔阋卟《驹谕庑紊吓c人體白細(xì)胞有相似之處,都是圓形,而且口蹄疫病毒的主要組成部分也是蛋白質(zhì),其蛋白質(zhì)含量高達(dá)70%,剩余的30%則是病毒的RNA單鏈。

        當(dāng)動物感染口蹄疫病毒之后,最初表現(xiàn)是會在皮膚上長出一些白色的小泡,損傷皮膚,使皮膚腐爛,隨之逐漸的損傷呼吸道和消化道的粘膜,然后病毒逐漸深入到血液中,伴隨著血液的流通,導(dǎo)致造成心肌出血和內(nèi)臟出血,最終造成心肌病變,臨床醫(yī)學(xué)表明,口蹄疫病毒造成的心肌病變后的心臟橫切面上有淡黃色斑點(diǎn)。

        3 對口蹄疫的抗體檢測及分析

        3.1 對于人工異變化毒株的培養(yǎng)

        針對口蹄疫的抗體研發(fā),弱毒疫苗的研發(fā)在很長一段時間內(nèi)被視為羅馬福音一樣的存在。弱毒疫苗是人工培植的一種抗體,其研發(fā)原理是,提取口蹄疫病毒的毒株,經(jīng)過人工培植之后,對其進(jìn)行“鼠化”處理,促使其原本的分子結(jié)構(gòu)異變,異變后的口蹄疫分子結(jié)構(gòu)對原始的口蹄疫病毒能夠形成一定程度的抑制作用,但是被人工異變后的口蹄疫病毒毒株仍然帶有原始毒株的分子結(jié)構(gòu)特性,很容易形成“易返”效果,即:人工異變后的口蹄疫病毒恢復(fù)其原始結(jié)構(gòu)。這種方法的成本和造價比較低,但是使用這種方法具有一定的局限性,首先是對于病毒的醫(yī)療效果不夠突出,盡管給動物注射完這種疫苗之后,可能會在短期內(nèi)獲得一定的收效,但是受到病毒的影響可能會反彈;其次是這種抗原的制作方法會受到運(yùn)輸?shù)纫蛩氐挠绊懀焕谕茝V和普及;最后是給被口蹄疫病毒感染后的動物注射完這種疫苗之后,可能會使被注射弱毒疫苗的動物產(chǎn)生變態(tài)反應(yīng),造成更嚴(yán)重的后果。

        3.2 滅活疫苗

        除了弱毒疫苗之外,還有另外一種疫苗的研發(fā)在很大程度上彌補(bǔ)了弱毒疫苗的缺陷和不足。滅活疫苗是上世紀(jì)20年代歐洲研發(fā)的,這種疫苗在弱毒疫苗功能的基礎(chǔ)上,添加了抗氧化鋁制劑,這使得滅活疫苗的功能比弱毒疫苗的功能更穩(wěn)定,功效也更為突出。對口蹄疫病毒具有針對性的抑制和消滅作用的一種抗原[5]。這種抗原在給感染口蹄疫病毒的動物注射之后,并不會產(chǎn)生反彈效果,而且對于口蹄疫病毒的抑制作用具有明顯的功效,這種疫苗是我國目前使用最廣泛的抵抗口蹄疫病毒的疫苗。

        3.3 基因重組疫苗

        基因重組疫苗所采用的基因重組技術(shù)與弱毒疫苗研發(fā)的技術(shù)具有相似之處,都是在血清中提取病毒毒株,然后通過基因改組技術(shù)對疫苗的分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行改組。但是基因重組疫苗與弱毒疫苗直接仍然有不同之處,前者的技術(shù)研發(fā)來源是來自于在大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)的口蹄疫病毒毒株,由于毒株的70%是由蛋白質(zhì)構(gòu)成,通過使用蛋白質(zhì)對毒株進(jìn)行誘導(dǎo),從而刺激被感染的動物在體內(nèi)產(chǎn)生抗體,然后使用蛋白分離技術(shù),在動物體內(nèi)提取出亞單位疫苗,然后對被感染的動物進(jìn)行注射,以此達(dá)到對口蹄疫病毒的抑制作用。這種對動物進(jìn)行間接接種疫苗的方法,使動物自身產(chǎn)生抗體,這種方法的發(fā)現(xiàn),是我國當(dāng)前基因技術(shù)工程的一個重大突破。

        3.4 接種口蹄疫免疫抗體的注意事項

        對于口蹄疫免疫抗體的接種,首先應(yīng)該注意的是在接種時要嚴(yán)格按照疫苗生產(chǎn)廠家所規(guī)定的要求進(jìn)行接種,要注意感染口蹄疫病毒的動物的感染時間,發(fā)病的具體情況,以及被感染的動物的年齡,根據(jù)具體的情況具體分析應(yīng)該接種疫苗的量。

        在對動物進(jìn)行疫苗接種時,工作人員要保持嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鲬B(tài)度,對疫苗的接種過程要嚴(yán)格遵守規(guī)定。對于接種環(huán)境也具有嚴(yán)格的要求,在進(jìn)行接種時,要確保接種的針頭清潔干凈,接種的環(huán)境合適。對動物進(jìn)行接種,多半是進(jìn)行肌肉注射的方式,在接種時要注意注射的位置正確。

        4 結(jié)語

        口蹄疫是一種傳染性非常強(qiáng)的病毒,而且口蹄疫在最初感染時不容易被察覺,這一點(diǎn)給口蹄疫的傳播提供了契機(jī)。一段口蹄疫病毒爆發(fā),那么將會給動物生存密集的地方,譬如養(yǎng)殖場帶來巨大不利影響,而且口蹄疫會通過空氣等方式進(jìn)行傳播,很可能會傳播給人類,給人類的生存生活帶來不必要的災(zāi)難。因此,口蹄疫的預(yù)防工作,對于畜牧業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)都是是一項重要的工作。

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