韓 鳳，章文偉，李巧玲，楊曉玉，林茂祥*

（1.重慶市藥物種植研究所，重慶 南川 408435； 2. 重慶市道地藥材規(guī)范化生產(chǎn)工程技術(shù)研究中心，重慶 南川 408435）

多花黃精Polygonatum cyrtonemaHua 為百合科Liliaceae 黃精屬PolygonatumMill 多年生草本植物，以干燥根狀莖入藥，作為正品藥材黃精收錄于2020年版《中國(guó)藥典》（一部）[1]，具有2 000多年藥用歷史和1 000多年栽培歷史[2]。多花黃精主要含有多糖類(lèi)、甾體皂苷類(lèi)、黃酮類(lèi)、生物堿類(lèi)及木脂素類(lèi)等活性成分，還含有大量氨基酸、微量元素等，現(xiàn)代研究表明它具有抗衰老、抗腫瘤、抗病毒、抗炎、降血糖、調(diào)血脂、提高免疫和改善記憶等藥理作用[3]，臨床用于治療脾胃氣虛、冠心病、糖尿病、高血脂、低血糖、慢性支氣管炎、延緩動(dòng)脈粥樣硬化等多種病癥[4]。多花黃精除了作藥用，還因其極高的食用價(jià)值，被廣泛用于食品和保健品等行業(yè)，開(kāi)發(fā)價(jià)值大，市場(chǎng)前景較好。多花黃精主產(chǎn)于湖南、四川、貴州、安徽、福建、重慶等地[5]，因市場(chǎng)需求增加，多花黃精的種植規(guī)模逐年擴(kuò)大，在生產(chǎn)實(shí)踐中，隨著種植年限增加，其葉片、莖干、根莖病害發(fā)生程度也逐年升高，尤其是根腐病的發(fā)病日益嚴(yán)重，從而導(dǎo)致其產(chǎn)量減少和質(zhì)量降低[6-7]，對(duì)藥農(nóng)造成了嚴(yán)重?fù)p失。

微生物群落結(jié)構(gòu)組成和多樣性反映了土壤微生態(tài)的現(xiàn)狀及變化趨勢(shì)，它受土壤肥力、植物品種類(lèi)型和種植方式等影響較大，還對(duì)土壤健康和病蟲(chóng)害的抑制起著重要作用[8-10]。中藥材根腐病主要是由細(xì)菌、真菌和線蟲(chóng)等多種病原混合侵染引起的[11]，目前仍主要使用化學(xué)農(nóng)藥進(jìn)行防治，而研究病、健植株根際土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的變化，探究根腐病與根際土壤細(xì)菌之間的關(guān)系，尋找有益細(xì)菌，對(duì)篩選根腐病生防菌具有重要意義。隨著土壤微生物研究的不斷深入，根際土壤微生物與植物病害之間關(guān)系成為研究熱點(diǎn)。賴寶春等[12]研究表明辣椒患病植株根際土壤中的細(xì)菌多樣性要低于健康植株。西洋參感染根腐病后，根際土壤中芽胞桿菌屬、鞘氨醇單胞菌屬和芽單胞菌屬相對(duì)豐度減少，而假單胞菌屬和鞘脂菌屬相對(duì)豐度增加，即細(xì)菌群落平衡被打破，導(dǎo)致根腐病的發(fā)生[13]。由此可見(jiàn)，根際土壤細(xì)菌群落在植物與土壤生態(tài)系統(tǒng)循環(huán)中扮演著重要角色[14]。目前，未見(jiàn)相關(guān)多花黃精健康植株與根腐病植株根際土壤細(xì)菌群落組成方面的研究報(bào)道。為此，本研究通過(guò)測(cè)定多花黃精健康植株、根腐病病株及未種植多花黃精土壤的酶活性，并采用Illumina Hiseq 2500高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)及多樣性進(jìn)行分析，明確多花黃精根際土壤中的有益細(xì)菌菌群，為研究多花黃精根腐病的發(fā)生原因、篩選生防細(xì)菌提供理論基礎(chǔ)，以期深入了解多花黃精根腐病的發(fā)生機(jī)制，為其綜合防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 根際土壤樣品采集

根際土壤樣品采集于重慶市南川區(qū)三泉鎮(zhèn)（29°8'14.79″N，107°13'23.25″E），海 拔890 m，年降水量為1 180 mm，土壤類(lèi)型為砂質(zhì)壤土。據(jù)調(diào)查，多花黃精根腐病發(fā)病率在11%～23%，發(fā)病初期，植株的地上莖干、葉片無(wú)明顯癥狀，根莖呈水漬狀褐色壞死斑點(diǎn)，土壤濕度大時(shí)，根莖表面可見(jiàn)白色霉層，病株極易從土壤中拔出，嚴(yán)重時(shí)根莖病部呈褐色或紅褐色，地上莖干、葉片枯黃，最后植株枯死。于2019年7月多花黃精根腐病發(fā)病盛期，按照五點(diǎn)取樣法，各選取5株健康植株和根腐病發(fā)病嚴(yán)重的植株，挖出根莖，抖去地表雜草和附著在根狀莖的土壤，用毛刷刷下須根上的土壤，將土壤樣品分別編號(hào)為HJJ和HJB。按上述方法采集土層深度為5～15 cm未種植過(guò)多花黃精的土壤，樣品編號(hào)為HJCK。將所有土壤樣品置入無(wú)菌自封袋中，帶回實(shí)驗(yàn)室，一部分土壤樣品過(guò)篩保存在DW-HL398S型冰箱（中科美菱低溫科技股份有限公司）用于土壤基因組DNA提取和測(cè)序，一部分置于陰涼通風(fēng)處干燥，過(guò)篩（80目）后用于土壤酶活性的測(cè)定。

1.2 土壤酶活性的測(cè)定

參照關(guān)松蔭[15]的方法測(cè)定多花黃精根際土壤樣品中的5種酶活性，即采用高錳酸鉀滴定法測(cè)定過(guò)氧化氫酶、3, 5-二硝基水楊酸比色法測(cè)定蔗糖酶、靛酚藍(lán)比色法測(cè)定脲酶、福林酚比色法測(cè)定酸性蛋白酶和磷酸苯二鈉比色法測(cè)定酸性磷酸酶。

1.3 土壤基因組DNA的提取

分別稱取三組土壤樣品 0.5 g，使用 DP336 土壤基因組 DNA 提取試劑盒［天根生化科技（北京）有限公司］，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)逐步進(jìn)行，提取DNA后利用TU-1810型紫外分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）測(cè)定DNA樣品濃度，并利用0.8%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA樣品純度，稀釋保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 文庫(kù)構(gòu)建及高通量測(cè)序

以稀釋后的三組土壤樣品基因組DNA為模板，使用細(xì)菌16S rRNA基因序列的通用引物對(duì)338F806R并結(jié)合Illumina Hiseq 2500測(cè)序平臺(tái)的V3～V4高變區(qū)片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR反應(yīng)體系：模板DNA 2 μL，上下游引物（濃度為10 μmol/L）各1 μL，Taq Master Mix（2×）10 μL，dd H2O 6μL，共20 μL。反應(yīng)程序?yàn)?95 ℃預(yù)變性 5 min，94℃ 變性1 min，53℃退火 1 min，72℃延伸1.5 min，共30個(gè)循環(huán)。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物使用2.0%瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳檢測(cè)后，用試劑盒（AXYGEN公司）對(duì)目標(biāo)片段進(jìn)行回收。將回收產(chǎn)物送至北京百邁克生物科技有限公司進(jìn)行高通量測(cè)序，最終數(shù)據(jù)分析均在北京百邁克生物科技有限公司BMKCloud云平臺(tái)網(wǎng)站（http://console.biocloud.net/）完成。

2 結(jié)果與分析

2.1 土壤酶活性變化

未種植土壤中過(guò)氧化氫酶活性明顯高于種植過(guò)多花黃精的土壤，即HJCK與HJJ、HJB的氧化氫酶活性差異明顯（P＜0.05），HJJ和HJB兩者間的氧化氫酶活性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。HJB中蔗糖酶活性明顯低于HJJ和HJCK （P＜0.05），而HJJ和HJCK兩者間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。脲酶和酸性蛋白酶的活性以HJCK最高，HJJ次之，HJB最低，且三者之間有明顯的差異（P＜0.05）。三組土壤中酸性磷酸酶活性從高到低分別為HJCK、HJJ和HJB，但它們之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1 未種植多花黃精土壤與多花黃精健株、病株根際土壤酶活性的差異（±s， n = 3）Tab. 1 The enzyme activities change of P. cyrtonema soil in healthy，root-rot plants and never planted soil（±s， n = 3）

表1 未種植多花黃精土壤與多花黃精健株、病株根際土壤酶活性的差異（±s， n = 3）Tab. 1 The enzyme activities change of P. cyrtonema soil in healthy，root-rot plants and never planted soil（±s， n = 3）

注: 同列字母完全不同，表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），下表同。

樣品名稱 過(guò)氧化氫酶/[μmol/（h·g）] 蔗糖酶/[mg/（d·g）] 脲酶/[μg/（d·g）] 酸性蛋白酶/[μg/（h·g）]酸性磷酸酶/[nmol/（h·g）]HJB 413.35±3.81b 41.80±0.66b 436.79±5.43c 35.42±0.94c 1 409.14±18.94a HJJ 420.30±5.15b 44.65±0.76a 449.91±4.55b 51.53±1.76b 1 416.29±35.57a HJCK 462.11±7.41a 45.02±0.41a 505.57±4.86a 60.41±2.44a 1 432.23±28.86a

2.2 測(cè)序數(shù)據(jù)和OUT聚類(lèi)分析

經(jīng)測(cè)序分析最終用于后續(xù)分析的有效序列共285 903條，其中HJJ土樣有 68 539條，有效率為85.59%；HJB土樣有 85 556條，有效率為90.11%；HJCK土樣131 808條，有效率為89.98%。HJB、HJJ、HJCK有效序列長(zhǎng)度分別為420 bp、421 bp和421 bp，見(jiàn)表2。

表2 三組土壤樣品細(xì)菌基因組總 DNA 高通量測(cè)序所得序列數(shù)據(jù)特征Tab. 2 Sequence data characteristics of total DNA on soil microbial genome in P. cyrtonema three samples by high throughput sequencing testing

稀釋曲線可直接反映優(yōu)化序列是否合理，并間接反映樣品的物種豐富度[16]，由圖1可知，當(dāng)測(cè)序數(shù)量達(dá)到20 000時(shí)，隨著測(cè)序數(shù)量的增加，稀釋曲線趨于平緩，表明三組土壤樣品所測(cè)的序列陣容都能夠較好的反映細(xì)菌群落種類(lèi)數(shù)量，測(cè)序數(shù)據(jù)基本合理?；?7%的序列相似性閾值可獲得1 753個(gè)OTUs，其中HJB均值為1 675個(gè)OTUs，HJJ均值為1 638個(gè)OTUs，HJCK均值為1 715個(gè)OTUs。Venn圖結(jié)果表明，HJCK、HJJ、HJB三組共有OTUs 1 545個(gè)，其中HJCK特有OUTs為7個(gè)， HJJ為3個(gè)， HJB為13個(gè)。同時(shí)，HJCK與HJJ共有OTUs 68個(gè)，HJJ與HJB共有OTUs為99個(gè)，而HJCK與HJB共有OTUs僅為18個(gè)。由此可推斷出，未種植過(guò)多花黃精的土壤與種植過(guò)多花黃精的土壤（無(wú)論患病與否）微生物群落差距較大；而多花黃精健株土壤與病株土壤之間雖有差異，但其土壤根際微生物含有共同種群相對(duì)較多。

圖1 多花黃精根際細(xì)菌群落的稀釋曲線和Venn圖Fig. 1 Rarefaction curves and Venn diagram of microbial commumities in soils samples of P. cyrtonema OUTs abundance

2.3 土壤細(xì)菌α-多樣性分析

三組土壤細(xì)菌群落α-多樣性分析表明物種覆蓋度均達(dá)到99%，表明樣品數(shù)據(jù)真實(shí)可靠。從ACE指數(shù)及Chaol指數(shù)來(lái)看，三組土壤樣品中物種豐富度由高到低為HJCK＞HJB＞HJJ，且Chaol指數(shù)具有顯著性差異，由此可見(jiàn)種植多花黃精后土壤物種豐富度下降，數(shù)量減少。HJB、HJJ、HJCK土壤樣品的Simpson和Shannon指數(shù)表明三組樣品中土壤細(xì)菌的多樣性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表3。

表3 土壤細(xì)菌 α-多樣性分析（±s， n = 3）Tab. 3 Alpha analysis of fungi strains in soil（±s， n = 3）

表3 土壤細(xì)菌 α-多樣性分析（±s， n = 3）Tab. 3 Alpha analysis of fungi strains in soil（±s， n = 3）

樣品名稱 ACE Chaol Simpson Shannon 覆蓋度/%HJB 1 696.14±109.86ab 1 704.45±104.86b 0.992 5±0.00a 6.63±0.00a 0.996±0.00a HJJ 1 657.80±162.84b 1 671.00±121.83c 0.992 4±0.00a 6.65±0.00a 0.992±0.00a HJCK 1 724.58±130.05a 1 745.52±117.37a 0.992 5±0.00a 6.64±0.00a 0.991±0.00a

2.4 根際土壤細(xì)菌群落組成

三組土壤樣品中細(xì)菌歸屬于27個(gè)門(mén)。HJCK和HJB、HJJ土樣細(xì)菌在門(mén)水平上的豐度差異比較大，前10種優(yōu)勢(shì)細(xì)菌門(mén)，見(jiàn)圖2。三組土壤樣品細(xì)菌中，相對(duì)豐度大于1%的細(xì)菌組成由高到低進(jìn)行排列，依次是變形菌門(mén)（Proteobacteria，34.01% ～ 36.55%）、酸桿菌門(mén)（Acidobacteria，16.41% ～ 26.16%）、綠彎菌門(mén)（Chloroflexi，5.89%～12.88%）、擬桿菌門(mén) （Bacteroidetes，4.76%～8.39%）、放線菌門(mén)（Actinobacteria，5.39%～6.74%）、芽單胞菌門(mén)（Gemmatimonadetes，4.89%～6.09%）、疣微菌門(mén)（Verrucomicrobia，3.06%～4.47%）、浮霉菌門(mén)（Planctomycetes，2.14%～3.89%）、硝化螺旋菌門(mén)（Nitrospirae，1.76%～2.18%）、遲發(fā)型細(xì)菌門(mén)（Latescibacteria，1.10%～2.23%）；其中，三組土壤樣品中變形菌門(mén)相對(duì)豐度的比例最高，明顯高于其它門(mén)類(lèi)；HJB土樣中的酸桿菌門(mén)和綠彎菌門(mén)相對(duì)豐富高于HJCK、HJJ土樣，而HJCK、HJJ土樣中放線菌門(mén)的相對(duì)豐度高于HJB土樣，表明多花黃精感染根腐病后導(dǎo)致根際土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的改變，造成其生長(zhǎng)環(huán)境的惡化。

在屬水平上，未鑒定出的細(xì)菌相對(duì)豐度為64.18% ～71.23%。相對(duì)豐度排名前十細(xì)菌而言，uncultured_bacterium_c_Subgroup_6（7.74% ～ 14.83%）、uncultured_bacterium_f_Gemmatimonadaceae（3.22% ～4.33%）、uncultured_bacterium_f_Micro-scillaceae（1.02% ～ 4.24%）、MND1（1.04% ～ 2.96%）、硝化螺旋菌屬Nitrospira（1.91% ～ 2.18%）、鞘氨醇單胞菌屬Sphingomonas（1.54% ～ 2.28%）、uncultured_bacterium_f_SC-I-84（1.09% ～ 2.17%）、uncultured_bacterium_f_Pedosphaeraceae（1.06% ～ 2.56%）、黃桿菌屬Flavobacterium（0.99% ～ 2.52%）、RB41（1.27% ～ 2.20%）。

為了更直觀的展現(xiàn)未種植多花黃精土壤和健株、病株多花黃精根際土壤細(xì)菌種群的相似性及變異，在門(mén)水平上，使用R軟件，對(duì)三組土壤樣品中排名前27門(mén)繪制聚類(lèi)熱圖，見(jiàn)圖3。橫向細(xì)菌群落根據(jù)進(jìn)化關(guān)系聚類(lèi)為兩大分支，其中HJCK獨(dú)自為一類(lèi)，而HJJ與HJB歸為一類(lèi)。縱向OUT可以分為三大類(lèi)，菌群Ⅰ在HJB組豐度最高，菌群Ⅱ在HJCK組豐度最高，菌群Ⅲ在HJJ組豐度最高。

從圖3可以看出，HJB土壤樣品中異常球菌-棲 熱 菌 門(mén)（Deinococcus-Thermus）、己 科 河 菌 門(mén)（Rokubacteria）、GAL15、綠彎菌門(mén)（Chloroflexi）、厚壁菌門(mén)（Firmicutes）、食氫菌門(mén)（Hydrogenedentes）相對(duì)豐度較高，Omnitrophicaeota、疣微菌門(mén)（Verrucomicrobia）、FCPU426相對(duì)豐度較低；HJJ土壤樣品中Dependentiae、芽單胞菌門(mén)（Gemmatimonadetes）、裝甲菌門(mén)（Armatimonadetes）、疣微菌門(mén)（Verrucomicrobia）、FCPU426相對(duì)豐度較高，綠彎菌門(mén)（Chloroflexi）、螺旋體門(mén)（Spirochaetes）相對(duì)豐度較低；HJCK土壤樣品中變形菌門(mén)（Proteobacteria）、硝化螺旋菌門(mén)（Nitrospirae）、擬桿菌門(mén)（Bacteroidetes）、匿桿菌門(mén)（Latescibacteria）、浮霉菌門(mén)（Planctomycetes）、藍(lán)藻門(mén)（Cyanobacteria）、迷蹤菌門(mén)（Elusimicrobia）、纖維桿菌門(mén)（Fibrobacteres)、放線菌門(mén)（Actinobacteria)、Patescibacteria、腸桿菌門(mén)（Entotheonellaeota)相對(duì)豐度較高，Armatimonadetes、Acidobacteria、WS2相對(duì)豐度較低。

圖 2 門(mén)和屬水平上的物種相對(duì)豐度Fig. 2 Relative abundance of species at phylum and genus level

圖3 基于樣品豐度前27的細(xì)菌物種豐度聚類(lèi)熱圖Fig. 3 Clustering heat map of bacterial species abundance based on the 27 samples before abundance

3 討論

土壤酶主要來(lái)源于土壤中動(dòng)、植物和微生物的分泌物及殘?bào)w腐爛分解物[15,17]，它參與土壤中的生物化學(xué)反應(yīng)，對(duì)土壤肥力起著重要作用，因此作為土壤生態(tài)系統(tǒng)變化的指標(biāo)之一[18]。通過(guò)測(cè)定土壤酶活性結(jié)果表明，與HJCK相比，種植多花黃精后土壤中的酶活性發(fā)生了明顯變化。多花黃精感染根腐病后，HJB中過(guò)氧化氫酶、蔗糖酶、脲酶、酸性蛋白酶、酸性磷酸酶活性均低于HJJ。而宋旭紅等[19]研究表明，與黃連健康植株相比，根腐病土壤中過(guò)氧化氫酶和脲酶活性顯著降低。楊紹瓊等[20]發(fā)現(xiàn)香蕉感染枯萎病后，河口縣4個(gè)地區(qū)感病植株根系附近土壤蔗糖酶活性高于健康植株。三七[21]、黃芪[22]、煙草[23]和青稞[24]根腐病的發(fā)生均與土壤酶活性的變化密切相關(guān)。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)多花黃精根腐病發(fā)生后，根際土壤中過(guò)氧化氫酶、蔗糖酶等5種酶活性降低，表明多花黃精根腐病的發(fā)生與土壤酶活性有一定的關(guān)系。

多花黃精根腐病主要由尖孢鐮刀菌Fusarium oxysporum、腐 皮 鐮 刀 菌F.Solani、F.Foetens和F.Hostae等鐮刀菌屬病原菌引起[25-26]。當(dāng)土壤中病原微生物大量滋生繁殖，而有益微生物減少時(shí)，就會(huì)引起植物病害的發(fā)生[27]，因此土壤微生物群落結(jié)構(gòu)變化是影響植物土傳病害發(fā)生的重要因素。通過(guò)擴(kuò)增HJJ、HJB和HJCK根際土壤細(xì)菌V3 ～ V4區(qū)域，采用高通量測(cè)序技術(shù)探究栽培多花黃精后土壤細(xì)菌群落的變化和多樣性進(jìn)行分析，分別獲得68 539、85 556、131 808條有效序列，平均長(zhǎng)度為420 bp，說(shuō)明高通量測(cè)序方法分析多花黃精根腐病和健康根際土壤細(xì)菌群落組成和多樣性具有可行性。由土壤多樣性分析可知，ACE指數(shù)和Chaol指數(shù)為HJCK＞HJB＞HJJ，同時(shí)Shannon指數(shù)和Simpson指數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，由此可得三種土壤中物種多樣性差異不大，但細(xì)菌數(shù)量具有顯著性差異，且未種植過(guò)黃精的土壤中細(xì)菌相對(duì)豐度較大。高通量測(cè)序結(jié)果表明，多花黃精三組土壤樣品中共鑒定細(xì)菌27門(mén)，其中，變形菌門(mén)、酸桿菌門(mén)、綠彎菌門(mén)、擬桿菌門(mén)、放線菌門(mén)在所有土壤樣品中相對(duì)豐度高，是主要優(yōu)勢(shì)菌門(mén)。黃穗萍等[28]研究發(fā)現(xiàn)，廣西香蕉根際及非根際土壤細(xì)菌中最豐富的門(mén)類(lèi)為變形菌門(mén)、酸桿菌門(mén)、綠彎菌門(mén)、擬桿菌門(mén)、放線菌門(mén)等。李茂森等[29]報(bào)道了遵義3 個(gè)海拔下植煙土壤優(yōu)勢(shì)門(mén)為放線菌門(mén)、變形菌門(mén)、綠彎菌門(mén)和酸桿菌門(mén)。百香果[30]、馬鈴薯[31]、茶樹(shù)[32]等其它植物根際土壤的研究顯示相似的優(yōu)勢(shì)菌。而HJB中細(xì)菌相對(duì)豐度大于HJJ，可能是因?yàn)橹仓瓴∽兒?，植物?nèi)生菌引起外界根際土壤細(xì)菌群落增加，從而細(xì)菌數(shù)量增加。從土壤細(xì)菌門(mén)的豐度來(lái)看，三組土壤中含量差異較大的是酸桿菌門(mén)和擬桿菌門(mén)。多花黃精感染根腐病后土壤逐漸酸化[33]，導(dǎo)致酸性細(xì)菌增多，酸桿菌門(mén)是一類(lèi)適宜在弱酸條件下生長(zhǎng)的細(xì)菌。HJCK、HJJ中酸桿菌門(mén)相對(duì)豐度低于HJB，由此可見(jiàn)酸桿菌門(mén)是影響多花黃精根部病變的主要細(xì)菌之一。擬桿菌門(mén)在HJJ根際土壤中相對(duì)豐度高于HJB，這可能是擬桿菌門(mén)能促進(jìn)健康植株碳源的吸收利用[34-35]，從而提高了多花黃精的抗病性。

4 結(jié)論

多花黃精HJB土壤中的土壤酶活性均比HJJ和HJCK低，其土壤中物質(zhì)轉(zhuǎn)化能力比HJJ和HJCK低；16S rRNA 高通量測(cè)序三組土壤細(xì)菌多樣性和群落結(jié)構(gòu)，結(jié)果表明，HJB、HJJ和HJCK分別得到的OUTS 數(shù)分別為 1 675、1 638、1 715；變形菌門(mén)、酸桿菌門(mén)、綠彎菌門(mén)、擬桿菌門(mén)、放線菌門(mén)、芽單胞菌門(mén)是三組土壤中的主要優(yōu)勢(shì)菌門(mén)。因此，多花黃精病株根際土壤酶活性和細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的變化或許是導(dǎo)致多花黃精根腐病發(fā)生的重要原因。