張婧婧，張昊，霍宗利

(江蘇省疾病預(yù)防控制中心，江蘇 南京 210009))

氯酚類化合物是一種在水體中廣泛存在的有機(jī)污染物。它性質(zhì)穩(wěn)定、不易降解，很容易通過飲用水在人體內(nèi)富集。由于它具有較強(qiáng)的致癌性，被我國列入優(yōu)先控制污染物名單，《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB 5749—2006)規(guī)定，飲用水中2,4,6-三氯酚和五氯酚的限值分別為0.2和0.009 mg/L[1]。

目前，測定氯酚類化合物的方法主要有高效液相色譜法[2-6]、高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[7-8]、氣相色譜法[9-12]和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[13-17]。由于氯酚類化合物極性較強(qiáng)，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法的前處理過程大多采用液液萃取和衍生化法來改善峰形，增加靈敏度，因而操作煩瑣、耗時(shí)長，且需要消耗大量有機(jī)溶劑。液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法雖不需要特殊的前處理過程，但是氯酚類化合物在C18柱上不易保留，易受雜質(zhì)干擾。

考慮到氯酚類化合物的高極性性質(zhì)，采用離子色譜法對其進(jìn)行分離，由于此類化合物的電導(dǎo)較低，因此并未采用電導(dǎo)檢測器，而是選用紫外檢測器，以實(shí)現(xiàn)對水中5種氯酚類化合物的同時(shí)測定。

1 材料與方法

1.1 儀器

ICS-1500離子色譜儀、UltiMate 3000紫外可見檢測器(美國賽默飛世爾科技公司)；AB204S電子分析天平(美國梅特勒托利多公司)；0.45 μm水相針式濾器(美國密理博公司)；戴安IonPac AS7 (4×250 mm)分析柱、戴安IonPac AG7 (4×50 mm)保護(hù)柱(美國賽默飛世爾科技公司)。

1.2 試劑

氯酚標(biāo)準(zhǔn)品：2-氯酚(99.9%)、2,4-二氯酚(99.8%)、2,4,6-三氯酚(99.8%)、2,3,4,6-四氯酚(99.8%)、五氯酚(99.9%)，均購自德國 Dr.Ehrenstorfer GmbH公司。甲醇(HPLC級，德國VWR公司)；硫酸銨(分析純，南京化學(xué)試劑一廠)；氨水(優(yōu)級純，南京化學(xué)試劑有限公司)；純凈水(杭州娃哈哈集團(tuán)有限公司)。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

稱取5種氯酚標(biāo)準(zhǔn)品適量，溶于甲醇，配成混合標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液，其中2-氯酚的質(zhì)量濃度為10.0 mg/mL，其余4種氯酚的質(zhì)量濃度均為1.0 mg/mL，于-4 ℃條件下避光保存。然后再用甲醇逐級稀釋，配置成混合標(biāo)準(zhǔn)使用液，其中2-氯酚的質(zhì)量濃度為10.0 mg/L，其余4種氯酚的質(zhì)量濃度為1.0 mg/L。

1.4 樣品前處理

水樣經(jīng)0.45 μm水相針式濾器過濾。

1.5 色譜條件

分析柱和保護(hù)柱的柱溫均為30 ℃，流動相為5%的氨水甲醇-1%的硫酸銨溶液 (V∶V=80∶20)；流速為1.0 mL/ min；進(jìn)樣量為200 μL；紫外檢測波長為250 nm。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測波長的選擇

使用紫外可見分光光度計(jì)分別對質(zhì)量濃度為10 mg/L的5種氯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行全波長掃描，結(jié)果表明，2-氯酚的吸收峰在236和294 nm處，2,4-二氯酚的吸收峰在246 和307 nm處，2,4,6-三氯酚的吸收峰在246 和312 nm處，2,3,4,6-四氯酚的吸收峰在250 和316 nm處，五氯酚的吸收峰在251和322 nm處。這5種氯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液在250和 310 nm 處均有較強(qiáng)的吸收峰，故分別使用500 μL質(zhì)量濃度為1 mg/L的5種氯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液，在紫外可見檢測器中對250和310 nm波長附近進(jìn)行信號掃描。結(jié)果表明，5種氯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液在250 nm處響應(yīng)較好且基線平穩(wěn)，峰形良好，而在310 nm下響應(yīng)較弱，因此，選擇檢測波長為250 nm。

2.2 色譜條件的選擇

考慮到強(qiáng)堿性溶液不適用于紫外檢測器，因此選擇非強(qiáng)堿性的氨水和硫酸銨溶液進(jìn)行洗脫。分別考察了3種4%的氨水甲醇-1%的硫酸銨溶液 (V∶V=40∶60，60∶40和80∶20)。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，隨著氨水甲醇比例的增加，5種氯酚的保留時(shí)間隨之縮短，當(dāng)甲醇為80%時(shí)，保留時(shí)間在15 min左右最合適。隨后考察了3%，4%和5%的氨水甲醇，發(fā)現(xiàn)隨著氨水濃度的增加，5種氯酚的色譜峰分離度更高，峰形更尖銳，響應(yīng)更強(qiáng)。這是因?yàn)殡S著氨水濃度的增加，溶液pH值增加，促進(jìn)了氯酚的電離。繼續(xù)考察0.5%，1%和2%的硫酸銨溶液，發(fā)現(xiàn)隨著硫酸銨濃度的增加，保留時(shí)間、峰形以及響應(yīng)均無明顯變化。因此選擇5%的氨水甲醇-1%的硫酸銨溶液 (V∶V=80∶20)作為流動相。2-氯酚、2,4-二氯酚、2,4,6-三氯酚、2,3,4,6-四氯酚和五氯酚的酸度系數(shù)(pKa)分別為8.52，7.89，6.23，5.22和4.70，隨著它們酸度的增強(qiáng)，在分析柱中的解離也增強(qiáng)，交換也隨之增強(qiáng)，保留時(shí)間更長，這5種氯酚的保留時(shí)間分別為4.32，5.47，7.50，9.73和13.20 min。

2.3 干擾試驗(yàn)

考察水中共存離子對目標(biāo)化合物的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，硝酸鹽和亞硝酸鹽的最大吸收波長為220 nm，在本實(shí)驗(yàn)的檢測波長250 nm條件下，這2種化合物無明顯的紫外吸收，當(dāng)它們的質(zhì)量濃度均為10 mg/L時(shí)，對實(shí)驗(yàn)不存在干擾；氯化物和硫酸鹽在波長200 nm以上無明顯的紫外吸收，當(dāng)它們的質(zhì)量濃度均為100 mg/L時(shí)，對實(shí)驗(yàn)不存在干擾。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線及方法檢出限

分別吸取5種氯酚標(biāo)準(zhǔn)使用液0.50，1.0，2.0，4.0和8.0 mL，置于50 mL容量瓶中，用純水稀釋至刻度。配制成2-氯酚質(zhì)量濃度為0.10，0.20，0.40，0.80，1.60 mg/L，其余4種氯酚質(zhì)量濃度為0.01，0.02，0.04，0.08，0.16 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，進(jìn)行色譜分析,以被測組分的峰面積對相應(yīng)的質(zhì)量濃度做標(biāo)準(zhǔn)曲線。取2-氯酚質(zhì)量濃度為0.10 mg/L，其余4種氯酚質(zhì)量濃度為0.01 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)，重復(fù)測定8次，按照公式MDL=t(n-1,0.99)×S計(jì)算方法檢出限[t(n-1,0.99)取2.998，S為平行測定的標(biāo)準(zhǔn)偏差]。5種氯酚的色譜圖見圖1，線性方程、相關(guān)系數(shù)及方法檢出限見表1。

注：1—2-氯酚；2—2,4-二氯酚；3—2,4,6-三氯酚；4—2,3,4,6-四氯酚；5—五氯酚。

表1 5種氯酚的線性方程、相關(guān)系數(shù)及方法檢出限

2.5 準(zhǔn)確度和精密度

分別吸取5種氯酚混合標(biāo)準(zhǔn)使用液1.0，2.0和4.0 mL，分別加入50 mL自來水中(未檢測出這5種氯酚)，配制成2-氯酚質(zhì)量濃度為0.2，0.4，0.8 mg/L，其余4種氯酚質(zhì)量濃度為0.02，0.04，0.08 μg/L的低、中、高3種加標(biāo)濃度的樣品。每個(gè)加標(biāo)樣品做6個(gè)平行，進(jìn)行加標(biāo)回收率和精密度實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見表2。由表2可見，5種氯酚在3個(gè)不同加標(biāo)量下的回收率為93.2%～100.8%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均<10%。

表2 5種氯酚的準(zhǔn)確度和精密度(n=6)

2.6 實(shí)際樣品測定

用本方法測定了10份自來水樣品，均未檢出5種氯酚類化合物。在氯酚的模擬消毒生成實(shí)驗(yàn)中，檢測到2,4,6-三氯酚，其余4種均未檢出。

3 結(jié)語

建立了同時(shí)測定水樣中5種氯酚類化合物的離子色譜-紫外檢測法。方法前處理簡單，無須富集濃縮，過濾后即可直接進(jìn)樣；檢測時(shí)間短(<15 min)；靈敏度高，2-氯酚的檢出限為0.03 mg/L，2,4-二氯酚的檢出限為0.004 mg/L，其余3種氯酚的檢出限為0.003 mg/L；精密度良好(RSD<10%)，準(zhǔn)確度較高(回收率>90%)。方法適用于基層檢測機(jī)構(gòu)對生活飲用水的日?？焖贆z測。