劉玉才，韓 勇

1.山東省日照市五蓮縣動物疫病預(yù)防控制中心，山東 五蓮 262300；2.山東省日照市動物疫病預(yù)防控制中心，山東 日照 276800

布魯氏菌?。˙rucellosis），又稱馬爾他熱或波狀熱，是由布魯氏菌（Brucella）引起的一種人畜共患的自然疫源性傳染病，常引起動物流產(chǎn)、不孕，故又稱之為傳染性流產(chǎn)病[1-4]。該病被世界動物衛(wèi)生組織（OIE）列為須通報(bào)動物疫病，我國將其列為二類動物疫病。近年來，國內(nèi)外多個(gè)地區(qū)有人畜感染發(fā)病的報(bào)告[5-6]。

布病試管凝集試驗(yàn)是國家標(biāo)準(zhǔn)中的確診方法，由于不需要精密儀器，操作簡單，易于基層推廣，在布魯氏菌病監(jiān)測凈化中起較大作用。但當(dāng)前缺少布病試管凝集試驗(yàn)專門觀察裝置，觀察結(jié)果需要將比濁管和樣品管分別從試管架取出，逐個(gè)進(jìn)行比較，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，傳統(tǒng)的試管口沒有專門的塞子，需用錫箔紙將試管口逐個(gè)包裹，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，錫紙密封不好存在較大的生物安全風(fēng)險(xiǎn)，本文針對以上不足，設(shè)計(jì)了一種新型布病試管凝集試驗(yàn)裝置。

1 一種布病試管凝集試驗(yàn)裝置

1.1 試驗(yàn)裝置描述

圖1—圖3 是一種布病試管凝集試驗(yàn)裝置結(jié)構(gòu)示意圖，包括盒體1 以及設(shè)置在盒體1 內(nèi)的多個(gè)試管本體2，盒體1 上固定連接有多個(gè)呈豎向設(shè)置的分隔板13，盒體1 內(nèi)設(shè)有多個(gè)固定板4，每個(gè)固定板4 上均固定連接有多個(gè)支撐桿11，支撐桿11 遠(yuǎn)離固定板4 的一端固定連接有用于固定試管本體2的圓環(huán)8，試管本體2 上滑動連接有橡膠塞10，固定板4 上設(shè)有用于放置試管本體2 的凹槽，每個(gè)固定板4 上均對稱固定連接有2 個(gè)連接板7，每個(gè)連接板7 上均設(shè)有轉(zhuǎn)動機(jī)構(gòu)，橡膠塞10 上設(shè)有用于方便操作的移動把手12，移動把手12 和橡膠塞10卡接，由于橡膠塞10 上設(shè)置有移動把手12。

1.2 裝置特點(diǎn)及操作

當(dāng)需要將橡膠塞10 和試管本體2 分離時(shí)，可以通過握住移動把手12，將橡膠塞10 取出，使得操作更加方便，同時(shí)因?yàn)橐苿影咽?2 和橡膠塞10 卡接，當(dāng)移動把手12 損壞時(shí)，可以方便快速地更換移動把手12。

固定板4 上設(shè)有多個(gè)豁口，每個(gè)豁口內(nèi)均固定連接有用于編號的標(biāo)簽6，通過每個(gè)豁口內(nèi)具有不同編號的標(biāo)簽6，可以更清楚地區(qū)別各個(gè)試管本體2 內(nèi)的物質(zhì)，從而更好地防止試管本體2 之間弄混淆，同時(shí)也使得試驗(yàn)出現(xiàn)操作誤差的幾率降低，每個(gè)凹槽上均固定連接有和試管本體2 配合使用的橡膠墊5，橡膠墊5 上設(shè)有弧形槽，由于將試管本體2 放在凹槽內(nèi)的橡膠墊5 上，可以防止透明玻璃質(zhì)地的試管本體2 和堅(jiān)硬的凹槽之間發(fā)生碰撞，也就可以防止試管本體2 發(fā)生破裂損壞，并且橡膠墊5上設(shè)置的弧形槽，可以避免試管本體2 的弧形底面在固定板4 和橡膠墊5 之間發(fā)生滑動。

轉(zhuǎn)動機(jī)構(gòu)包括與連接板7 卡接的固定塊9，固定塊9 上螺紋連接有螺紋桿3，螺紋桿3 一端轉(zhuǎn)動連接有轉(zhuǎn)動塊14，轉(zhuǎn)動塊14 遠(yuǎn)離螺紋桿3 的一端固定連接有安裝塊15，當(dāng)螺紋桿發(fā)生轉(zhuǎn)動時(shí)，由于螺紋桿3 和固定塊9 螺紋連接，螺紋桿3 轉(zhuǎn)動時(shí)，還會和固定塊9 發(fā)生相對移動，螺紋桿3 向下移動，螺紋桿3 上轉(zhuǎn)動連接的轉(zhuǎn)動塊14 也會向下移動，從而使得轉(zhuǎn)動塊14 上設(shè)置的安裝塊15 也向下移動，安裝塊15 上對稱設(shè)有2 個(gè)安裝腔，每個(gè)安裝腔上均滑動連接有滑動柱18，滑動柱18 上環(huán)繞設(shè)有直彈簧16，直彈簧16 兩端分別和安裝腔內(nèi)壁以及滑動柱18 固定連接，連接板7 上設(shè)有用于連接滑動柱18 的卡槽17，安裝塊15 上設(shè)置的滑動柱18 隨著一起移動時(shí)，由于滑動柱18 上設(shè)置的直彈簧16，在安裝腔內(nèi)處于壓縮狀態(tài)，在滑動柱18 向下移動過程中，當(dāng)滑動柱18 一端和卡槽17 相對時(shí)，在直彈簧16 的彈力作用下，滑動柱18 一端和卡槽17 進(jìn)行卡接。

2 裝置在布病試管凝集試驗(yàn)中的應(yīng)用

1）以羊和豬血清為例，將凝集試管放于布病試驗(yàn)觀察裝置，每排放4 支，分別放1、3、5、7 位置上，每個(gè)裝置放6 排，整個(gè)裝置可以檢測6 個(gè)樣品。

2）第1 管標(biāo)記檢驗(yàn)編碼后加920 μL 稀釋液，第2～4 管各加入500 μL 稀釋液。 然后取受檢血清80 μL，加入第1 管內(nèi)，并混合均勻。

3）取500 μL 混合液加入第2 管并充分混勻，如此倍比稀釋至第4 管，從第4 管棄去混勻液50 μL。

4）稀釋完畢，從第1～4 管的血清稀釋度分別為1∶12.5、1∶25、1∶50 和1∶100。

5）將稀釋的抗原液500 μL 分別加入已稀釋好的各管血清中，并振搖均勻，羊和豬的血清稀釋度則依次變?yōu)?∶25、1∶50、1∶100 和1∶200。

6）樣品稀釋好后，將凝集試管放觀察裝置上，通過將固定塊和2 個(gè)不同的固定塊上設(shè)置的連接板進(jìn)行卡接，由于初始狀態(tài)時(shí)，滑動柱上設(shè)置的直彈簧處于壓縮狀態(tài)，隨著安裝塊的移動，滑動柱與卡槽處于同一水平面內(nèi)時(shí)，在直彈簧的彈力作用下，滑動柱一端就會和卡槽進(jìn)行卡接。37 ℃培養(yǎng)24 h。

7）通過固定塊，可以方便地同時(shí)將這2 個(gè)連接板從盒體內(nèi)取出，可以每排每排地將樣品拿出，在光線明亮的地方繼續(xù)觀察結(jié)果，由于固定板上設(shè)置有多個(gè)凹槽，可以將比濁管（++）放在編號為2、4、6的位置進(jìn)行液體渾濁度比較，不需要將樣品逐個(gè)取出后再判定結(jié)果，試管口專門設(shè)置了橡膠塞，大大降低了生物安全傳播風(fēng)險(xiǎn)。

3 討 論

傳統(tǒng)的布魯氏菌試管凝集試管架判定試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，需要將4 個(gè)樣品管和比濁管（++）分別從試管架取出，重新放置在新的試管架上進(jìn)行逐個(gè)對比，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，其次，傳統(tǒng)試管架設(shè)計(jì)阻擋光線，不利于肉眼觀察，而且傳統(tǒng)的試驗(yàn)試管沒有專門的試管塞，需用錫箔紙將試管口逐個(gè)包裹，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，錫紙密封不好存在較大的生物安全風(fēng)險(xiǎn)。

本裝置通過轉(zhuǎn)動螺紋桿，使得螺紋桿上通過轉(zhuǎn)動塊連接的安裝塊，在豎直方向發(fā)生移動，安裝塊上設(shè)置的2 個(gè)滑動柱，與連接板進(jìn)行卡接，方便同時(shí)將2 個(gè)固定板取出，之后通過將比濁管（++）放在固定板的不同標(biāo)簽處，進(jìn)行液體渾濁度比較，不需要將樣品逐個(gè)取出后再判定結(jié)果，大大提高了檢測效率，并且試管架由1 個(gè)支撐桿以及圓環(huán)構(gòu)成，設(shè)計(jì)簡潔，最大限度地避免了光線被遮擋，使得肉眼觀察更加方便，同時(shí)，試管本體上安裝了橡膠塞，最大限度地降低了生物安全傳播風(fēng)險(xiǎn)。由于固定板的每個(gè)放置試管本體的凹槽內(nèi)，都安裝了橡膠墊，橡膠墊質(zhì)地較軟，可以減小試管本體和凹槽內(nèi)壁之間的碰撞，對試管本體具有一定的防護(hù)作用，同時(shí)橡膠墊上設(shè)置有弧形槽，使得弧形底面的試管本體在放置時(shí)更加穩(wěn)定。

本裝置已于2021 年11 月5 日通過國家授權(quán)的實(shí)用新型裝置（專利號：ZL202120502195 .5），下步將逐步在規(guī)模牛羊場進(jìn)行推廣應(yīng)用，可為日照市牛羊場布病凈化提供支撐。