白小慧,邢 艷,杜芳艷,馬向榮,何 奇,高續(xù)春,宋小利

(榆林學(xué)院 化學(xué)與化工學(xué)院,陜西 榆林 719000)

槲皮素是一種黃酮類化合物,主要存在于天然植物中,具有多種藥理作用[1-6]。目前槲皮素的測(cè)定方法主要有高效液相色譜法[7]、紫外分光光度法[8]、毛細(xì)管電泳法[9]和電化學(xué)法等[10]。與液相色譜法和毛細(xì)管電泳法相比,電化學(xué)分析法具有選擇性好、靈敏度高、價(jià)格低廉、耗時(shí)少、檢測(cè)限低和響應(yīng)快速等優(yōu)點(diǎn),因此實(shí)驗(yàn)選用電化學(xué)方法測(cè)定槲皮素[11-13]。類水滑石(LDHs)化合物具有特殊的層狀結(jié)構(gòu)及物理化學(xué)性質(zhì),具有孔徑可調(diào)變的擇形吸附催化性能,在吸附、催化領(lǐng)域中占有重要位置。作者合成具有電化學(xué)活性的LDHs[14-17]并用其修飾玻碳電極(GCE),研究改性玻碳電極的電催化性能,建立了一種檢測(cè)槲皮素含量的新方法。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑與儀器

鄰苯二甲酸氫鉀(KHP):天津市北聯(lián)精細(xì)化學(xué)品開發(fā)公司;氫氧化鈉(NaOH)、氯化鉀(KCl)、六氰合鐵酸鉀(K3[Fe(CN)6]):天津試劑廠;硝酸鎳[Ni(NO3)2·6H2O]:北京化工廠;硝酸鋁[(Al(NO3)3·9H2O)]:上海麥克林生化科技有限公司;N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、尿素[CO(NH2)2]:天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司;槲皮素:上海阿拉丁生化科技股份有限公司;以上試劑均為分析純;蒸餾水:自制。

電化學(xué)工作站:CHI660D,上海辰華儀器公司;三電極系統(tǒng):工作電極為Ni2＋-Al3＋-LDHs/GCE,參比電極為飽和甘汞電極(SCE),輔助電極為鉑絲電極(電化學(xué)工作站配件)。

1.2 Ni2＋-AI3＋-LDHs類水滑石的制備與表征

精確稱取4.907 4 g Ni(NO3)2·6H2O和2.110 1 g Al(NO3)3·9H2O,溶解于蒸餾水后,定容于250 m L容量瓶,將該溶液加入三口瓶中,并在攪拌下緩慢加入4.054 1 g尿素,t＝98℃,t＝10 h,用蒸餾水和無(wú)水乙醇洗滌產(chǎn)物,產(chǎn)品在室溫下干燥并研磨為粉末,記為Ni2＋-Al3＋-LDHs。

1.3 修飾電極的制備

1.3.1 修飾電極的制備

玻碳電極拋光、清洗干凈后,自然晾干。

準(zhǔn)確稱取0.100 0 g Ni2＋-Al3＋-LDHs粉末,用10 m L的DMF溶解,超聲30 min。用移液槍移取0.5μL溶液滴涂于GCE電極表面,自然風(fēng)干即得到修飾電極。

1.3.2 修飾電極的表征

將清洗干凈的裸電極GCE、修飾電極Ni2＋-Al3＋-LDHs/GCE置 于 含10 mmol/L K3[Fe(CN)6]和0.2 mol/L KCl混合溶液的電解池中,以K3[Fe(CN)6]為探針,采用循環(huán)伏安掃描(CV)和交流阻抗掃描(EIS)對(duì)電極進(jìn)行表征。

1.4 電化學(xué)測(cè)試

取一定量的槲皮素工作溶液于25.00 m L容量瓶中,加入17.5 m L KHP-NaOH緩沖溶液(p H＝4.6±0.2),定容至25 m L,以GCE、Ni2＋-Al3＋-LDHs/GCE為工作電極,以SCE為參比電極,以鉑絲電極為對(duì)電極,在電位為0.3~0.6 V進(jìn)行CV、方波伏安法(SWV)掃描,記錄峰電流Ip和峰電位Ep。

2 結(jié)果與討論

2.1 ρ(Ni2＋-AI3＋-LDHs)的確定

考察滴涂不同ρ(Ni2＋-Al3＋-LDHs)對(duì)修飾電極性能的影響,見圖1。

圖1 不同ρ(Ni2＋-AI3＋-LDHs)修飾GCE電極的CV圖

由圖1可知,ρ(Ni2＋-Al3＋-LDHs)＝0.5 mg/L,峰電流Ip最大,峰型最好,因此選擇ρ(Ni2＋-Al3＋-LDHs)＝0.5 mg/L溶液滴涂在GCE上制備Ni2＋-Al3＋-LDHs/GCE修飾電極。

2.2 Ni2＋-AI3＋-LDHs/GCE電化學(xué)性能表征

以Ni2＋-Al3＋-LDHs/GCE修 飾 電 極、GCE電極為工作電極,于5 mmol/L K3[Fe(CN)6]＋0.1 mol/L KCl溶液中進(jìn)行CV和EIS掃描,見圖2。

圖2 2種電極在電解池溶液中的CV及EIS圖

由圖2a可知,K3[Fe(CN)6]探針分子在2種電極上,均出現(xiàn)了一對(duì)氧化還原峰,對(duì)于Ni2＋-Al3＋-LDHs/GCE修飾電極,探針分子還原峰電位Epc＝0.292 V,氧化峰電位Epa＝0.361 V,峰電位差ΔEp＝0.069 V。較裸電極GCE峰電位差ΔEp減小,峰電流Ipa、Ipc顯著增大,峰型更加靈敏尖 銳。說 明Ni2＋-Al3＋-LDHs/GCE修 飾 電 極比GCE電極性能好。由圖2b可知,GCE電極的阻抗曲線基本為一條直線,表明GCE電極具有較大的阻抗,阻礙電子的轉(zhuǎn)移。Ni2＋-Al3＋-LDHs/GCE修飾電極的阻抗曲線中出現(xiàn)完整的圓弧,說明GCE修飾Ni2＋-Al3＋-LDHs類水滑石以后,電阻減小,導(dǎo)電能力增強(qiáng),電荷轉(zhuǎn)移速率加快。這可能是由于Ni2＋-Al3＋-LDHs中存在過渡金屬離子,該離子具有很好的導(dǎo)電性并與類水滑石特殊的層板結(jié)構(gòu)協(xié)同作用,使得修飾電極的表面積增大,電活性位點(diǎn)增多,因此增加了帶電粒子的導(dǎo)電性。同時(shí)也說明Ni2＋-Al3＋-LDHs類水滑石成功修飾在了玻碳電極表面,并且提高了修飾電極的電催化活性。

2.3 伏安法測(cè)定槲皮素參數(shù)的確定

c(槲皮素)＝2.0×10－6mol/L,改變SWV參數(shù),確定最佳測(cè)定條件,見圖3。

圖3 不同起點(diǎn)電位、振幅及頻率下的SWV圖

由圖3可知,電位為0.3~0.65 V,起點(diǎn)電位為0.6 V、振幅為0.25 V、頻率為20 Hz時(shí),峰電流Ip達(dá)到最大。

不同富集時(shí)間下的CV曲線,見圖4。

圖4 不同富集時(shí)間下的CV曲線

由圖4可知,富集時(shí)間30 s,峰電流Ip達(dá)到最大。因此確定的最佳實(shí)驗(yàn)參數(shù)為電位0.3~0.65 V,起點(diǎn)電位0.6 V,振幅0.25 V,測(cè)定頻率20 Hz,富集時(shí)間30 s。

2.4 電極的重現(xiàn)性及穩(wěn)定性

用8支 不 同 批 次 的Ni2＋-Al3＋-LDHs/GCE修飾電極測(cè)定同一濃度的槲皮素溶液,同時(shí)為了考察Ni2＋-Al3＋-LDHs/GCE對(duì) 槲 皮 素 氧 化 的 穩(wěn)定性,同一支修飾電極以30 min為間隔測(cè)試10次,見圖5。

由圖5a可知,測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.4%,說明電極有良好的重現(xiàn)性;由圖5b可知,測(cè)得其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.1%,表明Ni2＋-Al3＋-LDHs/GCE電極具有較好的穩(wěn)定性。

圖5 不同批次電極、時(shí)間下測(cè)定的槲皮素的CV圖

3 結(jié) 論

(1)用滴涂法制備了Ni2＋-Al3＋-LDHs/GCE電極 且 確 定 了 最 佳ρ(Ni2＋-Al3＋-LDHs)＝0.5 mg/L。采用CV和SWV確定了制備該電極的最佳參數(shù)為電位0.3~0.65 V,起點(diǎn)電位0.6 V,富集時(shí)間30 s,測(cè)定頻率20 Hz,振幅0.25 V;

(2)制 備 的Ni2＋-Al3＋-LDHs/GCE電 極 與 未修飾的玻碳電極相比,修飾電極的電催化性能明顯增加。測(cè)得修飾電極重現(xiàn)性及穩(wěn)定性的相對(duì)偏差低,分別為3.4%及1.1%,說明電極可穩(wěn)定存在;

(3)該研究為抗腫瘤藥物槲皮素的衡量測(cè)定提供了新的思路和方法。