鄭旭杰 董 悅 潘哲拓

阿爾茨海默癥（AD）臨床癥狀表現(xiàn)為認(rèn)知障礙、言語(yǔ)障礙及情感淡漠等[1]。研究發(fā)現(xiàn)，AD 患者認(rèn)知功能損害多與神經(jīng)內(nèi)分泌、神經(jīng)變性及炎性損傷有關(guān)[2]。趨化因子C-X-C 基序配體12（CXCL12）與各類腦血管疾病的進(jìn)展有密切關(guān)系[3]。脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2（Lp-PLA2）對(duì)腦損傷認(rèn)知功能有一定調(diào)節(jié)作用[4]。目前關(guān)于血清CXCL12、Lp-PLA2 表達(dá)水平與AD 患者認(rèn)知功能的關(guān)系研究鮮有報(bào)道。本研究通過(guò)檢測(cè)AD患者血清CXCL12、Lp-PLA2 的表達(dá)水平，探討其與AD 患者認(rèn)知功能損害的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 以2018 年12 月至2020 年12 月溫州醫(yī)科大學(xué)附屬康寧醫(yī)院精神科收治的80 例AD患者為研究對(duì)象（病例組），選擇同期在醫(yī)院體檢中心體檢的60 名健康者作為對(duì)照組。病例組：男42例，女38 例；年齡64～87（70.12±4.65）歲。對(duì)照組：男31 例，女29 例；年齡65～84（69.57±5.61）歲。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核通過(guò)（倫理批件編號(hào)：2020KY121）。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）診斷均符合《2018 中國(guó)癡呆與認(rèn)知障礙診治指南（二）：阿爾茨海默病診治指南》[5]中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)；（2）頭顱CT 或MRI 檢查顯示腦萎縮；（3）認(rèn)知功能障礙和日常生活能力降低病程≥6 個(gè)月；（4）患者家屬均知情同意并簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）由其他疾病引起的認(rèn)知功能障礙者；（2）合并心、肝、腎等器官功能障礙及嚴(yán)重軀體疾病者；（3）合并嚴(yán)重的血液系統(tǒng)及自身免疫系統(tǒng)疾病者；（4）患有惡性腫瘤及感染性疾病者；（5）主動(dòng)放棄治療或轉(zhuǎn)院者。

1.3 方 法

1.3.1 治療方法 參照《2018 中國(guó)癡呆與認(rèn)知障礙診治指南（二）：阿爾茨海默病診治指南》給予患者膽堿酯酶抑制劑治療，治療無(wú)效或因不良反應(yīng)不能耐受時(shí)可調(diào)換其他膽堿酯酶抑制劑或換作貼劑進(jìn)行治療，治療過(guò)程中嚴(yán)密觀察患者可能出現(xiàn)的不良反應(yīng)。

1.3.2 血清CXCL12、Lp-PLA2 水平檢測(cè) 采集所有受試者晨起空腹靜脈血3 mL，置于乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA）抗凝管中，靜置30 min，以3000 r/min 離心10 min（離心半徑為13 cm），收集上層血清，保存于-80 ℃冰箱內(nèi)待測(cè)。使用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法分別測(cè)定兩組血清CXCL12、Lp-PLA2 水平。研究所用試劑盒均由上海酶聯(lián)生物科技有限公司提供，所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒使用說(shuō)明書進(jìn)行。

1.3.3 分組方法[6]使用臨床癡呆量表（CDR）評(píng)估患者認(rèn)知功能，包括記憶力、判斷和解決問(wèn)題能力、社會(huì)事務(wù)、家庭生活業(yè)余愛(ài)好和個(gè)人照料6 個(gè)項(xiàng)目，得分與認(rèn)知功能損害程度呈反比。其中輕度組CDR評(píng)分≤1 分（45 例），中重度組CDR 評(píng)分為2～3 分（35 例）。

1.3.4 影響AD 患者認(rèn)知功能的相關(guān)資料收集 包括[性別、年齡、體質(zhì)指數(shù)（BMI）、病程、文化程度、婚姻狀況、既往史（家族史、吸煙史、飲酒史、腦卒中史、高血壓史、糖尿病史、頭部創(chuàng)傷史）、獨(dú)居、體育活動(dòng)少（1 周運(yùn)動(dòng)次數(shù)＜3 次，每次時(shí)間＜30 min）、社交活動(dòng)少（1 周與人交談次數(shù)＜3 次）、負(fù)性生活事件多[漢密爾頓焦慮量表（HAMA）評(píng)分為2～4 分]、入院時(shí)蒙特利爾認(rèn)知評(píng)估量表（MoCA）評(píng)分、簡(jiǎn)易精神狀態(tài)量表（MMSE）評(píng)分]、既往降壓藥服用情況（他汀類藥物、阿司匹林）及入院24 h 內(nèi)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)[低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDLC）、三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、總膽紅素（TBIL）、肌酐（Cre）、血小板（PLT）、空腹血糖（FBG）、空腹胰島素（FINS）、血清白蛋白（ALB）、全血白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、血清總蛋白（TP）、超敏C-反應(yīng)蛋白（hs-CRP）]及血清CXCL12、Lp-PLA2。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 25.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。符合正態(tài)分布計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。采用多因素Logistic 回歸分析影響AD 患者認(rèn)知功能的相關(guān)因素；采用Spearman 相關(guān)性法分析血清CXCL12、Lp-PLA2水平與影響AD 患者認(rèn)知功能相關(guān)因素的關(guān)系；繪制受試者工作特征曲線（ROC）分析血清CXCL12、Lp-PLA2 水平對(duì)AD 患者認(rèn)知功能損害的預(yù)測(cè)價(jià)值。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病例組與對(duì)照組血清CXCL12、Lp-PLA2 水平比較 病例組患者血清CXCL12、Lp-PLA2 水平均高于對(duì)照組（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 病例組與對(duì)照組血清CXCL12、Lp-PLA2 水平比較（）

表1 病例組與對(duì)照組血清CXCL12、Lp-PLA2 水平比較（）

注：病例組為阿爾茨海默癥患者；對(duì)照組為健康者；CXCL12 為趨化因子C-X-C 基序配體12；Lp-PLA2 為脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2

2.2 影響AD 患者認(rèn)知功能的單因素分析 中重度組獨(dú)居、社交活動(dòng)少、負(fù)性生活事件多占比、入院時(shí)MMSE 評(píng)分、血清CXCL12、Lp-PLA2 水平均高于輕度組（P＜0.05）；中重度組入院時(shí)MoCA 評(píng)分低于輕度組（P＜0.05）；兩組性別、年齡、BMI、病程、文化程度、婚姻狀況、既往史、體育活動(dòng)少、既往降壓藥服用情況、LDL-C、HDL-C、TG、TC、TBIL、Cre、PLT、FBG、FINS、ALB、WBC、TP、hs-CRP 比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表2。

表2 影響AD 患者認(rèn)知功能的單因素分析

2.3 影響AD 患者認(rèn)知功能的多因素Logistic 回歸分析 將AD 患者認(rèn)知功能損害情況作為因變量（Y），將單因素分析有差異指標(biāo)獨(dú)居、社交活動(dòng)少、負(fù)性生活事件多、入院時(shí)MoCA 評(píng)分、入院時(shí)MMSE 評(píng)分、血清CXCL12、Lp-PLA2 水平作為自變量（X），進(jìn)行Logistic 回歸分析賦值，賦值結(jié)果見(jiàn)表3。經(jīng)Logistic 回歸分析，結(jié)果顯示，獨(dú)居、社交活動(dòng)少、負(fù)性生活事件多、血清CXCL12、Lp-PLA2 水平均是影響AD患者認(rèn)知功能的相關(guān)因素（P＜0.05）。見(jiàn)表4。

表3 Logistic 回歸分析法賦值

表4 影響AD 患者認(rèn)知功能的多因素Logistic 回歸分析

2.4 血清CXCL12、Lp-PLA2 水平與影響AD 患者認(rèn)知功能的相關(guān)因素的關(guān)系 血清CXCL12 與獨(dú)居、社交活動(dòng)少、負(fù)性生活事件多、Lp-PLA2 均呈正相關(guān)（r=0.356、0.361、0.422、0.425，P 均＜0.05）；血清Lp-PLA2 與獨(dú)居、社交活動(dòng)少、負(fù)性生活事件多均呈正相關(guān)（r=0.347、0.363、0.431，P 均＜0.05）。見(jiàn)表5。

表5 血清CXCL12、Lp-PLA2 水平與影響AD 患者認(rèn)知功能的相關(guān)因素的關(guān)系

2.5 血清CXCL12、Lp-PLA2 水平對(duì)AD 患者認(rèn)知功能損害的預(yù)測(cè)價(jià)值 血清CXCL12、Lp-PLA2 預(yù)測(cè)AD 患者認(rèn)知功能損害的最佳截?cái)帱c(diǎn)分別為1.85μg/mL、28.88 μg/L，ROC 曲線下面積（the area under the ROC curve，AUC）分別為0.786（95%CI：0.688～0.892）、0.779（95%CI：0.687～0.875），敏感度分別為85.71%（30/35）、80.00%（28/35），特異度分別為73.33%（33/45）、71.11%（32/45），二者聯(lián)合檢測(cè)的AUC 為0.848（95%CI：0.759～0.951），敏感度和特異度分別為77.14%（27/35）、80.00%（36/45）。見(jiàn)圖1。

圖1 血清CXCL12、Lp-PLA2 水平預(yù)測(cè)AD 患者認(rèn)知功能損害的ROC 曲線

3 討論

當(dāng)AD 患者腦內(nèi)老年斑核心成分β 淀粉樣蛋白在細(xì)胞基質(zhì)沉淀聚集后，會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的神經(jīng)毒性作用，使周邊神經(jīng)元變性和壞死，進(jìn)而影響大腦皮層、海馬、杏仁核、基地前腦膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)及腦干單胺類神經(jīng)核團(tuán)，損害患者認(rèn)知功能[7]。本研究結(jié)果顯示，病例組患者血清CXCL12、Lp-PLA2 水平均高于對(duì)照組，提示血清CXCL12、Lp-PLA2 水平在AD 患者中呈異常表達(dá)。一旦局部腦組織出現(xiàn)缺氧、缺血，血管內(nèi)皮細(xì)胞就會(huì)大量合成并釋放CXCL12，導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)CXCL12 含量升高[8]。Shen 等[9]發(fā)現(xiàn)，腦出血患者血清CXCL12 濃度顯著增加，該指標(biāo)在一定程度上可反映出血性腦卒中的嚴(yán)重程度及預(yù)后情況。Lp-PLA2 通過(guò)氧化低密度脂蛋白產(chǎn)生大量的溶血卵磷脂和游離氧化脂肪酸，促進(jìn)各種炎癥因子產(chǎn)生強(qiáng)性致炎物質(zhì)，大腦中的小膠質(zhì)細(xì)胞和血液中的巨噬細(xì)胞受到炎癥刺刺激會(huì)釋放出較多的促炎細(xì)胞因子，刺激局部產(chǎn)生更多的Lp-PLA2，使機(jī)體內(nèi)其水平顯著升高[10]。張錢林等[11]研究結(jié)果亦顯示，血管性癡呆患者血清Lp-PLA2 水平顯著高于非癡呆患者。本研究結(jié)果與上述文獻(xiàn)研究結(jié)果具有同質(zhì)性，提示在相關(guān)疾病的研究中可重點(diǎn)監(jiān)測(cè)血清CXCL12、Lp-PLA2 水平。

在本研究中，獨(dú)居、社交活動(dòng)少、負(fù)性生活事件多、血清CXCL12、Lp-PLA2 水平均是影響AD 患者認(rèn)知功能的相關(guān)因素，且血清CXCL12、Lp-PLA2 水平與獨(dú)居、社交活動(dòng)少、負(fù)性生活事件多因素均呈正相關(guān)，這與既往研究結(jié)果基本一致，表明血清CXCL12、Lp-PLA2 與AD 患者認(rèn)知功能損害程度具有一定關(guān)系[12-13]。當(dāng)血清CXCL12、Lp-PLA2 水平分別超過(guò)1.85 μg/mL、28.88 μg/L 時(shí)，預(yù)測(cè)AD 患者認(rèn)知功能損害的靈敏度分別為85.71%、80.00%，二者聯(lián)合檢測(cè)時(shí)，其特異度可提高至80.00%，再次表明血清CXCL12、Lp-PLA2 參與AD 患者認(rèn)知功能損害過(guò)程。CXCL12 作為一類具有趨化活性的細(xì)胞因子，當(dāng)局部腦組織缺氧、缺血時(shí)，其會(huì)與其受體CXCR4 特異性結(jié)合，通過(guò)破壞血腦屏障誘導(dǎo)炎癥因子向缺血損傷部位聚集，參與神經(jīng)炎癥反應(yīng)過(guò)程，影響患者認(rèn)知功能[14]。Lp-PLA2 作為一種血管特異性炎癥酶，可與低密度脂蛋白膽固醇結(jié)合形成炎癥信號(hào)傳導(dǎo)通路，導(dǎo)致血管損傷，使神經(jīng)元因缺血而發(fā)生壞死，最終導(dǎo)致大腦因結(jié)構(gòu)和功能改變而出現(xiàn)認(rèn)知功能異常[15]。

綜上所述，血清CXCL12、Lp-PLA2 在AD 患者中呈現(xiàn)異常表達(dá)，二者均與患者的認(rèn)知功能損害具有一定關(guān)系，并對(duì)患者認(rèn)知功能損害程度有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值。