鴨坦布蘇病毒（Duck Tembusu virus，DTMUV）是黃病毒科黃病毒屬的新成員，主要引起蛋鴨的產蛋量急劇下降以及雛鴨的病毒性腦炎，感染鴨群發(fā)病率最高可達100%，死亡率為5%～20%。鴨坦布蘇病毒病于2010 年在我國福建、浙江等地區(qū)的鴨群中首次暴發(fā)，隨后迅速蔓延至我國大部分水禽養(yǎng)殖地區(qū)，給我國水禽產業(yè)造成了嚴重的經濟損失。DTMUV 侵入宿主細胞后，其復制過程中生成的雙鏈RNA 中間體等成分被RLR 等模式識別受體識別，引起宿主天然免疫反應。然而，DTMUV 如何逃逸宿主天然免疫反應，從而實現(xiàn)感染并致病，其機制尚不完全清楚。

近期發(fā)表于《Journal of Virology》的研究論文，研究發(fā)現(xiàn)了DTMUV 編碼的非結構蛋白NS2B 能夠顯著抑制I 型IFN 的表達，并詳細闡明了NS2B 蛋白通過降解MAVS 拮抗RLR 信號通路的分子機制。作者首先發(fā)現(xiàn)DTMUV 感染顯著抑制了poly（I:C）、SeV 誘導的IFN-α/β 和ZAP、PKR、MX 等ISG 的表達，表明DTMUV 可以拮抗I 型IFN 的產生。利用雙熒光素酶報告系統(tǒng)對DTMUV 的編碼蛋白進行篩選，發(fā)現(xiàn)DTMUV 編碼的非結構蛋白NS2B 抑制IFN-β 和IRF7 啟動子活性的效果最為顯著。通過對鴨RLR 信號通路的關鍵信號分子進行篩選，作者發(fā)現(xiàn)NS2B 通過靶向鴨MAVS 抑制I 型IFN 的產生。利用免疫共沉淀和免疫熒光共定位技術，作者發(fā)現(xiàn)NS2B 與鴨MAVS 存在相互作用，且二者共定位于線粒體。深入研究發(fā)現(xiàn)NS2B 顯著下調鴨MAVS 蛋白表達，卻不影響其mRNA 的表達，而蛋白酶體抑制劑MG132 處理后顯著回復了鴨MAVS 的表達，表明NS2B 通過泛素-蛋白酶體途徑降解鴨MAVS。作者進一步研究發(fā)現(xiàn)NS2B 可以促進鴨MAVS 發(fā)生K48 類型的泛素化修飾，并確定了其發(fā)生泛素化修飾的位點為K321、K354、K398 和K411，而這些位點也與NS2B 拮抗鴨MAVS 介導的天然免疫反應密切相關。由于黃病毒編碼的NS2B 不具有E3 泛素連接酶的活性，作者推測它可能作為支架來招募宿主的E3 泛素連接酶，泛素化鴨MAVS。采用免疫共沉淀實驗對多個鴨的E3 泛素連接酶進行篩選，發(fā)現(xiàn)E3 泛素連接酶MARCH5 和NDFIP1 與NS2B 存在相互作用，而只有MARCH5 能促進鴨MAVS的泛素化和降解。進一步研究表明，沉默MARCH5 后可顯著回復DTMUV 對鴨MAVS 的降解，也抑制了DTMUV的增殖；而過表達MARCH5則顯著促進了DTMUV的復制。

綜上所述，該研究發(fā)現(xiàn)DTMUV 編碼的非結構蛋白NS2B 通過招募E3 泛素連接酶MARCH5 促進鴨MAVS 發(fā)生K48 的泛素化，導致了鴨MAVS 的蛋白酶體降解，從而抑制了RLR 介導的I 型IFN 產生。該研究結果系統(tǒng)解析了DTMUV 編碼的NS2B 蛋白拮抗鴨天然免疫反應的分子機制，對闡明DTMUV 的免疫逃逸和致病機制具有十分重要的價值，同時也為DTMUV疫苗的研發(fā)和藥物靶標的篩選提供了理論依據。