盧騰娟
鹿寨縣人民醫(yī)院 廣西 柳州 545600
丙型肝炎(丙肝)是一種由丙型肝炎病毒引起的急性和慢性傳染病,人群普遍易感,且以丙型肝炎病毒陽性的人為主要傳染源,該病是一類嚴重危害人類健康的肝臟傳染病,且丙肝的傳播途徑較多,如血液、母嬰、性行為、器官移植等,然而因丙肝較乙肝的發(fā)病率低,人們對丙肝的重視度不夠[1]。丙型肝炎具有慢性化程度高、起病隱匿、傳播途徑明確的特點,HCV感染會造成肝纖維化和慢性炎癥壞死,少數(shù)情況會發(fā)展為肝細胞癌或肝硬化,對患者生命健康產(chǎn)生威脅[2]。因此應加強對丙肝的重視,盡早診斷并給予治療,以防疾病的惡性發(fā)展。目前臨床中暫無特效疫苗,主要進行抗病毒治療,具有較高的病毒清除率,因此,對丙肝進行準確檢驗并盡早治療對維護患者健康十分重要。本文通過對丙肝病毒生物學特性、流行病發(fā)展現(xiàn)狀、臨床檢驗技術及效果等進行論述,詳細內(nèi)容如下。
HCV是引起丙型肝炎的病原體,丙肝的形成與HCV病原的部分生物學特性存在一定關聯(lián)。HCV是RNA病毒,基因組是單股正鏈的RNA,可將其分為5'非編碼區(qū)、編碼區(qū)及3'非編碼區(qū),且由于HCV具有的高度變異性會對HCV的基因型產(chǎn)生影響,從而形成不同的基因型及基因亞型[3]。黃超群等[4]學者、戴俊斌等[5]學者通過進行不同地區(qū)的HCV基因特征分析研究,發(fā)現(xiàn)HCV基因分型具有明顯的地域性,且HCV不同基因型與抗病毒治療效果有密切的關聯(lián),會對抗病毒治療的應答、疾病轉歸等產(chǎn)生重要影響。
目前丙型肝炎病毒感染已呈現(xiàn)世界性分布,嚴重影響人們的健康,且隨著HCV感染情況的加重,會誘發(fā)慢性肝炎、肝硬化、肝癌等不良后果,因此對丙型肝炎進行早診斷、早預防顯得十分重要。丙肝在全世界流行,且不同國家及地域的流行狀況存在一定差異。相關研究資料表明,通過對捷克共和國的3000名成年人群進行血清檢測,發(fā)現(xiàn)標本中陽性率為1.67%、HCV RNA陽性率為0.93%,且經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)男性的陽性率明顯高于女性,另外在不同年齡段的陽性率也存在明顯區(qū)別[6]。另外吳護華[7]學者研究發(fā)現(xiàn)在美國與歐洲供血者中抗-HCV流行率低,約為0.047%-1.2%。
賈艷艷等[8]學者研究表明,我國丙型肝炎約占輸血后肝炎的60%-80%,丙型肝炎的感染率僅次于乙型肝炎。相關研究調查分析發(fā)現(xiàn),我國2004-2012年丙型肝炎發(fā)病率均呈逐年上升趨勢,發(fā)病率由3.03/10萬上升至14.96/10萬,可見丙型肝炎在我國具有較高的增長率,同時研究表明丙型肝炎無明顯季節(jié)性,但在我國有明顯的地區(qū)差異,且隨著年齡增加發(fā)病率呈現(xiàn)升高趨勢[9]。
目前丙肝的實驗室診斷主要有酶聯(lián)免疫吸附法、膠體金免疫層析法、逆轉錄聚合酶鏈反應法等,能夠通過對HCV抗體、RNA進行檢查,從而做出疾病診斷,因此就常見的檢驗方法及原理作出以下分析。
該方式是酶免疫測定技術中應用最廣的技術,主要是通過將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使抗體抗原反應在固相載體表面進行,并利用洗滌法將液相中的游離成分洗滌,最終酶作用于底物后會出現(xiàn)相應的顯色反應,從而輔助進行結果判斷,且顯色顏色的深淺與標本中相應抗體或抗原的量之間成正比。
ELISA檢測主要通過相應的試劑盒進行,有研究表明,采用試劑盒檢測的效果較優(yōu),且該檢驗方式對于免疫功能正常的丙型肝炎病毒-RNA陽性感染患者來說,具有高于99%的抗丙型肝炎病毒檢出率,因此在臨床中的應用較多。ELISA檢測法具有價格低廉、檢測方便、敏感度高、標記物來源豐富、無放射性污染等優(yōu)點,在檢驗診斷丙型肝炎中有重要作用[10]。但該檢驗方式仍存在局限性,受多種因素的影響可能出現(xiàn)假陽性的結果,影響臨床診斷及后期治療,因此應對相關風險因素進行規(guī)避,保證檢驗效果的準確性。陳連旺[11]學者在研究中指出,由于受到檢測設備及試劑的多樣化、規(guī)?;纫蛩氐挠绊?,不同生產(chǎn)廠家的試劑對同一項目的檢測結果也可能會出現(xiàn)偏差情況,從而導致實驗室各種血清指標的檢測結果存在一定差異。曾艷華等[12]學者針對上述問題展開不同試劑對檢測結果的影響研究,發(fā)現(xiàn)不同檢測系統(tǒng)在檢驗丙型肝炎中不存在明顯的差異,對于疾病的診斷均有重要價值,但定性試驗中Cut-off值存在一定差異,主要與不同試劑和有關,因此造成檢驗結果的差異。
臨床中關于ELISA檢驗丙型肝炎抗體的研究較多,其中余燕兒等[13]學者對ELISA檢測的可行性進行研究發(fā)現(xiàn),應用ELISA檢驗法能夠獲得較為理想的丙型肝炎抗體檢測結果,對于提高丙型肝炎診斷準確性有重要作用,且對患者后期臨床治療有積極效果。
化學發(fā)光酶免疫分析法是一種標記抗體與被測抗原同時與包被抗體結合的反應形式,主要是通過利用磁性微珠被磁場吸引的原理,在磁場作用下能夠發(fā)生力學移動,從而迅速捕捉到被測抗原。在進行丙型肝炎病毒檢測時,血清標本中的抗原與磁性抗體形成復合物,在磁力作用下快速進行復合物及其他非特異性物質的分離效果,再經(jīng)洗滌去掉未結合的抗體后加入發(fā)光底物,最終各類光子能量被計算機捕捉記錄并進行分析,從而獲取標本中的抗體含量?;瘜W發(fā)光酶免疫分析法雖與ELISA檢測法存在一定的相似性,但前者檢測中所用的包被載體為具有更大表面積的磁性顆粒,能夠在磁力作用下快速下沉,從而便于洗滌和分離,有利于縮短反應周期且有效提高了分離效果,使得最大光信號峰值的時間更短,檢測靈敏度更高,因此在檢測丙型肝炎中具有重要作用[14]。
化學發(fā)光酶免疫法是利用化學發(fā)光劑直接標記抗原或抗體,通過啟動發(fā)光實際作用而發(fā)光,該方式具有反應簡單、快速、無需催化劑的優(yōu)點。劉天堯[15]研究通過對110例丙型肝炎病毒抗體的患者進行化學發(fā)光酶免疫分析法及酶聯(lián)免疫吸附法,對比發(fā)現(xiàn)前者檢測陽性率明顯高于后者,且前者對相關抗體檢測的結果明顯高于后者,結果可知上述兩種檢測方法在進行丙型肝炎病毒初篩檢測時的效果無明顯差異,但比較發(fā)現(xiàn)酶聯(lián)免疫吸附法的特異性較好,而化學發(fā)光酶免疫分析法的靈敏度較高。
膠體金免疫層析法作為一種新式檢驗,具有操作簡便、觀察直觀、不需要特殊設備、經(jīng)濟、檢測時間短的優(yōu)點,該方式主要是通過將膠體金作為標志物,依據(jù)層析作用來進行抗原、抗體反應的檢測,目前在臨床中應用較廣,能夠對丙型肝炎病毒抗體進行有效篩查,從而為疾病診斷提供準確的依據(jù)。有關研究通過對比膠體金免疫層析法與酶免疫吸附法,兩種方式的檢測結果及時間比較發(fā)現(xiàn),兩組在丙型肝炎病毒抗體的檢出率上無明顯差異,但膠體金免疫層析法的檢測時間較酶免疫吸附法短,可見兩種檢測方式均對丙型肝炎病毒有較優(yōu)的檢出率,臨床中可根據(jù)實際情況選擇相應的檢測方式,對于標本量大、有時間要求的情況可優(yōu)先選擇膠體金免疫層析法,能夠迅速、準確的進行疾病篩查[16]。
丙型肝炎在我國具有較高的發(fā)生率,且疾病可經(jīng)血液、母嬰等方式進行傳播,加之丙型肝炎的臨床癥狀并不明顯,患病后人們不容易發(fā)現(xiàn),因此對丙型肝炎的關注度明顯低于乙型肝炎,因此對丙型肝炎的篩查及診斷不重視,隨著病毒不斷加重對人體的損害,會導致其他相關嚴重后果,威脅人們的健康及安全,因此應預防性地進行疾病臨床檢驗,可及時發(fā)現(xiàn)疾病并盡早展開治療,從而獲得較優(yōu)的預后。臨床檢驗的方式較多,均能夠對丙型肝炎病毒進行有效的篩查,但各類方式存在一定的局限性或不足,因此在進行臨床檢驗時需嚴格按照規(guī)范操作進行,根據(jù)檢驗時的實際情況選擇檢驗方式,規(guī)避其他因素對檢驗結果造成的影響。另外可選擇進行聯(lián)合檢驗,能夠彌補檢驗中的局限性,從而提升檢驗的準確性,對患者及臨床工作均有積極意義。