李蘭竹，莫燕麗，陳書俞，潘嘉欣，徐林新，劉建浩

（1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)研究生院，廣東廣州 510006；2.三亞市中醫(yī)院，海南三亞 572000）

急性腦梗死（acute cerebral infarction），是指因腦部血流灌注障礙導(dǎo)致腦部供血供氧不足，引發(fā)局限性腦組織缺血性壞死或軟化[1]。腦梗死后繼發(fā)遠(yuǎn)隔功能障礙多伴隨皮層擴(kuò)散性抑制（cortical spreading depression，CSD），CSD引起細(xì)胞內(nèi)外離子環(huán)境的改變進(jìn)而抑制神經(jīng)元的自發(fā)活動(dòng)，表現(xiàn)為腦電信號減弱和刺激引起的遠(yuǎn)隔部位缺乏響應(yīng)[2]，最終導(dǎo)致遠(yuǎn)離梗死灶、非受損腦供血區(qū)發(fā)生繼發(fā)性損害的現(xiàn)象[3]。海馬CA1區(qū)為急性腦梗死后遠(yuǎn)隔功能障礙發(fā)生的主要病灶，該區(qū)神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞（astrocytes）對缺血缺氧傷害極為敏感，占急性腦梗死后遠(yuǎn)隔區(qū)受損靶細(xì)胞的78%～86%[4]。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，電針?biāo)疁涎赏ㄟ^調(diào)控星形膠質(zhì)細(xì)胞活性有效保護(hù)急性腦梗死大鼠神經(jīng)功能[5]。本研究構(gòu)建了大腦中動(dòng)脈閉塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）伴隨CSD大鼠模型，進(jìn)一步觀察電針?biāo)疁涎▽Υ笫蠹毙阅X梗死后遠(yuǎn)隔部位繼發(fā)性損傷的治療作用及機(jī)制，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 60只SPF級健康成年雄性SD大鼠，體質(zhì)量（250±30）g，由上海中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物許可證號：SCXK（滬）2018-0004。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過程均依照我國科技部2006年頒發(fā)的《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見》進(jìn)行。

1.2 主要試劑與儀器 末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記（TUNEL）檢測試劑盒（上海翊圣生物科技有限公司）；兔抗膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）抗體、兔抗單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)體1（MCT1）抗體（中國Bioworld公司）；兔抗β-actin抗體（美國Cell Signaling Technology公司）；山 羊 抗 兔IgG H&L（FITC）（美國Abcam公司）；Na+-K+-ATP酶酶聯(lián)免疫吸附分析（ELISA）試劑盒、蛋白定量試劑盒（考馬斯亮藍(lán)法）、蘇木素染液（上海代軒生物科技有限公司）。華佗牌一次性無菌針灸針（0.25 mm×13 mm，蘇州醫(yī)療用品廠有限公司）；HANS-200E韓氏穴位神經(jīng)刺激儀（南京濟(jì)生醫(yī)療科技有限公司）；Mini-14k微型高速離心機(jī)（常州邁科諾儀器有限公司）；倒置熒光顯微鏡、成像系統(tǒng)（日本尼康公司）；Amersham Imager 600化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)（美國GE Healthcare公司）。

1.3 造模方法

1.3.1 構(gòu)建MCAO大鼠模型 參照改良Zea Longa法[6]。將大鼠麻醉后仰臥位固定于手術(shù)臺上消毒，沿頸前正中線切開皮膚及皮下筋膜，沿胸鎖乳突肌內(nèi)緣鈍性分離肌肉，分離右側(cè)頸總動(dòng)脈（CCA）、頸外動(dòng)脈（ECA）和頸內(nèi)動(dòng)脈（ICA），在CCA及ECA下分別穿絲線備用。結(jié)扎CCA近心端和ECA，用小動(dòng)脈夾暫時(shí)夾閉ICA，然后在距CCA分叉處3 mm的ECA上剪一“V”字形小口，將栓線插入ICA，將繞在CCA遠(yuǎn)心端的細(xì)線輕輕地系牢栓線。用眼科鑷輕推栓線感覺有阻力時(shí)停止進(jìn)線，進(jìn)線距離血管分叉處18～22 mm，將血管松到初始的狀態(tài)，確保線栓標(biāo)記點(diǎn)相對于血管分叉處沒有變化，緊緊系牢ECA遠(yuǎn)心端的細(xì)線。大鼠麻醉蘇醒后若出現(xiàn)同側(cè)Horner征及對側(cè)前肢為主的偏癱則表示造模成功。

1.3.2 構(gòu)建MCAO伴CSD大鼠模型 將MCAO大鼠置于立體定位儀上，在左側(cè)額骨鉆一直徑約3 mm的小孔為誘導(dǎo)CSD窗口（位于左側(cè)半球的軀體感覺皮層區(qū)，在成像窗口之外），以此為E1點(diǎn)（前囟前1～3 mm、中線旁2～4 mm），保持硬腦膜的完整。將一小張浸潤有5 mol/L KCl溶液的濾紙敷于小孔上，每20 min更換一次濾紙，持續(xù)2 h。采用機(jī)械針刺的方式誘導(dǎo)產(chǎn)生CSD，針刺時(shí)盡可能避開血管，以海馬CA1區(qū)（AP-3.3 mm，ML 2.2 mm，DV 3.0 mm）為E2點(diǎn)。針尖進(jìn)入持續(xù)2 s后拿出，此誘導(dǎo)方式可以保證只產(chǎn)生單波CSD[7]。銀球電極放置于軀體感覺皮層的E1處和于海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)的E2處，分別記錄下2個(gè)位點(diǎn)在CSD傳播過程中的胞外直流電位（direct current，DC）和腦電信號（electrocorticogram，ECoG）。E1電極記錄到的DC電位負(fù)向翻轉(zhuǎn)和ECoG腦電活動(dòng)的抑制先于E2電極，證明了CSD的擴(kuò)散性去極化和擴(kuò)散性抑制過程形成，表示MCAO伴CSD大鼠模型造模成功[8]。同時(shí)用Ag-AgCl電極記錄左側(cè)海馬CA1區(qū)的電位變化，另一個(gè)Ag-AgCl電極放置于頸部皮下作為參考電極。CSD電位的監(jiān)測和記錄采用生物信號采集分析系統(tǒng)（MS4000U system美國）收集，實(shí)驗(yàn)過程保持環(huán)境穩(wěn)定安靜，待基線穩(wěn)定后連續(xù)監(jiān)測記錄相應(yīng)時(shí)長，其余各組在相應(yīng)時(shí)間段均進(jìn)行電生理學(xué)記錄。數(shù)字化后的變量數(shù)據(jù)記錄存儲于相連的裝有模數(shù)轉(zhuǎn)換器的資料采集程序。

1.4 分組 將60只大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、MCAO組、MCAO+CSD組、電針組，每組又分為3個(gè)亞組，即造模后6 h、24 h、72 h，每個(gè)亞組5只大鼠。MCAO組大鼠構(gòu)建MCAO模型，MCAO+CSD組、電針組大鼠構(gòu)建MCAO伴CSD模型，假手術(shù)組大鼠只需將線栓插入10 mm左右，其余操作同MCAO大鼠模型制備。消毒后縫合皮膚，單籠飼養(yǎng)大鼠。

1.5 針刺方法 電針組：針刺治療于MCAO伴CSD模型造模成功后開始實(shí)施。操作者輕握固定大鼠，酒精棉球清潔鼻下，用0.5寸針灸針于水溝穴（唇裂鼻尖下1 mm正中）處[9]進(jìn)針，向上斜刺2 mm，并在該部位下約2 mm處刺入一針作為參考電極。針灸針連接韓氏穴位神經(jīng)刺激儀：選擇電針模式，水溝穴接電針儀負(fù)極，參考電極接正極，用5 Hz、20 mA、連續(xù)波電刺激持續(xù)30 min。分別于各亞組相應(yīng)時(shí)間治療1次。假手術(shù)組、MCAO組、MCAO+CSD組不予任何干預(yù)。

1.6 觀察指標(biāo)與方法

1.6.1 神經(jīng)功能缺失評分 參考Zea Longa評分法[6]，記錄大鼠神經(jīng)行為障礙評分：沒有神經(jīng)損傷癥狀，計(jì)0分；梗死對側(cè)前爪伸直困難，計(jì)1分；行走時(shí)向偏癱側(cè)轉(zhuǎn)圈，計(jì)2分；站立不穩(wěn)，行走時(shí)向偏癱側(cè)傾倒，計(jì)3分；意識喪失，不能自發(fā)行走，計(jì)4分。1～4分表示造模成功。

1.6.2 TUNEL染色法觀察海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡 各亞組處死大鼠，取出海馬組織，制備石蠟切片；石蠟切片60℃烘烤2 h，二甲苯脫蠟2次，每次15 min；下行乙醇溶液水合，室溫下蛋白酶K消化30 min，PBS漂洗3次，每次5 min；稍甩干后滴加破膜工作液覆蓋組織，常溫孵育20 min，PBS洗滌3次，每次5 min；暗濕盒中滴加TUNEL反應(yīng)液50μL 37℃孵育2 h，PBS漂洗；暗濕盒中滴加POD反應(yīng)液50μL 37℃孵育30 min，PBS漂洗；室溫下DAB顯色，PBS漂洗；蘇木素復(fù)染，溫水返藍(lán)；上行乙醇溶液脫水，二甲苯透明，封片。每只大鼠選1張切片，10×10倍熒光顯微鏡下定位腦梗死灶海馬CA1區(qū)陽性表達(dá)“熱點(diǎn)區(qū)”，10×20倍鏡下觀察不重疊5個(gè)視野并拍照。采用ImagePro Plus 6.0軟件進(jìn)行陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)，取5個(gè)視野下的均值。計(jì)算海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)，細(xì)胞凋亡指數(shù)（apoptotic index，AI）=陽性細(xì)胞總數(shù)/細(xì)胞總數(shù)×100%。

1.6.3 定磷法測定海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)Na+-K+-ATP酶活性 處死各亞組大鼠，于低溫環(huán)境下取海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)腦組織制成勻漿。嚴(yán)格按照試劑盒說明書要求進(jìn)行操作。用酶標(biāo)儀在660 nm波長處檢測OD值，計(jì)算Na+-K+-ATP酶活性。ATP酶活力＝{[（測定OD值-對照OD值）-（標(biāo)準(zhǔn)OD值-空白OD值）]標(biāo)準(zhǔn)品濃度×6×7.8}/待測樣本蛋白濃度。

1.6.4 免疫熒光標(biāo)記法檢測海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)MCT1/GFAP陽性共表達(dá)情況 處死各亞組大鼠，取海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)組織制備冰凍切片。將切下的腦片采用Tween 20-Tris緩沖鹽溶液漂洗2次，每次5 min；用5%山羊血清于37℃封閉1.5 h；分別加入一定比例稀釋的一抗MCT1（1∶1 000）、GFAP（1∶500），4℃孵育18 h，PBS液漂洗3次，每次10 min。以下步驟均避光：加入二抗山羊抗兔FITC-IgG（1∶1 000）37℃孵育2 h，DAPI復(fù)染5 min，PBS液漂洗3次，每次10 min；滴加抗熒光淬滅封片液，蓋玻片封片，4℃保存。隨機(jī)選取10個(gè)視野在熒光顯微鏡下觀察，使用ImagePro Plus 6.0軟件分析10個(gè)視野平均熒光強(qiáng)度觀察MCT1、GFAP共標(biāo)記陽性細(xì)胞表達(dá)情況。

1.7 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組間一個(gè)因素比較，經(jīng)正態(tài)分布檢驗(yàn)（One-Sample Kol-mogorov-Smirnov test，K-S檢驗(yàn)），符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)，再進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)。重復(fù)測量數(shù)據(jù)：若滿足球形對稱假設(shè)，進(jìn)行重復(fù)測量方差分析；若滿足齊性，多組間比較采用單因素方差分析（one-way ANOVA），組間兩兩比較采用LSD法。方差不齊，則應(yīng)用Tamhane’s T2方差分析。以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠不同時(shí)相神經(jīng)功能缺損評分比較 圖1結(jié)果顯示，由造模后評分可知，假手術(shù)組未出現(xiàn)神經(jīng)功能缺損，MCAO組、MCAO+CSD組、電針組大鼠造模后0、6、24、72 h時(shí)相神經(jīng)功能缺損評分均為1～3分，表明造模成功。各組治療后神經(jīng)行為學(xué)評分比較：與MCAO組同時(shí)相比較，MCAO+CSD組6 h時(shí)相神經(jīng)功能缺損評分明顯升高（P＜0.05），0、24、72 h時(shí)相差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；與MCAO+CSD組同時(shí)相比較，電針組6、24、72 h時(shí)相神經(jīng)功能缺損評分均明顯降低（P＜0.05）。

圖1 各組大鼠不同時(shí)相神經(jīng)功能缺損評分比較（±s）Figure 1 Comparison of neurologicaldeficit scores among various groups of rats in different phases（±s）

2.2 各組大鼠不同時(shí)相海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況比較 如圖2所示，TUNEL染色陽性產(chǎn)物主要表達(dá)在細(xì)胞核，呈棕黃色顆粒。熒光顯微鏡下可見，正常腦組織皮層神經(jīng)細(xì)胞核顯藍(lán)色，凋亡細(xì)胞核呈深淺不一的棕黃色，形態(tài)呈碎點(diǎn)狀，不規(guī)則，大小不一。假手術(shù)組少見陽性凋亡細(xì)胞，MCAO組、MCAO+CSD組凋亡細(xì)胞較多。圖3結(jié)果顯示：與假手術(shù)組比較，MCAO組、MCAO+CSD組、電針組大鼠在6、24、72 h時(shí)相的神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)均明顯升高（P＜0.05）；與MCAO組比較，MCAO+CSD組3個(gè)時(shí)相神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)均明顯升高（P＜0.05）；與MCAO+CSD組比較，電針組3個(gè)時(shí)相神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)均明顯降低（P＜0.05）。

圖2 各組大鼠不同時(shí)相海馬遠(yuǎn)隔區(qū)TUNEL陽性細(xì)胞分布情況Figure 2 The distribution of TUNEL-positive cells in the hippocampal distal region in various groups of rats in different phases

圖3 各組大鼠不同時(shí)相海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)比較Figure 3 Comparison of the apoptotic indices of neuronal cells in the distalCA1 region of the hippocampus among various groups of rats in different phases（±s）

2.3 各組大鼠不同時(shí)相海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)Na+-K+-ATP酶活性比較 圖4結(jié)果顯示：與假手術(shù)組比較，MCAO組、MCAO+CSD組6、24、72 h時(shí)相海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)Na+-K+-ATP酶活性均顯著降低（P＜0.05）；與MCAO組比較，MCAO+CSD組6、24 h時(shí)相Na+-K+-ATP酶活性顯著降低（P＜0.05），在72 h時(shí)相無顯著差異（P＞0.05）；與MCAO+CSD組比較，電針組6、24 h時(shí)相Na+-K+-ATP酶活性均顯著提高（P＜0.05），在72 h時(shí)相無顯著差異（P＞0.05）；電針組3個(gè)時(shí)相的Na+-K+-ATP酶活性與假手術(shù)組比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

圖4 各組大鼠不同時(shí)相海馬區(qū)遠(yuǎn)隔CA1區(qū)Na+-K+-ATP酶活性比較（定磷法）（±s）Figure 4 Comparison of the Na+-K+-ATPase activity in the distalCA1 region of the hippocampus among various groups of rats in different phases（determining phosphorus method）（±s）

2.4 各組大鼠不同時(shí)相海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)MCT1/GFAP共標(biāo)記表達(dá)情況比較 如圖5所示，應(yīng)用熒光共聚焦顯微鏡下觀察各組大鼠海馬CA1區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞的特異性標(biāo)記物MCT1、GFAP抗體共同陽性表達(dá)，以判斷電針?biāo)疁涎ㄊ欠裢瑫r(shí)在星形膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生效應(yīng)。熒光顯微鏡下可見，DAPI染色的星形膠質(zhì)細(xì)胞呈藍(lán)色熒光，目的細(xì)胞GFAP陽性表達(dá)經(jīng)雙染（Merge）后呈紅色熒光，MCT1呈藍(lán)綠色熒光，表明海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)內(nèi)有星形膠質(zhì)細(xì)胞MCT1/GFAP陽性共表達(dá)。

圖5 各組大鼠不同時(shí)相海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)MCT1/GFAP共標(biāo)記表達(dá)情況Figure 5 Expression of MCT1/GFAP co-labeling in the distalCA1 region of the hippocampus in various groups of rats in different phases

圖6結(jié)果顯示：與假手術(shù)組比較，MCAO+CSD組6、24、72 h時(shí)相海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)MCT1/GFAP共標(biāo)記表達(dá)量均顯著升高（P＜0.05），MCAO組、電針組24 h時(shí)相MCT1/GFAP共標(biāo)記表達(dá)量顯著升高（P＜0.05），在其余時(shí)相差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；與MCAO組比較，MCAO+CSD組3個(gè)時(shí)相MCT1/GFAP共標(biāo)記表達(dá)量顯著升高（P＜0.05），電針組24 h時(shí)相MCT1/GFAP共標(biāo)記表達(dá)量顯著降低（P＜0.05）；與MCAO+CSD組比較，電針組3個(gè)時(shí)相MCT1/GFAP共標(biāo)記表達(dá)量均顯著降低（P＜0.05）。

圖6 各組大鼠海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)MCT1/GFAP共標(biāo)記陽性表達(dá)強(qiáng)度比較（免疫熒光標(biāo)記法）（±s）Figure 6 Comparison of positive expression intensity of MCT1/GFAP co-labeling in the distalCA1 region of the hippocampus among various groups of rats（immunofluorescence labeling method）（±s）

3 討論

《針灸大成》曰：“督脈起于下極之腧，入腦上巔?！彼疁涎`屬于督脈，有醒腦開竅之功效。本研究結(jié)果顯示，與MCAO+CSD組比較，電針組6、24、72 h時(shí)相神經(jīng)功能缺損評分均明顯降低（P＜0.05），表明電針?biāo)疁涎ê?，急性腦梗死大鼠的神經(jīng)功能明顯改善，且起效較快。MCAO+CSD組神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)在24 h時(shí)相達(dá)到（61.84±4.91）%，提示CSD在被機(jī)械電刺激后由缺血灶向遠(yuǎn)隔區(qū)慢性負(fù)向播散。而電針?biāo)疁涎ㄔ?4、72 h時(shí)相海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)較同時(shí)相MCAO+CSD組明顯下降（P＜0.05），表明電針組CSD的發(fā)生頻率降低，海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡顯著減輕，提示電針?biāo)疁涎▽毙阅X梗死大鼠局灶缺血區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡進(jìn)行性加重趨勢亦有一定的緩解作用。

本課題組前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，病灶周圍、遠(yuǎn)隔部位甚至對側(cè)腦組織均發(fā)生細(xì)胞凋亡、物質(zhì)代謝障礙和離子環(huán)境改變[5]。腦梗死后神經(jīng)元氧供急速下降，細(xì)胞膜通透性增加，三磷酸腺苷（ATP）迅速耗竭被視為細(xì)胞凋亡前步驟[10]。星形膠質(zhì)細(xì)胞-神經(jīng)元在三羧酸循環(huán)中能量耦聯(lián)，增加腦內(nèi)無氧糖酵解，將葡萄糖分解為乳酸，通過單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)體（MCT）釋放到細(xì)胞外間隙形成“乳酸池”，提供部分能量底物。膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）是合成星形膠質(zhì)細(xì)胞的主要原料之一，可維持神經(jīng)突觸張力強(qiáng)度。腦損傷后，MCT1主要在GFAP陽性細(xì)胞表達(dá)，其聚合物分解可溶性GFAP片段釋放到周圍組織，促使星形膠質(zhì)細(xì)胞迅速分裂、增殖，GFAP陽性表達(dá)代償性劇增[11]，形成膠質(zhì)瘢痕，阻礙神經(jīng)組織的再生與功能重建[12]。研究表明，MCT1、GFAP水平與缺血性腦卒中預(yù)后呈負(fù)相關(guān)，即MCT1、GFAP水平越高，預(yù)后越差[13]。本研究結(jié)果顯示，電針組大鼠6、24、72 h時(shí)相海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)MCT1/GFAP共表達(dá)量較MCAO+CSD組顯著降低（P＜0.05）。腦缺血損傷后星形膠質(zhì)細(xì)胞活化，隨著缺血時(shí)間延長膠質(zhì)瘢痕增生不利于神經(jīng)元修復(fù)，本研究結(jié)果表明電針?biāo)疁涎梢种萍毙阅X梗死大鼠海馬遠(yuǎn)隔部位星形膠質(zhì)細(xì)胞過度增生，降低腦梗死遠(yuǎn)隔部位功能的遲發(fā)性損傷。

Na+-K+-ATP酶又稱為鈉泵，是存在于組織細(xì)胞及細(xì)胞器生物膜上的一種蛋白酶，對缺血、缺氧非常敏感。Na+-K+-ATP酶是維持細(xì)胞內(nèi)外Na+、K+濃度梯度保持細(xì)胞膜電位，提供神經(jīng)沖動(dòng)傳遞驅(qū)動(dòng)力的關(guān)鍵酶[14]。神經(jīng)元Na+-K+-ATP酶活性激活對腦缺血缺氧損傷具有保護(hù)作用[15]。本研究結(jié)果顯示，MCAO組、MCAO+CSD組海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)Na+-K+-ATP酶酶活性較假手術(shù)組顯著降低（P＜0.01），電針?biāo)疁涎梢陨险{(diào)6、24 h時(shí)相Na+-K+-ATP酶活性，起到改善遠(yuǎn)隔區(qū)缺血腦組織細(xì)胞代謝功能的作用。電針組3個(gè)時(shí)相Na+-K+-ATP酶活性與假手術(shù)組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），提示電針?biāo)疁涎赏ㄟ^調(diào)節(jié)Na+-K+-ATP酶活性促進(jìn)急性腦梗死發(fā)作后72 h內(nèi)海馬遠(yuǎn)隔CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞Na+、K+離子轉(zhuǎn)運(yùn)，維持離子自穩(wěn)平衡，保護(hù)神經(jīng)元功能。

綜上所述，電針?biāo)疁涎梢种萍毙阅X梗死大鼠CSD由梗死區(qū)向遠(yuǎn)隔區(qū)海馬結(jié)構(gòu)擴(kuò)散程度，顯著減輕遠(yuǎn)隔CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡。電針?biāo)疁涎赡芡ㄟ^提高ATP酶活性，經(jīng)Na+-K+-ATP酶信號通路改善細(xì)胞內(nèi)外離子環(huán)境，減少乳酸堆積，加強(qiáng)突觸間的聯(lián)系及傳導(dǎo)，抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)性膠質(zhì)化的途徑，抑制海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡，減輕腦梗死后遠(yuǎn)隔功能障礙、遠(yuǎn)隔部位繼發(fā)性損傷。