楊景，趙新利

（1.行唐縣獸醫(yī)獸藥飼料監(jiān)督檢驗(yàn)管理站，河北 石家莊 050600；2.行唐縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所口頭分所，河北 石家莊 050600）

人畜共患布魯氏菌病已威脅到人類(lèi)健康。該病在全球廣泛流行，而在我國(guó)，已將其列為了二類(lèi)動(dòng)物疫病。 布魯氏菌主要感染人和牛、 羊、豬、狗等多種動(dòng)物。 妊娠母畜感染后，主要表現(xiàn)有流產(chǎn)、胎盤(pán)滯留、子宮炎等臨床癥狀。 奶牛感染后， 布魯氏菌常在乳腺淋巴結(jié)和乳腺組織中，且病牛會(huì)一直分泌含有病菌的乳汁。 母山羊感染后，主要出現(xiàn)流產(chǎn)、死胎、產(chǎn)奶量下降等。 綿羊感染后，母綿羊會(huì)出現(xiàn)流產(chǎn)、發(fā)熱，公綿羊則出現(xiàn)附睪炎、關(guān)節(jié)炎等癥狀。 母豬感染后，表現(xiàn)的癥狀有流產(chǎn)、跛行、后肢麻痹、子宮炎等。 布魯氏菌病主要通過(guò)消化道、呼吸道、皮膚黏膜進(jìn)行傳播。由于布病的廣泛流行與傳播，不僅給畜牧業(yè)造成了巨大的損失，而且給人類(lèi)健康安全帶來(lái)了嚴(yán)重的影響。 因此，快速、準(zhǔn)確診斷對(duì)布魯氏菌病的有效控制具有重要意義。 本文將針對(duì)布魯氏菌的診斷方法與防控措施作綜述。

1 常見(jiàn)檢測(cè)方法

1.1 細(xì)菌學(xué)檢測(cè)方法

布魯氏菌病最常見(jiàn)的診斷方法是細(xì)菌的分離培養(yǎng)與鑒定。 布魯氏菌對(duì)營(yíng)養(yǎng)瓊脂的需求較高，實(shí)驗(yàn)室常用血清葡萄糖瓊脂、胰蛋白胨大豆瓊脂、血瓊脂、肝湯瓊脂等固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。待菌落長(zhǎng)出后，我們可根據(jù)其形態(tài)特征、生長(zhǎng)特性、 染色特點(diǎn)進(jìn)行鑒別。 布魯氏菌菌落大小為0.5～1.0 毫米，稍隆起圓形，邊緣整齊、光滑；布魯氏菌生長(zhǎng)在血瓊脂培養(yǎng)基上時(shí)不溶于血， 呈白色；常用科茲洛夫斯基染色布魯氏菌，可在顯微鏡下觀察到：散在分布的紅色球桿狀，且無(wú)芽孢、鞭毛，不形成莢膜。 但是，細(xì)菌分離存在培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)，病原的分離率較低，失敗率高等原因，常常不能對(duì)疾病做出及時(shí)診斷。

1.2 血清學(xué)檢測(cè)方法

1.2.1 虎紅平板凝集試驗(yàn)： 布魯氏菌接種于適宜培養(yǎng)基培養(yǎng)，加熱滅活后作為抗原，離心，收集菌體，用虎紅染料進(jìn)行染色后懸于乳酸緩沖液而制成。 因該方法靈敏度高、操作簡(jiǎn)便且可以在短時(shí)內(nèi)得出診斷的結(jié)果 （通常情況下，4 分鐘之內(nèi)可觀察診斷結(jié)果）。若發(fā)生凝集則判定為陽(yáng)性，反之則判定為陰性?；⒓t平板凝集試驗(yàn)適應(yīng)于初步篩選陽(yáng)性動(dòng)物的診斷，對(duì)初檢呈陽(yáng)性的動(dòng)物再進(jìn)行試管凝集反應(yīng)試驗(yàn)，根據(jù)凝集反應(yīng)確定診斷結(jié)果。該方法不僅適用于牛、羊、豬群體布病的篩查，也用于人布魯氏菌病初篩與監(jiān)測(cè)。

1.2.2 試管凝集試驗(yàn)： 布魯氏菌病法定診斷方法。判定標(biāo)準(zhǔn)：凝集價(jià)超過(guò)1∶100，判定呈陽(yáng)性。因?yàn)槁圆际蠗U菌病陽(yáng)性檢出率較低，因此對(duì)存在可疑的動(dòng)物個(gè)體需要進(jìn)行第二次復(fù)查，與第一次診斷間隔10～25 小時(shí)， 再次進(jìn)行試管凝集反應(yīng)做出診斷。 用于布魯氏菌病的早期診斷，可半定量，更具有較高準(zhǔn)確性、特異性、對(duì)IgM 敏感性。 該試驗(yàn)需在37℃環(huán)境下孵育且過(guò)夜，其缺點(diǎn)是操作過(guò)于繁瑣，耗時(shí)長(zhǎng)，易出現(xiàn)假陽(yáng)性或陰性，不適于對(duì)病原的快速篩查。

1.2.3 全乳環(huán)狀試驗(yàn)：以布魯氏菌為抗原，染成紅色，若乳中存在布魯氏菌抗體，便形成了紅色的抗原抗體復(fù)合物，并轉(zhuǎn)移至乳脂層，呈現(xiàn)出紫紅色乳脂環(huán)。該試驗(yàn)僅用于各種乳中布魯氏菌的篩查。 因該方法操作快速、簡(jiǎn)便、且成本偏低，多用于現(xiàn)場(chǎng)大批量奶樣篩查。 該方法靈敏性差，在檢測(cè)初乳樣、患乳房炎的奶樣、接近干奶期的奶樣等，可能會(huì)呈現(xiàn)假陽(yáng)性。

1.2.4 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)： 以溶血現(xiàn)象的有無(wú)出現(xiàn)，來(lái)判定在受檢血清中是否含有抗體。 該試驗(yàn)是公認(rèn)的用于牛、羊、綿羊布魯氏菌病確診性檢測(cè)，其特異性、敏感性均顯著高于其他血清學(xué)檢測(cè)。此外，該試驗(yàn)通過(guò)肉眼觀察溶液顏色變化，以此來(lái)判斷溶血程度具有一定的主觀性。該試驗(yàn)操作步驟較繁瑣，且要求操作技術(shù)較高，很難實(shí)現(xiàn)在基層推廣應(yīng)用和現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。

1.2.5 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)： 利用量化的OD值的大小來(lái)診斷待檢樣品是否患有布魯氏桿菌病，能夠直觀地觀察診斷結(jié)果。該方法2004 年被列為診斷布魯氏菌病的推薦方法， 具有靈敏性高、特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確性高、操作簡(jiǎn)單、所需樣品少等優(yōu)點(diǎn)，是確診布魯氏菌病試驗(yàn)，同時(shí)可以篩查大批量樣本。 雖然ELISA 靈敏性高，但不能區(qū)分是自然感染產(chǎn)生的抗體還是接種疫苗所產(chǎn)生的抗體， 因此，ELISA 常用于非免疫動(dòng)物的抗體檢測(cè)。

2 防控措施

對(duì)于布魯氏菌病的防治，主要以預(yù)防為主。

2.1 堅(jiān)持自繁自養(yǎng)

確實(shí)有需要引進(jìn)的種畜，必須嚴(yán)格按照法定程序檢測(cè)布魯氏菌病，檢測(cè)合格方可進(jìn)入。

2.2 堅(jiān)持早期檢測(cè)

畜群應(yīng)進(jìn)行定期、 全面布魯氏菌病監(jiān)測(cè)，杜絕該病在畜群間相互傳染。每年養(yǎng)殖場(chǎng)需進(jìn)行至少2 次檢測(cè)工作。

2.3 堅(jiān)持定期消毒

及時(shí)清理特定場(chǎng)所以及區(qū)域內(nèi)部雜物，定期進(jìn)行消毒，保持場(chǎng)所環(huán)境衛(wèi)生。

2.4 堅(jiān)持疫苗接種

畜群免疫接種布魯氏菌病疫苗能控制該病的發(fā)生。 在注射布魯氏菌病疫苗之前，需要對(duì)動(dòng)物群體開(kāi)展布魯氏菌病的監(jiān)測(cè)，隔離檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的個(gè)體，并采取妥善的方法處理。 檢測(cè)結(jié)果呈陰性的個(gè)體，才可注射布魯氏菌病疫苗。 未經(jīng)動(dòng)物群體檢測(cè)就注射疫苗，將為養(yǎng)殖場(chǎng)帶來(lái)更嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，同時(shí)還會(huì)進(jìn)一步增加布魯氏菌病的防控難度。

2.5 堅(jiān)持淘汰制度

對(duì)已確診的陽(yáng)性個(gè)體需直接淘汰， 及時(shí)撲殺，之后進(jìn)行大規(guī)模的消毒。

總之，針對(duì)人畜共患布魯氏菌病必須要積極開(kāi)展防控工作， 必須建立行之有效的長(zhǎng)效機(jī)制，將布魯氏菌病的傳播保持在可控范圍之內(nèi)，建立養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)化的可持續(xù)健康發(fā)展，并不斷提高在國(guó)內(nèi)競(jìng)爭(zhēng)實(shí)力。