邢布點，魏 婷，盧園園，冷俊杰，康品方，王洪巨，張寧汝

（蚌埠醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院心內科，安徽蚌埠 233000）

原發(fā)性高血壓（essential hypertension，EH）主要特征是體循環(huán)動脈血壓增高，繼而引起各內臟器官產(chǎn)生病變［1］。左心室肥厚（left ventricular hypertrophy，LVH）是EH 患者發(fā)展過程中最突出的靶器官損害，國外研究發(fā)現(xiàn)大約有1/3 的EH 患者伴有LVH，國內的一項社區(qū)研究發(fā)現(xiàn)我國約40%以上的EH 患者伴有LVH［2，3］。LVH 已被證 實為心 血管事件發(fā)生的獨立危險因素［4］。有研究發(fā)現(xiàn)，EH 患者合 并LVH 的 死 亡 率 是NLVH 患 者 的8 倍［5］。目 前對于EH 并發(fā)LVH 發(fā)生機制仍未完全明確，有學者認為心肌纖維化可能與EH 并發(fā)LVH 發(fā)病機制有著密切的聯(lián)系［6］。白介素-33（IL-33）是白細胞介素-1 家族的重要成員，與炎癥反應和纖維化有密切關系［7，8］。可溶性ST2（sST2）是IL-33 的“誘餌受體”，與ST2L 競爭性結合IL-33，抑制IL-33/ST2 信號通路的抗心肌肥大和纖維化的心血管保護作用［9］。然而，在EH 患者中，關于IL-33/ST2 信號通路與LVH 中的研究較少。因此，本研究旨在探究血清IL-33、sST2 在EH 患者伴LVH 中的變化及其與左室質量指數(shù)（LVMI）之間的相關性，探討其信號通路在EH 患者中與LVH 的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取來自2021 年4 月～2022 年4 月蚌埠醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院門診就診高血壓患者，總共入選原發(fā)性 高 血 壓 患 者220 例，LVH 診 斷 標 準［10］為：男 性LVMI≥115 g/m2、女 性LVMI≥95 g/m2。根 據(jù) 有無LVH，將所有入組高血壓患者分為NLVH 組（n=108）和LVH 組（n=112）。主要入選標準：年齡＞18 周歲；EH 診斷標準符合相關指南［10］。所有研究對象入組時排除服用降壓藥、繼發(fā)性高血壓、肥厚型心肌病、冠心病、心臟瓣膜疾病、心力衰竭、腦卒中、糖尿病、合并嚴重肝、腎功能損害者、各種腫瘤疾病以及不能配合者。

1.2 方法

1.2.1樣本制備 入組患者空腹過夜（8 h），坐位休息30 min 后，采集靜脈血外周靜脈血5 mL 于肝素抗凝試管中，3 000 r/min 離心，4 ℃離心15 min。為避免反復凍融循環(huán)，將每個血清樣本分成0.2 mL 等分，立即在-80 ℃下冷凍。

1.2.2左心室質量指數(shù)的計算方法 依據(jù)心臟彩超指標室間隔厚度（IVST）、左心室后壁厚度（LVPWT）和左室舒張末期內徑（LVEDD），左心室質量（LVM）=0.8×1.04［（IVST+LVEDD+LVPWT）3- LVEDD3］+0.6；左 心 室 質 量 指 數(shù)（LVMI）=LVM/體表面積（BSA）［11］，男性BSA（m2）=0.005 7×身高（cm）+0.012 1×體重（kg）+0.088 2；女性BSA（m2）=0.007 3× 身 高+0.012 7× 體 重（kg）-2.106［12］。

1.2.3ELISA 法檢測血清IL-33、sST2 水平 采用HumanIL-33、HumansST2（上海羽朵）檢測受試者血清IL-33、sST2 的表達水平，操作步驟嚴格按說明書進行。

1.2.4Westerblot檢測IL-33在PBMCs中的表達 提取PBMCs 內總蛋白，采用BCA 法測定蛋白含量，10%SDS-PAGE 電泳，PVDF 膜轉膜；5%脫脂牛奶常溫封閉；一抗二抗孵育；洗膜后ECL 發(fā)光液曝光，成像系統(tǒng)獲取圖像［13］。

1.3 統(tǒng)計學處理

組間比較采用t檢驗、卡方檢驗。應用Pearson分 析 法 分 析IL-33、sST2 與 收 縮 壓、LVMI 的 相 關性，以上數(shù)據(jù)采用SPSS26.0 軟件分析。

2 結果

2.1 NLVH 組和LVH 組受試者基線資料比較

兩組患者在年齡、性別、吸煙史、飲酒史、BMI、肝腎功能、血脂以及平均舒張壓等方面比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；而對于平均收縮壓，兩組受試者之間存在顯著差異性（P＜0.05），見表1。

2.2 NLVH 組 和LVH 組 血 清IL-33、sST2 以 及 心臟彩超相關指標的比較

與NLVH 組相比，LVH 組血清IL-33、sST2明顯升高（P＜0.05）；心臟彩超相關指標：LVH 組IVST、LVPWT、LVEDD 以及LVMI 大小較NLVH 組顯著增大（P＜0.05），見表2。

表2 NLVH 組和LVH 組血清IL-33、sST2 以及心臟彩超相關指標的比較（±s）Tab 2 Comparison of serum IL-33，sST2 and cardiac color ultrasound parameters between the NLVH group and the LVH group（±s）

表2 NLVH 組和LVH 組血清IL-33、sST2 以及心臟彩超相關指標的比較（±s）Tab 2 Comparison of serum IL-33，sST2 and cardiac color ultrasound parameters between the NLVH group and the LVH group（±s）

注：與NLVH 組相比，aP＜0.05。

組別n IL-33（pg/mL）sST-2（ng/mL）IVST（mm）LVPWT（mm）LVEDD（mm）LVMI（g/m2）NLVH 組LVH 組108 112 145.26±64.54 288.34±82.46a 28.12±0.64 36.25±0.18a 9.58±0.18 13.56±0.17a 9.04±4.35 12.96±3.14a 46.36±4.35 52.46±8.20a 94.43±12.14 132.46±11.06a

2.3 NLVH 組和LVH 組患者（各60 例）PBMCs 中IL-33 蛋白表達水平比較

兩組患者PBMCs 中，LVH 組的IL-33 蛋白表達水平高于NLVH 組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見圖1、2。

2.4 LVH 組患者IL-33、sST2 與 收縮壓、LVMI 相關性分析

Pearson 相關性檢驗結果中，IL-33 與收縮壓、LVMI 呈正相關（r=0.481，P＜0.001；r=0.506，P＜0.001）；sST2 與收縮壓、LVMI 呈正相關（r=0.463，P＜0.001；r=0.512，P＜0.001）。見表3。

表3 LVH 組IL-33、sST2 與收縮壓、LVMI 相關性分析Tab 3 Correlation between IL-33，sST2 and systolic blood pressure and LVMI in the LVH group

2.5 影響EH 發(fā)生LVH 多因素二元Logistic 回歸

以EH 患者發(fā)生LVH 為因變量，將IL-33、sST2、收縮壓為協(xié)變量，結果顯示IL-33、sST2 以及收縮壓是EH 患者發(fā)生LVH 的獨立預測因素，見表4。

表4 EH 患者發(fā)生LVH 多因素二元Logistic 回歸Tab 4 LVH multifactor binary Logistic regression in EH patients

3 討論

EH 是一種全身性慢性疾病，同時也是損害腎臟，引起心腦血管不良事件的重要原因［14］。早期血壓控制不好，持續(xù)升高，會使左心室負荷不斷加重，最終導致心肌纖維化，促進LVH 的發(fā)生、發(fā)展［15］。LVH 是EH 重要的靶器官損害及并發(fā)癥，是引起心血管事件的常見危險因素［16］，給患者的生命造成嚴重的威脅。因此，分析EH 并發(fā)LVH 形成的機制顯得極為重要。

IL-33 是新發(fā)現(xiàn)的IL-1 家族的重要成員，與炎癥反應和纖維化有密切關系［7，8］。IL-33 主要用作心臟病患者的生物標志物，與血管疾病功能障礙有關［17］。有研究報道，IL-33 可有效激活受損心臟中的2 型細胞因子環(huán)境，促進心肌纖維化，繼而促進心臟重構，最終導致心臟功能惡化［18］。慢性心力衰竭患者血清IL-33 水平升高，且隨著心功能的惡化而繼續(xù)升高［19，20］。據(jù)報道，終末期心力衰竭患者心肌組織IL-33 高表達［21］。此外，在這些研究中，血清IL-33 的水平與心臟纖維化程度和TGFβ1 表達水平存在明顯正相關?；谝陨线@些研究，可以看出IL-33 與心力衰竭、心肌纖維化有著密切的聯(lián)系，但是否與EH 并發(fā)LVH 仍不明確。在本次研究中，與NLVH 組相比，LVH 組患者血清IL-33 水平明顯升高，同時本研究PBMCs 中IL-33 蛋白濃度變化趨勢與ELISA 結果相符，提示IL-33 可能與EH 并發(fā)LVH 有關。在本次研究中，二元Logistic 回歸分析顯示IL-33 是EH 患者發(fā)生LVH 的獨立危險因素，進一步證實了血清IL-33 參與了EH 患者LVH 的發(fā)生?？紤]IL-33 能夠促使炎癥反應的發(fā)生，繼而進一步加劇了心肌細胞損傷，促使心肌纖維化，最終加速心室重構［22］。本研究Pearson 相關分析顯示，血清IL-33 與LVMI 兩者之間呈正相關關系，提示EH 患者血清IL-33 水平越高者，LVH 發(fā)生風險及嚴重程度相對來說會更高。這提示IL-33 在EH 患者LVH 發(fā)生、發(fā)展過程中扮演重要作用。

sST2 是IL-1R 家族的一員，在炎癥反應中起重要作用。當心肌應變和壓力增加后，sST2 表達上調［23］。sST2 水平升高與心肌纖維化程度以及心臟重 塑 有 關［24，25］。sST2 被 國 內 外 學 者 認 為 是 心 肌 纖維化和心室重塑的標志物［26］。sST2 作為誘餌受體干擾了ST2L 與IL-33 的結合，抑制IL-33/ST2 信號通路的抗心肌肥大和纖維化的心血管保護作用。相關指南［27］報道，sST 可作為心肌纖維化、炎癥反應的標記物。楊樹涵等［12］研究發(fā)現(xiàn)，相比較于NLVH組，高血壓合并LVH 組患者sST2 水平明顯是升高的。本研究LVH 組患者sST2 表達水平較NLVH組顯著增高，這與文獻報道一致。同時，本次研究行二元Logistic 回歸分析顯示sST2 是EH 患者發(fā)生LVH 的獨立危險因素，提示sST2 參與了EH 患者LVH 的發(fā)病。

本研究發(fā)現(xiàn)相較于NLVH 組，EH 患者中LVH組LVMI 等心臟纖維化的量化指標是升高的。研究進一步探討IL-33/sST2 信號通路相關因子的表達與LVMI 關系，發(fā)現(xiàn)LVH 患者血清中IL-33、sST2水平與LVMI 呈正相關。據(jù)此，筆者推測機體通過激活IL-33/sST2 信號通路，進而影響下游炎癥分子的表達，促進心肌纖維化，進而加重了心室重構，參與了EH 患者的LVH 發(fā)生、發(fā)展。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)IL-33、sST2 水平在EH患者并發(fā)LVH 中明顯升高。在以后的臨床工作中，可針對性檢測IL-33、sST2 水平，對EH 患者并發(fā)LVH 的早期診斷作出評估，可顯著減少心血管事件的發(fā)生，有利于患者的預后。本研究存在以下不足：本研究納入病例數(shù)有限、數(shù)據(jù)誤差不可避免，因此本文結果還需大規(guī)模多中心研究進一步驗證。

作者貢獻度說明：

邢布點：數(shù)據(jù)分析、文章撰寫工作；魏婷：負責相關實驗操作；盧園園、冷俊杰：收集數(shù)據(jù)；康品方、張寧汝、王洪巨：設計實驗，指導寫作。

所有作者聲明不存在利益沖突關系。