溫小雨，孫玉浩，李卓嫻，夏 猛

（廣西中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，廣西南寧 530000）

近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)全球范圍內(nèi)抑郁癥患病率為20%，其發(fā)病具有普遍化與年輕化的特點(diǎn)，抑郁癥健康問(wèn)題也逐漸發(fā)展成為了我國(guó)社會(huì)最大的醫(yī)療負(fù)擔(dān)之一，不利于社會(huì)的穩(wěn)定發(fā)展［1］。抑郁癥作為常見(jiàn)的心理與精神類疾病，逐年升高的自殺率嚴(yán)重影響我國(guó)居民的身心健康和社會(huì)安定，患者自殺的原因主要與得知患病所出現(xiàn)的極度悲傷、沮喪、焦慮情緒有關(guān)［2，3］。根據(jù)抑郁癥的臨床癥狀表現(xiàn)，可將其歸屬為中醫(yī)學(xué)“情志病”“郁證”的范疇，而中醫(yī)藥治療的核心是辯證論治［4］，通過(guò)抓住疾病的病因病機(jī)進(jìn)行辯證施治。針對(duì)疾病的證候醫(yī)學(xué)研究，中醫(yī)學(xué)在治療“情志病”上發(fā)揮了許多優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)積累了豐富經(jīng)驗(yàn)。隨著中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的發(fā)展，對(duì)于抑郁癥的基礎(chǔ)研究日益升入，符合中醫(yī)證候的抑郁癥模型成為了矚目的研究熱點(diǎn)，“病”“證”結(jié)合的研究也涉及了多個(gè)方面，構(gòu)建貼合中醫(yī)學(xué)證候的動(dòng)物模型，在形成西醫(yī)的疾病特點(diǎn)上兼顧中醫(yī)的證候特征，為我們更客觀地認(rèn)識(shí)疾病提供重要的依據(jù)［5］。肝郁脾虛型抑郁癥是目前單向抑郁癥患者發(fā)病的主要常見(jiàn)證型，其主要病機(jī)為肝失疏泄、脾失健運(yùn)、氣血失調(diào)，在情志抑郁的基礎(chǔ)上容易出現(xiàn)少氣懶言、不欲飲食、腹瀉等癥狀［6］。因此在構(gòu)建單一的抑郁癥大、小鼠動(dòng)物模型基礎(chǔ)上，有必要結(jié)合多種手段模擬人類發(fā)病證型特點(diǎn)及探討誘導(dǎo)發(fā)病原理，達(dá)到證候動(dòng)物模型的穩(wěn)定性與可靠性［7］。由此可見(jiàn)，該動(dòng)物模型的建立完善且廣泛推廣運(yùn)用，將有效服務(wù)于中醫(yī)藥抗抑郁藥物的新藥開(kāi)發(fā)。目前傳統(tǒng)的造模方式通過(guò)慢性應(yīng)激刺激（CUMS）、慢性束縛應(yīng)激（CRS）、懸（夾）尾等方式并未能充分體現(xiàn)中醫(yī)的證候特點(diǎn)，不同品系間的動(dòng)物造模結(jié)果仍然存在較大差異。另外有學(xué)者提出懸尾實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ唾N合中醫(yī)肝郁氣滯型，利血平誘導(dǎo)模型則是心脾兩虛型，科學(xué)客觀地建立和檢驗(yàn)證候模型是進(jìn)行中醫(yī)藥郁證研究的關(guān)鍵所在?，F(xiàn)對(duì)適用于抑郁癥模型構(gòu)建的不同品系的大、小鼠特點(diǎn)研究進(jìn)行如下綜述，為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)出符合證型的抑郁癥大、小鼠模型提供依據(jù)。

2 肝郁脾虛抑郁癥證候鼠類模型

嚙齒類動(dòng)物具有與人類親緣關(guān)系相近的優(yōu)勢(shì)，因此在諸多實(shí)驗(yàn)中能夠穩(wěn)定的充當(dāng)監(jiān)測(cè)指標(biāo)的研究對(duì)象。在動(dòng)物證候模型的構(gòu)建中，相關(guān)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)也能符合中醫(yī)學(xué)證候特征的體現(xiàn)。此外，不同品系的大、小鼠因?yàn)榫哂忻黠@特征差異，因而在對(duì)抑郁癥造模方式選用時(shí)有不同要求與注意要點(diǎn)?；谛袨閷W(xué)、內(nèi)分泌代謝、遺傳學(xué)、社會(huì)心理水平中存在的較大差異，考慮到合理匹配實(shí)驗(yàn)動(dòng)物類型、制定相關(guān)監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)、抑郁造模方法的準(zhǔn)確性是有效與科學(xué)地評(píng)估抑郁動(dòng)物模型的關(guān)鍵所在。故恰當(dāng)選擇成熟與可靠的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型能夠更好地達(dá)到實(shí)驗(yàn)效果與實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性。由此可見(jiàn)，在使用大、小鼠作為研究對(duì)象時(shí)，詳細(xì)區(qū)分不同特點(diǎn)的品系種類能夠更貼合實(shí)驗(yàn)，更好地服務(wù)研究人員，最大可能地減少實(shí)驗(yàn)中存在的差異，確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的科學(xué)性。

2.1 不同品系小鼠抑郁癥模型

不同品系的小鼠有其獨(dú)特的表型，是目前疾病研究中應(yīng)用最廣的動(dòng)物模型，具有體積小、價(jià)格低廉、可從互聯(lián)網(wǎng)免費(fèi)獲取基因組測(cè)序圖譜、方便采取基因工程技術(shù)誘導(dǎo)小鼠模型建立等無(wú)可比擬的優(yōu)勢(shì)［8］。其中C57BL/6 小鼠作為抑郁癥小鼠模型中的出色品系，表現(xiàn)出個(gè)體差異小、穩(wěn)定性高的特點(diǎn)，是普遍認(rèn)為可首選作為制作應(yīng)激類模型的鼠類品系［9］。最普遍的不分品系的常見(jiàn)小鼠抑郁造模方式是經(jīng)典抑郁模型之一的慢性應(yīng)激刺激（CUMS），其中當(dāng)小鼠懸尾時(shí)，為克服不正常體位而掙扎活動(dòng)失敗會(huì)產(chǎn)生類似行為絕望的靜止行為，以上方法雖符合抑郁癥發(fā)病的病因病機(jī)且更接近于人類，但具有難以持續(xù)維持抑郁發(fā)病狀態(tài)，不利于長(zhǎng)久證型的抑郁癥研究［10，11］。對(duì)此掌握不同品系的小鼠特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)能夠有助于挑選適當(dāng)?shù)脑炷７绞?，達(dá)到構(gòu)建長(zhǎng)期且穩(wěn)定的具備有中醫(yī)證型的抑郁癥小鼠模型，極大可能地保障了實(shí)驗(yàn)研究的科學(xué)性。目前國(guó)內(nèi)外常見(jiàn)用于抑郁癥研究的小鼠模型還有昆明種KM 小鼠模型、BALB/C 小鼠、ICR 小鼠及不分品系的FST、TST、CUMS、CRS 小鼠模型，以下內(nèi)容將對(duì)不同品系的小鼠特點(diǎn)與相關(guān)研究結(jié)果進(jìn)行羅列。

2.1.1 國(guó)內(nèi)昆明種KM 小鼠模型 張中啟［12］提到使用國(guó)內(nèi)昆明種（KM）小鼠造模時(shí)受到造模時(shí)間的影響，小鼠在4～9 月份時(shí)強(qiáng)迫性游泳期間的不動(dòng)時(shí)間值高，其原因可能是受到動(dòng)物的生物鐘與生物周期的影響。雖然KM 小鼠比Wistar 大鼠存在更大的個(gè)體差異，但從實(shí)驗(yàn)方法發(fā)現(xiàn)，使用KM 小鼠只需一次實(shí)驗(yàn)便可達(dá)到觀察效果，其藥量使用與費(fèi)用花銷對(duì)造模影響明顯低于眾多大鼠。所以，在設(shè)計(jì)強(qiáng)迫性游泳法研究藥物的抗抑郁作用時(shí)，應(yīng)首選KM 小鼠，因其個(gè)體行為差異明顯，具有不顯著對(duì)比差異更易于實(shí)驗(yàn)研究。研究中又發(fā)現(xiàn)在進(jìn)行CUMS 造模干預(yù)后的3 周中檢測(cè)出KM 小鼠海馬中miRNA-132和miRNA-134 水平等多種miRNA 的變化與抑郁癥密切相關(guān)。同時(shí)有研究報(bào)道認(rèn)為，在精神疾病患者的腦內(nèi)海馬中也存在miRNAs 水平異常，可能原因是miRNA-132 能夠明顯抑制人體內(nèi)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF）的基因表達(dá)，從而誘導(dǎo)精神疾病的發(fā) 生［13，14］。近 期 研 究 表 明，在 雌 雄KM 小 鼠 中 采 用CUMS 造模，雌性KM 小鼠除了出現(xiàn)情緒應(yīng)激變化，還會(huì)引起相關(guān)的生殖功能減退，對(duì)于觀察不同性別的精神差異實(shí)驗(yàn)，表現(xiàn)具有有效性、可操作性和可重復(fù)性更強(qiáng)的特點(diǎn)，同時(shí)在研究復(fù)方藥效學(xué)評(píng)價(jià)時(shí)，高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)中推薦重測(cè)信度相對(duì)較好的雄性昆明小鼠［15，16］。

2.1.2 BALB/C 小鼠抑郁模型 小鼠作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，具有適合抑郁建模的敏感性、有效性、可靠性，能夠極大程度地提供可行性實(shí)驗(yàn)參考與制定相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。在同等飼養(yǎng)條件下，個(gè)體質(zhì)量相近的KM 小鼠和BALB/C 小鼠這兩種不同品系的小鼠，在不同水溫、晝夜節(jié)律改變的環(huán)境中強(qiáng)迫游泳行為出現(xiàn)變化差異［17］。同時(shí)，昆明小鼠白天的不動(dòng)時(shí)間明顯少于BALB/C 小鼠的不動(dòng)時(shí)間，且BALB/C 小鼠夜間的不動(dòng)時(shí)間比白天短。進(jìn)一步研究又發(fā)現(xiàn)BALB/C小鼠的陽(yáng)性結(jié)果數(shù)明顯多于KM 小鼠，小鼠性別影響程度不高。最終總結(jié)出，該類型小鼠在22 ℃水溫中更容易產(chǎn)生抑郁樣行為，且進(jìn)行慢性不可預(yù)知應(yīng)激（CUMS）和皮下注射皮質(zhì)酮時(shí)，BALB/C 品系小鼠還出現(xiàn)顯著而穩(wěn)定的氣虛樣證候，同時(shí)在社交挫敗應(yīng)激實(shí)驗(yàn)后該品系小鼠也會(huì)出現(xiàn)氣虛樣證候［18，19］。束縛加噪聲應(yīng)激5 d 能夠明顯使小鼠強(qiáng)迫游泳靜止時(shí)間延長(zhǎng)，BALB/C 小鼠是常用的近交系小鼠品系，其較低的社會(huì)性能較好地復(fù)制人類的一些心身疾病模型，更符合證候特點(diǎn)［20］。

2.1.3 雄性C57BL/6 小鼠抑郁癥模型 C57BL/6品系小鼠因其是通過(guò)早期母嬰分離，適合用于斷乳后持續(xù)慢性應(yīng)激構(gòu)建新型長(zhǎng)時(shí)程抑郁LTD 模型，該模型與傳統(tǒng)CUMS、ELS 小鼠相比，能更長(zhǎng)期且穩(wěn)定地表現(xiàn)出抑郁狀態(tài)，有利于行為學(xué)研究。在組織切片顯示中，LTD 小鼠海馬CA1 區(qū)和CA3 區(qū)皆能呈現(xiàn)出明顯的退行性變性。李亮萍等［21］提出C57BL/6 小鼠在急性應(yīng)激的情況下，觀察曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果中發(fā)現(xiàn)該品系小鼠比其余小鼠更容易表現(xiàn)出抑郁樣行為，推測(cè)行為學(xué)表現(xiàn)可能被遺傳因素所影響，對(duì)于研究遺傳類的精神疾病可首選C57BL/6 小鼠。C57BL/6 小鼠還具有能夠長(zhǎng)久維持抑郁樣行為，明顯表現(xiàn)出長(zhǎng)期的心理應(yīng)激狀態(tài)，因此適用于研究模擬抑郁狀態(tài)長(zhǎng)期的變化與差異［22，23］。此外，相關(guān)研究指出C57BL/6 小鼠進(jìn)行CUMS 造模后，在體重、糖水偏好、曠場(chǎng)與垂直運(yùn)動(dòng)檢測(cè)指標(biāo)均表現(xiàn)出顯著敏感性，因而認(rèn)為C57BL/6 小鼠適用于作為通過(guò)傳統(tǒng)CUMS 手段造模構(gòu)建的抑郁癥動(dòng)物模型［24］。而基于C57BL/6 小鼠的自發(fā)活動(dòng)量低、對(duì)新奇環(huán)境的探索能力差的特點(diǎn)，在行為絕望上更易于形成該狀態(tài)。綜上所述，該品系小鼠不僅可作為慢急性應(yīng)激抑郁模型，還具備成為多種形式應(yīng)激造模的潛力。

2.1.4 ICR 小鼠抑郁模型 李騰飛等［25］對(duì)ICR 和KM 小鼠等進(jìn)行曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其總動(dòng)態(tài)距離、運(yùn)動(dòng)速度和運(yùn)動(dòng)時(shí)間明顯要高于C57BL/6 小鼠，且在站立次數(shù)中，ICR 小鼠也比C57BL/6 小鼠更具有顯著性差異。ICR 小鼠在群體內(nèi)存在的個(gè)體差異與某些位點(diǎn)上的多態(tài)性較為符合遠(yuǎn)交群實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的特點(diǎn)，在慢性束縛應(yīng)激下ICR 小鼠的體重增長(zhǎng)速度呈下降趨勢(shì)，曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中的活動(dòng)距離、垂直站立次數(shù)和理毛次數(shù)均明顯減少。當(dāng)ICR 小鼠出現(xiàn)潛伏期縮短時(shí)，原穿越次數(shù)和原平臺(tái)象限時(shí)間比率明顯提高。實(shí)驗(yàn)證明慢性束縛應(yīng)激能引起ICR 小鼠抑郁樣行為表現(xiàn)，但對(duì)ICR 小鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力卻有促進(jìn)作用［26］。成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子能影響神經(jīng)元的生長(zhǎng)分化調(diào)節(jié)病情發(fā)生，F(xiàn)GF2 在抑郁患者的大腦皮層、海馬及小腦等部位的含量降低，而FGF9含量則明顯上調(diào)［27］，F(xiàn)GF2/FGF9 可以調(diào)節(jié)抑郁的發(fā)生。大鼠腦內(nèi)注射脂多糖會(huì)使FGF2 含量升高，進(jìn)而可改善大鼠抑郁樣行為，而ICR 小鼠腦室注射FGF9 則會(huì)使其出現(xiàn)抑郁樣行為［28］。

2.1.5 不分品系的FST、TST、CUMS、CRS 小鼠模型 目前抑郁動(dòng)物造模方式中，F(xiàn)ST 造模是1977 年P(guān)orsolt 等［29］構(gòu)建的一類較成熟的小鼠抑郁癥模型，具有成本低、簡(jiǎn)便性、高效性、可靠性的優(yōu)點(diǎn)，使用抗抑郁藥治療時(shí)均有明顯作用，因而廣泛用于抗抑郁藥的初篩或?qū)ζ渌钟裟Ｐ蛣?dòng)物行為改變的評(píng)價(jià)。但該方法只能通過(guò)影響小鼠外在行為的變化了解其抑郁狀態(tài)，難以體現(xiàn)出抑郁癥患者的一些內(nèi)在核心癥狀的變化，因此又研發(fā)了一種小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)（TST）。該實(shí)驗(yàn)由Steru 等在1985 年首次提出，TST 具有簡(jiǎn)單、快速、敏感等特點(diǎn)。王嘉南等［30］認(rèn)為T(mén)ST 在構(gòu)建抑郁模型時(shí)可與FST 聯(lián)合使用，同時(shí)用于對(duì)抗抑郁藥物的快速初篩和對(duì)其他抑郁模型動(dòng)物行為改變的評(píng)價(jià)。該類型造模的小鼠對(duì)成本節(jié)約與時(shí)效上具有明顯優(yōu)勢(shì)，因此目前也受到廣泛運(yùn)用。慢性束縛應(yīng)激（CRS）與慢性溫和不可預(yù)刺激（CUMS）是目前抑郁動(dòng)物模型常用的造模方法，CUMS 造模方式較CRS 造模方式溫和，CRS 通常是單因素應(yīng)激源，CUMS 則是多因素應(yīng)激源［31］。CUMS 模型小鼠在實(shí)驗(yàn)中與CRS 模型小鼠相比，強(qiáng)迫游泳與曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中活動(dòng)距離下降明顯、靜止時(shí)間長(zhǎng)，且活動(dòng)次數(shù)明顯降低，小鼠海馬中的FGF2 含量顯著減少，認(rèn)為CUMS 模型小鼠比CRS 模型小鼠的抑郁傾向和中樞神經(jīng)抑制效果更佳［32］。

2.2 不同品系大鼠抑郁癥模型

在抑郁癥造模實(shí)驗(yàn)中，大鼠的體重變化和行為學(xué)觀測(cè)數(shù)據(jù)是極具有參考性評(píng)價(jià)抗抑郁效果的敏感指標(biāo)［33］。在慢性強(qiáng)迫水游泳實(shí)驗(yàn)中，會(huì)相應(yīng)地引起大鼠海馬糖皮質(zhì)激素水平升高，導(dǎo)致腦內(nèi)5-HT和DA 的數(shù)量增加，活性增強(qiáng)，從而出現(xiàn)大鼠的體質(zhì)量增長(zhǎng)和攝食率顯著降低。因此，相對(duì)與小鼠而言，大鼠更具有研究?jī)r(jià)值與意義［34］。其中大鼠中最具有代表性的是SD 大鼠和Wistar 大鼠，兩者作為遠(yuǎn)交系封閉群白色大鼠，是國(guó)內(nèi)外學(xué)習(xí)記憶損傷相關(guān)臨床實(shí)驗(yàn)研究與機(jī)制研究的首選對(duì)象，能夠更好地模擬了現(xiàn)代社會(huì)中人們面臨壓力下產(chǎn)生抑郁的疾病狀態(tài)。此外，兩品系大鼠在研究慢性束縛應(yīng)激引起的外周作用中表現(xiàn)一致。然而，SD 大鼠的非空間學(xué)習(xí)記憶能力的損傷更顯著［35，36］。除了以上兩種品系的常見(jiàn)大鼠模型，在抑郁癥研究中尚有WKY、FH/Wjd 等不同品系的大鼠作為研究對(duì)象，但作為中醫(yī)證候研究對(duì)象可能稍遜于SD 大鼠和Wistar 大鼠。

2.2.1 肝郁脾虛型抑郁癥SD 大鼠模型 通過(guò)缺血性腦卒中的應(yīng)激誘導(dǎo)方式進(jìn)行抑郁癥造模，對(duì)大鼠的機(jī)體無(wú)明顯損傷性刺激，與人類罹患抑郁癥疾病過(guò)程相似，其原理通過(guò)反復(fù)進(jìn)行同一種應(yīng)激使動(dòng)物對(duì)應(yīng)激產(chǎn)生適應(yīng)導(dǎo)致CIS 模型大鼠由憤怒狀態(tài)肝氣郁結(jié)轉(zhuǎn)化為抑郁狀態(tài)，且逐漸有氣虛乏力、神情疲憊、大便稀溏等脾虛癥狀的出現(xiàn)，符合“肝木乘土”的中醫(yī)機(jī)理，因此本模型廣受中醫(yī)界證候研究人員的認(rèn)可［37］。陳曉梅等［38］使用足底電擊、冰水游泳、24 h 禁水、24 h 禁食、束縛（4 h）、夾尾（2 min）、交換合籠對(duì)象等方式，每天不定時(shí)隨機(jī)安排一種刺激，建造慢性不可預(yù)測(cè)應(yīng)激模型。在外界應(yīng)激的同時(shí)，中醫(yī)理論認(rèn)為抑郁癥的發(fā)生主要原因?yàn)楦斡?，結(jié)合行為學(xué)、大鼠進(jìn)食量、排便情況及重量等一般形態(tài)變化，判斷其與中醫(yī)證候中食欲降低、痞滿、困乏、大便稀溏等脾虛日久的癥狀相符。楊力凝［39］在進(jìn)行慢性社會(huì)挫敗應(yīng)激（CSDS）造模時(shí)發(fā)現(xiàn)SD 大鼠造模后在體重增長(zhǎng)減慢、糖水偏好降低、強(qiáng)迫游泳中均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)與高架實(shí)驗(yàn)的進(jìn)入開(kāi)/閉臂次數(shù)和時(shí)間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，提示SD 大鼠因具有明顯的抑郁樣特征，同時(shí)焦慮樣表現(xiàn)不明顯，能夠確保動(dòng)物造模后出現(xiàn)與抑郁癥患者更貼合病情表現(xiàn)的特征，更好地作為抑郁疾病研究的研究模型。

2.2.2 Wistar 雄性抑郁大鼠模型 使用慢性不可預(yù)知應(yīng)激實(shí)驗(yàn)對(duì)Wistar 雄性大鼠進(jìn)行21 d 造模后，對(duì)其進(jìn)行強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。造模則使用4 ℃冰水游泳、明暗顛倒24 h、禁食水24 h、夾尾3 min、電擊足底5 s、潮濕墊料10 h 等方式。在氯胺酮注射前、后1 h、2 h、6 h、1 d、4 d 及7 d 分別進(jìn)行曠場(chǎng)試驗(yàn)，觀察并記錄大鼠水平活動(dòng)及垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)。通過(guò)CUMS 構(gòu)建抑郁Wistar 大鼠模型，檢測(cè)抑郁組大鼠海馬組織中NF-κB 信號(hào)通路活性呈顯著升高趨勢(shì)，同時(shí)海馬DG 區(qū)、CA1 區(qū)、CA3 區(qū)結(jié)構(gòu)正常的神經(jīng)元數(shù)量下降［40］。Wistar 大鼠在肝郁脾虛、肝郁、脾虛的狀態(tài)下均會(huì)呈現(xiàn)不同程度的血液高黏狀態(tài)，而肝郁模型大鼠血液高黏狀態(tài)主要與血液中的血小板及其他大分子成分的變化有關(guān)，脾虛與肝郁脾虛證大鼠血液黏度升高與紅細(xì)胞自身流變性質(zhì)變化及血小板有關(guān)，該研究對(duì)中醫(yī)學(xué)研究“氣滯血瘀”、“氣行血行”有重要指導(dǎo)意義［41］。有學(xué)者認(rèn)為，在中醫(yī)學(xué)中，“氣行則血行”符合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為的氣的充沛能推動(dòng)血的運(yùn)行，預(yù)防血液的異常凝滯。

2.2.3 抑郁癥WKY 大鼠模型 Wistar Kyoto（WKY）大鼠是Wistar 大鼠品種的近交系，具有高水平的內(nèi)源性抑郁樣行為特點(diǎn)［42］。WKY 鼠于1963 年由Okamoto 等人發(fā)現(xiàn)，并由Paré WP 驗(yàn)證作為一種抑郁模型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，WKY 大鼠在造模過(guò)程中容易出現(xiàn)習(xí)得性無(wú)助、強(qiáng)迫水游泳實(shí)驗(yàn)中靜止絕望水平非常高、持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，而在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中也出現(xiàn)活動(dòng)距離短和較低等特征。同時(shí)研究表明在不同品系的大鼠大腦海馬和杏仁核基因表達(dá)分析發(fā)現(xiàn)，WKY 大鼠與慢性應(yīng)激抑郁Wistar 大鼠的分子機(jī)制具有差異性，這提示W(wǎng)KY 大鼠不同的分子機(jī)制有望成為研究新型藥物的目標(biāo)［43，44］。WKY 大鼠雖作為基因變異的應(yīng)激敏感Wistar 大鼠，更容易在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)靜止時(shí)間增加、快感缺失等抑郁樣行為，并且海馬與前額葉皮層中樹(shù)突棘密度明顯下降，但由于對(duì)應(yīng)激的高反應(yīng)性以及HPA 軸的異常調(diào)節(jié)，可能會(huì)更容易出現(xiàn)焦慮型精神疾病，因而研究者大多將其運(yùn)用于焦慮疾病研究［45，46］。

2.2.4 FH/Wjd 大鼠模型 FH/Wjd（Fawn-Hooded）大鼠是Wistar 大鼠近親繁殖到第19 代的近交系大鼠，具有5-羥色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）差異變化表現(xiàn)明顯、行為絕望明顯等特征，且其抑郁特性已得到明確，是一種理想的抑郁癥的動(dòng)物模型［47，48］。既 往 研 究 發(fā) 現(xiàn)，F(xiàn)H/Wjd 大 鼠 在 強(qiáng) 迫 游 泳實(shí)驗(yàn)中靜止時(shí)長(zhǎng)明顯，糖水偏愛(ài)程度較SD 大鼠低，而水迷宮中逃避潛伏期較長(zhǎng)，顯著具有快感缺失、學(xué)習(xí)記憶低、疲勞耐力差、行為絕望等抑郁特性［49］。熊庭旺等［50］證實(shí)FH/Wjd 大鼠具有明顯的焦慮行為和高活動(dòng)性的機(jī)制可能與DA、5-HT 含量低下、代謝亢進(jìn)，HPA 軸亢進(jìn)導(dǎo)致的神經(jīng)精神系統(tǒng)疾病相關(guān)，其機(jī)制明確的特點(diǎn)作為抑郁癥研究對(duì)象，也具有更值得信賴的特點(diǎn)。

2.2.5 不分品系FSL 和CUMS 大鼠抑郁模型

Overstreet 和Wegener 率 先 提 出FSL 大 鼠 模 型，但隨后發(fā)現(xiàn)該模型動(dòng)物表現(xiàn)出快動(dòng)眼睡眠延長(zhǎng)，并且在強(qiáng)迫水游泳中靜止時(shí)間延長(zhǎng)，而這些行為改變可被抗抑郁藥物所逆轉(zhuǎn)。同時(shí)，兩人發(fā)現(xiàn)抗抑郁用藥治療后14 d，F(xiàn)SL 大鼠出現(xiàn)抗抑郁藥樣行為。FSL 大鼠很顯著的一個(gè)特征是對(duì)很多種藥理機(jī)制不同的藥物都非常敏感。因此FSL 大鼠可以作為抑郁癥的基因動(dòng)物模型［51］。大腦中BDNF 神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的含量在抑郁癥發(fā)病中起至關(guān)重要的作用，造模后的CUMS模型大鼠腦內(nèi)會(huì)出現(xiàn)BDNF 下降的趨勢(shì)。Dandekar等［52］發(fā)現(xiàn)模型大鼠海馬、腦脊液內(nèi)中BDNF 含量顯著下降，同時(shí)研究指出CUMS 造模后大鼠海馬中白介素家族IL-2、IL-5、IL-7 等的含量明顯增多。但是CUMS 模型大鼠表現(xiàn)出腸道代謝的異常，糞便代謝中丁酸、直腸內(nèi)丙酸鈉出現(xiàn)失調(diào)的情況［53］。

3 討論

抑郁癥屬在中醫(yī)學(xué)中屬于“郁證”疾病范疇，主要原因及發(fā)病機(jī)制是由肝、心、脾三臟受累及氣血失調(diào)誘發(fā)情志異常。目前大多選用環(huán)境應(yīng)激造模方法及相應(yīng)的行為學(xué)測(cè)定作為經(jīng)典的動(dòng)物抑郁癥模型之一［54］。通過(guò)文獻(xiàn)檢索與數(shù)據(jù)收集，筆者發(fā)現(xiàn)除了慢性應(yīng)激模型之外，還有獲得性無(wú)助模型、慢性社會(huì)失敗模型、單一物理應(yīng)激模型、慢性強(qiáng)迫游泳應(yīng)激，利血平、脂多糖、糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)造模、手術(shù)造模與基因敲除等手段［55］。通過(guò)對(duì)目前使用的不同品系的大小鼠造模，分析其行為學(xué)實(shí)驗(yàn)、糖水消耗實(shí)驗(yàn)、體重變化等方面差異及優(yōu)劣，探討最適用于符合證候的抑郁癥模型的小鼠造模品系。使用關(guān)鍵詞“小鼠”或“大鼠”加上“抑郁”、“模型”檢索近十年CNKI 上的抑郁研究論文，涉及小鼠模型使用實(shí)驗(yàn)研究文獻(xiàn)共793 篇，大鼠則為1 401 篇。推測(cè)大鼠在抑郁模型實(shí)驗(yàn)研究上的使用頻率比小鼠高，同時(shí)趙謙等［56］認(rèn)為大鼠CUMS 模型所致的疾病發(fā)生和表現(xiàn)形式，更能模擬人類的抑郁癥狀及一系列人類抑郁后引起的生化改變，情緒障礙藥物的有效性能夠充分反映，即符合情緒障礙動(dòng)物模型表面效度、結(jié)構(gòu)效度和預(yù)測(cè)效度的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，因此在抑郁癥研究領(lǐng)域被廣泛使用。

由于缺乏貼合肝郁脾虛證候的動(dòng)物模型的規(guī)范化標(biāo)準(zhǔn)，為嘗試解決該問(wèn)題，孫曉倩等［57］根據(jù)在人類疾病中，肝郁脾虛的發(fā)生多有脅肋脹痛、腹脹、食少納呆、便溏、舌淡紅或舌淡等特點(diǎn)，通過(guò)觀察模型動(dòng)物的形態(tài)，如：精神狀態(tài)、舌、眼睛、尾部瘀斑、飲食、糞便、毛發(fā)等差異，制定符合證候的動(dòng)物模型的評(píng)分表，能夠在動(dòng)物造模時(shí)更加準(zhǔn)確地把握中醫(yī)證候。證候的認(rèn)識(shí)是中醫(yī)辨證論治的核心，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中，證候模型的建立是研究中醫(yī)學(xué)藥物物質(zhì)基礎(chǔ)的關(guān)鍵，僅僅依靠證候評(píng)分表進(jìn)行檢驗(yàn)證候模型的成功與否，尚不能確鑿地證明造模方式的可靠性，因此目前對(duì)證候模型建立及檢驗(yàn)的研究仍需進(jìn)一步完善［58］。

4 展望

根據(jù)以上內(nèi)容，在檢索相關(guān)文獻(xiàn)總結(jié)發(fā)現(xiàn)，近現(xiàn)代國(guó)內(nèi)外的抑郁癥動(dòng)物模型造模方式主要以應(yīng)激性造模、藥物造模、手術(shù)造模、基因敲除等作為常見(jiàn)手段［59，60］。抑郁動(dòng)物模型的建立對(duì)抑郁癥的發(fā)病機(jī)制研究具有重要意義，采用單胺類神經(jīng)遞質(zhì)作為模型評(píng)價(jià)的唯一標(biāo)準(zhǔn)，缺乏中醫(yī)四診合參和病證結(jié)合辨證思路，不利于構(gòu)建合格的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。符合課題研究需要挑選更具有相應(yīng)證候的動(dòng)物模型，能夠達(dá)到把握不同品系動(dòng)物的優(yōu)點(diǎn)，從而準(zhǔn)確選擇出貼合課題研究目的的模型動(dòng)物品系，采用正確的造模方式，配合更加貼切證候的評(píng)分與診斷標(biāo)準(zhǔn)，才能提高實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，更好地完成實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型構(gòu)建。筆者認(rèn)為，想要長(zhǎng)期穩(wěn)定地模擬抑郁情緒且能夠更好地達(dá)到抑郁癥證候研究與證型研究的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，可使用CUMS 造模方式以Wistar 大鼠或SD雄性大鼠進(jìn)行造模。隨著分子生物學(xué)技術(shù)在心理疾病與精神醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的廣泛應(yīng)用，基于基因科學(xué)的新技術(shù)、新方法、新思路從生物學(xué)、遺傳學(xué)等各角度達(dá)到模擬抑郁癥疾病狀態(tài)的體現(xiàn)［60］。證候是中醫(yī)辨證論治中的核心要點(diǎn)，病證結(jié)合的研究模式也逐漸發(fā)展成為中醫(yī)研究的主流，由于中醫(yī)強(qiáng)調(diào)整體觀念，除了制定相關(guān)的證候積分評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，還可以考慮使用以代謝組學(xué)、蛋白組學(xué)、基因組學(xué)為代表的具備整體性與證型的研究理念高度一致的現(xiàn)代系統(tǒng)生物學(xué)手段，試圖從“宏觀”至“微觀”，以證候的生物學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)全面而精確地確保中醫(yī)證型動(dòng)物模型的構(gòu)建［61］。雖然目前的大小鼠品系模型所具有的特點(diǎn)能滿足筆者大部分的實(shí)驗(yàn)要求，但是筆者依舊需要努力研究與開(kāi)發(fā)新的抑郁癥動(dòng)物模型，達(dá)到構(gòu)建出高度貼合中醫(yī)藥證型研究標(biāo)準(zhǔn)的動(dòng)物模型，規(guī)范化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造模方式，為未來(lái)深入研究中醫(yī)發(fā)病機(jī)制和證候研究提供更有價(jià)值研究思路。

作者貢獻(xiàn)度說(shuō)明：

溫小雨：負(fù)責(zé)執(zhí)筆撰寫(xiě)文章；孫玉浩：文獻(xiàn)檢索收集、校對(duì)；李卓嫻：協(xié)助負(fù)責(zé)文章修改工作；夏猛：負(fù)責(zé)文章大綱敲定與修正。

所有作者聲明不存在利益沖突關(guān)系。