冷天波 張衛(wèi)云 馬軍偉 李衛(wèi)浩 劉俊清 劉 艷

（鄢陵縣林業(yè)局，河南 鄢陵 461200）

櫻花薔薇科櫻屬落葉小喬木，是早春觀花樹種，在春天櫻花樹上會(huì)開出由白色、淡紅色轉(zhuǎn)變成深紅色的花。晚櫻在國(guó)內(nèi)種植及園林綠化中運(yùn)用比較廣泛，開花時(shí)間大致在3 月左右。盛開時(shí)節(jié)花繁艷麗，滿樹爛漫，如云似霞，極為壯觀。優(yōu)良品種通常利用嫁接繁殖，不能及時(shí)滿足社會(huì)需要，利用組培技術(shù)能快速得到大量?jī)?yōu)良單株。

1．黑暗處理開始時(shí)間對(duì)組培苗的影響

1.1 處理方法

在組培間準(zhǔn)備一個(gè)單獨(dú)培養(yǎng)架，并在培養(yǎng)架上鋪設(shè)不透明黑布或其他不透明物品。將當(dāng)天接種的櫻花試管苗以及在正常條件下培養(yǎng)3 天、5 天、7 天、9 天、11 天、15天的組培苗分別取30 瓶，放在鋪有黑布的培養(yǎng)架上并用另一塊黑布或不透明物體蓋在組培苗上。嚴(yán)禁透明或漏光，使組培苗完全處在黑暗的條件下。其他環(huán)境條件不變，在黑暗條件下培養(yǎng)一周。在培養(yǎng)過(guò)程中嚴(yán)禁打斷黑暗處理。黑暗處理結(jié)束后及時(shí)進(jìn)行觀察統(tǒng)計(jì)。

1.2 處理結(jié)果

經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，不同的開始時(shí)間，處理后組培苗表現(xiàn)不相同。當(dāng)天接種及接種三天后進(jìn)行黑暗處理效果不明顯，節(jié)間伸長(zhǎng)、頂芽萌動(dòng)、葉片（葉色、大小、厚?。┳兓扰c正常條件下培養(yǎng)的差別不大。正常條件下培養(yǎng)5 天和7 天再進(jìn)行黑暗處理的效果較為明顯，頂芽開始萌發(fā)或進(jìn)行明顯的生長(zhǎng)，新長(zhǎng)出部分生長(zhǎng)速度較快，上部節(jié)間明顯變長(zhǎng)，基部萌發(fā)的新芽短粗而上部或頂部新萌發(fā)的細(xì)長(zhǎng)，新生葉片較小。基部開始出現(xiàn)愈傷組織或開始膨大的組培苗，經(jīng)過(guò)黑暗處理效果都比較明顯。正常條件下培養(yǎng)9 天和11 天再進(jìn)行黑暗處理的效果與培養(yǎng)5 天和7 天的差別不明顯。但正常條件下培養(yǎng)15 天的上部生長(zhǎng)明顯但基部側(cè)芽不萌發(fā)。

1.3 結(jié)果分析

通過(guò)試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，接種后立即進(jìn)行黑暗處理，創(chuàng)傷面還沒(méi)有愈合不能適應(yīng)新的培養(yǎng)基或還沒(méi)有進(jìn)行生長(zhǎng)。所以處理與否差別不大，并且對(duì)以后的生長(zhǎng)有一定的影響。當(dāng)培養(yǎng)5-7 天后，基部創(chuàng)傷面愈合并產(chǎn)生一定量的愈傷組織，說(shuō)明組培苗開始吸收培養(yǎng)基內(nèi)營(yíng)養(yǎng)和激素并具有生長(zhǎng)能力，此時(shí)再進(jìn)行黑暗處理正是時(shí)候。但正常條件下培養(yǎng)9-11 天以后，因其愈傷面已形成，并開始正常吸收養(yǎng)分。處理效果于正常條件下培養(yǎng)7 天左右的差別不大。正常條件下培養(yǎng)15 天，組培苗已開始生長(zhǎng)，在黑暗條件下處理只有帶頂?shù)膫?cè)芽效果明顯，而基部的側(cè)芽不會(huì)萌發(fā)。

經(jīng)過(guò)分析可知。關(guān)于何時(shí)進(jìn)行黑暗處理時(shí)間的確定，不是看培養(yǎng)天數(shù)決定的多少，而是看該品種何時(shí)產(chǎn)生愈傷組織，以及頂芽側(cè)芽是否開始萌動(dòng)所決定的。新接種組培苗產(chǎn)生愈傷組織或愈傷組織開始膨大時(shí)是黑暗處理的最佳時(shí)間。處理過(guò)早影響后面的生長(zhǎng)和質(zhì)量。處理過(guò)完培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，增加生產(chǎn)成本。

2．黑暗處理時(shí)間長(zhǎng)短對(duì)組培苗的影響

2.1 處理方法

利用正常條件下培養(yǎng)7 天左右或基部已產(chǎn)生愈傷組織的櫻花組培苗180 瓶。將其分成六組，每組30 瓶。并且每組都單獨(dú)存放在鋪有黑色不透明布的培養(yǎng)架上。然后在組培苗上蓋上黑布并相互隔開進(jìn)行黑暗處理，以便在以后的觀察過(guò)程中互不影響。其他培養(yǎng)環(huán)境條件相同。在黑暗條件下分別在培養(yǎng)3 天、5 天、7 天、9 天、11 天、15 天后進(jìn)行觀察，并統(tǒng)計(jì)組培苗的生長(zhǎng)量以及萌芽狀況。

2.2 處理結(jié)果

通過(guò)不同處理觀測(cè)發(fā)現(xiàn)黑暗處理少于5 天的組培苗生長(zhǎng)量不明顯，頂芽略有萌動(dòng)或雖萌動(dòng)但生長(zhǎng)量也不大。帶頂芽的組培苗頂部有發(fā)黃現(xiàn)象，新出葉片明顯變小、變薄、變淺。黑暗處理長(zhǎng)于10 天的組培苗，節(jié)間伸長(zhǎng)明顯，莖嫩、葉小、色弱，節(jié)間甚至達(dá)到半透明狀態(tài)，處理時(shí)間越長(zhǎng)這些現(xiàn)象越明顯。絕大部分組培苗頂部彎曲，更有甚者苗高已達(dá)到瓶口，出現(xiàn)繞蓋兒生長(zhǎng)且長(zhǎng)勢(shì)更弱，開始出現(xiàn)枯頂或下部葉片枯死現(xiàn)象。而黑暗處理5-9 天后的試管苗，生長(zhǎng)量、節(jié)間伸長(zhǎng)明顯，葉色略弱，頂芽及基部叢生芽都能萌發(fā)，并且出現(xiàn)明顯的彎曲現(xiàn)象。下部小芽萌動(dòng)明顯但生長(zhǎng)量不大，不能形成小幼苗。再次接種后增值率較高，且幼苗能健壯生長(zhǎng)。

2.3 結(jié)果分析

通過(guò)以上試驗(yàn)可以看出，組培苗對(duì)黑暗適應(yīng)也需要一定的時(shí)間，對(duì)櫻花而言，5天左右是適應(yīng)期。在黑暗條件下，各種激素活動(dòng)較為明顯。在不同溫度條件試驗(yàn)結(jié)果也有一定的差異，高溫情況下黑暗處理效果更明顯。但低溫、溫差大的條件下黑暗處理效果不明顯，甚至達(dá)不到黑暗處理的目地。處理10 天以后，激素的作用明顯小于黑暗作用，可能是黑暗刺激激素大量積累的作用，造成生長(zhǎng)勢(shì)明顯加快。但組培苗的質(zhì)量明顯下降，使無(wú)效苗的數(shù)量增加。

3.光照對(duì)黑暗處理后恢復(fù)期的影響

3.1 處理方法

所謂恢復(fù)期是指黑暗處理后幼苗生長(zhǎng)由不正常狀態(tài)，轉(zhuǎn)變?yōu)檎ＩL(zhǎng)狀態(tài)所需要的時(shí)間。隨著外部環(huán)境條件（光照和溫度）的變化恢復(fù)期長(zhǎng)短也有一定的差異。利用黑暗處理7 到15 天的組培苗作為試驗(yàn)對(duì)象，黑暗處理結(jié)束后，取90 瓶組培苗分成三組，分別放在弱光、正常光、強(qiáng)光條件下進(jìn)行恢復(fù)性培養(yǎng)。在培養(yǎng)的過(guò)程中觀察在不同光強(qiáng)條件下，各組幼苗的生長(zhǎng)、恢復(fù)以及受害情況。尋找出適合恢復(fù)正常生長(zhǎng)環(huán)境的條件以及恢復(fù)時(shí)間，為以后生產(chǎn)提供處理數(shù)據(jù)。

3.2 處理結(jié)果

黑暗處理解除后在正常環(huán)境條件下培養(yǎng)2-3 天頂部彎曲現(xiàn)象都能自動(dòng)變直。葉色、莖段都會(huì)變成正常，葉片明顯開始變大，葉色逐漸轉(zhuǎn)綠。但高度基本停止生長(zhǎng)，在以后的生長(zhǎng)培育過(guò)程中高度生長(zhǎng)也不明顯，但葉片開始增大、變綠更加明顯。與對(duì)照相比葉色略淡、莖稍細(xì)、節(jié)間變長(zhǎng)明顯。但長(zhǎng)勢(shì)較弱的幼苗放到培養(yǎng)架上正常培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間后，葉色、莖粗以及葉片大小，才會(huì)逐步轉(zhuǎn)變正常，但不如壯苗變化明顯。若是加強(qiáng)光照強(qiáng)度或突然高溫，組培苗很容易受到灼傷或上部葉片、嫩莖直接枯死。在強(qiáng)光下培養(yǎng)容易使上部不充實(shí)的組培苗嫩莖變紅，特別是細(xì)弱的幼苗。生長(zhǎng)一段時(shí)間后大部分變紅部分會(huì)枯死下部生長(zhǎng)基本正常。

3.3 結(jié)果分析

通過(guò)試驗(yàn)觀察，影響黑暗處理恢復(fù)期幼苗生長(zhǎng)質(zhì)量的因素主要有兩個(gè)方面。第一是黑暗處理后幼苗質(zhì)量的好壞，第二是黑暗處理后在恢復(fù)期外界環(huán)境條件的變化?；謴?fù)期幼苗的質(zhì)量好壞對(duì)以后的生長(zhǎng)、增值率以及健壯程度影響較大。若是在生根前進(jìn)行黑暗處理，在恢復(fù)期幼苗質(zhì)量較差，也會(huì)影響到生根質(zhì)量，同時(shí)對(duì)后期的馴化移栽成活率造成較大的影響。所以說(shuō)對(duì)黑暗處理幼苗質(zhì)量的控制很關(guān)鍵。外界環(huán)境條件主要是光照強(qiáng)度的大小和溫度的高低，強(qiáng)光容易使幼小莖葉受傷，弱光能使幼苗進(jìn)一步徒長(zhǎng)降低組培苗質(zhì)量。適當(dāng)降低溫度能使組培苗健康生長(zhǎng)，快速恢復(fù)到正常狀態(tài)。

4.重復(fù)黑暗處理對(duì)組培苗的影響

4.1 處理方法

利用黑暗處理10 天后的組培苗，隨機(jī)抽取120 瓶，分成4 組每組30 瓶進(jìn)行重復(fù)黑暗處理試驗(yàn)，隨機(jī)抽取的組培苗質(zhì)量（高低、大小、健壯程度）有一定的差異。在正常條件下進(jìn)行恢復(fù)生長(zhǎng)5 天（經(jīng)過(guò)5 天的恢復(fù)生長(zhǎng)，組培苗無(wú)論是葉片無(wú)論是葉片大小、葉色以及莖基本能恢復(fù)到正常情況，利用該階段的苗具有一定的代表性），再進(jìn)行黑暗處理，3 天、5 天、7 天、9 天觀察是否會(huì)出現(xiàn)二次快速生長(zhǎng)或出現(xiàn)其他不良現(xiàn)象。

4.2 處理結(jié)果

經(jīng)過(guò)3 天黑暗處理的組培苗變化不明顯，黑暗處理7天左右的組培苗生長(zhǎng)明顯。特別是健壯植株且下部已萌發(fā)叢生側(cè)芽或側(cè)枝生長(zhǎng)更加明顯，但叢生側(cè)芽都能萌發(fā)成細(xì)弱小枝。部分生長(zhǎng)細(xì)弱的組培苗頂部會(huì)出現(xiàn)黃葉或死亡現(xiàn)象。直立生長(zhǎng)的植株頂部再次彎曲。黑暗處理9 天的組培苗生長(zhǎng)勢(shì)較弱枯頂現(xiàn)象更加明顯。無(wú)論是黑暗處理還是重復(fù)黑暗處理以及處理時(shí)間的長(zhǎng)短，組培苗過(guò)老的情況效果不太理想。

4.3 結(jié)果分析

通過(guò)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，重復(fù)黑暗處理的天數(shù)不宜超過(guò)七天，根據(jù)溫度高低適當(dāng)提前或推遲。對(duì)于前一次黑暗處理生長(zhǎng)量不太理想的試管苗，再次進(jìn)行黑暗處理，效果比較明顯。但不易時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)出現(xiàn)明顯的黃化現(xiàn)象，黑暗結(jié)束后極容易枯死。組培苗黑暗處理結(jié)束后，經(jīng)過(guò)短暫正常培養(yǎng)后，要及時(shí)進(jìn)行轉(zhuǎn)接。轉(zhuǎn)結(jié)后不宜直接放在強(qiáng)光條件下培養(yǎng)，應(yīng)在弱光條件下適應(yīng)一段時(shí)間。再增強(qiáng)光照強(qiáng)度促進(jìn)健康生長(zhǎng)。在生根前期對(duì)一些高度不夠或數(shù)量不足的組培苗，應(yīng)用黑暗重復(fù)處理，能達(dá)到較好的效果。對(duì)于一些生長(zhǎng)速度慢，叢生芽萌發(fā)能力弱的品種進(jìn)行重復(fù)黑暗處理也是一個(gè)不錯(cuò)的選擇。但對(duì)于容易發(fā)生玻璃劃的品種應(yīng)慎用。

另外，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中還發(fā)現(xiàn)一些問(wèn)題。例如，利用不同接種工人接種的試管苗進(jìn)行試驗(yàn)，在其他條件都相同的條件下試驗(yàn)結(jié)果有一定的差異。說(shuō)明接種手法和分切方式不同，對(duì)處理結(jié)果有一定的影響。所以在生產(chǎn)中應(yīng)加強(qiáng)接種工人的技能培訓(xùn)，以減少由于接種原因造成的影響。在黑暗處理的前一階段不同強(qiáng)光培養(yǎng)，對(duì)黑暗處理的結(jié)果也有一定的影響。前一階段為正常條件和強(qiáng)光的進(jìn)行黑暗處理后對(duì)處理結(jié)果影響不大。但在弱光條件下培養(yǎng)過(guò)的試管苗在經(jīng)過(guò)黑暗處理生長(zhǎng)更加明顯。生產(chǎn)中影響黑暗處理效果的因素較多，只有采取相應(yīng)的技術(shù)措施，才能使黑暗處理達(dá)到理想的效果。

5.總結(jié)

黑暗處理對(duì)櫻花組培苗的生長(zhǎng)有較大的影響。首先，在生長(zhǎng)量上表現(xiàn)明顯，經(jīng)過(guò)黑暗處理后高度生長(zhǎng)明顯。上部莖段節(jié)間明顯變長(zhǎng)，多數(shù)會(huì)出現(xiàn)彎曲現(xiàn)象，正常培養(yǎng)后都能快速變直。健壯植株基部叢生芽萌發(fā)明顯且短粗，若再經(jīng)過(guò)重復(fù)黑暗處理，基部叢生芽以及側(cè)芽都能萌發(fā)成枝，生長(zhǎng)量倍增。愈傷組織較多的植株黑暗處理后生長(zhǎng)量也較明顯。其次，表現(xiàn)在增值率上。由于櫻花組培苗是利用莖段進(jìn)行增值的，黑暗處理后生長(zhǎng)量變大，成枝數(shù)量增多，分切后增值率上升，特別是健壯植株進(jìn)行重復(fù)黑暗處理下部萌發(fā)成枝力較強(qiáng)，形成大量的叢生芽使增殖率上升。第三，對(duì)生根的影響。黑暗處理后進(jìn)行一段時(shí)間的恢復(fù)性生長(zhǎng)，再進(jìn)行生根培養(yǎng)。生根數(shù)量和質(zhì)量與正常培養(yǎng)條件下基本一致。由于幼苗高度增加、葉片變小更利于接種操作和后期馴化、移栽。通過(guò)實(shí)驗(yàn)對(duì)比，移栽后的成活率影響不大，但能大大提高組培苗移栽速度。第四。對(duì)生產(chǎn)成本控制有一定的作用。在組培生產(chǎn)過(guò)程中構(gòu)成成本的主要是電能消耗和工人工資。通過(guò)黑暗處理，增值率上升提高工人的工作效率，減少了污染率使工人的成本有所下降。

6.討論

黑暗處理雖然效果比較明顯，但在應(yīng)用過(guò)程中應(yīng)注意一些問(wèn)題。例如，處理時(shí)間的把控，時(shí)間短達(dá)不到目的，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)生長(zhǎng)苗較弱，影響下期生長(zhǎng)，甚至?xí)霈F(xiàn)黃化、枯死現(xiàn)象。容易受溫度的影響，高溫效果明顯但易產(chǎn)生細(xì)弱小苗，低溫處理效果不明顯。處理結(jié)果整齊度不好把控，多是由于接種工人造成，生長(zhǎng)生根階段，苗情較弱時(shí)應(yīng)加強(qiáng)煉苗階段的控制。重復(fù)黑暗處理容易造成死苗，黑暗處理存在的一些弊端只有經(jīng)過(guò)多次試驗(yàn)才能在可調(diào)范圍之內(nèi)，但在實(shí)際生產(chǎn)中仍是一項(xiàng)有效的控制手段。