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        動(dòng)物用凍干活疫苗及其制備工藝

        2022-11-16 00:48:10金京勛顧超男
        吉林畜牧獸醫(yī) 2022年1期
        關(guān)鍵詞:保護(hù)劑冷凍干燥凍干

        金京勛,羅 琦,顧超男

        中崇信諾生物制藥泰州有限公司 ,江蘇泰州 225300

        疫苗是指由各種致病微生物制成的用于預(yù)防接種的生物制品,包括活疫苗和滅活疫苗?;钜呙缡峭ㄟ^(guò)人工減毒病原體或從自然界篩選無(wú)毒或微毒的病原體菌株而制備的活的微生物制劑,也稱為減毒活疫苗。將活疫苗接種于動(dòng)物體內(nèi),不致病但病原體可在生物體中復(fù)制從而引發(fā)免疫反應(yīng),以實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期或終生保護(hù)。與滅活疫苗相比,活疫苗具有更強(qiáng)的免疫力和更長(zhǎng)的作用時(shí)間。

        在動(dòng)物疫苗中,滅活疫苗占有相當(dāng)大的比例。隨著畜牧業(yè)的快速發(fā)展,動(dòng)物疫苗的數(shù)量和種類(lèi)不斷增加。目前滅活疫苗的保存形式主要為油苗,與活疫苗相比,其具有運(yùn)輸方便,存儲(chǔ)要求低,但也有免疫效果差、抗體保護(hù)時(shí)間短且難以應(yīng)對(duì)新流行株等缺點(diǎn)。

        將活疫苗加入凍干保護(hù)劑中進(jìn)行凍干處理,得到凍干活疫苗。目前常用的凍干保護(hù)劑主要有牛奶、蔗糖、明膠等,且凍干保護(hù)劑組成簡(jiǎn)單,保護(hù)功能差,導(dǎo)致凍干活疫苗保存期短,穩(wěn)定性差。本文主要對(duì)動(dòng)物凍干活疫苗進(jìn)行分析研究,改進(jìn)制備儲(chǔ)藏工藝,提高凍干活疫苗的穩(wěn)定性以及實(shí)用性。

        1 凍干活疫苗

        1.1 凍干疫苗概念

        凍干活疫苗在是不破壞原有免疫原性的基礎(chǔ)上,通過(guò)病原微生物的傳代或遺傳修飾使病原微生物非致病性,病原微生物失去致病性,將培養(yǎng)液放入凍干機(jī)中,通過(guò)低溫提高凍干機(jī)真空度的方法,將培養(yǎng)液中的水升華分離,制成保持原有微生物免疫原性的干粉,即凍干活疫苗。

        1.2 凍干技術(shù)

        冷凍干燥也稱為冷凍真空干燥或冷凍干燥。冷凍干燥過(guò)程的意義在于減少水分,降低病原生物化學(xué)活性并保持病原免疫原性。微生物通過(guò)生物化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行代謝;衰變率則取決于該反應(yīng)物的有效濃度、活性和溫度;對(duì)于這個(gè)反映來(lái)說(shuō),水起著重要的決定作用,因?yàn)樗軌蚴沟蒙锏鞍踪|(zhì)的結(jié)構(gòu)發(fā)生一系列變化,生物體的流動(dòng)性也是由于水的存在。因此為了能夠保存好微生物,就必須去除水分。這樣才能夠保留好其本身的功能結(jié)構(gòu),而且能夠降低自身的流動(dòng)性。對(duì)于生物的相關(guān)制品來(lái)說(shuō),它冷凍真空干燥的過(guò)程是水分轉(zhuǎn)移以及狀態(tài)發(fā)生變化的過(guò)程,水的三種狀態(tài)達(dá)到平衡,是需要一定條件的。也就是說(shuō),需要首先將含水的物質(zhì)先冷凍成為固態(tài),然后在真空下將固態(tài)冰升華成水蒸氣,其中水蒸氣在冷凝器的表面上形成霜;冷凍干燥后,霜融化成水并被排出。

        1.3 我國(guó)凍干疫苗制備領(lǐng)域的不足

        國(guó)內(nèi)凍干活疫苗生產(chǎn)企業(yè)由于要考慮到成本因素,所以在選擇凍干保護(hù)劑的時(shí)候,還是會(huì)選擇價(jià)格比較低的保護(hù)劑。因此,雖然保護(hù)方面有所變化,但改善的程度是有限的。對(duì)于現(xiàn)階段市場(chǎng)上的試劑來(lái)說(shuō),不同品牌以及不同批次的還是有一定的差距。所以說(shuō),制備保護(hù)劑的時(shí)候,就要先確定試劑制造商是否合格,這個(gè)過(guò)程對(duì)于產(chǎn)品的質(zhì)量來(lái)說(shuō),是非常至關(guān)重要的,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,需要建立高規(guī)格的原料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

        此外,我國(guó)凍干活疫苗生產(chǎn)中凍干保護(hù)劑還存在一些不足,比如說(shuō)配方簡(jiǎn)單、保護(hù)劑的效果差異比較大等問(wèn)題。對(duì)于國(guó)內(nèi)的生物制品來(lái)說(shuō),解決這些問(wèn)題還是比較重要的。疫苗研制人員往往把凍干技術(shù)認(rèn)定為一個(gè)機(jī)械的范疇,生產(chǎn)合格的半成品會(huì)被運(yùn)送到分裝車(chē)間去完成工作。但是,通過(guò)實(shí)踐了解到,每個(gè)過(guò)程和環(huán)節(jié)都是非常重要的。只有疫苗研發(fā)制備人員對(duì)產(chǎn)品生產(chǎn)中的各個(gè)環(huán)節(jié)高度參與,并且必須將上下游有機(jī)地結(jié)合起來(lái),與凍干操作人員密切溝通,否則很難生產(chǎn)出穩(wěn)定的高質(zhì)量產(chǎn)品[1]。

        2 凍干活疫苗制備工藝

        保護(hù)劑制備指南:其中疫苗塊的崩解溫度由賦形劑的相對(duì)濃度決定;抗原收獲或凍干前應(yīng)加入保護(hù)劑;它應(yīng)該含有能夠中和羧基的活性物質(zhì);電解液的成分應(yīng)該最少;國(guó)外學(xué)者研究了產(chǎn)品在凍干過(guò)程中的損傷及蛋白質(zhì)保護(hù)機(jī)理,以提高產(chǎn)品的穩(wěn)定性和經(jīng)濟(jì)性,研究方向主要集中在凍干保護(hù)劑的選擇和耐熱保護(hù)劑的配方上。國(guó)內(nèi)部分單位也先后開(kāi)展了豬瘟細(xì)胞活疫苗、新城疫活疫苗、馬立克氏病活疫苗、傳染性法氏囊病活疫苗、傳染性支氣管活疫苗、雞痘活疫苗等耐熱凍干保護(hù)劑的研究,并取得了階段性成果[2]。雞法氏囊病毒弱毒株B87制備凍干疫苗,在2~8 ℃條件下儲(chǔ)存12個(gè)月或24個(gè)月,效價(jià)基本保持不變。新城疫疫苗經(jīng)改良凍干保護(hù)劑儲(chǔ)存37個(gè)月后,雞只經(jīng)病毒免疫,保護(hù)率仍為91% ~100%。

        3 小結(jié)

        凍干保護(hù)劑對(duì)于國(guó)外來(lái)說(shuō),其相關(guān)技術(shù)是核心機(jī)密。因此,國(guó)內(nèi)企業(yè)要想達(dá)到國(guó)際的先進(jìn)水平,就必須要和國(guó)外企業(yè)緊密合作,只有這樣,才能夠生產(chǎn)出價(jià)格合理、成本低廉的凍干活疫苗。同時(shí)要增加凍干活疫苗技術(shù)的理論研究,提高產(chǎn)品預(yù)測(cè)能力,增加產(chǎn)品批次間的穩(wěn)定性,為制備更好的動(dòng)物用凍干活疫苗提供理論依據(jù)。

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