于樹(shù)濤

（萊陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，山東萊陽(yáng) 265200）

磷不僅是畜禽必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，而且是功能最多的營(yíng)養(yǎng)素之一。如果畜禽機(jī)體缺少鈣、磷，就會(huì)導(dǎo)致飼料轉(zhuǎn)化率降低，動(dòng)物生長(zhǎng)緩慢甚至停止生長(zhǎng)，也會(huì)導(dǎo)致一些疾病發(fā)生，如佝僂病、軟骨病等[1]。豬、雞等單胃動(dòng)物很難吸收飼料中的磷，因?yàn)轱暳现械牧状蟛糠忠灾菜崃仔问酱嬖?，?dǎo)致畜禽對(duì)植酸磷的吸收率很低，所以在飼料中添加植酸酶可以有效提高植酸磷利用率[2]。

目前，單胃動(dòng)物的預(yù)混料、濃縮料、全價(jià)配合粉料中都添加了植酸酶，但是要在飼料中使用植酸酶，就必須考慮植酸酶在加工制粒過(guò)程中的熱穩(wěn)定性和在動(dòng)物腸道內(nèi)的水解效率。顆粒飼料的調(diào)制和制粒過(guò)程，溫度可達(dá)80～90℃，普通植酸酶活性大幅降低，只有添加耐高溫的植酸酶產(chǎn)品，才能保證植酸酶在顆粒飼料中使用的安全性[3-4]。

目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)植酸酶在豬、肉雞等畜禽養(yǎng)殖方面的應(yīng)用效果研究已有很多，但有關(guān)低磷日糧添加耐高溫植酸酶對(duì)蛋雞影響的研究還較少。植酸酶可替代日糧中0.1%有效磷[5]。因此，開(kāi)展這方面的研究非常必要，對(duì)指導(dǎo)蛋雞生產(chǎn)、合理應(yīng)用酶制劑、減少磷的排放污染及環(huán)保養(yǎng)殖具有重要意義。為了提高飼料中磷的利用率，克服高溫下植酸酶的變性失活，本試驗(yàn)以海蘭褐蛋雞為試驗(yàn)動(dòng)物，通過(guò)飼養(yǎng)試驗(yàn)及屠宰試驗(yàn)，研究在含磷量較低的日糧中加入耐高溫植酸酶對(duì)海蘭褐蛋雞蛋品質(zhì)和產(chǎn)蛋性能的影響，并為耐高溫植酸酶應(yīng)用于蛋雞養(yǎng)殖打下基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料及儀器

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物。供試動(dòng)物為海蘭褐蛋雞。

1.1.2 試驗(yàn)試劑。試驗(yàn)試劑主要包括HCl-HNO3混合酸、HCl溶液、無(wú)水乙醇、乙醚、耐高溫植酸酶（濰坊寧濰化工有限公司，高溫制粒后酶活保持在90%以上）。

1.1.3 試驗(yàn)儀器。主要試驗(yàn)儀器包括AF-610A原子熒光光譜儀（北京合悅達(dá)科技有限公司）、FA-1004電子天平（泰興市凌基儀器有限公司）、游標(biāo)卡尺（青海量具刃具集團(tuán)公司）、蛋白高度測(cè)定儀（KIYA SEISAKUSHO公司）。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)前的日糧要求低磷，在預(yù)試驗(yàn)前篩掉不健康的雞只，盡量保證每組雞生產(chǎn)性能接近和只數(shù)相同。選取240羽24周齡海蘭褐商品蛋雞，采用籠養(yǎng)方式，隨機(jī)分成4組進(jìn)行試驗(yàn)，分別為對(duì)照組、試驗(yàn)1組、試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組，每組3個(gè)重復(fù)。對(duì)照組使用低磷日糧，試驗(yàn)1、2、3組從24周齡開(kāi)始預(yù)飼7 d后分別在低磷日糧中添加600、900、1 200 U/kg耐高溫植酸酶，試驗(yàn)時(shí)間8周。

1.3 日糧組成及飼養(yǎng)管理

低磷日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1和表2。整個(gè)飼養(yǎng)試驗(yàn)均在雞舍內(nèi)，雞舍為階梯式，每籠4只，預(yù)試期7 d，確定各組主要生產(chǎn)性能差異不顯著后，才開(kāi)始正式試驗(yàn)，試驗(yàn)時(shí)間8周，日喂2次，自由飲水。雞舍溫度控制為18～23℃，相對(duì)濕度為60%～70%，光照時(shí)間為16 h。按常規(guī)管理方法做好驅(qū)蟲(chóng)、免疫、消毒工作。在進(jìn)行試驗(yàn)前，首先進(jìn)行徹底的清洗、消毒，重點(diǎn)是對(duì)雞籠、雞舍、料槽和水槽進(jìn)行消毒。在試驗(yàn)期間，每日清掃雞舍，保證雞舍衛(wèi)生。

表1 低磷日糧組成 單位：%

表2 低磷日糧營(yíng)養(yǎng)水平 單位：%

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 產(chǎn)蛋性能指標(biāo)。試驗(yàn)中每天以組為單位記錄產(chǎn)蛋數(shù)、軟殼蛋數(shù)、蛋重、破殼蛋數(shù)，計(jì)算產(chǎn)蛋率、平均蛋重及合格蛋率，每周計(jì)算1次料蛋比。

1.4.2 蛋品質(zhì)的測(cè)定及方法。試驗(yàn)結(jié)束之后，首先每個(gè)組隨機(jī)抽選50枚雞蛋放在室溫（20℃）下，然后從每組再選取15枚雞蛋，用來(lái)測(cè)定蛋黃指數(shù)、蛋殼厚度、蛋形指數(shù)，并計(jì)算哈氏單位。

1.4.3 脛骨質(zhì)量的測(cè)定及方法。試驗(yàn)結(jié)束之后，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽選1只雞屠宰并剝離左右側(cè)脛骨，測(cè)定脛骨強(qiáng)度、灰分及鈣、磷含量。將左脛骨處理后放入105℃烘箱中烘干24 h，測(cè)定長(zhǎng)度、直徑、脛骨重量。將脛骨壓碎，放入坩堝，于茂福爐中550℃灰化18 h，測(cè)定灰分含量。脛骨鈣采用EDTA絡(luò)合滴定法測(cè)定；脛骨磷采用濕灰化釩黃比色法測(cè)定。

1.5 數(shù)據(jù)分析

使用Excel將所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)建立數(shù)據(jù)庫(kù)，采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件中One-Way ANOVA方差分析檢驗(yàn)組間差異的顯著性，采用最小顯著差數(shù)法（LSD），結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 低磷日糧中添加不同劑量耐高溫植酸酶對(duì)海蘭褐蛋雞產(chǎn)蛋性能的影響

由表3可知：與對(duì)照組相比，試驗(yàn)1、2、3組平均蛋重差異不顯著（P＞0.05）；產(chǎn)蛋率提高不顯著（P＞0.05）；合格蛋率提高不顯著（P＞0.05）；料蛋比差異不顯著（P＞0.05）。

表3 不同劑量植酸酶對(duì)海蘭褐蛋雞產(chǎn)蛋性能的影響

2.2 低磷日糧中添加不同劑量耐高溫植酸酶對(duì)海蘭褐蛋雞蛋品質(zhì)的影響

由表4可以看出：與對(duì)照組相比，試驗(yàn)1、3組蛋殼厚度差異不顯著（P＞0.05），而試驗(yàn)2組蛋殼厚度提高顯著（P＜0.05）；與對(duì)照組相比，試驗(yàn) 1、2、3 組蛋黃指數(shù)提高極顯著（P＜0.01）；與對(duì)照組相比，試驗(yàn)2組雞蛋的哈氏單位提高顯著（P＜0.05），試驗(yàn) 1、3 組提高不顯著（P＞0.05），試驗(yàn) 2組與試驗(yàn) 1、3組差異顯著（P＜0.05）。

表4 不同劑量植酸酶對(duì)海蘭褐蛋雞蛋品質(zhì)的影響

2.3 低磷日糧中添加耐高溫植酸酶對(duì)海蘭褐蛋雞脛骨質(zhì)量的影響

由表5可知：與對(duì)照組相比，試驗(yàn)2組脛骨重量提高顯著（P＜0.05），試驗(yàn) 1、3 組不顯著；與對(duì)照組相比，試驗(yàn) 1、2、3 組脛骨長(zhǎng)度差異不顯著（P＞0.05）；與對(duì)照組相比，試驗(yàn)2組的鈣含量提高極顯著（P＜0.01），試驗(yàn)1、3組的鈣含量提高不顯著（P＞0.05）；與對(duì)照組相比，試驗(yàn) 1、3組的總磷含量提高不顯著（P＞0.05），而試驗(yàn)2組的總磷含量提高極顯著（P＜0.01）；與對(duì)照組相比，試驗(yàn)1、2、3組的粗灰分含量提高不顯著（P＞0.05）。

表5 不同劑量植酸酶對(duì)海蘭褐蛋雞脛骨質(zhì)量的影響

3 結(jié)論與討論

3.1 低磷日糧中添加耐高溫植酸酶對(duì)海蘭褐蛋雞產(chǎn)蛋性能的影響

據(jù)報(bào)道，日糧含磷量低會(huì)引起蛋雞的產(chǎn)蛋率、平均蛋重、飼料報(bào)酬下降，而加入耐高溫植酸酶可有效提高蛋雞的產(chǎn)蛋率、飼料報(bào)酬、日產(chǎn)蛋重，也可以提高鈣和磷的利用率等[6]。黃 忠等[7]報(bào)道，在低磷日糧中添加植酸酶，其產(chǎn)蛋率、蛋重以及料蛋比分別比對(duì)照組提高了2.86%、3.24%和3.29%，每1 kg雞蛋飼料成本降低3.45%，死亡淘汰率和破殼軟殼蛋率降低。本試驗(yàn)在對(duì)照組和所有試驗(yàn)組海蘭褐蛋雞均未死亡、均無(wú)明顯臨床癥狀情況下的結(jié)果表明，低磷日糧中添加耐高溫植酸酶改善了蛋雞的產(chǎn)蛋性能。這是因?yàn)橹菜崦改芩庵菜後尫懦鰺o(wú)機(jī)磷，同時(shí)解離植酸與各種營(yíng)養(yǎng)成分的結(jié)合，使飼料的消化吸收效率和飼料的營(yíng)養(yǎng)密度得到提高[8-9]。另外，添加900 U/kg組海蘭褐蛋雞的平均蛋重、產(chǎn)蛋率和合格蛋率均優(yōu)于添加600、1 200 U/kg組，但添加900 U/kg組的料蛋比與添加600、1 200 U/kg組相比，分別降低了2.17%（P＞0.05）、4.76%（P＞0.05）。 綜合考慮，添加 900 U/kg組優(yōu)于添加600、1 200 U/kg組，說(shuō)明適量添加耐高溫植酸酶可有效地提高海蘭褐蛋雞的生產(chǎn)性能，但低磷日糧中添加耐高溫植酸酶的經(jīng)濟(jì)性及后續(xù)效應(yīng)仍需進(jìn)一步研究。

3.2 低磷日糧中添加耐高溫植酸酶對(duì)海蘭褐蛋雞蛋品質(zhì)的影響

雞蛋品質(zhì)主要與雞蛋的營(yíng)養(yǎng)成分、食用價(jià)值密切相關(guān)，從而影響其商品等級(jí)、市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力及經(jīng)濟(jì)效益，同時(shí)對(duì)雞蛋的破損率、保存時(shí)間及種蛋孵化率等有一定的影響。低磷日糧中添加耐高溫植酸酶能提高蛋重、蛋形指數(shù)、蛋殼厚度，且以添加900 U/kg耐高溫植酸酶更有利于提高蛋品質(zhì)。這可能是因?yàn)橹菜崦缚伤庵菜後尫懦霰黄浣j(luò)合的Ca2+，提高鈣的利用率，從而增加了鈣在體內(nèi)的存留及在蛋殼中的沉積量[10-11]。蛋形指數(shù)范圍為1.30～1.35時(shí)的孵化率較高[12]。試驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，添加600、1 200 U/kg組蛋形指數(shù)及蛋殼厚度差異不顯著，而添加900 U/kg組差異顯著。說(shuō)明適量添加耐高溫植酸酶對(duì)蛋形指數(shù)及蛋殼厚度有明顯影響。蛋黃指數(shù)是用來(lái)表示蛋黃品質(zhì)和禽蛋的新鮮程度，哈氏單位是用來(lái)衡量蛋品新鮮度和蛋白質(zhì)品質(zhì)的重要指標(biāo)[13]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，3個(gè)試驗(yàn)組蛋黃指數(shù)差異極顯著，而哈氏單位只有添加900 U/kg組差異極顯著，說(shuō)明當(dāng)日糧中鈣、磷已達(dá)需要水平時(shí)，再添加植酸酶無(wú)明顯效果。這是因?yàn)楦哜}不利于植酸酶作用，鈣與植酸酶可形成復(fù)合物或植酸鈣，從而影響植酸酶活性。

3.3 低磷日糧中添加耐高溫植酸酶對(duì)海蘭褐蛋雞脛骨質(zhì)量的影響

脛骨中灰分、鈣及磷含量降低的主要原因是畜禽攝入鈣、磷不足或機(jī)體對(duì)鈣、磷需要量增加時(shí)，骨中鈣、磷被動(dòng)出來(lái)。在蛋雞日糧中添加植酸酶可提高脛骨質(zhì)量和脛骨灰分中鈣、磷含量以及骨密度[14]。本試驗(yàn)脛骨分析表明，在低磷日糧中添加耐高溫植酸酶顯著提高了脛骨重量；與對(duì)照組相比，添加900 U/kg組的總磷含量及鈣含量提高極顯著；在一定范圍內(nèi)總磷含量隨植酸酶的增加而增加，死亡率與腿病率隨植酸酶的增加而降低。