潘忠文，潘忠斌

（1.舒城縣畜牧獸醫(yī)發(fā)展中心，安徽 舒城 231300；2.舒城縣水產(chǎn)發(fā)展中心，安徽 舒城 231300）

近些年，中草藥提取物的研究比較廣泛。黃芪是一種多年生草本中草藥，味甘、性溫，可以起到固表止汗、補(bǔ)氣、托毒排膿等作用。而黃芪多糖是從黃芪植物中提取的一種生物活性成分，具有多種生物學(xué)功能，如調(diào)節(jié)機(jī)體免疫、增強(qiáng)抗氧化性能、抗菌等[1-3]。目前，黃芪多糖在畜禽養(yǎng)殖生產(chǎn)中的研究應(yīng)用主要集中于豬、家禽、反芻動物等。崔玉革等[4]研究發(fā)現(xiàn)，在斷奶仔豬生產(chǎn)中使用黃芪多糖可以提高斷奶仔豬的生長性能，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，并能改善部分血清生化指標(biāo)。楊泓濤等[5]研究發(fā)現(xiàn)，在黔北麻羊生產(chǎn)中使用適量的黃芪多糖，可以提高羔羊的生產(chǎn)性能，調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫力。龐青松等[6]在斷奶肉兔的養(yǎng)殖中使用適量的黃芪多糖，可以有效促進(jìn)幼兔的生長性能，降低其腹瀉率，提高機(jī)體免疫力。劉春花等[9]在草魚生產(chǎn)中使用一定劑量的黃芪多糖可以提高草魚機(jī)體的非特異性免疫功能，并能對嗜水氣單胞菌具有很好的抑制作用，且黃芪多糖在草魚養(yǎng)殖中的最適添加水平為10～30 mg/kg 。目前，黃芪多糖在鯽魚生產(chǎn)中的研究應(yīng)用相對較少。因此，本研究以鯽魚為研究對象，探討不同水平的黃芪多糖對其機(jī)體免疫功能的影響，并確定黃芪多糖在鯽魚養(yǎng)殖中的最適添加水平，為黃芪多糖在鯽魚養(yǎng)殖中的合理應(yīng)用提供理論數(shù)據(jù)支持。

1 試驗(yàn)材料和試驗(yàn)方法

1.1 試驗(yàn)黃芪多糖

本試驗(yàn)中使用的黃芪多糖由北京某生物公司生產(chǎn)，其有效含量大于60%。試驗(yàn)所用的鯽魚來自舒城縣柏林鄉(xiāng)老徐家庭農(nóng)場，該農(nóng)場以生產(chǎn)大規(guī)格的魚種為主，選取的鯽魚體重約40 g，健康、無病。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計及鯽魚餌料

試驗(yàn)選取500尾體重差異不顯著、健康無病的鯽魚按照單因子試驗(yàn)設(shè)計，將其均分為5個處理組，每組5個重復(fù)，每個重復(fù)20尾鯽魚。對照組試驗(yàn)鯽魚飼喂基礎(chǔ)餌料，試驗(yàn)1組鯽魚飼喂含有5 mg/kg的黃芪多糖的基礎(chǔ)餌料，試驗(yàn)2組鯽魚飼喂含有10 mg/kg的黃芪多糖的基礎(chǔ)餌料，試驗(yàn)3組鯽魚飼喂含有20 mg/kg的黃芪多糖的基礎(chǔ)餌料，試驗(yàn)4組鯽魚飼喂含有40 mg/kg的黃芪多糖的基礎(chǔ)餌料。試驗(yàn)周期分為預(yù)試驗(yàn)7天和正式試驗(yàn)30天，試驗(yàn)結(jié)束后采集鯽魚血液，檢測鯽魚血清中免疫球蛋白M、免疫球蛋白G、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、超氧化物歧化酶及丙二醛等免疫指標(biāo)。試驗(yàn)設(shè)計見表1。試驗(yàn)鯽魚的基礎(chǔ)餌料配方見表2。

表1 試驗(yàn)設(shè)計及處理

表2 試驗(yàn)鯽魚的基礎(chǔ)餌料配方

1.3 鯽魚養(yǎng)殖管理

試驗(yàn)所有鯽魚飼養(yǎng)于25個水族箱中，試驗(yàn)開始前馴化7天，期間投喂基礎(chǔ)餌料。每日鯽魚分別于6:00、12:00、17:00飼喂。每日餌料的投喂量約為鯽魚體質(zhì)量的3.5%～4.5%。每日使用虹吸管收集水族箱中的殘餌。水溫約為23.5℃～25.5℃，溶解氧含量大于5.2 mg/L。每7天換水2次，每次的換水量約為1/3。

1.4 鯽魚免疫指標(biāo)的檢測

試驗(yàn)第30天時，停止投喂餌料24小時后，每個重復(fù)選擇2尾鯽魚進(jìn)行麻醉后，采集尾靜脈的血液，靜置2～4小時后，4000 r/min離心5 min，取上層血清用于檢測免疫指標(biāo)。主要檢測免疫球蛋白M、免疫球蛋白G、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、超氧化物歧化酶、丙二醛等免疫指標(biāo)。以上指標(biāo)的檢測方法參考試劑盒說明書進(jìn)行（南京建成生物工程研究所）。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)結(jié)束后檢測的鯽魚血清免疫指標(biāo)數(shù)據(jù)使用SPSS 26統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行單因子方差分析，此組指標(biāo)數(shù)據(jù)具有差異顯著性后，再使用LSD方法對組間數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較，結(jié)果以平均值表示，P＜0.05表示此組數(shù)據(jù)具有差異性。

2 試驗(yàn)結(jié)果

不同水平的黃芪多糖對鯽魚血清免疫指標(biāo)的影響見表3。由表3可見，在鯽魚養(yǎng)殖中使用適量的黃芪多糖可以增強(qiáng)鯽魚機(jī)體的免疫力。其中，試驗(yàn)3組鯽魚血清中免疫球蛋白M和免疫球蛋白G含量顯著高于對照組（P＜0.05），而試驗(yàn)2組和試驗(yàn)4組鯽魚血清中的免疫球蛋白M和免疫球蛋白G含量有比對照組提高的趨勢，但差異不顯著（P＞0.05）。試驗(yàn)3組和試驗(yàn)4組鯽魚血清中超氧化物歧化酶活性顯著高于對照組（P＜0.05），試驗(yàn)2組鯽魚血清超氧化物歧化酶活性有提高的趨勢（P＞0.05）。試驗(yàn)3組鯽魚血清中丙二醛含量顯著低于對照組（P＜0.05），其他試驗(yàn)組鯽魚血清中丙二醛含量有降低趨勢（P＞0.05）。

表3 不同水平的黃芪多糖對鯽魚血清免疫指標(biāo)的影響

3 討論與分析

本試驗(yàn)中，在鯽魚養(yǎng)殖使用20 mg/kg的黃芪多糖對鯽魚機(jī)體的免疫功能的效果最好，表明鯽魚機(jī)體對黃芪多糖具有一定耐受能力，不是添加量越高效果越好。曹婷婷等[10]研究表明，在鯽魚養(yǎng)殖中使用黃芪復(fù)方可以提高鯽魚血清中NBT細(xì)胞數(shù)量，增強(qiáng)機(jī)體的抗病力。周智愚等[11]研究表明，黃芪多糖可以提高草魚機(jī)體的免疫力，且能通過母本傳遞給子代。以上研究表明，在水生動物養(yǎng)殖使用適量的黃芪多糖可以有效提高機(jī)體的免疫力，與黃芪多糖的調(diào)節(jié)免疫力的生物學(xué)功能相關(guān)。在實(shí)際生產(chǎn)中，每種魚對黃芪多糖的耐受力不同，根據(jù)實(shí)際需要確定后其獨(dú)特的添加量。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)研究表明，在鯽魚養(yǎng)殖中使用適量的黃芪多糖可以提高其機(jī)體的免疫球蛋白含量，增強(qiáng)超氧化物歧化酶活性，降低丙二醛含量，顯著改善了機(jī)體的免疫力，且黃芪多糖的最適添加量為20 mg/kg。