陳崎鳳

（淮安生物工程高等職業(yè)學(xué)校，江蘇 淮安 223200）

近年來，隨著水產(chǎn)生物養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大，水產(chǎn)的養(yǎng)殖環(huán)境逐漸惡化，致使水產(chǎn)生物疾病頻發(fā)，給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。抗生素在治療水產(chǎn)生物疾病取得不錯(cuò)效果的同時(shí)，也產(chǎn)生了較為嚴(yán)重的負(fù)面影響，如耐藥菌株的產(chǎn)生、抗生素畜產(chǎn)品殘留、環(huán)境污染等問題，因此開發(fā)安全、綠色、環(huán)保、高效的抗生素替代品至關(guān)重要。其中，中草藥在替代抗生素方面取得不錯(cuò)的效果[1-3]。蒲公英屬于藥食同源的多年生草本植物[4]。蒲公英提取物中含有多種生物活性成分，如有機(jī)酸、皂苷、多糖、生物堿等[5]，具有多種生物學(xué)功能，如抗氧化、提高免疫力、降血糖等[6-7]。目前，蒲公英提取物已廣泛應(yīng)用于畜禽及水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)中，可以提高動(dòng)物采食量，增強(qiáng)機(jī)體免疫力及抗氧化性能，降低發(fā)病率，進(jìn)而改善動(dòng)物的生產(chǎn)性能[8-10]。但蒲公英提取物在鯉魚養(yǎng)殖生產(chǎn)中的研究應(yīng)用結(jié)果并不多，因此，本試驗(yàn)以鯉魚為受試對象，探究鯉魚基礎(chǔ)餌料中添加不同水平的蒲公英提取物對其機(jī)體免疫功能的影響，并確定蒲公英提取物在鯉魚生產(chǎn)中的最適添加水平，為蒲公英提取物在鯉魚生產(chǎn)中的高效推廣應(yīng)用提供理論數(shù)據(jù)支撐。

1 試驗(yàn)材料和試驗(yàn)方法

1.1 蒲公英提取物

本研究中使用的蒲公英提取物由西安櫟萍生物科技有限公司提供，其有效成分為蒲公英黃酮，有效含量大于10%。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本研究選擇體重相近、健康的鯉魚1000尾按照單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，隨機(jī)分成4個(gè)處理組，每組250尾鯉魚。對照組鯉魚投喂基礎(chǔ)餌料，試驗(yàn)1組鯉魚投喂基礎(chǔ)餌料+50 mg/kg的蒲公英提取物，試驗(yàn)2組鯉魚投喂基礎(chǔ)餌料+100 mg/kg的蒲公英提取物，試驗(yàn)3組鯉魚投喂基礎(chǔ)餌料+200 mg/kg的蒲公英提取物。試驗(yàn)周期為9周，其中預(yù)飼期1周，正式試驗(yàn)期8周。試驗(yàn)結(jié)束，采集各組鯉魚血液，檢測血清免疫指標(biāo)。試驗(yàn)設(shè)計(jì)如表1所示。試驗(yàn)鯉魚的基礎(chǔ)餌料配方如表2所示。

表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

表2 試驗(yàn)鯉魚基礎(chǔ)餌料配方

1.3 鯉魚養(yǎng)殖管理

試驗(yàn)開始前，準(zhǔn)備已消毒處理的養(yǎng)殖設(shè)備。試驗(yàn)鯉魚馴化一周之后進(jìn)行正式試驗(yàn)，此期間投喂基礎(chǔ)餌料。水箱中的水溫約為25.5℃，pH值約為7.3，溶解氧濃度大于5.5 mg/L。每日鯉魚被投喂2次，投喂量約為鯉魚體質(zhì)量的3.5%。及時(shí)清理水箱中的殘餌，每周換水量約為1/3。

1.4 鯉魚血清免疫指標(biāo)的測定

試驗(yàn)結(jié)束，所有試驗(yàn)鯉魚禁食24小時(shí)后，每組挑選10尾健康的鯉魚采集血液，經(jīng)3500 r/min離心8 min后，收集上層血清樣品于-20℃冰箱保存，用于檢測鯉魚血清中的免疫球蛋白M、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、溶菌酶、丙二醛、超氧化物歧化酶等指標(biāo)。試劑盒由南京建成研究所生產(chǎn)。

1.5 數(shù)據(jù)處理

檢測的鯉魚血清免疫指標(biāo)數(shù)據(jù)采用SPSS26進(jìn)行單因子方差分析顯著性，鄧肯法對數(shù)據(jù)兩兩比較，P＜0.05代表指標(biāo)數(shù)據(jù)具有顯著性差異。

2 試驗(yàn)結(jié)果

不同水平的蒲公英提取物對鯉魚機(jī)體免疫指標(biāo)的影響見表3。由表3數(shù)據(jù)可見，試驗(yàn)2組鯉魚血清中的免疫球蛋白M含量顯著高于對照組（P＜0.05），試驗(yàn)2組和試驗(yàn)3組鯉魚血清中補(bǔ)體C3含量顯著高于對照組（P＜0.05），試驗(yàn)2組鯉魚血清中的補(bǔ)體C4含量顯著高于對照組（P＜0.05），試驗(yàn)2組鯉魚血清中的超氧化物歧化酶活性顯著高于對照組（P＜0.05），試驗(yàn)2組和試驗(yàn)3組鯉魚血清中丙二醛含量顯著低于對照組（P＜0.05），試驗(yàn)2組和試驗(yàn)3組鯉魚血清中溶菌酶活性顯著高于對照組（P＜0.05）。

表3 不同水平的蒲公英提取物對鯉魚機(jī)體免疫指標(biāo)的影響

3 討論

動(dòng)物血清中的免疫球蛋白M、補(bǔ)體、溶菌酶、丙二醛、超氧化物歧化酶是水產(chǎn)生物機(jī)體非特異性免疫的重要指標(biāo)。本試驗(yàn)中，在鯉魚生產(chǎn)中使用適量蒲公英提取物可以顯著提高血清中免疫球蛋白M、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4含量，增強(qiáng)超氧化物歧化酶活性及溶菌酶活性，降低丙二醛含量，改善了機(jī)體的免疫功能。王紅濤等[8]研究發(fā)現(xiàn)，在鯉魚生產(chǎn)中使用100 mg/kg的蒲公英提取物可以有效提高血清中免疫球蛋白M、補(bǔ)體含量及溶菌酶活性，與本研究結(jié)果類似。蒲公英提取物提高了鯉魚機(jī)體免疫力與其富含的生物活性成分相關(guān)，蒲公英提取物中的黃酮、生物堿、皂苷等有效成分均具有較強(qiáng)的調(diào)節(jié)免疫功能的作用。

4 結(jié)論

研究表明，在鯉魚生產(chǎn)中使用蒲公英提取物可以顯著提高血清中免疫球蛋白M、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4含量，增強(qiáng)超氧化物歧化酶活性及溶菌酶活性，降低丙二醛含量，改善了機(jī)體的免疫功能，且蒲公英提取物的最適添加量為100 mg/kg。