徐 偉，張 山，唐會(huì)昌，李憶蒙

(邯鄲市中心醫(yī)院神經(jīng)外四科，邯鄲 056000；*通訊作者,E-mail:dpx699@163.com)

外傷性腦損傷是由于大腦受到直接的機(jī)械損傷而發(fā)生的，并引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化和神經(jīng)元細(xì)胞死亡。顱腦外傷后不僅是最初的原發(fā)性損傷會(huì)導(dǎo)致腦功能障礙，在很大程度上也與繼發(fā)性腦損傷密切相關(guān)，繼發(fā)性腦損傷首先會(huì)產(chǎn)生一系列生化降解過程的損傷級(jí)聯(lián)反應(yīng)，主要包括氧化應(yīng)激、炎癥、凋亡和興奮性氨基酸毒性等，致使神經(jīng)細(xì)胞進(jìn)一步受損或致死，因此避免繼發(fā)性腦損傷引起的神經(jīng)元死亡對(duì)腦組織起一定的保護(hù)作用，如何減輕神經(jīng)損傷是臨床亟待解決的重要課題[1,2]。目前臨床上除少數(shù)患者需要手術(shù)治療外，多強(qiáng)調(diào)維持營(yíng)養(yǎng)、水、電解質(zhì)、酸堿平衡等預(yù)防各種并發(fā)癥。急需有效的治療措施來降低腦組織破壞水平，減緩/抑制神經(jīng)細(xì)胞的進(jìn)一步損傷。依達(dá)拉奉是一種抗氧化劑和自由基清除劑，可清除多種自由基[3]。有研究顯示[4,5]，依達(dá)拉奉作為一種腦保護(hù)劑可減輕腦水腫，可能通過抑制脂質(zhì)出現(xiàn)過氧化反應(yīng)，捕獲自由基數(shù)量減少，減少自由基濃度，保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞不被自由基損傷，從而降低危重型顱腦損傷病人的死亡率和致殘率。右莰醇是雙環(huán)單萜類化合物，可抑制炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，進(jìn)而可能減少細(xì)胞凋亡、壞死[6]。依達(dá)拉奉和右莰醇兩種活性成分組成的復(fù)方制劑即為依達(dá)拉奉右莰醇，在依達(dá)拉奉和右莰醇以4 ∶1的配比聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，研究發(fā)現(xiàn)可用于減輕急性腦梗死血管內(nèi)治療開通良好患者的神經(jīng)損傷情況[7]以及應(yīng)用于急性缺血性腦卒中的神經(jīng)保護(hù)[8]，但在顱腦外傷后腦損傷中的作用國(guó)內(nèi)目前未見相關(guān)報(bào)道?；诖?，本研究通過建立大鼠液壓沖擊腦創(chuàng)傷動(dòng)物模型，并應(yīng)用依達(dá)拉奉右莰醇進(jìn)行干預(yù)，以此來證實(shí)依達(dá)拉奉右莰醇的神經(jīng)保護(hù)作用。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

本研究選取大鼠購(gòu)于河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，均為雄性SD大鼠，總共96只，年齡8～12周，體質(zhì)量250～350 g，平均(304.7±8.6)g。在本實(shí)驗(yàn)開始前，于河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物房適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，相對(duì)濕度40%～70%，室溫(25±2)℃，采用標(biāo)準(zhǔn)鼠飼料常規(guī)喂養(yǎng)，鼠飼料和飲水自由進(jìn)食。本研究已經(jīng)獲得邯鄲市中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，審查批件號(hào)[2021-(倫審)-056]。

1.2 動(dòng)物分組及建模

將96只大鼠隨機(jī)分為3組：假手術(shù)組、腦損傷組、依達(dá)拉奉右莰醇組，每組32只。采用河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院孫國(guó)柱等[9]設(shè)計(jì)的液壓沖擊裝置建立大鼠液壓沖擊腦損傷模型，打擊強(qiáng)度(1.50±0.20)個(gè)大氣壓，造成中度腦損傷。大致步驟為：稱重，隨后腹腔注射10%水合氯醛麻醉大鼠，固定于手術(shù)臺(tái)上，對(duì)大鼠頭部去毛并消毒，剪開頭皮、分離骨膜、暴露顱骨，采用牙科鉆磨在顱骨上開一直徑為5 mm的圓形骨窗。將自制打擊管固定于圓形骨窗上，以待后續(xù)注入藥物使用。假手術(shù)組大鼠只行麻醉后顱骨開窗，不行液壓沖擊處理。腦損傷組和依達(dá)拉奉右莰醇給藥組將液壓沖擊儀強(qiáng)度調(diào)整為2.026×105Pa，隨后再將打擊管與液壓沖擊儀器連接，從而進(jìn)行打擊，大鼠出現(xiàn)四肢抽搐，有數(shù)秒呼吸抑制現(xiàn)象時(shí)提示建模成功。在建模成功后，依達(dá)拉奉右莰醇組大鼠用經(jīng)尾靜脈注射給藥方法，每次劑量為3 mg/kg，于造模后12 h、24 h、3 d、7 d連續(xù)給藥4次；假手術(shù)組和腦損傷組大鼠則給予注射等量生理鹽水。

1.3 腦組織含水量測(cè)定

分別在造模后12 h、24 h、3 d、7 d采用腹腔注射10%水合氯醛麻醉大鼠，迅速處死大鼠，每組2只。腦組織含水量的測(cè)定采用干濕質(zhì)量法。稱取濕重前需用濾紙吸取表面水分，稱取干重前則再將腦組織置于110 ℃恒溫烤箱中烘烤24 h。腦組織含水量(%)=(濕重-干重)/濕重×100%。

1.4 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)炎性細(xì)胞因子水平

分別在造模后12 h、24 h、3 d、7 d采用腹腔注射10%水合氯醛麻醉大鼠，迅速處死大鼠，每組2只，取出血腫周圍腦組織，加入0.9%生理鹽水制成10%組織勻漿并在低溫3 000 r/min離心20 min后取上清液，實(shí)驗(yàn)過程中嚴(yán)格按照大鼠ELISA試劑盒說明書進(jìn)行操作。采用全自動(dòng)酶標(biāo)分析儀測(cè)定其吸光度值(波長(zhǎng)為450 nm)，分別計(jì)算白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的表達(dá)水平。

1.5 腦組織中活性氧族(ROS)和超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定

分別在造模后12 h、24 h、3 d、7 d采用腹腔注射10%水合氯醛麻醉大鼠，迅速處死大鼠，每組2只并將水腫腦組織稱重，制作10%的組織勻漿(10 mmol/L磷酸鹽緩沖液)。在12 000g條件下取組織勻漿5 ml離心20 min，取上清液。ROS采用二氯熒光素乙酰乙酸鹽熒光分光光度法檢測(cè)(上海潤(rùn)裕生物科技有限公司)，SOD采用黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)(上海潤(rùn)裕生物科技有限公司)。上述檢測(cè)方法的所有操作步驟均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.6 免疫組織化學(xué)染色和單鏈DNA(ssDNA)、羥基脲(Hu)、8-羥化脫氧鳥苷(8-OHdG)或四羥壬烯醛(4-HNE)陽(yáng)性細(xì)胞的定量分析

1.6.1 免疫組織化學(xué)染色 分別在造模后12 h、24 h、3 d、7 d采用腹腔注射10%水合氯醛麻醉大鼠，然后注入300 ml 0.1 mol/L磷酸鹽(PBS，pH 7.4～7.5)，在PBS中加入300 ml 4%多聚甲醛，迅速處死大鼠，每組2只并取出腦組織。使用微切片機(jī)將病變最大尺寸切成50 μm厚的連續(xù)冠狀切片。用3% H2O2在TBS緩沖液中浸泡30 min可阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性。切片用含0.1%聚乙二醇辛基苯基醚(TBS-T)的TBS緩沖液洗滌3次，用3%牛血清白蛋白在TBS-T中處理30 min，并與下列一級(jí)抗體在室溫下孵育過夜：兔多克隆抗ssDNA抗體、單克隆抗Hu抗體、單克隆抗8-OHdG抗體、單克隆抗4-HNE抗體。清洗后，切片進(jìn)一步與大鼠試劑盒(由過氧化酶結(jié)合的抗小鼠或抗兔二抗組成，購(gòu)于上海紀(jì)寧生物)孵育，室溫下處理60 min。大鼠試劑盒含有預(yù)吸收的大鼠血清，并在損傷大鼠組織中表現(xiàn)出可忽略的大鼠血清非特異性結(jié)合。

1.6.2 ssDNA、Hu、8-OHdG或4-HNE陽(yáng)性細(xì)胞的定量分析 使用二氨基聯(lián)苯胺進(jìn)行標(biāo)記5 min，用蘇木精復(fù)染，定量Hu、8-OHdG和4-HNE陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量。按照上述步驟，用正常大鼠血清代替初級(jí)抗體進(jìn)行陰性對(duì)照染色。為明確ssDNA、Hu、8-OHdG和4-HNE陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量，記錄500 μm內(nèi)所有二氨基聯(lián)苯胺標(biāo)記的細(xì)胞受損區(qū)域(皮層)，不包括白質(zhì)。取3個(gè)連續(xù)切片中顯微鏡下二氨基聯(lián)苯胺標(biāo)記細(xì)胞數(shù)的平均值。使用CCD相機(jī)(北京星光光技術(shù)有限公司)放大測(cè)量區(qū)域的圖像，并通過計(jì)算機(jī)對(duì)每張圖像中測(cè)量的面積和體積進(jìn)行跟蹤和測(cè)量。根據(jù)平均陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)和體積計(jì)算出二氨基聯(lián)苯胺標(biāo)記細(xì)胞數(shù)。ssDNA、Hu、8-OHdG和4-HNE陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)均以陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量/100 μm3表示。

1.7 Hu或膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)雙免疫熒光染色ssDNA

大鼠液壓沖擊腦損傷后，采集的切片用50 mmol/L甘氨酸在TBS中沖洗并在37 ℃下封閉2 h，以減少非特異性熒光。用TBS-T清洗切片，用3%牛血清白蛋白在TBS-T中阻斷，并在室溫下與抗ssDNA抗體(1 ∶300)孵育過夜。廣泛清洗后，切片進(jìn)一步與Alexa Fluor 488抗兔IgG(北京百奧萊博科技有限公司)室溫下孵育80 min。然后，廣泛清洗切片，并與小鼠單克隆抗Hu抗體(1 ∶300)或小鼠單克隆抗GFAP(1 ∶300)抗體(星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物)在室溫下孵育過夜。大量清洗后，切片進(jìn)一步與Alexa Fluor 555抗小鼠IgG(北京百奧萊博科技有限公司)室溫下孵育80 min。隨后使用共聚焦激光顯微鏡掃描。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠腦組織含水量比較

假手術(shù)組各時(shí)間點(diǎn)大鼠腦組織中基礎(chǔ)含水量基本相當(dāng)。與假手術(shù)組比較，腦損傷組大鼠各時(shí)間點(diǎn)腦組織含水量均明顯增加(P<0.05)。與腦損傷組比較，依達(dá)拉奉右莰醇組大鼠各時(shí)間點(diǎn)腦組織含水量均明顯降低(P<0.05，見表1)。

表1 各組大鼠腦組織含水量的比較

2.2 各組大鼠炎性細(xì)胞因子水平比較

與假手術(shù)組比較，腦損傷組大鼠各時(shí)間點(diǎn)腦組織中IL-1β、IL-6和TNF-α水平均明顯升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與腦損傷組比較，依達(dá)拉奉右莰醇組大鼠各時(shí)間點(diǎn)腦組織中IL-1β、IL-6和TNF-α水平均明顯降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見表2～4)。

表2 各組大鼠腦組織中IL-1β水平的比較

表3 各組大鼠腦組織中IL-6水平的比較

表4 各組大鼠腦組織中TNF-α水平的比較

2.3 各組大鼠腦組織中ROS和SOD含量比較

與假手術(shù)組比較，腦損傷組各時(shí)間點(diǎn)腦組織中ROS含量均升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與腦損傷組比較，依達(dá)拉奉右莰醇組大鼠各時(shí)間點(diǎn)腦組織中ROS含量均有所降低(P<0.05，見表5)。與假手術(shù)組比較，腦損傷組各時(shí)間點(diǎn)腦組織中SOD含量均降低(P<0.05)；與腦損傷組比較，依達(dá)拉奉右莰醇組大鼠各時(shí)間點(diǎn)腦組織中SOD含量均有所升高(P<0.05，見表6)。

表5 各組大鼠腦組織中ROS含量的比較

表6 各組大鼠腦組織中SOD含量的比較

2.4 8-OHdG、4-HNE、ssDNA和Hu陽(yáng)性細(xì)胞定量分析

在腦損傷組大鼠各時(shí)間點(diǎn)腦組織損傷區(qū)域周圍出現(xiàn)大量8-OHdG、4-HNE、ssDNA陽(yáng)性細(xì)胞，而在依達(dá)拉奉右莰醇組各時(shí)間點(diǎn)腦組織損傷區(qū)域周圍只有少數(shù)8-OHdG、4-HNE、ssDNA陽(yáng)性細(xì)胞出現(xiàn)，兩組在各時(shí)間點(diǎn)8-OHdG、4-HNE、ssDNA陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)量上對(duì)比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。在腦損傷后12 h、24 h、3 d、7 d，腦損傷組和依達(dá)拉奉右莰醇組Hu陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量逐漸增多，且在第7天時(shí)最顯著，此時(shí)Hu陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)量比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見表7～10)。

表7 各組大鼠8-OHdG陽(yáng)性細(xì)胞定量分析陽(yáng)性數(shù)/100 μm3)

表8 各組大鼠4-HNE陽(yáng)性細(xì)胞定量分析陽(yáng)性數(shù)/100 μm3)

表9 各組大鼠ssDNA陽(yáng)性細(xì)胞定量分析陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量/100 μm3)

表10 各組大鼠Hu陽(yáng)性細(xì)胞定量分析陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量/100 μm3)

2.5 Hu或GFAP雙免疫熒光染色ssDNA

在腦損傷組中觀察到大量的ssDNA免疫陽(yáng)性細(xì)胞、Hu免疫陽(yáng)性細(xì)胞和GFAP免疫陽(yáng)性細(xì)胞。ssDNA免疫陽(yáng)性細(xì)胞對(duì)Hu和GFAP呈雙免疫陽(yáng)性(見圖1)。相反，在依達(dá)拉奉右莰醇組中，只有少數(shù)ssDNA免疫陽(yáng)性細(xì)胞，但有較多Hu免疫陽(yáng)性細(xì)胞和GFAP免疫陽(yáng)性細(xì)胞，而未觀察到Hu或GFAP雙標(biāo)記的ssDNA免疫陽(yáng)性細(xì)胞(見圖2)。

A.綠色顯示大量ssDNA免疫陽(yáng)性細(xì)胞 (×100);B.紅色為Hu和GFAP免疫陽(yáng)性細(xì)胞 (×200);C.紅色為Hu和GFAP免疫陽(yáng)性細(xì)胞 (×400);D.黃色顯示Hu和GFAP呈雙免疫陽(yáng)性 (×200);E.黃色顯示Hu和GFAP呈雙免疫陽(yáng)性 (×400)圖1 建模后7 d腦損傷組Hu或GFAP對(duì)ssDNA雙免疫熒光染色Figure 1 Double immunofluorescence staining of ssDNA by Hu or GFAP at 7 d after modeling in brain injury group

A.綠色顯示大量ssDNA免疫陽(yáng)性細(xì)胞 (×100);B.紅色為Hu和GFAP免疫陽(yáng)性細(xì)胞 (×200);C.紅色為Hu和GFAP免疫陽(yáng)性細(xì)胞 (×400);D.未觀察到Hu和GFAP雙標(biāo)記的ssDNA免疫陽(yáng)性細(xì)胞 (×200);E.未觀察到Hu和GFAP雙標(biāo)記的ssDNA免疫陽(yáng)性細(xì)胞 (×400)圖2 建模后7 d依達(dá)拉奉右莰醇組Hu或GFAP對(duì)ssDNA雙免疫熒光染色Figure 2 Double immunofluorescence staining of ssDNA at 7 d after modeling by Hu or GFAP in edaravone dexcamphenol group

3 討論

外傷性腦損傷是由于大腦受到直接的機(jī)械損傷，導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化和神經(jīng)元細(xì)胞死亡。在外傷早期，大腦會(huì)出現(xiàn)神經(jīng)元丟失、興奮性毒性損傷、微出血、血腦屏障破壞、彌漫性軸索損傷及自由基產(chǎn)生等，在細(xì)胞、代謝、分子級(jí)聯(lián)作用下出現(xiàn)神經(jīng)炎癥，進(jìn)一步表現(xiàn)為腦組織水腫、腦細(xì)胞損傷/萎縮/死亡、腦容量變化等[10,11]。李萍等[12]研究證明抑制神經(jīng)炎癥反應(yīng)，下調(diào)炎癥因子的表達(dá)水平，可改善腦組織水腫情況。大量研究資料表明，依達(dá)拉奉能通過多種信號(hào)通路抑制炎癥激活、促進(jìn)抗氧化途徑、拮抗恢復(fù)凋亡相關(guān)調(diào)節(jié)因子等來減輕炎癥性損傷和氧化應(yīng)激損傷，從而對(duì)腦外傷組織發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用，包括抑制神經(jīng)功能缺損、細(xì)胞凋亡和結(jié)構(gòu)損傷[13,14]。本研究結(jié)果顯示，依達(dá)拉奉右莰醇組大鼠各時(shí)間點(diǎn)腦組織含水量及炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平均顯著低于腦損傷組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。表明依達(dá)拉奉右莰醇干預(yù)治療后可有效減輕腦損傷大鼠的腦組織水腫，減少炎癥因子含量，抑制腦外傷誘發(fā)的炎癥反應(yīng)，從而降低對(duì)損傷周圍腦組織神經(jīng)元的損害，保護(hù)腦神經(jīng)功能。

Reis等[15]研究顯示，腦外傷后存在的高活性分子如活性氧自由基產(chǎn)生過多，不僅會(huì)直接對(duì)神經(jīng)細(xì)胞造成損傷，還可間接通過炎癥介質(zhì)誘發(fā)神經(jīng)細(xì)胞凋亡和炎性損傷。而自由基可誘導(dǎo)神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化，產(chǎn)生4-羥基-2-壬烯醛(4-HNE)，并可直接引起神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞DNA損傷，產(chǎn)生8-羥基-20-脫氧鳥苷(8-OHdG)[16,17]。這些膜過氧化和DNA損傷的級(jí)聯(lián)反應(yīng)可誘導(dǎo)神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞凋亡，可檢測(cè)為免疫陽(yáng)性單鏈DNA(ssDNA)和神經(jīng)元功能障礙[18]。表明4-HNE和8-OHdG可用作實(shí)驗(yàn)性腦損傷后的凋亡前標(biāo)志物，ssDNA用作凋亡標(biāo)志物。吳志寶等[19]通過建立大鼠液壓沖擊腦損傷模型，檢測(cè)氧化應(yīng)激損傷活性指標(biāo)活性氧族、丙二醛、超氧化物歧化酶、血紅素氧化酶1和磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化還原酶1的表達(dá)，證實(shí)自由基誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激在腦損傷中具有重要作用，早期調(diào)控氧化應(yīng)激狀態(tài)有助于減輕繼發(fā)性腦損傷。本研究顯示，與假手術(shù)組比較，腦損傷組各時(shí)間點(diǎn)腦組織中ROS含量升高、SOD含量降低(P<0.05)；與腦損傷組比較，依達(dá)拉奉右莰醇組大鼠各時(shí)間點(diǎn)腦組織中ROS含量降低、SOD含量升高(P<0.05)。表明腦損傷后腦組織中會(huì)產(chǎn)生大量活性氧類物質(zhì)，致使內(nèi)源性抗氧化系統(tǒng)功能下降，最終導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生過氧化反應(yīng)，從而發(fā)生氧化應(yīng)激損傷。王旭平等[20]發(fā)現(xiàn)通過絞股藍(lán)總苷拮抗谷氨酸介導(dǎo)的氧化性神經(jīng)損傷機(jī)制可能與提高神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶活性，清除氧自由基對(duì)線粒體膜的損傷有關(guān)。王鵬等[21]證實(shí)二十二碳六烯酸減輕全腦缺血/再灌注誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷機(jī)制可能與抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)、激活線粒體途徑和抑制ERK信號(hào)通路有關(guān)。提示在腦損傷過程中，自由基誘導(dǎo)的信號(hào)通路可引起細(xì)胞損傷甚至凋亡。本研究結(jié)果顯示，依達(dá)拉奉右莰醇組大鼠各時(shí)間點(diǎn)腦組織損傷區(qū)域周圍8-OHdG、4-HNE、ssDNA陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量少于腦損傷組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。因此認(rèn)為依達(dá)拉奉右莰醇可能吸收了腦外傷產(chǎn)生的自由基并抑制其功能，從而防止自由基介導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡和膠質(zhì)細(xì)胞變性后死亡。此外，本研究顯示，與腦損傷組比較，依達(dá)拉奉右莰醇組中與ssDNA共定位的Hu和GFAP免疫陽(yáng)性細(xì)胞較少，且腦損傷后第7天(即慢性期)損傷區(qū)域周圍有更多的Hu陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量表達(dá)；在依達(dá)拉奉右莰醇組中，只有少數(shù)ssDNA免疫陽(yáng)性細(xì)胞，但有較多Hu和GFAP免疫陽(yáng)性細(xì)胞，而未觀察到Hu或GFAP雙標(biāo)記的ssDNA免疫陽(yáng)性細(xì)胞。Hu或GFAP與神經(jīng)元存活及功能有密切關(guān)系，在腦損傷后期，Hu或GFAP免疫陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量增加，提示可能存在反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞增生活躍，在損傷腦組織周圍可以形成膠質(zhì)副界膜，減少腦損傷區(qū)范圍的擴(kuò)大，在損傷-正常腦組織之間起橋梁運(yùn)輸?shù)淖饔茫⑼ㄟ^分泌細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子等修復(fù)神經(jīng)元、誘導(dǎo)再生神經(jīng)元的遷移及促進(jìn)軸突再生，從而恢復(fù)腦組織神經(jīng)系統(tǒng)的正常功能[22-24]。上述結(jié)果進(jìn)一步支持依達(dá)拉奉右莰醇治療抑制腦損傷后自由基介導(dǎo)的神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞凋亡。

綜上所述，腦損傷后依達(dá)拉奉右莰醇治療可改善腦水腫情況，抑制炎癥反應(yīng)，下調(diào)炎癥因子的表達(dá)，抑制自由基誘導(dǎo)的神經(jīng)元變性和損傷區(qū)周圍細(xì)胞凋亡。