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        生物發(fā)酵麥麩脫除赭曲霉毒素A的條件優(yōu)化及發(fā)酵前后揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的評(píng)價(jià)

        2022-10-27 05:14:36黃鶴陽(yáng)孫秀蘭
        食品工業(yè)科技 2022年21期
        關(guān)鍵詞:因素

        鄒 東,楊 陽(yáng),黃鶴陽(yáng),紀(jì) 劍,孫秀蘭

        (江南大學(xué)食品學(xué)院,江蘇無(wú)錫 214122)

        赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)主要是由曲霉菌產(chǎn)生的一種有毒次級(jí)代謝產(chǎn)物,廣泛存在于各種食品和飼料中,如谷物和谷物制品、干果、葡萄、奶酪和肉制品等,嚴(yán)重威脅人和動(dòng)物的健康安全。OTA分子式為CHClNO,多種研究表明OTA不僅具有腎毒性,還具有肝毒性、致畸性、遺傳毒性和致癌性,現(xiàn)已被國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)歸類為2B類致癌物。不同食品中的OTA含量都具有相應(yīng)的限量標(biāo)準(zhǔn),歐盟規(guī)定谷物原料最大限量5 μg/kg,谷物加工制品最大限量3 μg/kg,嬰幼兒及特醫(yī)性食品不超過(guò)5 μg/kg,對(duì)于葡萄干、可溶性咖啡和一些干果的最大允許限值為10.0 ng/g。聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織和世界衛(wèi)生組織暫定OTA對(duì)人體的每周容許攝入量為100 ng/kg。我國(guó)對(duì)配合飼料中的OTA最高限量為100 μg/kg。據(jù)報(bào)道,植物源性食品中OTA的平均濃度在0.1~100 ng/g之間。由小麥、燕麥、大麥、黑麥等谷物制成的食品及干草/青貯飼料也含有0.1~100 ng/g的OTA,在動(dòng)物源性食品和飼料中,OTA的水平在0.1~1 ng/g之間。因此,研究OTA的脫毒不可或缺。食品和飼料中的霉菌毒素的方法通常分為物理、化學(xué)和生物三種方法。物理和化學(xué)方法存在能源消耗大,脫毒過(guò)程會(huì)對(duì)產(chǎn)品造成營(yíng)養(yǎng)成分的流失,產(chǎn)生各種副產(chǎn)物等缺點(diǎn),相較于這兩種方法,生物法具有可持續(xù)性、環(huán)保、安全等優(yōu)勢(shì)。

        麥麩即小麥皮,是優(yōu)良的氨基酸源,并含有多種礦物質(zhì)及微量元素。目前,我國(guó)小麥麩皮年產(chǎn)量大,最高可達(dá)2000萬(wàn)噸,在傳統(tǒng)的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中多用于牲畜飼料、食品和藥品的加工應(yīng)用。但麥麩中真菌毒素污染嚴(yán)重,其中包括OTA,限制了其在飼料工業(yè)中的安全應(yīng)用。生物發(fā)酵麥麩的研究早有報(bào)道,發(fā)酵后的麥麩營(yíng)養(yǎng)特性明顯提高,還能產(chǎn)生多種有益的生物活性物質(zhì),提高飼料的飼用品質(zhì)。陳洪偉等的研究表明,黑曲霉和酵母菌協(xié)同發(fā)酵麥麩可以提高其粗蛋白及游離氨基酸含量。同多數(shù)麥麩發(fā)酵的研究一樣,該研究進(jìn)行了微生物發(fā)酵麥麩的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)評(píng)價(jià),但缺少對(duì)麥麩發(fā)酵前后真菌毒素及風(fēng)味物質(zhì)的變化的研究。黑曲霉降解真菌毒素的有效性及發(fā)酵飼料降解真菌毒素的研究此前已有報(bào)道,黑曲霉也被證實(shí)對(duì)OTA具有降解作用,然而降解過(guò)程均在培養(yǎng)基體系中進(jìn)行,應(yīng)用在實(shí)際樣品中的研究較少。

        因此,本研究使用本課題組篩選的一株非產(chǎn)毒黑曲霉菌株FS-UV-21,生物發(fā)酵OTA污染的麥麩,采用響應(yīng)面法優(yōu)化發(fā)酵條件,并對(duì)最優(yōu)發(fā)酵條件下麥麩發(fā)酵前后的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的變化進(jìn)行分析。該研究旨在為麥麩資源的安全應(yīng)用及深度開(kāi)發(fā)提供技術(shù)參考。

        1 材料與方法

        1.1 材料與儀器

        黑曲霉FS-UV-21 由本課題組篩選并保藏于中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心,保藏編號(hào)為CGMCC No.20751;麥麩 河北五得利面粉集團(tuán)有限公司;OTA標(biāo)準(zhǔn)品 純度≥99%,美國(guó)默克公司;乙腈、無(wú)水乙酸 色譜純,上海國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA培養(yǎng)基)上海博微生物科技有限公司。

        Agilent 1260 HPLC系統(tǒng) 美國(guó)安捷倫公司;GI54DWS 型高壓滅菌鍋 美國(guó)ZEALWAY產(chǎn)品;BSC-1300Ⅱ型超凈工作臺(tái) 蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司產(chǎn)品;PHY-DHS*500-BS型恒溫培養(yǎng)箱 上海博泰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司產(chǎn)品;PB303型電子精密天平 上海梅特勒-托利多儀器有限公司;EX-OHOUS型旋渦振蕩儀 美國(guó)奧豪斯公司產(chǎn)品;Scientz-10N型臺(tái)式冷凍干燥機(jī)、Scientz-10LS型真空離心濃縮儀 寧波新芝生物科技股份有限公司產(chǎn)品

        1.2 實(shí)驗(yàn)方法

        1.2.1 黑曲霉FS-UV-21菌株活化及孢子懸浮液制備 將黑曲霉FS-UV-21從-80 ℃取出,接種于PDA培養(yǎng)基上,在28 ℃恒溫培養(yǎng)7 d,再用滅菌后的生理鹽水(含0.05%的吐溫-80)將洗下黑曲霉孢子作為孢子懸液,并調(diào)整濃度至10CFU/mL,備用。

        1.2.2 生物發(fā)酵法處理麥麩 將麥麩粉碎,過(guò)40目篩后收集備用。對(duì)粉碎后的麥麩進(jìn)行采樣稱重,采樣方法參考GB/T 14699.1-2005,精準(zhǔn)稱取10 g樣品置于250 mL三角錐形瓶中,封口膜封口后置于滅菌鍋(121 ℃,20 min)中滅菌。

        滅菌處理后待麥麩冷卻至室溫后,分別加入無(wú)菌水(含OTA標(biāo)準(zhǔn)品)和FS-UV-21孢子懸液,攪拌均勻,麥麩中OTA終含量為1 μg/g。恒溫有氧發(fā)酵,取樣待檢測(cè)。對(duì)滅菌后的麥麩及加標(biāo)后的麥麩進(jìn)行取樣檢測(cè),確定OTA的加標(biāo)回收率。

        1.2.3 麥麩中OTA的測(cè)定 參考GB 5009.96-2016對(duì)麥麩中OTA進(jìn)行提取和檢測(cè)。配置OTA標(biāo)準(zhǔn)溶液:質(zhì)量濃度梯度為 10、25、50、100、250、500、1000、2000 ng/mL。

        液相色譜條件優(yōu)化,條件如下:使用C反相柱(Thermo Hypersil Gold C,150 mm×4.6 mm,3.5 μm)和熒光檢測(cè)器(FLD,=333 nm 和=460 nm;增益=100),通過(guò)HPLC分析提取物。進(jìn)樣量為20 μL,樣品以1 mL/min的流速洗脫,流動(dòng)相為乙腈/水/乙酸的混合物(99:99:2,V/V/V),柱溫為 30 ℃,洗脫時(shí)間為15 min。

        1.2.4 單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) FS-UV-21孢子懸液濃度固定為10CFU/mL,分別探究料水比(麥麩質(zhì)量與無(wú)菌水體積的比值,g/mL)、接種量(孢子懸液體積與麥麩質(zhì)量的百分比,%)、溫度(麥麩發(fā)酵溫度,℃)及時(shí)間(麥麩發(fā)酵時(shí)間,d)等因素對(duì)OTA脫除率的影響,試驗(yàn)設(shè)計(jì)如下:接種量分別為1%、5%、10%、15%、20%,發(fā)酵溫度 30 ℃,發(fā)酵時(shí)間 4 d,料水比為1:3 g/mL;發(fā)酵溫度為 20、25、30、35、40 ℃,接種量為10%,發(fā)酵時(shí)間4 d,料水比為1:3 g/mL;發(fā)酵時(shí)間為 2、3、4、5、6 d,接種量為 10%,發(fā)酵溫度30 ℃,料水比為 1:3 g/mL;料水比為 1:1、1:2、1:3、1:4、1:5 g/mL,接種量為 10%,發(fā)酵溫度 30 ℃,發(fā)酵時(shí)間4 d。分別進(jìn)行實(shí)驗(yàn),檢測(cè)麥麩中OTA的脫除率。

        OTA脫除率計(jì)算方法為:OTA脫除率(%)=(未發(fā)酵樣品中OTA含量-發(fā)酵后樣品中OTA含量)/未發(fā)酵樣品中OTA含量×100

        1.2.5 響應(yīng)面法因素水平試驗(yàn)設(shè)計(jì) 參考上述單因素實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,應(yīng)用Box-Behnken設(shè)計(jì)方法和響應(yīng)面處理軟件,選擇接種量(A)、發(fā)酵溫度(B)、發(fā)酵時(shí)間(C)、料水比(D)作為響應(yīng)變量,設(shè)計(jì)四因素三水平試驗(yàn),以O(shè)TA脫除率作為響應(yīng)值進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化設(shè)計(jì)。響應(yīng)面試驗(yàn)因素與水平設(shè)計(jì)見(jiàn)表1。

        表1 響應(yīng)面試驗(yàn)因素與水平設(shè)計(jì)Table 1 Factors and levels of response surface test

        1.2.6 麥麩生物發(fā)酵前后揮發(fā)性物質(zhì)檢測(cè) 利用頂空固相微萃取風(fēng)味物質(zhì)。取5 g接種發(fā)酵后的麥麩樣品置于40 mL頂空進(jìn)樣瓶中密封,將頂空進(jìn)樣瓶置于加入加熱裝置中30 min,再將萃取頭插入瓶中,距離1 cm處進(jìn)行萃取,萃取后立即進(jìn)樣。萃取溫度為50 ℃,萃取時(shí)間為30 min,解析時(shí)間為5 min。

        采用氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)風(fēng)味物質(zhì),色譜毛細(xì)管柱為Equity-5柱(30 m×0.32 mm×0.25 μm),使用以下溫度程序:主烤箱溫度范圍從40~140 ℃,以10 ℃/min升溫,然后到200 ℃,以7 ℃/min升溫,進(jìn)樣口溫度為250 ℃。載氣為氦氣,流速為2.5 mL/min,無(wú)分流。電離方式為EI,電子能量為70 eV,檢測(cè)器電壓為-1499 V,m/z范圍為15~350。使用自動(dòng)數(shù)據(jù)處理軟件Chroma TOFFi (LECO)以200的信噪比閾值處理總離子色譜圖。

        1.3 數(shù)據(jù)處理

        GraphPad Prism 8.0、SPSS 26、Design Expert11軟件用于數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)值顯示為三個(gè)實(shí)驗(yàn)的平均值±SD,每個(gè)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行三次。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 麥麩中OTA的提取

        提取加標(biāo)前后麥麩中OTA的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示,加標(biāo)前麥麩中未檢測(cè)出OTA。加標(biāo)后的麥麩中OTA含量理論上為1 μg/g,實(shí)際檢測(cè)結(jié)果顯示加標(biāo)麥麩中OTA含量平均為0.9878 μg/g,表明OTA的加標(biāo)回收率較好。

        表2 麥麩中OTA的含量Table 2 OTA content in wheat bran

        2.2 單因素實(shí)驗(yàn)

        2.2.1 接種量對(duì)OTA脫除的影響 由圖1可見(jiàn),黑曲霉FS-UV-21的接種量對(duì)麥麩中OTA的脫除率有顯著影響(<0.05)。在接種量為15%時(shí),OTA的脫除率最高,在接種量為1%~15%的區(qū)間內(nèi),OTA的脫除率都隨著接種量的增加而升高。然而接種量為20%時(shí),OTA的脫除率明顯降低,說(shuō)明接種量過(guò)大或過(guò)小都不利于麥麩中OTA的生物脫除。接種量過(guò)小時(shí),發(fā)酵體系內(nèi)黑曲霉較少,會(huì)延長(zhǎng)發(fā)酵周期,而接種量過(guò)大時(shí),黑曲霉菌之間生存競(jìng)爭(zhēng)加大,很可能導(dǎo)致菌株在發(fā)酵體系中的生長(zhǎng)受抑制。因此,接種量的選擇應(yīng)在15%左右。

        圖1 接種量對(duì)黑曲霉脫除OTA的影響Fig.1 Effect of inoculation amount on the removal of OTA by Aspergillus niger

        2.2.2 發(fā)酵溫度對(duì)OTA脫除的影響 溫度對(duì)黑曲霉的生長(zhǎng)及代謝產(chǎn)生極大的影響,在不同的發(fā)酵體系中,黑曲霉的最適發(fā)酵溫度不一定相同。因此,試驗(yàn)研究了在麥麩發(fā)酵體系中不同發(fā)酵溫度對(duì)黑曲霉脫除OTA的影響。根據(jù)圖2可知,在20~30 ℃的溫度區(qū)間內(nèi),OTA的脫除率隨溫度的提高而升高,在30 ℃時(shí)脫除率最高為51.71%。當(dāng)溫度超過(guò)30 ℃,黑曲霉的脫除能力明顯降低,很可能偏離了黑曲霉的最適生長(zhǎng)溫度,影響了發(fā)酵體系內(nèi)微生物的生長(zhǎng),無(wú)法形成良好的酶系,也可能黑曲霉內(nèi)轉(zhuǎn)化OTA的酶活性被抑制,導(dǎo)致OTA脫除率的降低。因此,選擇30 ℃左右為麥麩體系的響應(yīng)面優(yōu)化水平。

        圖2 發(fā)酵溫度對(duì)黑曲霉脫除OTA的影響Fig.2 Effect of fermentation temperature on the removal of OTA by Aspergillus niger

        2.2.3 發(fā)酵時(shí)間對(duì)OTA脫除的影響 微生物的生長(zhǎng)及生理活性與培養(yǎng)時(shí)間密切相關(guān),因此微生物發(fā)酵體系內(nèi),發(fā)酵時(shí)間也是需要控制的重要因素之一。在其他條件不變的情況下,從圖3可以看出OTA的脫除率隨著發(fā)酵時(shí)間的增加而升高,在第5 d時(shí)脫除率為59.74%,第6 d的OTA脫除率(59.85%)與第5 d相比無(wú)顯著增加(>0.05)。因此,選擇發(fā)酵時(shí)間為5 d左右。

        圖3 發(fā)酵時(shí)間對(duì)黑曲霉脫除OTA的影響Fig.3 Effect of fermentation time on the removal of OTA by Aspergillus niger

        2.2.4 料水比對(duì)OTA脫除的影響 發(fā)酵過(guò)程中,體系含水量也是菌體正常生長(zhǎng)發(fā)育的關(guān)鍵因素之一。如果含水量過(guò)低,微生物沒(méi)有足夠可利用的水進(jìn)行生理活動(dòng);而含水量過(guò)高則會(huì)導(dǎo)致傳質(zhì)和傳氧困難。因此,適宜的料水比對(duì)麥麩中OTA的脫除也至關(guān)重要。由圖4可知,隨著水含量的增加,OTA的脫除率先升高后下降,料水比為1:3 g/mL時(shí)脫除率最高為51.43%。故選取1:3 g/mL作為0水平進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn)。

        圖4 料水比對(duì)黑曲霉脫除OTA的影響Fig.4 Effect of ratio of material to water on the removal of OTA by Aspergillus niger

        2.3 響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果

        2.3.1 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)因素與水平 根據(jù)上述單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可以得到接種量、料水比、發(fā)酵時(shí)間、發(fā)酵溫度四個(gè)因素的較優(yōu)水平,采用響應(yīng)面法對(duì)四個(gè)因素三水平進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì),各因素兩兩交互影響。以O(shè)TA脫除率為指標(biāo),最終得到黑曲霉發(fā)酵脫除麥麩中OTA的最佳條件。響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見(jiàn)表3。

        表3 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 3 Response surface test design and results

        2.3.2 響應(yīng)面回歸模型的建立與分析 利用Design Expert 11對(duì)響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析,可以得到以O(shè)TA 脫除率(Y)為響應(yīng)值,接種量(A)、發(fā)酵溫度(B)、發(fā)酵時(shí)間(C)、料水比(D)的二次多項(xiàng)回歸模型:

        Y=57.5760+0.3542A+3.5483B-0.1842C+0.9317D-0.0450AB-0.5125AC-1.2450AD-1.5750BC+3.6400 BD+0.5200CD-3.1405A-7.879B-2.7605C-3.6692 D2

        為了檢驗(yàn)回歸模型的有效性和可靠性,回歸模型的方差和顯著性分析結(jié)果見(jiàn)表4。

        結(jié)果表明,回歸模型高度顯著(<0.01),失擬項(xiàng)不顯著(>0.05),為 0.8531,表明該模型擬合性較好,可較好的預(yù)測(cè)分析并能夠反映各因素水平與響應(yīng)值之間的關(guān)系。因此,由表4可知,試驗(yàn)影響因素的主次排序如下:發(fā)酵溫度>料水比>接種量>發(fā)酵時(shí)間。

        表4 OTA脫除率回歸模型方差分析Table 4 Variance analysis of OTA removal rate regression model

        2.3.3 各因素兩兩交互作用 黑曲霉發(fā)酵麥麩脫除OTA的4個(gè)影響因素:接種量(A)、發(fā)酵溫度(B)、發(fā)酵時(shí)間(C)、料水比(D)兩兩交互作用對(duì)麥麩中OTA脫除率影響的響應(yīng)面圖見(jiàn)圖5。

        圖5 各因素交互作用對(duì)OTA脫除率影響的響應(yīng)面圖Fig.5 Response surface plots of the interaction of various factors on the removal rate of OTA

        結(jié)合上述結(jié)果,交互項(xiàng)BD即發(fā)酵溫度與料水比的交互作用顯著(<0.05),而交互項(xiàng) AB、AC、AD、BC、CD的試驗(yàn)結(jié)果顯著性分析為>0.05,表明其他交互項(xiàng)之間交互作用不顯著。該響應(yīng)面模型存在最高點(diǎn),即平面等高線圖的圓心,表明在此條件下OTA的脫除效果較好。

        2.3.4 響應(yīng)面最優(yōu)條件的確定 通過(guò)上述分析得優(yōu)化因素為接種量15.05%,發(fā)酵溫度31.48 °C,發(fā)酵時(shí)間4.91 d,料水比1:3.27 g/mL。此條件下預(yù)測(cè)的OTA脫除率為58.24%??紤]到實(shí)際實(shí)驗(yàn)的操作性和可行性,選取接種量15%,發(fā)酵溫度32 °C,發(fā)酵時(shí)間5 d,料水比1:3.3 g/mL進(jìn)行發(fā)酵麥麩實(shí)驗(yàn),得到OTA脫除率為60.89%±0.93%,與理論值相對(duì)誤差為2.65%,說(shuō)明該條件優(yōu)化參數(shù)可行,可用于實(shí)際應(yīng)用中。

        2.4 最優(yōu)發(fā)酵參數(shù)下麥麩中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)分析評(píng)價(jià)

        對(duì)黑曲霉發(fā)酵前后麥麩中的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)進(jìn)行研究。發(fā)酵前后總離子流色譜圖如圖6,黑曲霉發(fā)酵處理后的麥麩揮發(fā)性物質(zhì)變化明顯。本實(shí)驗(yàn)在發(fā)酵前后共鑒定出揮發(fā)性成分398種,其中酚類24種,醇類84種,醛類42種,酯類116種,雜環(huán)類24種,苯環(huán)類65種及其他(圖7)。

        圖6 麥麩發(fā)酵前后總離子流色譜圖Fig.6 Total ion flow chromatogram of wheat bran before and after fermentation

        圖7 發(fā)酵前后麥麩揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)種類與數(shù)量Fig.7 Types and quantities of volatile flavor compounds in wheat bran before and after fermentation

        對(duì)比發(fā)酵前的麥麩,結(jié)合T檢驗(yàn)得到的值和FC值繪制整體揮發(fā)性物質(zhì)的火山圖。如圖8 A所示,橫坐標(biāo)為log 2的FC值,縱坐標(biāo)為-log 10的值,使用log轉(zhuǎn)換縮小差異過(guò)大或過(guò)小的揮發(fā)性物質(zhì)之間的差異。選?。?.05,log 2(FC)>1 或<-1篩選顯著差異物質(zhì),藍(lán)色表示顯著下調(diào)物質(zhì),紅色表示顯著上調(diào)物質(zhì)。發(fā)酵后的麥麩揮發(fā)性化合物上調(diào)了207種,下調(diào)了191種8,其中上調(diào)最多的壬醇,下調(diào)較大的為-萜品烯(圖8 B)。壬醇具有玫瑰和橙的香氣,是我國(guó)GB 2760-86規(guī)定為允許使用的食用香料,主要用于本制奶油、桃、橙、檸檬、白檸檬和菠蘿等型香精,而-萜品烯則具有柑橘和檸檬似香氣,主要用以配制人造檸檬和薄荷精油。所以,黑曲霉發(fā)酵后會(huì)改變麥麩原有的氣味,除此之外,還有許多帶有愉快香氣的揮發(fā)性物質(zhì)在發(fā)酵后產(chǎn)生,如對(duì)茴香醛、己酸、-壬內(nèi)酯、-十一內(nèi)酯、6-甲-5-庚烯-2-酮等,這些物質(zhì)可以改善麥麩的風(fēng)味,以增加動(dòng)物飼料的適口性。

        圖8 發(fā)酵前后麥麩揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)對(duì)比分析Fig.8 Comparative analysis of volatile flavor substances in wheat bran before and after fermentation

        發(fā)酵后麥麩揮發(fā)性物質(zhì)中占比最大的物質(zhì)為醇類、酯類與苯環(huán)類。表5列舉出了一些麥麩發(fā)酵前后相對(duì)含量變化較大的物質(zhì)。麥麩發(fā)酵前相對(duì)含量較多的3-辛酮、3-辛醇和辛烯-3-醇在發(fā)酵后含量明顯減少。也有許多揮發(fā)性物質(zhì)相對(duì)含量升高了。其中香蘭素具有香莢蘭豆香氣及濃郁的奶香,起增香和定香作用,且香氣穩(wěn)定,可為發(fā)酵后的麥麩增添獨(dú)特的香氣。

        表5 發(fā)酵前后麥麩中揮發(fā)性物質(zhì)的相對(duì)含量Table 5 Relative content of volatile substances in wheat bran before and after fermentation

        3 結(jié)論

        本研究利用黑曲霉FS-UV-21生物發(fā)酵麥麩,研究了發(fā)酵中的關(guān)鍵因素(接種量、發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間、料水比)對(duì)麥麩中OTA脫除率的影響。并運(yùn)用響應(yīng)面法優(yōu)化上述四個(gè)因素,得到最優(yōu)脫除條件為接種量 15%,發(fā)酵溫度 32 °C,發(fā)酵時(shí)間 5 d,料水比1:3.3 g/mL,脫除率為60.89%。并對(duì)發(fā)酵后的麥麩揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)進(jìn)行研究分析,發(fā)現(xiàn)發(fā)酵后的麥麩風(fēng)味物質(zhì)明顯增多,并且不同于傳統(tǒng)麥麩風(fēng)味的揮發(fā)性化合物含量增加明顯,如壬醇、香蘭素等,均可賦予發(fā)酵麥麩愉悅的風(fēng)味。因此,黑曲霉FS-UV-21發(fā)酵麥麩不僅能有效降低其中OTA的含量,還能提升麥麩的風(fēng)味,提高麥麩的利用價(jià)值。后續(xù)還可在此基礎(chǔ)上研究黑曲霉發(fā)酵的安全性及其降解其他霉菌毒素的可能性,為發(fā)酵麥麩將來(lái)的綠色健康生產(chǎn)應(yīng)用提供參考。

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