李曉偉，王 露，任露露，王繼美，趙素勤，趙林萍

（河南中標(biāo)檢測(cè)服務(wù)有限公司，河南鄭州 450001）

有機(jī)氯農(nóng)藥是一類持久性有機(jī)污染物，過(guò)去廣泛用于農(nóng)業(yè)?，F(xiàn)在大多數(shù)有機(jī)氯農(nóng)藥都被禁止使用，因?yàn)樗鼈兙哂懈叨然蛑卸任ｋU(xiǎn)，其特點(diǎn)是生物降解性低、半衰期長(zhǎng)、在環(huán)境中具有持久性。因此，有必要對(duì)六六六（HCH）、滴滴涕（DDT）等農(nóng)產(chǎn)品中的有機(jī)氯農(nóng)藥進(jìn)行監(jiān)測(cè)，以確保其用藥安全[1]。而茶葉是福建省重要的產(chǎn)業(yè)支柱，茶葉資源豐富、種類繁多，因此關(guān)注茶葉安全問(wèn)題意義重大。氣相色譜-電子捕獲檢測(cè)器被廣泛用于國(guó)內(nèi)外茶葉中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的檢測(cè)中，其具有分析速度快、靈敏度高、準(zhǔn)確性好等優(yōu)勢(shì)[2-3]。本研究旨在利用氣相色譜-電子捕捉檢測(cè)器建立快速測(cè)定茶葉中HCH、DDT農(nóng)藥殘留的分析方法。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

原料：福建省泉州市提供毛峰品種；耗材：0.22 μm微孔水相濾膜（津騰）。

農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所購(gòu)買8種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液分別為α-HCH、β-HCH、γ-HCH、δ-HCH、p,p’-DDE、p,p’-DDD、o,p’-DDT和 p,p’-DDT（100 μg·mL-1）；分析純：氯化鈉；色譜純?cè)噭菏兔?、丙酮以及正己烷；?yōu)級(jí)純：濃硫酸。

1.2 儀器與設(shè)備

TGL-16高速冷凍離心機(jī)，四川蜀科儀器有限公司；8860氣相色譜儀（配有ECD檢測(cè)器），安捷倫科技有限公司；KQ-800DE型數(shù)控超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；THZ-82數(shù)顯水浴恒溫振蕩器，金壇華鋒儀器有限公司；YP5002電子天平，上海佑科儀器儀表有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

分別將100 μg·mL-1的8種有機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用正己烷逐級(jí)稀釋，保存于冰箱中。

1.3.2 茶葉樣品前處理

（1）提取。將干燥的茶葉樣品經(jīng)粉碎機(jī)粉碎后，置于研缽研磨，過(guò)20目篩后，其粒徑均符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)要求[4]。利用電子天平稱取2.00 g茶葉粉，轉(zhuǎn)移至離心管中，向其中加入10.0 mL正己烷進(jìn)行溶解并提取樣品中的有機(jī)氯農(nóng)藥殘留。操作步驟如下：離心管先放置于旋渦混合器中混合片刻，超聲提取樣品，25 ℃下超聲 1 h，之后以 4 000 r·min-1的轉(zhuǎn)速離心5 min，收集上層液。收集下層樣品按照上述操作步驟重復(fù)提取，合并2次上層液進(jìn)行后續(xù)處理。

（2）磺化處理。向上述提取液中加入2.0 mL濃硫酸進(jìn)行磺化反應(yīng)，密封后先渦旋2 min，渦旋操作中每30 s便進(jìn)行放氣1次。操作結(jié)束后樣品置于超聲波清洗器中超聲，保證無(wú)乳化現(xiàn)象出現(xiàn)，然后4 000 r·min-1離心5 min，收集上清液，經(jīng)氮吹后濃縮至2.0 mL，樣品經(jīng)0.22 μm微孔濾膜過(guò)濾，采用氣相色譜-電子捕獲檢測(cè)器檢測(cè).

1.3.3 氣相色譜條件

色譜柱：DB-5石英毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；進(jìn)樣口溫度：280 ℃；ECD檢測(cè)器溫度：300 ℃；程序升溫條件：90 ℃保持1 min，之后以40 ℃·min-1升溫至 170 ℃，再以 5 ℃·min-1升溫至280 ℃，保持1 min；分流進(jìn)樣，分流比5∶1；進(jìn)樣體積：1.0 μL；載氣：氮?dú)?；載氣流速：1.0 mL·min-1；尾吹氣流量：60.0 mL·min-1。

1.4 數(shù)據(jù)處理

1.4.1 定性分析

采用1.3.3的氣相色譜條件，分別檢測(cè)8種有機(jī)氯農(nóng)藥的單獨(dú)標(biāo)準(zhǔn)品，記錄色譜峰保留時(shí)間進(jìn)行定性分析。

1.4.2 定量分析

采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法對(duì)8種有機(jī)氯農(nóng)藥進(jìn)行定量分析。以濃度（C）為橫坐標(biāo)，以峰面積（A）為縱坐標(biāo)，擬合得到線性回歸方程及線性相關(guān)系數(shù)。根據(jù)線性關(guān)系及樣品峰面積求出樣品中各農(nóng)藥成分的含量。具體計(jì)算公式如下；

式中：C為茶葉中有機(jī)氯農(nóng)藥含量，ng·g-1；b為線性方程的縱截距；k為線性方程的斜率；A為有機(jī)氯農(nóng)藥的峰面積；m為稱取茶葉樣品的質(zhì)量，g；V為茶葉樣品處理后的體積，mL。其中，HCH含量為4種單組分含量之和，DDT含量為4種單組分含量之和。

2 結(jié)果與分析

2.1 氣相色譜條件的選擇及優(yōu)化

由于茶葉中組分復(fù)雜，所以保留有效組分、凈化其中雜質(zhì)是茶葉前處理中的關(guān)鍵。研究發(fā)現(xiàn)茶葉中HCH、DDT大多根據(jù)“相似相溶”原理采用溶劑提取法提取[5]。由于有機(jī)氯農(nóng)藥極性較弱，因此本實(shí)驗(yàn)采用非極性溶劑如石油醚、正己烷等進(jìn)行溶解，但考慮到石油醚易揮發(fā)，容易導(dǎo)致結(jié)果重復(fù)性較差，實(shí)驗(yàn)最終以正己烷為提取溶劑。另外考慮到茶葉中基質(zhì)復(fù)雜、色素干擾嚴(yán)重，可能會(huì)引起基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)，影響定量分析結(jié)果，故需要進(jìn)行基質(zhì)及色素凈化。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道在濃硫酸環(huán)境下，HCH、DDT不會(huì)變質(zhì)、變性，基體凈化能力強(qiáng)，操作簡(jiǎn)單[6]。故本實(shí)驗(yàn)采用濃硫酸凈化茶葉中的雜質(zhì)，該過(guò)程中的乳化現(xiàn)象可以通過(guò)超聲除去，不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在優(yōu)化后的實(shí)驗(yàn)條件下，測(cè)定HCH、DDT標(biāo)準(zhǔn)溶液，色譜圖見(jiàn)圖1。

圖1 HCH、DDT標(biāo)樣色譜圖

2.2 線性范圍、檢出限與定量限研究

將HCH、DDT混合標(biāo)準(zhǔn)溶液配制成0.005 μg·mL-1、0.010 μg·mL-1、0.020 μg·mL-1、0.050 μg·mL-1、0.100 μg·mL-1、0.200 μg·mL-1和 0.500 μg·mL-1的 標(biāo)準(zhǔn)工作液，在1.3.3色譜條件下進(jìn)行測(cè)定，檢出限以3倍噪音計(jì)算，定量限以10倍噪音計(jì)算，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 8種農(nóng)藥線性范圍、檢出限與定量限研究

2.3 回收率、精密度研究

取茶葉空白樣品，分別加入3個(gè)濃度（0.025 mg·kg-1、1.250 mg·kg-1、5.000 mg·kg-1）的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)混合標(biāo)液，按本方法的操作，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，計(jì)算8種農(nóng)藥的加標(biāo)回收率、精密度（RSD），結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 8種農(nóng)藥回收率、精密度

3 結(jié)論

本研究建立了氣相色譜檢測(cè)茶葉中HCH、DDT農(nóng)藥殘留的方法。采用氣相色譜方法對(duì)茶葉中HCH、DDT農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示回收率、精密度均能滿足定量分析的要求，而且準(zhǔn)確性高，重現(xiàn)性好，符合HCH、DDT農(nóng)藥殘留的檢測(cè)要求，可廣泛用于福建省泉州市及其他地區(qū)茶葉中的HCH、DDT農(nóng)藥殘留含量檢測(cè)。