趙鼎銘 曲執(zhí)

（葫蘆島市中心血站，遼寧 葫蘆島 125000）

輸血在臨床各種治療中是必不可少的一種治療方式。為了患者在治療過程中所輸入的血液吻合、安全、有效，在輸血之前須進(jìn)行ABO血型、RhD血型的檢測(cè)。血型主要受所屬基因決定，通過血型抗原呈現(xiàn)出不同的遺傳多樣性。在血型鑒別時(shí)，由于常常受ABO亞型、抗體或抗原降低、不規(guī)則抗體等影響，使得ABO血型的正反定型檢測(cè)中會(huì)呈現(xiàn)出不一樣的結(jié)果，從而使一般的試劑檢測(cè)無法直接判斷出正確的血型[1]。以往，大多數(shù)血站均是通過微板法進(jìn)行血型檢測(cè)，但由于其操作流程復(fù)雜、繁瑣，人為影響因素較多，且損耗多，而在近年逐漸向標(biāo)準(zhǔn)、自動(dòng)、快速方向發(fā)展，由半自動(dòng)化的微板法漸漸演變?yōu)槿詣?dòng)血型分析儀法。為此，本文針對(duì)本血站2018年10月至2019年10月的無償獻(xiàn)血者，探究在ABO血型篩查中分別采用全自動(dòng)血型分析儀法與微板法的檢測(cè)效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本文的100例樣本數(shù)據(jù)均是選取于在本血站進(jìn)行無償獻(xiàn)血者，所選時(shí)間區(qū)間為2018年10月至2019年10月。樣本采用乙二胺四乙酸二鉀抗凝，每份2 mL，于采集后的12 h后進(jìn)行血型檢測(cè)篩查。

1.2 方法 將樣本以3 000 r/min的轉(zhuǎn)速進(jìn)行15 min的離心處理后，分別進(jìn)行全自動(dòng)血型分析儀與微板法檢測(cè)。

對(duì)照組給予微板法檢測(cè)，根據(jù)臨床中的微孔板紅細(xì)胞凝聚法原理，主要采用U型微孔板，利用全自動(dòng)式加樣儀器進(jìn)行加樣處理，即將血清與4%濃度的紅細(xì)胞各50 μL注入至每個(gè)孔位中，作正定型處理；將ABO反定型的紅細(xì)胞與血清各50 μL注入至每個(gè)孔位中，作反定型處理。待加樣完成后，將U型微孔板放入醫(yī)用型的低速率離心器中，以每分鐘1 700 r的轉(zhuǎn)速進(jìn)行3 min的離心處理，其次再放置于振蕩孵育儀器中，以每分鐘120次的速率進(jìn)行4 min的震蕩處理，放置靜止3 min后，通過波長(zhǎng)為620 nm的酶標(biāo)儀器進(jìn)行比色處理。若臨界值＜0.6，呈陰性，為不凝聚狀態(tài)；若臨界值＞0.8，呈陽性，為凝聚狀態(tài)；若臨界值在0.6～0.8之間，則是灰區(qū)[2]。

試驗(yàn)組給予全自動(dòng)血型分析儀檢測(cè)，根據(jù)臨床中的微孔板紅細(xì)胞凝聚法原理，并結(jié)合儀器所附的說明書進(jìn)行試劑、樣本、梯形V字型的底微板等裝卸操作。全自動(dòng)血型分析儀會(huì)自動(dòng)式進(jìn)行讀碼操作，在此基礎(chǔ)上進(jìn)行加樣與孵育，并通過電腦數(shù)據(jù)傳輸、處理、CCD圖等分析后，進(jìn)行試驗(yàn)結(jié)果的分析處理、判定、傳送、打印等。主要的加樣過程與方式：將抗A、抗B、抗D、抗A細(xì)胞、抗B細(xì)胞、抗O細(xì)胞、鹽水加入至加樣儀器中，并將各25 μL容量的1.6%濃度紅細(xì)胞、抗A、抗B、抗D、鹽水注入至每個(gè)孔位中，作正定型處理；將ABO反定型的紅細(xì)胞30 μL的試劑與20 μL已進(jìn)行2倍稀釋處理的血清，注入至每個(gè)孔位中，作反定型處理。待加樣結(jié)束后，放置于36～38 ℃的溫度下進(jìn)行1 h的孵育，全自動(dòng)血型分析儀根據(jù)參數(shù)SPC、LIA、P/C進(jìn)行結(jié)果的分析、解讀。SPC作為主要參考參數(shù)，若SPC大于10，呈陰性，為不凝聚狀態(tài)；若SPC小于10，呈陽性，為凝聚狀態(tài)；若SPC等于10，則為臨界點(diǎn)，具有可疑[3]。

若兩組檢測(cè)出的正反定型的樣本結(jié)果不同，則通過試管法、微柱凝膠法、吸收放散法進(jìn)一步進(jìn)行檢測(cè)確認(rèn)。

1.3 觀察指標(biāo) 統(tǒng)計(jì)并對(duì)比兩種血型篩查方式的血型錯(cuò)誤率、亞型漏檢率、O細(xì)胞凝聚率，并觀察ABO血型的正反定型現(xiàn)象、O細(xì)胞凝聚中不規(guī)則抗體的概率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 將本次研究中的100例樣本數(shù)據(jù)應(yīng)用于SPSS19.0進(jìn)行軟件處理，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，用率（%）表示兩組血型篩查方式的試驗(yàn)結(jié)果、ABO血型的正反定型試驗(yàn)結(jié)果、O細(xì)胞凝聚中不規(guī)則抗體的試驗(yàn)結(jié)果，進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，組間對(duì)比若P＜0.05，即可證實(shí)組間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血型篩查方式的試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比 由表1可知，兩組篩查方式均無錯(cuò)誤率，試驗(yàn)組的亞型漏檢率稍低于對(duì)照組，而試驗(yàn)組的O細(xì)胞凝聚率高于對(duì)照組，但組間差異無顯著性，P＞0.05，組間具有可比性。

表1 兩組血型篩查方式的試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比[n（%）]

2.2 兩組ABO血型的正反定型試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比 試驗(yàn)組的ABO亞型、正反定型不符、抗體降低的概率均稍高于對(duì)照組，而正常性血型的概率略低于對(duì)照組，組間差異性不大（P＞0.05）。見表2。

表2 兩組ABO血型的正反定型試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比[n（%）]

2.3 兩組O細(xì)胞凝聚中不規(guī)則抗體的試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比 試驗(yàn)組出現(xiàn)不規(guī)則抗體的概率明顯高于對(duì)照組，組間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 兩組O細(xì)胞凝聚中不規(guī)則抗體的試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比[n（%）]

3 討論

輸血治療在各種疾病的救治與急救中具有重要作用，而給患者進(jìn)行輸血前，有效、準(zhǔn)確的血型檢測(cè)是保障治療的基礎(chǔ)與根本。據(jù)臨床統(tǒng)計(jì)，在健康的人群中有0.3%～2%的人群存在不規(guī)則抗體，而不規(guī)則抗體較容易引發(fā)溶血性輸血反應(yīng)[4]。因此，準(zhǔn)確的血型匹配以及對(duì)不規(guī)則抗體的篩查對(duì)于患者輸血治療具有重要影響。

在臨床中，對(duì)于血型的鑒定主要采用試管法、微板法、全自動(dòng)血型分析儀法等方式。以往在臨床中多使用試管法進(jìn)行ABO血型、RhD血型檢測(cè)，該檢測(cè)方式的結(jié)果雖然具有較高的精準(zhǔn)性，但若進(jìn)行大批量的樣本鑒定，則難以實(shí)現(xiàn)操作的迅速化、規(guī)范化，且在篩查過程中存在人為因素，也可能導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤或漏檢現(xiàn)象[5]。微板法也稱作半自動(dòng)檢測(cè)法，其可進(jìn)行樣本的大批量檢測(cè)，但由于反應(yīng)中使用鹽水為介質(zhì)，在常規(guī)室溫下，容易產(chǎn)生較弱的凝聚現(xiàn)象或抗體難以檢測(cè)的現(xiàn)象，從而影響血型的最終鑒定結(jié)果[6]。

全自動(dòng)血型分析儀法，其鑒定的全過程均在血型儀的自動(dòng)化模式下進(jìn)行完成，無須過多的人員處理、操作，所有流程、環(huán)節(jié)均在血型儀的監(jiān)控下進(jìn)行，且其反定型的溫度設(shè)定在36～38 ℃左右，最大程度地防止了免疫球蛋白M型冷抗體發(fā)生不同正反定型現(xiàn)象。該鑒定方式不僅能夠大批量地進(jìn)行樣本的快速處理，對(duì)ABO血型、RhD血型、不規(guī)則抗體能有效、快速的進(jìn)行篩查、判定，實(shí)現(xiàn)了流程上的自動(dòng)化、簡(jiǎn)便化、規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化，也有效避免了人為因素的干擾，降低了血型檢測(cè)的錯(cuò)誤率、漏檢率[7]；該檢測(cè)方式從加樣、分配試劑、離心震蕩處理、結(jié)果及圖像的分析、處理、掃描、輸出等，使流程實(shí)現(xiàn)了一體化模式，也有效防止了在鑒定過程中的交叉污染影響，在減少工作強(qiáng)度的同時(shí)，提高了鑒定、篩查工作的效率。此外，其在檢測(cè)中所用到的容量，也僅是試管法與微板法的檢測(cè)試劑的一半，極大地減少了檢測(cè)的成本[8-16]。

由本次試驗(yàn)可知，全自動(dòng)血型分析儀與微板法在血型檢測(cè)中的錯(cuò)誤率均為0，但應(yīng)用對(duì)照組在檢測(cè)中的亞型漏檢率稍微多于試驗(yàn)組，而試驗(yàn)組的O細(xì)胞凝聚率相比對(duì)照組較高，但均無太大差異；在ABO血型的正反定型試驗(yàn)對(duì)比中，對(duì)照組的ABO亞型、正反定型不符、抗體降低概率均低于試驗(yàn)組，但組間差異無顯著性（P＞0.05）；在O細(xì)胞凝聚中出現(xiàn)不規(guī)則抗體對(duì)比中，試驗(yàn)組能有效篩查出不規(guī)則抗體，其效果顯著高于對(duì)照組，P＜0.05。究其原因?yàn)?，微板法即使能夠大批量?shí)施標(biāo)本檢測(cè)，但是鹽水為其反應(yīng)介質(zhì)，在室溫條件下能夠進(jìn)行試驗(yàn)，會(huì)導(dǎo)致稀有抗體以及弱凝集無法被檢測(cè)到。而對(duì)于全自動(dòng)血型分析儀而言，（37±1）℃為反定型溫度，對(duì)于免疫球蛋白M型冷抗體導(dǎo)致的正反定性不一致可以充分避免，獲得上述理想結(jié)果，由此可說明，全自動(dòng)血型分析儀對(duì)于血型的檢測(cè)具有較高的安全性、精準(zhǔn)性，且能有效對(duì)不規(guī)則抗體進(jìn)行篩查。

綜上所述，在ABO血型檢測(cè)中應(yīng)用全自動(dòng)血型分析儀，不僅能實(shí)現(xiàn)血型鑒定的標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化、快速化，還能安全、有效地進(jìn)行ABO血型的篩查。