張佳佳 張紅強(qiáng) 王佳慧 張佳美
1.山西振東制藥股份有限公司,山西長治,047100;2.山西振東健康生物科技股份有限公司,山西長治,047100
現(xiàn)如今,因疫情的影響,抑菌健康類洗護(hù)產(chǎn)品發(fā)展火熱?!耙志彼坪醭蔀橄醋o(hù)產(chǎn)品必備功能之一。市面上抑菌劑的種類繁多,但抑菌劑同產(chǎn)品中各成分的配伍還面臨困難。洗滌劑產(chǎn)品中的主要成分為表面活性劑,而不同種類表面活性劑和復(fù)配比例對(duì)配方的黏度、pH、使用效果影響重大[1-3],本文研究發(fā)現(xiàn)表面活性劑對(duì)抑菌劑抑菌效果的發(fā)揮也有較大影響,因此考察表面活性劑體系對(duì)抑菌劑的性能影響具有深遠(yuǎn)意義。
本文考察了洗滌劑中常用兩種殺菌劑三氯生和對(duì)氯間二甲苯酚(PCMX)的抑菌效果,以及在不同配比表面活性劑中的抑菌率。最后將相同的抑菌劑體系加入不同洗滌樣品中進(jìn)行了抑菌效果對(duì)比,為抑菌系列產(chǎn)品的研發(fā)提供參考。
(1)實(shí)驗(yàn)菌種與廠家:金黃色葡萄球菌(ATCC 6538)、大腸埃希菌(ATCC 25922)、白念珠菌(ATCC 10231)均由中國食品藥品檢定研究院提供,為第六代菌。
(2)試劑:改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基均由北京三藥科技開發(fā)公司提供,無水硫酸氫二鈉由國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司提供,氯化鈉、磷酸二氫鉀由天津市永大化學(xué)試劑有限公司提供。
1.2.1 抑菌效果檢測(cè)方法
懸液定量法:將待測(cè)樣品按照要求進(jìn)行稀釋,本實(shí)驗(yàn)的測(cè)試濃度為50%,將待測(cè)樣品和無菌標(biāo)準(zhǔn)硬水按1∶1比例進(jìn)行稀釋。挑取適量菌種于營養(yǎng)肉湯中,震蕩混合均勻,用PBS溶液進(jìn)行適當(dāng)稀釋制成菌懸液,并進(jìn)行2~3梯度稀釋,作為對(duì)照樣品的平均菌落數(shù)。吸取待測(cè)樣品稀釋液9.0 ml放入無菌試管中,吸取稀釋好的菌懸液1.0 ml于待測(cè)樣品中,震蕩均勻后作用相應(yīng)的時(shí)間,同做2~3個(gè)稀釋梯度,取稀釋液0.5 ml于平板內(nèi),每個(gè)樣品接種兩個(gè)平板,手背感受營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基溫度,待培養(yǎng)基不燙,約40 ℃,向培養(yǎng)基中倒入營養(yǎng)瓊脂約15ml,使樣品溶液和營養(yǎng)瓊脂充分混勻以使培養(yǎng)后的菌落均勻生長,待營養(yǎng)瓊脂凝固后將平板倒置放入培養(yǎng)箱中進(jìn)行恒溫培養(yǎng)。
1.2.2 抑菌檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)
按照《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》GB 15979—2002進(jìn)行抑菌性能檢測(cè),每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次。
1.2.3 抑菌率計(jì)算
其中A為對(duì)照樣品的平均菌落數(shù),B為待測(cè)樣品的平均菌落數(shù),抑菌效率等于對(duì)照樣品的平均菌落數(shù)與試驗(yàn)樣品的平均菌落數(shù)的差值占對(duì)照樣品的平均菌落數(shù)的百分比。
1.2.4 抑菌效果評(píng)價(jià)
(1)抑菌率≥50%,產(chǎn)品有抑菌作用,抑菌率≥90%,產(chǎn)品有較強(qiáng)抑菌作用。
(2)樣品經(jīng)過37 ℃加速試驗(yàn),其殺菌率或抑菌率達(dá)到(1)中規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)值,樣品抑菌作用在室溫下至少保持2年。
本研究選用脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸鈉(AES)作為陰離子表面活性劑的代表,脂肪醇聚氧乙烯醚(AEO9)、椰子油二乙醇酰胺(6501)作為非離子表面活性劑的代表,CAB(椰油酰胺丙基甜菜堿)作為兩性表面活性劑的代表。三氯生和對(duì)氯間二甲酚選取作為本實(shí)驗(yàn)的廣譜高效抑菌劑。
由檢測(cè)結(jié)果可知(圖1),在0.1%的三氯生和不同含量的AES表面活性劑體系中,隨著AES的增加抑菌率成逐漸下降趨勢(shì),其中大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌下降程度較小,白念珠菌下降明顯,抑菌率由85%降至不足10%,說明在等量抑菌劑樣品中,AES的含量和抑菌效果成負(fù)相關(guān),并且AES的增加對(duì)白念珠菌的抑菌率影響最大。
圖1 三氯生隨AES含量增加的抑菌率變化
由表1檢測(cè)結(jié)果可知,無論是非離子表面活性劑還是兩性離子表面活性劑的加入,都會(huì)對(duì)抑菌劑的抑菌效果產(chǎn)生不同程度的影響,相對(duì)來看對(duì)白念珠菌的抑菌影響較大。
表1 抑菌劑在不同種類表面活性劑中的抑菌率
由表2結(jié)果可知,在12%AES和3%CAB的復(fù)配表面活性劑體系中,AEO9、6501兩種表面活性劑在不同的復(fù)配比例下對(duì)白念珠菌的抑菌效果影響較大,其中當(dāng)6501和AEO9配方量分別為1.5、3.0時(shí),對(duì)白念珠菌的抑菌效果最好。當(dāng)AEO9含量高于或低于3.0%,抑菌效果都有下降的趨勢(shì)。這可能與陰離子和非離子多元表面活性劑體系之間有協(xié)同作用有關(guān),在最佳比例下可促進(jìn)抑菌劑的抑菌性能發(fā)揮[4]。選擇不同的表面活性劑的配比對(duì)整個(gè)配方的黏度、pH都會(huì)產(chǎn)生較大的影響[5],經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)不同配比的表面活性劑對(duì)抑菌效果也會(huì)產(chǎn)生較大的影響,選擇最優(yōu)配比成為關(guān)鍵[6]。
表2 AEO9、6501不同復(fù)配比例對(duì)白念珠菌的抑菌率
由表3結(jié)果可知,組合物一(0.2%三氯生、0.3%水楊酸),組合物二(0.2%三氯生、0.5%PCMX),組合物三(0.2%三氯生、0.3%吡啶酮乙醇胺鹽)三種抑菌劑復(fù)配體系在不同的洗滌產(chǎn)品配方中,對(duì)三種菌的抑菌效果大不相同,對(duì)細(xì)菌的抑菌效果均可達(dá)到100%,而對(duì)白念珠菌的抑菌結(jié)果差異較大。其中沐浴液主要表面活性劑成分為AES、CAB、AOS、6501,洗手液的主要表面活性劑成分為AES、CAB、APG,洗衣液主要成分為AES、AEO9、6501、CAB。通過實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)說明,表面活性劑的種類和復(fù)配比例對(duì)抑菌結(jié)果都會(huì)產(chǎn)生較大的影響,因此表面活性劑的含量選擇至關(guān)重要[5-6]。
表3 復(fù)配抑菌成分在不同洗滌產(chǎn)品配方中的抑菌率
(1)三氯生和PCMX在陰離子表面活性劑中較為敏感,其抑菌效果相對(duì)于水溶液明顯下降。而兩性表面活性劑和非離子表面活性劑對(duì)三氯生和PCMX抑菌效果的影響相對(duì)較小。
(2)在含有12%AES、3%CAB配方中,不同的AEO9、6501的復(fù)配比例對(duì)白念珠菌的抑菌效果影響較大,6501和AEO9含量為1.5、3.0時(shí),抑菌效果最好。
(3)0.2%三氯生、0.3%水楊酸抑菌組合在主表活為AES、AEO9、CAB、6501洗衣液產(chǎn)品中抑菌率最高,0.2%三氯生、0.5%PCMX抑菌組合在主表 活為APG、6501、CAB洗手液中的抑菌率最高。0.2%三氯生、0.5%吡啶酮乙醇胺鹽抑菌組合在主表活為AES、AOS、6501、CAB沐浴液產(chǎn)品中抑菌率最高。