蔣辰宇 許云龍 柳昱彤 徐 薇 朱英杰*

1(中國(guó)科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院 深圳 518055)

2(中國(guó)科學(xué)院大學(xué) 北京 100049)

3(深圳市藥物成癮重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 深圳 518055)

1 引 言

藥物成癮是一種慢性神經(jīng)精神疾病，其主要癥狀為過(guò)度渴求攝入精神類藥物，以尋求欣快或緩解痛苦，進(jìn)而誘發(fā)認(rèn)知、記憶和情緒的根本變化。藥物成癮的核心臨床癥狀為藥物戒斷與藥物渴求的長(zhǎng)期復(fù)發(fā)性循環(huán)，成癮患者盡管了解使用藥物產(chǎn)生的不良后果，但依舊無(wú)法控制自身的藥物使用。隨著藥物成癮病程延續(xù)，使用藥物帶來(lái)的快感減少，導(dǎo)致患者對(duì)精神藥物的需求上升，進(jìn)而加重了藥物使用者的藥物依賴[1]。以嗎啡為代表的阿片類藥物成癮和以甲基苯丙胺為代表的合成毒品成癮，是當(dāng)前控制藥物成癮所面臨的主要問(wèn)題[2-3]。

影響藥物成癮易感性的因素包括多個(gè)方面。首先是遺傳因素，通過(guò)對(duì)人類群體基因組水平的薈萃分析研究，相關(guān)研究者發(fā)現(xiàn)藥物成癮相關(guān)的基因多態(tài)性有成百上千種，除直接編碼執(zhí)行功能的蛋白質(zhì)相關(guān)基因外，基于表觀遺傳學(xué)水平的基因修飾變化[4]以及調(diào)節(jié)基因的多態(tài)性，也會(huì)影響個(gè)體藥物成癮的易感性[5]。受其影響，許多重要的神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)的活動(dòng)變化，如內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)活動(dòng)水平上升[6]、內(nèi)源性催產(chǎn)素系統(tǒng)遞質(zhì)釋放減少[7]以及神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)如 HPA 軸的過(guò)度激活等因素[8]，都會(huì)提高藥物成癮易感性。其次，環(huán)境因素和心理因素對(duì)藥物成癮易感性有較大影響[9]。相關(guān)學(xué)者通過(guò)對(duì)雙生子進(jìn)行調(diào)查[10-11]發(fā)現(xiàn)，當(dāng)雙生子處于如戰(zhàn)場(chǎng)、娛樂(lè)性場(chǎng)所等易于社群共享藥物的環(huán)境中，其中一方成癮藥物使用風(fēng)險(xiǎn)更高。在家庭教育中，父母對(duì)青少年時(shí)期人群教育管理的嚴(yán)格程度和成癮藥物使用風(fēng)險(xiǎn)呈負(fù)相關(guān)[12]。此外，性別差異也是影響藥物成癮易感性的重要因素[13]，在人類研究和臨床調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，女性比男性更容易藥物成癮，且雌激素水平與成癮風(fēng)險(xiǎn)成正比[14-15]。在大鼠的相關(guān)研究中發(fā)現(xiàn)，切除卵巢或注射雌激素受體拮抗劑的大鼠，對(duì)可卡因和海洛因的自給藥水平會(huì)降低，而切除卵巢后再外源注射雌激素的大鼠，自給藥水平和對(duì)照組大鼠相同[16-17]。

毛發(fā)生長(zhǎng)的過(guò)程包括生發(fā)期、退化期和休止期，其動(dòng)態(tài)生長(zhǎng)循環(huán)與 Wnt-β-Catenin 信號(hào)通路、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、Sonic Hedgehog 等多個(gè)信號(hào)通路密切相關(guān)[18-19]，因此，會(huì)受到如營(yíng)養(yǎng)、免疫、激素等因素的影響[20]。直接影響毛發(fā)生長(zhǎng)的因素是個(gè)體攝入營(yíng)養(yǎng)的差異，各類維生素和礦物質(zhì)的攝入不足和過(guò)量，都會(huì)影響毛發(fā)的生長(zhǎng)。如維生素 A 和 Si 元素的過(guò)量攝入會(huì)導(dǎo)致脫發(fā)[21]，且統(tǒng)計(jì)分析表明大量脫發(fā)患者也存在維生素 D 缺乏現(xiàn)象[22]。此外，免疫系統(tǒng)可以直接調(diào)控毛發(fā)的生長(zhǎng)過(guò)程，與白細(xì)胞介素 1 分泌直接相關(guān)的GasderminA3，對(duì)促進(jìn)毛發(fā)進(jìn)入新一輪生長(zhǎng)周期非常關(guān)鍵[23]，當(dāng)身體處于長(zhǎng)期炎癥或免疫失調(diào)時(shí)，免疫系統(tǒng)會(huì)直接攻擊毛囊，導(dǎo)致脫發(fā)和毛發(fā)生長(zhǎng)緩慢[24-25]。人體內(nèi)各類激素對(duì)毛發(fā)生長(zhǎng)也會(huì)產(chǎn)生重要影響，如性激素、褪黑素、皮質(zhì)醇等[26]。有研究表明，皮質(zhì)醇的水平與毛發(fā)生長(zhǎng)有著密切聯(lián)系，較高水平的皮質(zhì)醇會(huì)降低毛囊功能相關(guān)物質(zhì)的合成(如透明質(zhì)酸和蛋白聚糖)水平，導(dǎo)致毛發(fā)生長(zhǎng)減緩和脫發(fā)[27]，而較低水平的皮質(zhì)醇則能夠降低上述物質(zhì)的降解速度，促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)。

皮質(zhì)醇在藥物成癮中的作用逐漸受到關(guān)注，靈長(zhǎng)類動(dòng)物的下丘腦-垂體-腎上腺軸興奮性上升可以直接提高皮質(zhì)醇水平[28-29]，且這種興奮性可以長(zhǎng)期維持，進(jìn)而促進(jìn)個(gè)體皮質(zhì)醇保持在較高的水平[30]。在動(dòng)物研究中，皮質(zhì)醇水平的上升可以直接促進(jìn)大鼠的苯丙胺自給藥水平[31-32]以及靈長(zhǎng)類動(dòng)物的過(guò)度酒精攝入[33]。而在人類研究中發(fā)現(xiàn)，HPA 軸興奮性與成癮患者對(duì)精神藥物的需求和復(fù)吸欲望呈現(xiàn)正相關(guān)[34]，急性的皮質(zhì)醇給藥可以使可卡因依賴患者產(chǎn)生強(qiáng)烈的藥物渴求[35]。皮質(zhì)醇能夠在外周組織內(nèi)積累，影響外周組織細(xì)胞的生命周期[36]。有研究發(fā)現(xiàn)，皮質(zhì)醇可以在毛發(fā)中積累[37]，進(jìn)而誘導(dǎo)毛發(fā)休止期延長(zhǎng)，導(dǎo)致毛發(fā)再生緩慢，產(chǎn)生斑禿、毛發(fā)稀疏等現(xiàn)象，這一結(jié)論在嚙齒動(dòng)物[38]和人類的研究[39-41]中均得到了驗(yàn)證。該現(xiàn)象反映出毛發(fā)再生可能與皮質(zhì)醇水平相關(guān)，也進(jìn)一步反映出個(gè)體對(duì)成癮藥物的易感性差異。

本研究通過(guò)觀察修剪毛發(fā)后大鼠毛發(fā)再生的過(guò)程，以毛發(fā)再生的結(jié)果作為分類指標(biāo)，利用經(jīng)典的條件性位置偏好行為模型(Conditional Place Preference，CPP)和動(dòng)物自主給藥行為模型(Self-Administration，SA)，對(duì)毛發(fā)再生差異是否與大鼠對(duì)成癮藥物的易感性有關(guān)進(jìn)行分析。結(jié)果表明，大鼠毛發(fā)再生速度與藥物成癮易感性存在負(fù)相關(guān)性，即毛發(fā)再生較快的 SD 大鼠，對(duì)成癮性藥物的偏好性較低。

2 材料和方法

2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

本文動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方案經(jīng)中國(guó)科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院動(dòng)物倫理委員會(huì)審查通過(guò)(受理號(hào)為SIAT-IACUC-210811-NS-DXF-A2036)。實(shí)驗(yàn)所用大鼠為封閉群 SD 大鼠，共使用 28 只雄性、年齡為 6 周的青年成鼠。大鼠購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，每個(gè)籠子 2 只，讓大鼠在無(wú)特定病原體實(shí)驗(yàn)室環(huán)境內(nèi)適應(yīng) 1 周左右，期間給予大鼠充足的飼料和飲水，照明周期為12 h 光照/12 h 黑暗。

2.2 實(shí)驗(yàn)藥品

本文動(dòng)物實(shí)驗(yàn)使用的鹽酸嗎啡由中國(guó)科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院藥物管理平臺(tái)經(jīng)核準(zhǔn)后采購(gòu)，采購(gòu)自東北制藥集團(tuán)沈陽(yáng)第一制藥廠，規(guī)格為 10 mg/mL 針劑。鹽酸甲基安非他命(鹽酸甲基苯丙胺)來(lái)自中國(guó)食品藥品檢定研究院，藥品批號(hào)為 171212-201605，規(guī)格為 20 mg/支。

2.3 大鼠修剪毛發(fā)與毛發(fā)再生記錄

所有大鼠先適應(yīng)環(huán)境 1 周，再經(jīng)異氟烷麻醉后，使用同一規(guī)格的剃毛器進(jìn)行毛發(fā)修剪，毛發(fā)剩余長(zhǎng)度為 3 mm。修剪毛發(fā)后立即拍照記錄其毛發(fā)情況，拍攝使用的攝像機(jī)是與三星 S10 攝像頭型號(hào)一致的長(zhǎng)焦鏡頭攝像機(jī)，1 200 萬(wàn)像素，最大光圈為 2.4。修剪毛發(fā) 14 d 后，再次使用異氟烷麻醉大鼠，并拍照記錄其毛發(fā)再生情況。最后使用 MATLAB 進(jìn)行平均灰度分析，在每張照片中，取大鼠背部修剪毛發(fā)處 83×78 個(gè)像素區(qū)域，觀察其毛發(fā)再生差異。

2.4 動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)

2.4.1 曠場(chǎng)試驗(yàn)

大鼠修剪毛發(fā) 3 d 后，使用 2 個(gè)自制的曠場(chǎng)試驗(yàn)裝置測(cè)試其運(yùn)動(dòng)能力：將大鼠放入長(zhǎng)寬高均為 50 cm、上底面開(kāi)放的正方體黑色聚乙烯箱體空間中，允許其自由活動(dòng)。箱體底板及內(nèi)壁均使用粗糙黑色壁紙全覆蓋，避免光反射。在箱體底面中心區(qū)域設(shè)置一個(gè)長(zhǎng)寬均為 30 cm 的正方形，使用白色壁紙條作為其外周劃分，用于標(biāo)記區(qū)域范圍。在曠場(chǎng)正上方利用支架固定 2 個(gè)工業(yè)廣角 USB 攝像機(jī)(LRCP，商品編號(hào)：3206)進(jìn)行視頻采集。實(shí)驗(yàn)大鼠先在曠場(chǎng)中自由活動(dòng) 1 min，然后記錄其 15 min 的行為數(shù)據(jù)，并進(jìn)行分析。

2.4.2 條件性位置偏好實(shí)驗(yàn)

在完成曠場(chǎng)行為學(xué)測(cè)試 2 周后，選擇其中 12只大鼠進(jìn)行嗎啡條件性位置偏好實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程參考 Wang 和 Rosen 等人[42-43]的實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)中使用 3 個(gè)相同的自制條件性位置偏好實(shí)驗(yàn)裝置，測(cè)試大鼠對(duì)嗎啡的條件性位置偏好行為：實(shí)驗(yàn)裝置為 2 個(gè)大小相同的箱體(30 cm×25 cm×30 cm)，由一個(gè)黑色的中央小隔間(10 cm×25 cm×30 cm)隔開(kāi)，該隔間底板光滑，用閘門與雙側(cè)箱體連接。雙側(cè)大箱體有不同的墻壁圖案(分別使用黑白相間的斑馬紋與黑白相間的正方形墻紙進(jìn)行覆蓋)和底板紋理(斑馬紋箱體底板有精細(xì)的網(wǎng)格，正方形箱體底板是砂紙)，實(shí)驗(yàn)裝置上方開(kāi)放。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，使用 3 個(gè)工業(yè)廣角攝像機(jī)(LRCP，商品編號(hào)：3206)錄制實(shí)驗(yàn)視頻。

整個(gè)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)周期為 11 d，首先為準(zhǔn)備階段，第 1 天讓大鼠在實(shí)驗(yàn)裝置的 3 個(gè)房間內(nèi)自由探索 15 min，熟悉實(shí)驗(yàn)裝置環(huán)境。第 2 天進(jìn)行基準(zhǔn)環(huán)境偏好測(cè)試，根據(jù)大鼠體重，對(duì)每只大鼠注射 1 mL/kg 大鼠體重劑量的生理鹽水，然后關(guān)閉閘門將大鼠封閉在中央小隔間內(nèi)，1 min 后打開(kāi)閘門，允許其在裝置內(nèi)自由探索 15 min，根據(jù)大鼠在大箱體內(nèi)停留的時(shí)間長(zhǎng)短，篩選大鼠對(duì)裝置的自然偏好側(cè)。在大箱體內(nèi)注射生理鹽水，并選擇其自然偏好側(cè)的對(duì)側(cè)作為嗎啡給藥環(huán)境(若大鼠對(duì) 3 個(gè)隔間中某一隔間的偏好超過(guò)總實(shí)驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)的 80%，則淘汰該大鼠)。

然后進(jìn)入條件化階段，在第 3、5、7、9 天，根據(jù)大鼠體重為其注射 5 mg/kg 劑量的嗎啡，并置于嗎啡配對(duì)環(huán)境內(nèi) 45 min，第 4、6、8、10 天注射等量的生理鹽水，置于對(duì)照配對(duì)環(huán)境內(nèi) 45 min。實(shí)驗(yàn)第 11 天進(jìn)行條件化后環(huán)境偏好測(cè)試，操作過(guò)程同第 2 天，通過(guò)該測(cè)試，可分析大鼠對(duì)嗎啡給藥環(huán)境的偏好性。以上視頻采集平臺(tái)的其他硬件包括：三星 Type-C USB 128G 移動(dòng)存儲(chǔ)器，高性能計(jì)算機(jī)(戴爾 OptiPlex 7080 塔式機(jī))。

大鼠的行為學(xué)實(shí)驗(yàn)均在獨(dú)立安靜的同一行為實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，先將大鼠放入實(shí)驗(yàn)環(huán)境適應(yīng) 15 min。每只大鼠行為測(cè)試完成后，取走大鼠，并清理儀器裝置中大鼠留下的尿液和糞便，用 75% 乙醇溶液擦拭，待乙醇揮發(fā)完全后再放入另一只大鼠進(jìn)行測(cè)試，確保大鼠之間不會(huì)因氣味相互影響。為避免大鼠節(jié)律影響，所有實(shí)驗(yàn)過(guò)程均在上午 9 時(shí)到 16 時(shí)之間完成，且每一只大鼠每天進(jìn)行行為學(xué)實(shí)驗(yàn)的時(shí)間段恒定。

2.4.3 大鼠甲基苯丙胺自給藥實(shí)驗(yàn)

剩余的 16 只大鼠進(jìn)行頸靜脈插管，用于甲基苯丙胺自給藥實(shí)驗(yàn)。頸靜脈插管手術(shù)后，待實(shí)驗(yàn)大鼠休息恢復(fù) 5 d，再進(jìn)行自給藥實(shí)驗(yàn)。以上實(shí)驗(yàn)在減噪箱(Anilab)中的操作室(AESDSA6，Anilab)內(nèi)進(jìn)行，使用 Anilab Ver 6.40 軟件(Anilab)控制儀器記錄行為數(shù)據(jù)。甲基苯丙胺自給藥共訓(xùn)練 12 d，使用 0.2 mg/mL 甲基苯丙胺溶液給藥，記錄大鼠每天的鼻觸次數(shù)與給藥次數(shù)，并分析其行為變化。對(duì)操作箱氣味處理方式同第 2.4.2 小節(jié)，自給藥時(shí)間均在上午 9 時(shí)到 14時(shí)之間完成，并盡可能地控制每只動(dòng)物進(jìn)行行為學(xué)實(shí)驗(yàn)的時(shí)間段恒定。

2.5 行為學(xué)分析

本文使用 Anymaze 軟件分析曠場(chǎng)試驗(yàn)和嗎啡條件性位置偏好實(shí)驗(yàn)視頻，記錄大鼠的位置，并計(jì)算其在曠場(chǎng)中心區(qū)停留時(shí)間，曠場(chǎng)中的總運(yùn)動(dòng)距離以及 CPP-score(條件性位置偏好得分)。CPP-score 計(jì)算方式為：大鼠嗎啡給藥側(cè)條件化后停留時(shí)間減去大鼠嗎啡給藥側(cè)基準(zhǔn)停留時(shí)間。以上數(shù)據(jù)均使用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

在大鼠甲基苯丙胺自給藥實(shí)驗(yàn)中，提取大鼠有效側(cè)鼻觸次數(shù)、無(wú)效側(cè)鼻觸次數(shù)以及給藥次數(shù)，使用雙因素方差對(duì)大鼠自給藥行為進(jìn)行討論，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

以上統(tǒng)計(jì)學(xué)分析均使用 Graphpad prism 9.0.0版本進(jìn)行。

3 結(jié) 果

本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的整體流程如圖 1 所示。由于兩種藥物的易感性檢測(cè)同時(shí)進(jìn)行，因此，在曠場(chǎng)試驗(yàn)后 14 d，將大鼠隨機(jī)分為兩批進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

圖1 毛發(fā)再生與藥物成癮相關(guān)性實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)流程Fig. 1 Experiment protocol for analyzing correlation between hair regrowth and drug addiction

3.1 大鼠毛發(fā)再生差異性

大鼠修剪毛發(fā)后，對(duì)其毛發(fā)再生情況進(jìn)行觀察，討論是否存在差異性。大鼠修剪毛發(fā)后和毛發(fā)恢復(fù)生長(zhǎng) 14 d 后的結(jié)果如圖 2 所示。

圖2 SD 大鼠毛發(fā)再生差異示意圖Fig. 2 The difference of hair regrowth of SD rats

通過(guò)灰度差異分析，以灰度差作為分類依據(jù)(G指灰度，灰度差 ΔG＝G14-G0)，以毛發(fā)生長(zhǎng)灰度差中位數(shù)(ΔG＝21.259 05)作為分類標(biāo)準(zhǔn)，可將大鼠分為毛發(fā)再生較快(ΔG＞中位數(shù))組和毛發(fā)再生較慢(ΔG＜中位數(shù))組。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，同一時(shí)期進(jìn)行同樣的毛發(fā)修剪，同籠飼養(yǎng)的大鼠毛發(fā)再生情況存在較大差異，部分大鼠毛發(fā)再生速度和再生毛發(fā)覆蓋程度顯著高于其他同類大鼠。后續(xù)實(shí)驗(yàn)以此表型作為分類依據(jù)，將大鼠依據(jù)毛發(fā)再生程度分為快和慢 2 組，用于后續(xù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

3.2 大鼠毛發(fā)再生能力與嗎啡條件性位置偏好的相關(guān)分析

利用 Anymaze 軟件對(duì) 12 只大鼠嗎啡條件性位置偏好視頻數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，根據(jù)其在給藥前第2 天在各箱體內(nèi)的基準(zhǔn)停留時(shí)間，與給藥條件化結(jié)束后第 11 天在各箱體內(nèi)的停留時(shí)間，計(jì)算條件位置偏好得分(CPP score)，結(jié)果如圖 3 所示。

圖3 毛發(fā)生長(zhǎng)快和慢兩組大鼠的嗎啡條件性位置偏好得分Fig. 3 Morphine CPP scores of rats with fast and slow hairregrowth

在嗎啡條件性位置偏好實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，使用5 mg/kg 鹽酸嗎啡進(jìn)行 4 個(gè)周期的條件化后，毛發(fā)再生較快的大鼠的 CPP-score 顯著低于毛發(fā)再生較慢的大鼠，即毛發(fā)再生較快的大鼠對(duì)該劑量的嗎啡條件性位置偏好顯著較低，兩組大鼠的運(yùn)動(dòng)能力不存在明顯區(qū)別，因此可排除組間運(yùn)動(dòng)能力差異導(dǎo)致的箱體內(nèi)停留時(shí)間差異。該結(jié)果支持了毛發(fā)再生較慢的大鼠對(duì)嗎啡易感性高，更易產(chǎn)生藥物偏好的結(jié)論。

3.3 大鼠毛發(fā)再生差異對(duì)甲基苯丙胺渴求的影響

甲基苯丙胺等合成毒品的消費(fèi)人群正在逐漸擴(kuò)大，但對(duì)其成癮后的治療手段有限[44]，因此可以考慮從易感性方面入手，研究個(gè)體對(duì)甲基苯丙胺成癮前的抵抗力。對(duì)于經(jīng)典阿片類精神藥物嗎啡，毛發(fā)再生速度不同的大鼠的成癮易感性存在差異，本文針對(duì)甲基苯丙胺設(shè)計(jì)進(jìn)行了自給藥實(shí)驗(yàn)，研究毛發(fā)再生差異對(duì)甲基苯丙胺易感性的影響。根據(jù) Anilab Ver 6.40 軟件收集的大鼠在自給藥習(xí)得階段的鼻觸與給藥次數(shù)，分析毛發(fā)再生差異與甲基苯丙胺自給藥習(xí)得程度的關(guān)系，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖 4 所示。

圖4 兩組大鼠的甲基苯丙胺自給藥覓藥行為對(duì)比Fig. 4 Comparing methamphetamine-seeking behavior between the two groups of rats

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，毛發(fā)再生的快慢對(duì)甲基苯丙胺自給藥模型中的大鼠給藥渴求程度沒(méi)有顯著影響，但在習(xí)得階段，毛發(fā)再生較快的大鼠主動(dòng)給藥次數(shù)相對(duì)較少，存在抵抗甲基苯丙胺依賴的趨勢(shì)(雙因素方差分析，F(xiàn)(1, 10)＝1.943，P＝0.193 6)。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步對(duì)兩組大鼠甲基苯丙胺自給藥覓藥最后 5 個(gè)節(jié)段進(jìn)行多重對(duì)比分析，結(jié)果如表 1 所示。分析結(jié)果表明，在習(xí)得階段最后 3 天內(nèi)，毛發(fā)再生較快的大鼠的平均自主給藥次數(shù)比毛發(fā)再生較慢的大鼠減少約 40%。綜上所述，在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上，毛發(fā)再生的快慢對(duì)大鼠甲基苯丙胺總體依賴情況沒(méi)有影響，但是存在降低大鼠對(duì)甲基苯丙胺易感性的趨勢(shì)。

表1 兩組大鼠的甲基苯丙胺自給藥覓藥行為統(tǒng)計(jì)Table 1 Methamphetamine self-administration behavior statistics in two groups of rats

3.4 大鼠毛發(fā)再生差異對(duì)運(yùn)動(dòng)能力和焦慮程度的影響

為研究毛發(fā)再生差異是否影響動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)能力和焦慮程度，本研究利用曠場(chǎng)試驗(yàn)，對(duì)兩組動(dòng)物在運(yùn)動(dòng)能力和焦慮水平上的差別進(jìn)行討論。由Anymaze 軟件分析曠場(chǎng)試驗(yàn)大鼠行為后，以 15 min內(nèi)大鼠在中央?yún)^(qū)停留的時(shí)間作為評(píng)價(jià)其焦慮水平的參數(shù)，大鼠在整個(gè)曠場(chǎng)內(nèi)的總運(yùn)動(dòng)距離作為評(píng)價(jià)其運(yùn)動(dòng)能力的參數(shù)，得到行為結(jié)果如圖 5 所示。

由圖 5 可知，兩組大鼠毛發(fā)再生速度的差異對(duì)其運(yùn)動(dòng)能力和焦慮水平均無(wú)顯著影響，即兩組大鼠在給藥前的生理狀態(tài)無(wú)顯著差異。

圖5 兩組毛發(fā)再生存在差異的大鼠運(yùn)動(dòng)能力和焦慮水平的曠場(chǎng)試驗(yàn)結(jié)果Fig. 5 Results of field experiments on exercise ability and anxiety levels of two groups of rats with different hair regeneration

4 討論和分析

迄今為止，針對(duì)藥物成癮風(fēng)險(xiǎn)的研究仍主要集中于分子水平差異，在宏觀表征上，對(duì)群體中個(gè)體以至整個(gè)群體的藥物成癮易感性預(yù)測(cè)仍不清楚。此外，在長(zhǎng)期藥物成癮后，進(jìn)行治療復(fù)健的臨床難度較高，通過(guò)發(fā)現(xiàn)生物群體中自然存在的精神藥物依賴抗性以及明顯的宏觀表型進(jìn)行篩選，以期研究生物體自身對(duì)拮抗精神藥物易感性的方法，可能是更加妥善的處理方式。由于壓力可以導(dǎo)致皮質(zhì)醇釋放，而高水平皮質(zhì)醇與脫發(fā)有著密切聯(lián)系[27]，且壓力也會(huì)導(dǎo)致個(gè)體對(duì)精神藥物的依賴性上升，因而毛發(fā)的生長(zhǎng)情況可能間接反映了個(gè)體對(duì)精神藥物的成癮易感性。

本研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)群居的 SD 大鼠同時(shí)期修剪毛發(fā)后，其毛發(fā)再生情況存在比較明顯的個(gè)體差異，部分大鼠的毛發(fā)再生顯著慢于其他大鼠，且這一表型差異與大鼠自身的運(yùn)動(dòng)能力和情緒焦慮水平并無(wú)顯著關(guān)聯(lián)。在針對(duì)精神藥物成癮易感性的研究中，毛發(fā)再生情況的差異對(duì)甲基苯丙胺自給藥的大鼠并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)上的影響，且累進(jìn)比率給藥研究表明，兩類大鼠對(duì)甲基苯丙胺的藥物渴求程度基本一致。但毛發(fā)再生較快的大鼠在固定比率給藥階段，甲基苯丙胺的平均攝入量比毛發(fā)再生較慢的大鼠低約 40%。這表明毛發(fā)再生較快的大鼠更容易控制自己覓藥的行為，較低劑量的甲基苯丙胺就可以滿足，藥物依賴性相對(duì)較弱。在嗎啡條件性位置偏好實(shí)驗(yàn)中，對(duì)于給藥環(huán)境的偏好，毛發(fā)再生較快的大鼠顯著低于毛發(fā)再生較慢的大鼠，表明 5 mg/kg 嗎啡所引發(fā)的條件性位置偏愛(ài)效應(yīng)在毛發(fā)再生較快的大鼠中顯著降低。綜上所述，在一定程度上，大鼠毛發(fā)再生的快慢可以反映和預(yù)測(cè)個(gè)體對(duì)精神藥物的易感性差異，具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

本研究為探索藥物成癮易感性的表型分析提供了一種新思路，即直接通過(guò)毛發(fā)生長(zhǎng)和再生的個(gè)體差異性，推測(cè)個(gè)體對(duì)精神藥物的成癮風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)而可能通過(guò)外周水平的表型變化，預(yù)先判斷成癮易感個(gè)體，對(duì)其進(jìn)行干預(yù)和控制其精神藥物的使用，對(duì)降低藥物濫用的風(fēng)險(xiǎn)起到輔助作用。

5 結(jié) 論

基于動(dòng)物條件性位置偏好模型和動(dòng)物自給藥實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，本文對(duì)毛發(fā)再生與藥物成癮易感性之間的關(guān)聯(lián)性進(jìn)行了評(píng)估。對(duì)于個(gè)體藥物成癮易感性的差異，以往研究更注重于基因與分子層面，本研究則從宏觀角度提出毛發(fā)生長(zhǎng)與藥物成癮之間的關(guān)系，為研究個(gè)體藥物成癮易感性提供了一個(gè)新的切入角度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：與毛發(fā)再生較快的大鼠相比，毛發(fā)再生較慢的大鼠對(duì)藥物成癮的易感性相對(duì)較高，且存在顯著的嗎啡條件性環(huán)境偏好。這一發(fā)現(xiàn)可作為預(yù)測(cè)個(gè)體藥物成癮風(fēng)險(xiǎn)的參考性指標(biāo)，為進(jìn)一步研究個(gè)體藥物成癮易感性的差異來(lái)源提供了新思路。