馬曉潔

(河南省濮陽縣人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河南 濮陽 457000)

生化檢驗(yàn)是臨床對(duì)疾病進(jìn)行診斷、治療和判斷預(yù)后的關(guān)鍵方式，其檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性存在重要意義，而血液樣本質(zhì)量則是保障檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確的關(guān)鍵。在檢驗(yàn)科中標(biāo)本溶血現(xiàn)象較為常見，當(dāng)臨床標(biāo)本未能及時(shí)送檢或是在血液標(biāo)本采集時(shí)相關(guān)操作不規(guī)范時(shí)，將會(huì)使得標(biāo)本發(fā)生溶血，即紅細(xì)胞破壞，血細(xì)胞內(nèi)部分物質(zhì)會(huì)在血清樣品中呈現(xiàn)特殊的紅色現(xiàn)象。在臨床上，血液樣本溶血屬于常見和能夠干擾的，會(huì)對(duì)臨床生化檢驗(yàn)產(chǎn)生一定影響。當(dāng)血液內(nèi)白細(xì)胞、紅細(xì)胞以及血小板等出現(xiàn)破壞，則會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞中部分成分被釋放，若細(xì)胞內(nèi)外該成分水平存在差異，則會(huì)影響血漿中該成分水平。標(biāo)本溶血會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)指標(biāo)發(fā)生變化，當(dāng)標(biāo)本出現(xiàn)溶血情況時(shí)，受到繼發(fā)性理化因素改變等影響，將會(huì)使得相關(guān)臨床指標(biāo)出現(xiàn)改變，導(dǎo)致精確度下降。血脂、肝功能、心肌酶以及電解質(zhì)等是臨床常用的檢測(cè)指標(biāo)，但是目前臨床在上述指標(biāo)檢驗(yàn)時(shí)使用溶血標(biāo)本是否會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響尚未得出統(tǒng)一結(jié)論，故而需要以此作為切入點(diǎn)開展研究。本次研究選擇82例在河南省濮陽縣人民醫(yī)院開展生化檢驗(yàn)的患者，采集其血液樣本并分別進(jìn)行溶血前后生化指標(biāo)檢驗(yàn)，觀察溶血對(duì)生化指標(biāo)的影響，現(xiàn)針對(duì)研究相關(guān)情況作出以下介紹。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究群體為2020年5月至2021年12月在本院開展生化檢驗(yàn)的82例患者。82例患者內(nèi)，年齡區(qū)間30～70歲，平均年齡(52.69±5.67)歲；女性35例、男性47例；體質(zhì)指數(shù)21.00～25.00 kg/m，平均體質(zhì)指數(shù)(23.21±1.01)kg/m。本研究交由本院倫理委員會(huì)專家審核后同意繼續(xù)開展研究。

納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)血液樣本送檢時(shí)未發(fā)生溶血情況；(2)無凝血塊；(3)外周血樣本未發(fā)生污染情況；(4)患者了解研究?jī)?nèi)容后自愿參加。

排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)存在其他系統(tǒng)嚴(yán)重病變情況者；(2)伴有膿毒血癥者；(3)存在全身性感染情況者；(4)依從性較差，不愿意配合研究者。

1.2 研究方法

全部患者均在晨起時(shí)采集空腹上臂靜脈血樣本8 mL，將其平均分成兩管，分別將2 mL抗凝劑添加至血液樣本中，并置于1 000 r/min的離心機(jī)內(nèi)，進(jìn)行持續(xù)5 min離心處理，離心機(jī)離心半徑為10 cm。選擇其中一管，利用佳能TBA-FX8全自動(dòng)生化分析儀(采購(gòu)自四川新健康成生物股份有限公司)開展血液樣本血脂、肝功能以及電解質(zhì)、肌鈣蛋白I指標(biāo)檢測(cè)，使用配套檢測(cè)試劑盒。利用安圖A2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光測(cè)定儀(采購(gòu)自四川新健康成生物股份有限公司)檢測(cè)血液樣本中前體N末端前腦利鈉肽水平。對(duì)另一管實(shí)施溶血處理，攪動(dòng)血塊，促使其形成溶血，之后將其放置在3 000 r/min的離心機(jī)內(nèi)進(jìn)行持續(xù)10 min離心處理，肉眼查看血清呈淡紅色，之后將其放置在BC-5800型血球分析儀(采購(gòu)自深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司)上觀察血紅蛋白水平，依據(jù)血紅蛋白水平將全部血液樣劃分成輕中度溶血組以及重度溶血組。其中血紅蛋白水平在4 g/L以下屬于輕中度溶血，超過4 g/L則屬于重度溶血。

1.3 觀察項(xiàng)目

(1)對(duì)比不同溶血程度組與未溶血組血液樣本肝功能指標(biāo)水平。在肝功能方面主要包含總蛋白、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶以及丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。(2)對(duì)比不同溶血程度組與未溶血組血液樣本電解質(zhì)指標(biāo)水平。在電解質(zhì)方面主要包含鈣離子、氯離子、鈉離子以及鉀離子。(3)對(duì)比不同溶血程度組與未溶血組血液樣本血脂指標(biāo)水平。在血脂方面主要包含低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、甘油三酯以及總膽固醇。(4)對(duì)比不同溶血程度組與未溶血組血液樣本心肌酶指標(biāo)水平。在心肌酶方面主要包含肌鈣蛋白I、前體N末端前腦利鈉肽、肌酸激酶同工酶以及肌酸激酶。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 兩組血液樣本肝功能指標(biāo)水平差異比較

未溶血組血液樣本中總蛋白、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶以及丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平均低于輕中度溶血組、重度溶血組，輕中度溶血組血液樣本中總蛋白、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶以及丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平均低于重度溶血組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05)。見表1。

表1 兩組血液樣本肝功能指標(biāo)水平差異比較

2.2 兩組血液樣本電解質(zhì)指標(biāo)水平差異比較

不同溶血程度組與未溶血組血液樣本中鈉離子水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＞0.05)。未溶血組血液樣本中鈣離子、氯離子以及鉀離子水平均低于輕中度溶血組、重度溶血組，輕中度溶血組血液樣本中鈣離子、氯離子以及鉀離子水平均低于重度溶血組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05)。見表2。

表2 兩組血液樣本電解質(zhì)指標(biāo)水平差異比較(± s )

2.3 兩組血液樣本血脂指標(biāo)水平差異比較

不同溶血程度組與未溶血組血液樣本中低密度脂蛋白膽固醇以及高密度脂蛋白膽固醇水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＞0.05)。未溶血組血液樣本中甘油三酯以及總膽固醇水平均低于輕中度溶血組、重度溶血組，輕中度溶血組血液樣本中甘油三酯以及總膽固醇水平均低于重度溶血組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05)。見表3。

表3 兩組血液樣本血脂指標(biāo)水平差異比較(± s )

2.4 兩組血液樣本心肌酶指標(biāo)水平差異比較

未溶血組血液樣本中肌鈣蛋白I、前體N末端前腦利鈉肽、肌酸激酶同工酶以及肌酸激酶水平均低于輕中度溶血組、重度溶血組，輕中度溶血組血液樣本中肌鈣蛋白I、前體N末端前腦利鈉肽、肌酸激酶同工酶以及肌酸激酶水平均低于重度溶血組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05)。見表4。

表4 兩組血液樣本心肌酶指標(biāo)水平差異比較(± s )

3 討 論

標(biāo)本溶血是臨床實(shí)驗(yàn)室最為常見的誤差類型，同時(shí)還是標(biāo)本拒收的重要因素。選擇不同采血管或是標(biāo)本存放時(shí)間較長(zhǎng)等均會(huì)導(dǎo)致標(biāo)本采集期間血細(xì)胞溶解，使得血清或是血漿總血紅蛋白水平升高。當(dāng)患者血細(xì)胞溶液時(shí)，會(huì)伴有顯著的理化因素改變，細(xì)胞中不同離子被釋放入血，并且細(xì)胞中線粒體代謝產(chǎn)物以及肌鈣蛋白等大分子結(jié)構(gòu)物質(zhì)將會(huì)顯著升高，進(jìn)而會(huì)影響溶血檢測(cè)結(jié)果，甚至?xí)沟眉膊≌`診或是漏診，出現(xiàn)嚴(yán)重后果。溶血樣本檢測(cè)值會(huì)出現(xiàn)較大波動(dòng)，并且其指標(biāo)精確性不佳，在后續(xù)使用中可靠性較差。了解溶血標(biāo)本是否會(huì)對(duì)肝功能、電解質(zhì)、血脂以及心肌酶等常見生化檢驗(yàn)指標(biāo)產(chǎn)生影響，對(duì)提升檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性具有積極意義。

在董立娜的研究中，其通過分別觀察溶血與未溶血血液樣本中肝功能指標(biāo)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)溶血血液樣本中肝功能指標(biāo)相較于未溶血組有明顯升高，故而其認(rèn)為溶血標(biāo)本會(huì)對(duì)肝功能檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性產(chǎn)生不利影響。本次研究后發(fā)現(xiàn)，溶血組血液樣本中總蛋白、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶以及丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平均高于未溶血組，重度溶血血液樣本中總蛋白、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶以及丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平均高于輕中度溶血。針對(duì)研究結(jié)果開展進(jìn)一步分析，在血細(xì)胞中總蛋白、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶以及丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶能夠一定程度表達(dá)，而當(dāng)血標(biāo)本發(fā)生溶血情況后，因線粒體膜通透性升高，這使得總蛋白、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶以及丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶被大量釋放入血。另外，在溶血期間，因繼發(fā)性血漿內(nèi)不同細(xì)胞成分富集，會(huì)使得線粒體或是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)出現(xiàn)嚴(yán)重的應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致有關(guān)指標(biāo)水平出現(xiàn)波動(dòng)。在朱玉飛的研究中，其發(fā)現(xiàn)溶血后血液標(biāo)本中鈣離子、氯離子以及鉀離子水平相較于未溶血標(biāo)本，有明顯升高。因此其認(rèn)為標(biāo)本溶血會(huì)對(duì)電解質(zhì)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響，故而需要對(duì)檢驗(yàn)過程各項(xiàng)環(huán)節(jié)進(jìn)行把控，進(jìn)而保障檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。鈣離子、氯離子、鈉離子以及鉀離子等電解質(zhì)指標(biāo)在臨床判斷患者電解質(zhì)紊亂或是衰竭代謝方面具有重要意義，當(dāng)血細(xì)胞出現(xiàn)溶解時(shí)，會(huì)有大量電解質(zhì)指標(biāo)被釋放入血，但是由于血漿內(nèi)有不同程度的碳酸鹽以及磷酸鹽緩沖系統(tǒng)，能夠一定程度上同有關(guān)電解質(zhì)波動(dòng)進(jìn)行中和，故而臨床對(duì)于不同電解質(zhì)檢測(cè)指標(biāo)有無顯著改變尚未得出統(tǒng)一結(jié)論。

本次研究中，不同溶血程度組與未溶血組血液樣本中鈉離子水平比較無明顯差異。輕中度溶血組、重度溶血組血液樣本中鈣離子、氯離子以及鉀離子水平均高于未溶血組，重度溶血組血液樣本中鈣離子、氯離子以及鉀離子水平均高于輕中度溶血組。針對(duì)研究結(jié)果開展進(jìn)一步分析，不同溶血程度組與未溶血組血液標(biāo)本中鈉離子水平未見顯著改變，可能是由于細(xì)胞外鈉離子水平本身較高，細(xì)胞中少量鈉離子外流后不會(huì)引起鈉離子水平顯著變化，這表明鈉離子水平具有穩(wěn)定性。但是鈣離子、氯離子以及鉀離子改變可能同細(xì)胞分解后內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或是細(xì)胞質(zhì)中有關(guān)離子釋放相關(guān)。在李莉等人的研究中，其對(duì)溶血標(biāo)本和未溶血標(biāo)本中血脂指標(biāo)水平進(jìn)行檢驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在總膽固醇以及甘油三酯指標(biāo)水平方面，溶血標(biāo)本相較于未溶血標(biāo)本有明顯升高。因此其認(rèn)為溶血會(huì)對(duì)標(biāo)本中血脂指標(biāo)水平檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性產(chǎn)生不利影響。

通過本次研究后發(fā)現(xiàn)，不同溶血程度組與未溶血組血液樣本中低密度脂蛋白膽固醇以及高密度脂蛋白膽固醇水平比較無明顯差異。輕中度溶血組、重度溶血組血液樣本中甘油三酯以及總膽固醇水平均高于未溶血組，重度溶血組血液樣本中甘油三酯以及總膽固醇水平均高于輕中度溶血組。分析研究結(jié)果后發(fā)現(xiàn)，溶血標(biāo)本會(huì)使得血脂指標(biāo)中總膽固醇以及甘油三酯水平上升，但是在低密度脂蛋白膽固醇以及高密度脂蛋白膽固醇方面不會(huì)產(chǎn)生顯著影響，考慮是因出現(xiàn)溶血后，會(huì)使得線粒體以及肌鈣蛋白等大分子結(jié)合相關(guān)。對(duì)于低密度脂蛋白膽固醇以及高密度脂蛋白膽固醇水平無顯著變化的具體機(jī)制還未完全掌握，需要臨床開展深入分析。在張保的研究中，其發(fā)現(xiàn)溶血標(biāo)本中心肌酶指標(biāo)水平有明顯升高，因此其認(rèn)為溶血標(biāo)本開展生化檢驗(yàn)時(shí)，會(huì)對(duì)心肌酶指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度產(chǎn)生影響。肌鈣蛋白I、前體N末端前腦利鈉肽、肌酸激酶同工酶以及肌酸激酶等心肌酶指標(biāo)水平是提示心肌梗死或是其他心血管疾病的關(guān)鍵臨床參考指標(biāo)，其檢測(cè)水平存在重要的臨床意義。通過開展本次研究后發(fā)現(xiàn)，輕中度溶血組、重度溶血組血液樣本中肌鈣蛋白I、前體N末端前腦利鈉肽、肌酸激酶同工酶以及肌酸激酶水平均高于未溶血組，重度溶血組血液樣本中肌鈣蛋白I、前體N末端前腦利鈉肽、肌酸激酶同工酶以及肌酸激酶水平均高于輕中度溶血組。針對(duì)研究結(jié)果開展進(jìn)一步分析，考慮溶血標(biāo)本中心肌酶指標(biāo)水平顯著升高可能同長(zhǎng)時(shí)間溶血使得血漿內(nèi)有關(guān)心肌酶大量積蓄，另外溶血后血漿內(nèi)結(jié)合狀態(tài)的心肌酶大量釋放，均會(huì)引起心肌酶水平上升。

綜上所述，開展生化檢驗(yàn)時(shí)，標(biāo)本溶血會(huì)對(duì)肝功能、電解質(zhì)、血脂以及心肌酶指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響，臨床需要減少標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響，防止疾病出現(xiàn)誤診或是漏診情況。