潘康鎖，代德華，侯佳琪，辛怡霖，唐 熙，李青云，張 欣，祁會(huì)彩，李引乾*

(1.陜西省農(nóng)業(yè)檢驗(yàn)檢測(cè)中心，陜西西安 710016；2.陜西省動(dòng)物衛(wèi)生與屠宰管理站，陜西西安 710016；3.西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，陜西楊陵 712100；4.西安市農(nóng)業(yè)綜合執(zhí)法支隊(duì)未央大隊(duì)，陜西西安 710016)

奶牛乳房炎是危害奶牛養(yǎng)殖最普遍的疾病之一，全球約有30%的奶?；加腥榉垦?，經(jīng)濟(jì)損失嚴(yán)重[1]。乳房炎根據(jù)臨床癥狀分為臨床型乳房炎和隱型乳房炎。病原微生物感染是導(dǎo)致乳房炎的主要病因。目前已報(bào)道致奶牛乳房炎的病原微生物共有100多種微生物，其中主要為金黃色葡萄球菌、鏈球菌和大腸埃希氏菌[2]。近年來，抗生素在防治奶牛乳房炎方面發(fā)揮了重要作用，但是抗生素治療易造成藥物殘留，且耐藥菌株變多，影響了抗生素的治療效果[3]。而中藥制劑有辨證施治、標(biāo)本兼治、天然溫和、低毒低殘留的特點(diǎn)，具有良好的應(yīng)用前景[4]，且中藥制劑不易產(chǎn)生耐藥性，體內(nèi)代謝較快、高效低毒、無殘留，可替代化學(xué)合成藥物用于奶牛乳房炎的防治。因此，研制開發(fā)中藥制劑具有廣闊的發(fā)展前景。本試驗(yàn)選用高、中、低3個(gè)劑量組公英翹蘆散與公英散對(duì)奶牛乳房炎進(jìn)行臨床療效試驗(yàn)，以期對(duì)比觀察公英翹蘆散對(duì)奶牛乳房炎臨床治療效果。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)用動(dòng)物 試驗(yàn)用動(dòng)物選由西北農(nóng)林科技大學(xué)畜牧站提供患有臨床乳房炎的奶牛，主要表現(xiàn)為患病乳區(qū)奶汁異常(出現(xiàn)絮片、凝塊或呈水樣)，乳房有不同程度的紅、腫、熱、痛癥狀，產(chǎn)奶量下降，但無明顯的全身癥狀。

1.1.2 試驗(yàn)藥品 供試品：公英翹蘆散(批號(hào)：191201)，含蒲公英 30 g，連翹 20 g，王不留行30 g，路路通20 g，漏蘆10 g，黃芩20 g，當(dāng)歸20 g，川芎10 g，白術(shù)10 g，乳香10 g，沒藥10 g，皂角刺10 g，共12味中藥，內(nèi)蒙古華天制藥有限公司產(chǎn)品。對(duì)照藥物：公英散(批號(hào)：191121)，含蒲公英60 g，金銀花60 g，連翹60 g，絲瓜絡(luò)30 g，通草25 g，芙蓉葉25 g，貝母30 g，共7味中藥。

1.1.3 主要儀器 KQ-500 DE型數(shù)控超聲波清洗器，江蘇省昆山市超聲儀器有限公司產(chǎn)品；不銹鋼手提式壓力蒸氣滅菌器，上海申安醫(yī)療器械廠產(chǎn)品；PHS-精密pH計(jì)和超凈工作臺(tái)，上海精密科學(xué)有限公司產(chǎn)品；真空泵和真空蓋式除菌過濾器，Pall-Gelman 公司產(chǎn)品；DGG-9053A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有線公司產(chǎn)品；低速離心機(jī)，湖南凱達(dá)科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；高速離心機(jī)，美國(guó)貝克曼公司產(chǎn)品；恒溫水浴鍋，天津市泰斯特儀器有限公司產(chǎn)品；便攜式體細(xì)胞計(jì)數(shù)儀C-Reader，韓國(guó)Digital Bio Technology公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)分組 將臨床診斷確診為乳房炎的40頭奶牛，隨機(jī)分為公英翹蘆散給藥組和對(duì)照藥物給藥組。公英翹蘆散給藥組，設(shè)高、中(推薦劑量)、低3個(gè)劑量試驗(yàn)組，每組試驗(yàn)動(dòng)物10頭，并記錄患病乳區(qū)數(shù)。藥物對(duì)照組，即“公英散”組，按照推薦劑量給藥，試驗(yàn)動(dòng)物10頭，并記錄患病乳區(qū)數(shù)。

1.2.2 用法用量 給藥前，將藥物散劑與3倍量水混合均勻，經(jīng)胃管灌胃給藥，1日1次，7 d為1個(gè)療程。經(jīng)2個(gè)療程未治愈者改用其他藥物治療。參照文獻(xiàn)[5-6]，公英翹蘆散給藥組，設(shè)高、中(即產(chǎn)品說明書中推薦劑量)、低3個(gè)試驗(yàn)組，每次分別經(jīng)胃管灌服公英翹蘆散600 g、300 g、150 g，1日1次，7 d為1個(gè)療程。最多治療2個(gè)療程。藥物對(duì)照組，即“公英散”組，每次經(jīng)胃管灌服“公英散” 300 g，1日1次，7 d為1個(gè)療程。最多治療2個(gè)療程。

1.2.3 臨床型奶牛乳房炎的納入標(biāo)準(zhǔn) 患奶牛乳房炎的奶牛一般出現(xiàn)以下臨床癥狀：乳汁異常、乳房的大小、質(zhì)地和溫度出現(xiàn)變化，患區(qū)表現(xiàn)疼痛，根據(jù)病情不同還常伴有不同程度的全身反應(yīng)。且在治療前未使用其它藥物治療，均可作為病例收治。

1.2.4 治療后各組奶牛有效乳區(qū)數(shù)統(tǒng)計(jì) 在乳房炎奶牛治療7 d后，綜合考察患病奶牛的整體狀況與感染乳區(qū)的局部癥狀，記錄各組奶牛有效乳區(qū)數(shù)。

1.2.5 乳樣體細(xì)胞數(shù)檢測(cè) 在乳房炎奶牛治療前后，分別采集并測(cè)定乳液中體細(xì)胞數(shù)(SCC)。采樣時(shí)先擠掉前幾把奶，隨后擠取約30 mL奶于50 mL離心管中，采用便攜式體細(xì)胞檢測(cè)儀對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)。

1.2.6 奶牛乳房炎的療效判定標(biāo)準(zhǔn) 對(duì)確診患乳房炎的奶牛按1.2.2的方法給藥后，觀察治療效果，并按以下標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行治療效果評(píng)定[7]。①治愈：臨床癥狀消失，乳房恢復(fù)正常，產(chǎn)乳量恢復(fù)，乳汁外觀正常，乳汁體細(xì)胞數(shù)降至正常范圍(50萬/mL以下)，治愈率=(組內(nèi)治愈乳區(qū)數(shù)/組內(nèi)用藥乳區(qū)數(shù))× 100%；②顯效：臨床癥狀基本消失，乳房恢復(fù)正常，產(chǎn)乳量恢復(fù)，乳汁外觀正常，實(shí)驗(yàn)室檢查，各種指標(biāo)接近正常，顯效率=(組內(nèi)顯效乳區(qū)數(shù)/組內(nèi)用藥乳區(qū)數(shù))× 100%；③有效：臨床癥狀減輕，乳汁外觀正常，產(chǎn)乳量恢復(fù)，乳汁體細(xì)胞數(shù)下降至50萬/mL～100萬/mL，有效率=(組內(nèi)有效乳區(qū)數(shù)/組內(nèi)用藥乳區(qū)數(shù))× 100%；④無效：各項(xiàng)指標(biāo)均未改善，甚至病情加重，無效率=(組內(nèi)無效乳區(qū)數(shù)/組內(nèi)用藥乳區(qū)數(shù))× 100%。

1.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法 各項(xiàng)檢測(cè)數(shù)據(jù)均用SPSS軟件(SPSS 17.0版)進(jìn)行單因素方差分析統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，分析各組間用藥后乳汁體細(xì)胞數(shù)的差異顯著性，用卡方檢驗(yàn)對(duì)各組的治愈率、顯效率、有效率和無效率進(jìn)行差異顯著性比較。

2 結(jié)果

2.1 治療前、后患乳房炎奶牛乳區(qū)統(tǒng)計(jì)情況

治療前40頭患臨床型乳房炎的奶牛分成4組及統(tǒng)計(jì)各組奶牛的患病乳區(qū)數(shù)見表1，治療后各組臨床型奶牛乳房炎有效乳區(qū)數(shù)情況見表2。

表1 治療前奶牛乳房炎患病乳區(qū)統(tǒng)計(jì)結(jié)果

表2 治療后統(tǒng)計(jì)奶牛有效乳區(qū)數(shù)

2.2 公英翹蘆散對(duì)體細(xì)胞數(shù)的影響

本試驗(yàn)在分別給予患乳房炎的奶牛不同劑量的公英翹蘆散和公英散后，對(duì)40頭患乳房炎奶牛治療前后的牛乳進(jìn)行體細(xì)胞數(shù)(SCC)檢測(cè)，連續(xù)7 d，結(jié)果見表3。治療前4組奶牛乳樣體細(xì)胞數(shù)無顯著性差異(P>0.05)。治療后(7 d)4組均與治療前有顯著性差異(P<0.01)，公英翹蘆散高、中劑量組治療效果明顯優(yōu)于公英散對(duì)照組，且差異極顯著(P<0.01)，而公英翹蘆散低劑量組則與公英散對(duì)照組之間則無顯著性差異(P>0.05)。

表3 乳房炎奶牛乳汁SCC檢測(cè)結(jié)果(萬個(gè)/mL)

2.3 臨床治療效果

經(jīng)過7 d的臨床治療，40頭乳房炎奶牛的臨床治療效果見表4。公英翹蘆散高、中劑量組治愈效果明顯，有效治愈率均達(dá)100%，低劑量組有效治愈率為88.89%，稍高于公英散對(duì)照組(83.33%)，表明公英翹蘆散對(duì)奶牛乳房炎有較好的治療效果。

表4 公英翹蘆散與公英散對(duì)奶牛乳房炎患病乳區(qū)的臨床治療效果

3 討論

奶牛乳房炎給養(yǎng)殖業(yè)帶來了極大的損失，中獸醫(yī)認(rèn)為乳房炎即乳癰，是熱、濕、氣、血郁結(jié)不散，化而為炎，應(yīng)以清熱解毒、抗菌消炎、通經(jīng)活血、活絡(luò)通乳為治療原則[4]。公英翹蘆散是由蒲公英、黃芩、連翹、當(dāng)歸等12味中藥組成，其中，蒲公英具有消癰散結(jié)、抗菌消炎的作用，能夠疏通阻塞的乳腺管，起到散結(jié)化瘀、利尿催乳的作用[8]。導(dǎo)致奶牛乳房炎的病原菌主要包括無乳鏈球菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌[2,9]，蒲公英提取物與多種抗生素聯(lián)合使用，對(duì)金黃色葡萄球菌的體外抑菌具有良好的協(xié)同作用，可顯著降低抗生素的用量[10]。黃芩對(duì)大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌等多種細(xì)菌均有一定的抑制作用[11]。王不留行性苦、平，歸肝、胃經(jīng)，有活血通經(jīng)，下乳消腫的功效，其中主要含有三萜皂苷、環(huán)肽、黃酮類化合物等成分，具有催乳、抗氧化等作用[12]。當(dāng)歸味甘，溫，長(zhǎng)期以來被用作活血潤(rùn)腸，調(diào)經(jīng)止痛，其主要成分當(dāng)歸多糖具有重要的體內(nèi)外藥理作用，如增強(qiáng)免疫、抗氧化、保肝等[13]。以黃芪、當(dāng)歸及王不留行為主藥的芪王催乳散可有效治療奶牛隱性乳腺炎，且可有效改善奶牛乳樣品質(zhì)[14]。

公英散是我國(guó)獸醫(yī)臨床治療奶牛乳房炎的經(jīng)典中藥方劑，具有清熱解毒，散結(jié)消腫的功效[15]，本試驗(yàn)中，公英翹蘆散對(duì)奶牛乳房炎的治療效果明顯優(yōu)于公英散，通過灌胃給藥，公英翹蘆散高、中劑量組的患乳房炎奶牛臨床癥狀基本消失，乳汁正常，體細(xì)胞數(shù)也降至正常范圍，有效治愈率均達(dá)到100%，低劑量組患病奶牛的臨床癥狀也普遍消失，乳汁體細(xì)胞數(shù)較治療前顯著減少(P<0.01)。高、中劑量組對(duì)患病奶牛乳樣體細(xì)胞的治療效果顯著優(yōu)于公英散組(P<0.01)，有效治愈率也均高于公英散組，表明公英翹蘆散對(duì)奶牛乳房炎具有良好的治療效果。