任力 李劍峰 冉訓 吳鋒
434200 松滋市人民醫(yī)院檢驗科,湖北松滋
在體液標本檢測中,胸腹水、腦脊液均是常規(guī)項目,通過體液標本的細胞學檢查,能夠為相關疾病的診斷、治療提供參考[1]。以往,體液檢測普遍應用顯微鏡下手工計數(shù)及分類,即手工法,并將其結(jié)果作為臨床判斷的金標準,但是在實際應用過程中,手工法具有操作復雜、費時費力的特點,并且其檢測結(jié)果重復性差,誤差較高,難以在臨床實踐中形成標準化規(guī)程[2]。近年來,隨著臨床檢驗自動化技術的發(fā)展及相關設備的普及、應用,部分新型號的體液標本檢驗分析儀(血細胞、尿沉渣)逐漸在臨床中得到應用,發(fā)揮著細胞計數(shù)與分類的作用[3-4]。全自動血細胞分析儀即是其中之一,通過體液分析模式,可有效實現(xiàn)針對體液細胞的自動化監(jiān)測、分析。本研究選取112例患者的體液標本進行分析檢測,旨在分析在臨床體液檢測中配合應用全自動血細胞分析儀的價值,報告如下。
選取2020年10月-2021年9月112 例住院患者的體液標本為研究樣本。其中,胸水44 例,腹水36例,腦脊液25例,關節(jié)液7例。在標本收集后,立即送檢,體液標本均依次完成全自動血細胞分析儀、顯微鏡下手工計數(shù)以及分類檢驗,所有檢驗操作均于2 h內(nèi)完成。
方法:①全自動血細胞分析儀檢測:通過全自動血紅胞分析儀(生產(chǎn)廠家:邁瑞醫(yī)療器械有限公司;型號BC-6800Plus)對取得體液標本進行檢測,經(jīng)體液模式下,≥2 次重復測定,針對測定結(jié)果進行記錄,重點為紅細胞數(shù)(RBC-BF)、有核細胞數(shù)(TC-BF)以及其分類結(jié)果,計算平均數(shù),同時由檢驗專家,進行散點圖的觀察,在條件允許的情況下,計算強熒光細胞比率。②顯微鏡下手工計數(shù)以及分類檢測:在全自動血細胞分析儀檢測后,針對同一份體液標本,再進行顯微鏡下手工計數(shù)以及分類檢測操作,參考《全國臨床檢驗操作規(guī)程》,經(jīng)顯微鏡輔助,以標準牛鮑氏計數(shù)板對RBC-BF、TC-BF 進行≥2 次計數(shù),并取均值為最終值。再將其對應體液標本進行離心(1 500 r/min,5 min)操作,取3 張沉渣制片,2 張完成瑞氏染色,1 張備用,由≥2名人員操作,在顯微鏡輔助下對不同涂片中計數(shù)200個有核細胞,并進行分類(2次),對涂片中單個核細胞(MN)、多個核細胞(PMN)百分比均值進行計算。所有手工操作由經(jīng)過專業(yè)培訓且經(jīng)驗豐富的人員完成。
觀察指標:統(tǒng)計RBC-BF、TC-BF,計算MN、PMN百分比均值。按照細胞數(shù)差異進行分組,TC-BF 以100×106/L為界限;RBC-BF以血性、非血性分組[5-6]。
統(tǒng)計學分析:數(shù)據(jù)均用SPSS 20.0 統(tǒng)計學軟件予以處理;對檢驗結(jié)果中RBC-BF、TC-BF 及其分類百分比結(jié)果進行記錄,以中位數(shù)表示,以手工法為參考,對檢測結(jié)果進行相關性分析。
全自動血細胞分析儀、顯微鏡下手工計數(shù)以及分類檢驗的相關性分析:在血性、非血性體液標本中,全自動血細胞分析儀、顯微鏡下手工計數(shù)檢測結(jié)果在RBC-BF 中均有較好的相關性;當TC-BF>100×106/L時,TC-BF 及分類相關性較好;當TC-BF≤100×106/L時,全自動血細胞分析儀、顯微鏡下手工計數(shù)檢測在TC-BF、單個核分類百分比、多個核分類百分比測定結(jié)果相關性較差。見表1。
表1 全自動血細胞分析儀、顯微鏡下手工計數(shù)以及分類檢驗的相關性分析
近年來,隨著醫(yī)學檢驗技術的快速發(fā)展,在融合電阻抗、流式細胞術、熒光染色技術后,全自動體液細胞檢驗技術得到了快速發(fā)展,其檢測效能也得到了臨床的普遍認可[7]。在本次研究中,以全自動血細胞分析儀對體液標本進行檢測,利用激光流式細胞術和熒光感染技術,能夠精準、高效地識別與檢測體液標本中的有核細胞,再通過鞘流阻抗通道,完成體液標本中紅細胞的檢測,并借助特殊的體液模式,全程自動化完成體檢指標的檢測[8]。在全自動血細胞分析儀的檢測結(jié)果中,除常規(guī)報告參數(shù)(7 項)外,還涵蓋了強熒光細胞比率、白細胞技術等指標,進而為后續(xù)制作核細胞分類散點圖提供參考,進而提升檢測結(jié)果的科學性、準確性[9-10]。
本次研究結(jié)果顯示,在血性、非血性體液標本中,全自動血細胞分析儀、顯微鏡下手工計數(shù)檢測結(jié)果在RBC-BF 中均表示較好的相關性;當TC-BF>100×106/L 時,有核細胞計數(shù)及分類相關性較好。該結(jié)果說明,針對研究涉及的112例體液標本,全自動血細胞分析儀、顯微鏡下手工計數(shù)以及分類檢驗其結(jié)果具有較好的一致性表現(xiàn)。當TC-BF≤100×106/L 時,全自動血細胞分析儀、顯微鏡下手工計數(shù)檢測在TC-BF、單個核分類百分比、多個核分類百分比測定結(jié)果相關性較差。該結(jié)果原因分析:血性標本紅細胞總數(shù)差異較大、數(shù)量過多,在進行顯微鏡下手工計數(shù)以及分類檢驗過程中,需稀釋倍數(shù)較高,且受到重復操作、誤差值等多方面因素影響,導致標本測定結(jié)果出現(xiàn)一致性差異[11]。在血性細胞標本中,全自動血細胞分析儀、顯微鏡下手工計數(shù)以及分類檢驗其相關性結(jié)果一致性較好。個別標本細胞計數(shù)值較高,可能是由于血性標本中患者的個體因素的差異所致,如細胞數(shù)過少,則可能存在“泊松分布現(xiàn)象”,造成計數(shù)、分類的偶爾誤差增加,最終表現(xiàn)在檢測結(jié)果中,即重復性差、一致性低[12-14]。
壽爽等[15]研究顯示,全自動血細胞分析儀和手工法檢測,不論血性或非血性體液標本,兩種方法的RBC-BF 相關性均較好。在白雪[16]的研究中,也表明全自動血細胞分析儀和手工法檢測其一致性檢驗效能較好。
雖然全自動血細胞分析儀在臨床應用中具有諸多優(yōu)勢,但需要注意的是,現(xiàn)階段,全自動血細胞分析儀檢驗技術仍然無法完全取代顯微鏡下手工計數(shù)以及分類檢驗技術,尤其是在對TC-BF 檢驗中,因為其結(jié)果涉及標本性質(zhì)的定義[16]。因此針對有核細胞的技術,在臨床體液檢驗工作中,不僅在檢測技術的選擇,還需要檢驗技術人員認真負責的態(tài)度,按照相關質(zhì)量標準進行檢驗,有效提高臨床檢驗報告質(zhì)量。
綜上所述,在臨床體液檢驗中,針對體液細胞全自動血細胞分析儀、顯微鏡下手工計數(shù)以及分類檢驗結(jié)果具有較好的一致性,尤其是對血性、TC-BF較多的體液標本,在應用全自動血細胞分析儀檢驗技術上,能夠有效減少誤差,提高檢驗結(jié)果的準確性,提升檢驗效能,降低臨床工作量。但對于RBC-BF、TC-BF 較少的體液標本而言,建議以全自動血細胞分析儀配合顯微鏡下手工計數(shù)以及分類檢驗,同時無需進行結(jié)果分類。對于存在血性、數(shù)量較少有核細胞的體液標本檢驗上,建議優(yōu)先溶解紅細胞,再進行手工法計數(shù),以提高檢驗結(jié)果質(zhì)量。