張彥利，蔡 龍，呂慧源，牛建芹，丁宏標，李習龍，蔣顯仁*

（1.中國農(nóng)業(yè)科學院飼料研究所，農(nóng)業(yè)部飼料生物技術重點實驗室，北京 100081；2.北京生泰爾科技股份有限公司，北京 102206）

在現(xiàn)代集約化養(yǎng)殖場中多采用早期斷奶，而斷奶后應激引起的腸道結構和功能受損，會造成仔豬體內(nèi)氧化還原系統(tǒng)失衡和炎癥反應，繼而引發(fā)腹瀉并增加感染各類腸道相關疾病的風險。雖然飼用抗生素可有效緩解仔豬斷奶后腹瀉并促進仔豬生長，但抗生素的大量濫用也帶來了藥物殘留、耐藥性等副作用。我國已禁止在飼糧中添加含有促生長類藥物飼料添加劑，但也出現(xiàn)了畜禽生長性能下降和發(fā)病率升高等問題，這給我國畜牧養(yǎng)殖行業(yè)帶來了巨大的沖擊，因此目前迫切需要尋找安全、有效的飼用抗生素替代物來應對這種困境。

天然植物提取物具有抑菌消炎、抗氧化以及抗癌癥等生物活性功能，是較為理想的抗生素替代品。黃芪多糖是黃芪的主要活性成分，具有調(diào)節(jié)機體抗氧化、免疫功能以及改善腸道健康的作用。小檗堿又稱黃連素，具有抑菌、抗炎以及調(diào)節(jié)免疫等生理功能，能夠顯著改善仔豬腸道菌群結構。復合添加黃芪多糖和鹽酸小檗堿的相關研究甚少，二者對斷奶仔豬的生長和健康是否具有協(xié)同效應值得深入研究。因此，本試驗旨在研究復合植物提取物（主要成分為黃芪多糖和鹽酸小檗堿）對斷奶仔豬生長性能、腹瀉率以及血液常規(guī)生化等指標的影響，為該復合植物提取物在斷奶仔豬生產(chǎn)中的應用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 復合植物提取物的有效成分及含量為黃芪多糖200 mg/g、鹽酸小檗堿1.8 mg/g。

1.2 試驗設計及飼養(yǎng)管理 選用初始體重為（7.59±0.39）kg的28 日齡杜× 長× 大三元斷奶閹公豬75 頭，按體重完全隨機區(qū)組分為3 個處理，每個處理5 個重復（欄），每個重復5 頭豬。飼糧處理組分別為對照組（基礎飼糧不添加抗生素）、抗生素組（基礎飼糧添加160 mg/kg土霉素鈣和40 mg/kg 維吉尼亞霉素）以及復合植物提取物組（基礎飼糧添加500 mg/kg 復合植物提取物）。各組飼糧中粗蛋白質(zhì)（CP）、鈣和總磷等營養(yǎng)水平保持一致，營養(yǎng)水平參照NRC（2012），基礎飼糧組成及營養(yǎng)成分見表1。

表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)成分（飼喂基礎）

試驗于廊坊市某商業(yè)化豬場進行，試驗采用全封閉式豬舍，舍內(nèi)溫度、濕度、通風強度均為自動化控制。試驗期間豬舍溫保持在24～26℃，試驗仔豬分欄飼養(yǎng)（1.4 m×1.7 m），塑料漏縫地板，不銹鋼可調(diào)式料槽，乳頭式飲水器。試驗期間每天早上和傍晚向料槽內(nèi)加料，確保仔豬自由采食和飲水，飼料為顆粒料。按照豬場要求進行常規(guī)免疫接種。試驗時間為2020 年7 月11 日—2020年8 月23 日，共進行42 d。

1.3 樣品采集 于試驗第14、42 天上午，每欄選取1頭體重接近平均體重的空腹仔豬，通過前腔靜脈采血，靜置30 min，3 000 ×g 離心10 min，分離血清并于置于-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 測定指標及方法

1.4.1 生長性能及腹瀉率 在試驗開始當天、第14 天、第28 天和第42 天，分別稱量斷奶仔豬欄重并記錄，每天記錄采食量，并在試驗結束時稱量料槽殘留飼料重量，計算平均日增重、平均日采食量和耗料增重比。豬只死淘時記錄死淘豬體重和該欄剩余料重，用于校正生長性能數(shù)據(jù)。每天定時記錄仔豬腹瀉情況，于試驗結束后計算每個處理組的腹瀉率。計算公式：

平均日增重=（試驗末重– 試驗初重）/ 頭數(shù)/ 試驗天數(shù)

平均日采食量=（試驗期內(nèi)供料量–試驗期內(nèi)飼料剩余量）/頭數(shù)/試驗天數(shù)

飼料轉化率=平均日采食量/平均日增重

腹瀉率=腹瀉豬頭次/（試驗豬頭數(shù)× 總天數(shù)）×100%

1.4.2 血清抗氧化、生化和免疫指標 抗氧化指標主要包括丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）和總抗氧化（T-AOC）；生化指標包括尿素氮（UN）、堿性磷酸酶（AKP）、谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶（AST）和胰島素樣生長因子1（IGF-1）；免疫指標為免疫球蛋白G（IgG）。上述測定指標所需試劑盒均為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品，具體操作步驟按說明書進行。

1.5 統(tǒng)計分析 數(shù)據(jù)以重復為統(tǒng)計單位，經(jīng)Excel 整理后，生長性能采用SAS 9.3 統(tǒng)計軟件中線性分析（GLM）及Tukey 多重比較方法進行分析，腹瀉率等比率數(shù)據(jù)采用卡方檢驗，血液指標采用Mixed 分析及時間重復比較方法進行分析?！?.05 時差異被認為差異顯著。

2 結果

2.1 復合植物提取物對斷奶仔豬生長性能及腹瀉率的影響 由表2 可知，與對照組相比，飼糧添加抗生素和復合植物提取物均可降低仔豬斷奶后0～14 d 的腹瀉率（<0.05）；各組間仔豬試驗末重、各階段平均日增重、平均日采食量以及耗料增重比差異均不顯著，但添加復合植物提取物可提高仔豬末重。

表2 復合植物提取物對斷奶仔豬生長性能和腹瀉率的影響

2.2 復合植物提取物對斷奶仔豬血清生化指標的影響由表3 可知，與對照組和抗生素組組相比，飼糧添加復合植物提取物可降低血清中UN 濃度（<0.05），對IGF-1、AKP、AST 和ALT 含量均無顯著性影響。但隨著日齡增加，仔豬血清中AKP 和ALT 含量均降低（<0.05），AST 含量也具有降低的趨勢（=0.074）。

表3 復合植物提取物對斷奶仔豬血清生化指標的影響

2.3 復合植物提取物對斷奶仔豬血清抗氧化及免疫指標的影響 由表4 可知，與對照組相比，飼糧添加復合植物提取物可降低血清中MDA 含量（<0.05）；與抗生素組相比，飼糧添加復合植物提取物具有提高血清中IgG 含量的趨勢（=0.098）；對其他血清抗氧化指標具有一定改善作用（>0.05）。此外，隨著日齡增加，仔豬血清T-AOC 水平增加（<0.05），IgG 水平具有增加的趨勢（=0.092）。

表4 復合植物提取物對斷奶仔豬血清抗氧化及免疫指標的影響

3 討 論

3.1 復合植物提取物對斷奶仔豬生長性能及腹瀉率的影響 在飼糧中添加復合植物提取物對畜禽的生長有一定的促進作用。如Yuan 等在斷奶仔豬飼料中添加800 mg/kg 黃芪多糖能夠顯著改善斷奶仔豬的生產(chǎn)性能；Cheng 等研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加1 g/kg 復合植物添加劑（主要成分為黃芪和黨參）雖不影響平均日采食量，但可以顯著提高育肥豬的試驗末重以及試驗全期的平均日增重；Xu 等在斷奶仔豬基礎飼糧中添加10 mg/kg 或20 mg/kg 黃柏提取物（主要成分小檗堿）可有效降低腹瀉率和腹瀉指數(shù)，表明黃柏提取物具有一定的抗腹瀉作用。本研究中，盡管飼糧中添加復合植物提取物（主要成分為黃芪多糖和鹽酸小檗堿）對斷奶仔豬各階段的平均日增重、平均日采食量以及耗料增重比均沒有產(chǎn)生顯著影響，但復合植物提取物組仔豬的末重、試驗全期的平均日增重均有所提高，耗料增重比有所降低。王芳芳等研究也發(fā)現(xiàn)，中草藥添加劑可顯著提高斷奶仔豬的生長性能，降低腹瀉率，抑制腸道內(nèi)大腸埃希氏菌繁殖，促進有益菌的增殖。本試驗中，各項生長性能指標均優(yōu)于抗生素組，說明復合植物提取物的促生長效果好于抗生素。仔豬在斷奶后，由于受到飼糧以及外界環(huán)境變化等因素的影響，容易發(fā)生腹瀉。本試驗結果發(fā)現(xiàn)，飼糧添加復合植物提取物能夠有效降低豬斷奶后腹瀉，且與添加抗生素的飼喂效果相當，表明該復合植物提取物具有很強的抗腹瀉能力。復合植物提取物發(fā)揮促生長效果主要與其含有的大量活性成分和營養(yǎng)物質(zhì)密切相關，其可能通過影響飼糧的感官品質(zhì)來刺激動物食欲、抑制體內(nèi)病原微生物的生長以及提高腸道健康和抗逆能力等途徑來有效預防腹瀉等疾病的發(fā)生，從而有益于動物的健康和生長。

3.2 復合植物提取物對斷奶仔豬血清生化指標的影響血液是體液循環(huán)的承載體，血液生化指標的變化可以反映機體物質(zhì)周轉代謝以及生理機能的狀況。血清UN 是蛋白質(zhì)分解的終產(chǎn)物，其含量與機體對氮元素的利用率相關。徐松琪發(fā)現(xiàn)，在豬飼糧添加黃芪多糖和葛根提取物可降低哺乳母豬血清中UN 含量。本試驗結果也表明，飼糧中添加復合植物提取物可以提高斷奶仔豬對氮的利用率，加速蛋白質(zhì)在體內(nèi)的沉積，從而增強對蛋白質(zhì)的消化吸收能力。IGF-1 是一種非常重要的促生長因子，在體內(nèi)可促進細胞分裂并參與各類營養(yǎng)物質(zhì)代謝。本研究發(fā)現(xiàn)，復合植物提取物組仔豬體內(nèi)IGF-1含量較對照組仔豬提高了近一倍，但是由于試驗重復數(shù)少以及個體之間變異大，導致了差異不顯著。AKP 主要來源于骨骼和肝臟，能夠有效促進攝入的鈣、磷在骨骼中沉積，在骨骼發(fā)育過程中起著非常重要的作用。在本研究中，飼糧添加復合植物提取物能夠提高仔豬血清中AKP 活性；表明復合植物提取物可能能夠促進仔豬斷奶后的骨骼發(fā)育，從而有利于早期仔豬體架的形成。AST 和ALT 活性能夠間接反映畜禽相應臟器的功能，其活性升高暗示機體肝臟和心臟可能受到一定損傷。本研究結果發(fā)現(xiàn)，隨著斷奶日齡的增大，各組ALT 活性顯著下降，AST 活性也呈下降趨勢，這表明隨著仔豬的生長，其肝膽代謝能力趨于成熟，對各類營養(yǎng)物質(zhì)利用率提高。本研究結果揭示，飼糧添加復合植物提取物能夠提高斷奶仔豬對蛋白質(zhì)的利用率，有利于維護仔豬肝臟健康。

3.3 復合植物提取物對斷奶仔豬血清抗氧化及免疫指標的影響 哺乳仔豬在斷奶后，容易發(fā)生氧化應激并產(chǎn)生過量的活性氧類物質(zhì)，導致體內(nèi)氧化還原系統(tǒng)失衡，進而引發(fā)一系列相關疾病的發(fā)生，影響動物的生長性能。MDA 是體內(nèi)活性氧類物質(zhì)與多不飽和脂肪酸反應產(chǎn)生的脂質(zhì)過氧化物，產(chǎn)生過量則會有細胞毒性作用；CAT、SOD 能夠有效避免羥自由基的過度產(chǎn)生，是體內(nèi)抗氧化酶的重要組成部分。Ibtisham 等發(fā)現(xiàn)，飼糧添加3.32 g/kg 復合植物添加劑能提高蛋雞血液中CAT 和SOD 活性，降低MDA 含量，并且對肝臟中T-AOC 水平也具有顯著的改善作用；賈紅杰等報道，添加不同劑量的黃芪多糖可調(diào)節(jié)血清抗氧化酶SOD、GSH-Px 以及T-AOC 活性，同時降低MDA 含量，從而增強蛋雞的抗氧化功能。本試驗發(fā)現(xiàn)，添加復合植物提取物能夠改善仔豬血清中抗氧化酶活性，顯著降低MDA 含量，表明復合植物提取物具有改善斷奶仔豬抗氧化能力的作用，可能與黃芪多糖和小檗堿能夠調(diào)節(jié)核因子E2 相關因子2/抗氧化反應元件（NRF2/ARE）信號通路的激活密切相關。激活NRF2 的表達能夠提高體內(nèi)CAT、SOD 等抗氧化酶的活性，清除體內(nèi)過量的活性氧，從而緩解氧化損傷。前人的早期報道也證實黃芪多糖具有免疫調(diào)節(jié)作用。本研究結果發(fā)現(xiàn)，復合植物提取物組仔豬血清中IgG 含量有提高的趨勢，表明飼糧中添加復合植物提取物具有增強斷奶仔豬免疫，改善仔豬免疫系統(tǒng)的功能。

4 結 論

本研究結果表明，飼糧添加復合植物提取物（主要成分為黃芪多糖和鹽酸小檗堿）可顯著降低仔豬斷奶后0～14 d 的腹瀉率，具有促生長效果；復合植物提取物對血清生化、抗氧化和免疫指標均有一定改善作用；整個試驗階段，復合植物提取物組和抗生素組在生長性能、腹瀉率和血液指標方面均無顯著性差異，具有良好的替代抗生素效果。