張彥利，蔡 龍，呂慧源，牛建芹，丁宏標(biāo)，李習(xí)龍，蔣顯仁*

（1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100081；2.北京生泰爾科技股份有限公司，北京 102206）

在現(xiàn)代集約化養(yǎng)殖場(chǎng)中多采用早期斷奶，而斷奶后應(yīng)激引起的腸道結(jié)構(gòu)和功能受損，會(huì)造成仔豬體內(nèi)氧化還原系統(tǒng)失衡和炎癥反應(yīng)，繼而引發(fā)腹瀉并增加感染各類腸道相關(guān)疾病的風(fēng)險(xiǎn)。雖然飼用抗生素可有效緩解仔豬斷奶后腹瀉并促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)，但抗生素的大量濫用也帶來了藥物殘留、耐藥性等副作用。我國(guó)已禁止在飼糧中添加含有促生長(zhǎng)類藥物飼料添加劑，但也出現(xiàn)了畜禽生長(zhǎng)性能下降和發(fā)病率升高等問題，這給我國(guó)畜牧養(yǎng)殖行業(yè)帶來了巨大的沖擊，因此目前迫切需要尋找安全、有效的飼用抗生素替代物來應(yīng)對(duì)這種困境。

天然植物提取物具有抑菌消炎、抗氧化以及抗癌癥等生物活性功能，是較為理想的抗生素替代品。黃芪多糖是黃芪的主要活性成分，具有調(diào)節(jié)機(jī)體抗氧化、免疫功能以及改善腸道健康的作用。小檗堿又稱黃連素，具有抑菌、抗炎以及調(diào)節(jié)免疫等生理功能，能夠顯著改善仔豬腸道菌群結(jié)構(gòu)。復(fù)合添加黃芪多糖和鹽酸小檗堿的相關(guān)研究甚少，二者對(duì)斷奶仔豬的生長(zhǎng)和健康是否具有協(xié)同效應(yīng)值得深入研究。因此，本試驗(yàn)旨在研究復(fù)合植物提取物（主要成分為黃芪多糖和鹽酸小檗堿）對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、腹瀉率以及血液常規(guī)生化等指標(biāo)的影響，為該復(fù)合植物提取物在斷奶仔豬生產(chǎn)中的應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 復(fù)合植物提取物的有效成分及含量為黃芪多糖200 mg/g、鹽酸小檗堿1.8 mg/g。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼養(yǎng)管理 選用初始體重為（7.59±0.39）kg的28 日齡杜× 長(zhǎng)× 大三元斷奶閹公豬75 頭，按體重完全隨機(jī)區(qū)組分為3 個(gè)處理，每個(gè)處理5 個(gè)重復(fù)（欄），每個(gè)重復(fù)5 頭豬。飼糧處理組分別為對(duì)照組（基礎(chǔ)飼糧不添加抗生素）、抗生素組（基礎(chǔ)飼糧添加160 mg/kg土霉素鈣和40 mg/kg 維吉尼亞霉素）以及復(fù)合植物提取物組（基礎(chǔ)飼糧添加500 mg/kg 復(fù)合植物提取物）。各組飼糧中粗蛋白質(zhì)（CP）、鈣和總磷等營(yíng)養(yǎng)水平保持一致，營(yíng)養(yǎng)水平參照NRC（2012），基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分（飼喂基礎(chǔ)）

試驗(yàn)于廊坊市某商業(yè)化豬場(chǎng)進(jìn)行，試驗(yàn)采用全封閉式豬舍，舍內(nèi)溫度、濕度、通風(fēng)強(qiáng)度均為自動(dòng)化控制。試驗(yàn)期間豬舍溫保持在24～26℃，試驗(yàn)仔豬分欄飼養(yǎng)（1.4 m×1.7 m），塑料漏縫地板，不銹鋼可調(diào)式料槽，乳頭式飲水器。試驗(yàn)期間每天早上和傍晚向料槽內(nèi)加料，確保仔豬自由采食和飲水，飼料為顆粒料。按照豬場(chǎng)要求進(jìn)行常規(guī)免疫接種。試驗(yàn)時(shí)間為2020 年7 月11 日—2020年8 月23 日，共進(jìn)行42 d。

1.3 樣品采集 于試驗(yàn)第14、42 天上午，每欄選取1頭體重接近平均體重的空腹仔豬，通過前腔靜脈采血，靜置30 min，3 000 ×g 離心10 min，分離血清并于置于-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能及腹瀉率 在試驗(yàn)開始當(dāng)天、第14 天、第28 天和第42 天，分別稱量斷奶仔豬欄重并記錄，每天記錄采食量，并在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)稱量料槽殘留飼料重量，計(jì)算平均日增重、平均日采食量和耗料增重比。豬只死淘時(shí)記錄死淘豬體重和該欄剩余料重，用于校正生長(zhǎng)性能數(shù)據(jù)。每天定時(shí)記錄仔豬腹瀉情況，于試驗(yàn)結(jié)束后計(jì)算每個(gè)處理組的腹瀉率。計(jì)算公式：

平均日增重=（試驗(yàn)?zāi)┲亘C 試驗(yàn)初重）/ 頭數(shù)/ 試驗(yàn)天數(shù)

平均日采食量=（試驗(yàn)期內(nèi)供料量–試驗(yàn)期內(nèi)飼料剩余量）/頭數(shù)/試驗(yàn)天數(shù)

飼料轉(zhuǎn)化率=平均日采食量/平均日增重

腹瀉率=腹瀉豬頭次/（試驗(yàn)豬頭數(shù)× 總天數(shù)）×100%

1.4.2 血清抗氧化、生化和免疫指標(biāo) 抗氧化指標(biāo)主要包括丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）和總抗氧化（T-AOC）；生化指標(biāo)包括尿素氮（UN）、堿性磷酸酶（AKP）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）和胰島素樣生長(zhǎng)因子1（IGF-1）；免疫指標(biāo)為免疫球蛋白G（IgG）。上述測(cè)定指標(biāo)所需試劑盒均為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品，具體操作步驟按說明書進(jìn)行。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)以重復(fù)為統(tǒng)計(jì)單位，經(jīng)Excel 整理后，生長(zhǎng)性能采用SAS 9.3 統(tǒng)計(jì)軟件中線性分析（GLM）及Tukey 多重比較方法進(jìn)行分析，腹瀉率等比率數(shù)據(jù)采用卡方檢驗(yàn)，血液指標(biāo)采用Mixed 分析及時(shí)間重復(fù)比較方法進(jìn)行分析?！?.05 時(shí)差異被認(rèn)為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 復(fù)合植物提取物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能及腹瀉率的影響 由表2 可知，與對(duì)照組相比，飼糧添加抗生素和復(fù)合植物提取物均可降低仔豬斷奶后0～14 d 的腹瀉率（<0.05）；各組間仔豬試驗(yàn)?zāi)┲亍⒏麟A段平均日增重、平均日采食量以及耗料增重比差異均不顯著，但添加復(fù)合植物提取物可提高仔豬末重。

表2 復(fù)合植物提取物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能和腹瀉率的影響

2.2 復(fù)合植物提取物對(duì)斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響由表3 可知，與對(duì)照組和抗生素組組相比，飼糧添加復(fù)合植物提取物可降低血清中UN 濃度（<0.05），對(duì)IGF-1、AKP、AST 和ALT 含量均無顯著性影響。但隨著日齡增加，仔豬血清中AKP 和ALT 含量均降低（<0.05），AST 含量也具有降低的趨勢(shì)（=0.074）。

表3 復(fù)合植物提取物對(duì)斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響

2.3 復(fù)合植物提取物對(duì)斷奶仔豬血清抗氧化及免疫指標(biāo)的影響 由表4 可知，與對(duì)照組相比，飼糧添加復(fù)合植物提取物可降低血清中MDA 含量（<0.05）；與抗生素組相比，飼糧添加復(fù)合植物提取物具有提高血清中IgG 含量的趨勢(shì)（=0.098）；對(duì)其他血清抗氧化指標(biāo)具有一定改善作用（>0.05）。此外，隨著日齡增加，仔豬血清T-AOC 水平增加（<0.05），IgG 水平具有增加的趨勢(shì)（=0.092）。

表4 復(fù)合植物提取物對(duì)斷奶仔豬血清抗氧化及免疫指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 復(fù)合植物提取物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能及腹瀉率的影響 在飼糧中添加復(fù)合植物提取物對(duì)畜禽的生長(zhǎng)有一定的促進(jìn)作用。如Yuan 等在斷奶仔豬飼料中添加800 mg/kg 黃芪多糖能夠顯著改善斷奶仔豬的生產(chǎn)性能；Cheng 等研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加1 g/kg 復(fù)合植物添加劑（主要成分為黃芪和黨參）雖不影響平均日采食量，但可以顯著提高育肥豬的試驗(yàn)?zāi)┲匾约霸囼?yàn)全期的平均日增重；Xu 等在斷奶仔豬基礎(chǔ)飼糧中添加10 mg/kg 或20 mg/kg 黃柏提取物（主要成分小檗堿）可有效降低腹瀉率和腹瀉指數(shù)，表明黃柏提取物具有一定的抗腹瀉作用。本研究中，盡管飼糧中添加復(fù)合植物提取物（主要成分為黃芪多糖和鹽酸小檗堿）對(duì)斷奶仔豬各階段的平均日增重、平均日采食量以及耗料增重比均沒有產(chǎn)生顯著影響，但復(fù)合植物提取物組仔豬的末重、試驗(yàn)全期的平均日增重均有所提高，耗料增重比有所降低。王芳芳等研究也發(fā)現(xiàn)，中草藥添加劑可顯著提高斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能，降低腹瀉率，抑制腸道內(nèi)大腸埃希氏菌繁殖，促進(jìn)有益菌的增殖。本試驗(yàn)中，各項(xiàng)生長(zhǎng)性能指標(biāo)均優(yōu)于抗生素組，說明復(fù)合植物提取物的促生長(zhǎng)效果好于抗生素。仔豬在斷奶后，由于受到飼糧以及外界環(huán)境變化等因素的影響，容易發(fā)生腹瀉。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼糧添加復(fù)合植物提取物能夠有效降低豬斷奶后腹瀉，且與添加抗生素的飼喂效果相當(dāng)，表明該復(fù)合植物提取物具有很強(qiáng)的抗腹瀉能力。復(fù)合植物提取物發(fā)揮促生長(zhǎng)效果主要與其含有的大量活性成分和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)密切相關(guān)，其可能通過影響飼糧的感官品質(zhì)來刺激動(dòng)物食欲、抑制體內(nèi)病原微生物的生長(zhǎng)以及提高腸道健康和抗逆能力等途徑來有效預(yù)防腹瀉等疾病的發(fā)生，從而有益于動(dòng)物的健康和生長(zhǎng)。

3.2 復(fù)合植物提取物對(duì)斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響血液是體液循環(huán)的承載體，血液生化指標(biāo)的變化可以反映機(jī)體物質(zhì)周轉(zhuǎn)代謝以及生理機(jī)能的狀況。血清UN 是蛋白質(zhì)分解的終產(chǎn)物，其含量與機(jī)體對(duì)氮元素的利用率相關(guān)。徐松琪發(fā)現(xiàn)，在豬飼糧添加黃芪多糖和葛根提取物可降低哺乳母豬血清中UN 含量。本試驗(yàn)結(jié)果也表明，飼糧中添加復(fù)合植物提取物可以提高斷奶仔豬對(duì)氮的利用率，加速蛋白質(zhì)在體內(nèi)的沉積，從而增強(qiáng)對(duì)蛋白質(zhì)的消化吸收能力。IGF-1 是一種非常重要的促生長(zhǎng)因子，在體內(nèi)可促進(jìn)細(xì)胞分裂并參與各類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝。本研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)合植物提取物組仔豬體內(nèi)IGF-1含量較對(duì)照組仔豬提高了近一倍，但是由于試驗(yàn)重復(fù)數(shù)少以及個(gè)體之間變異大，導(dǎo)致了差異不顯著。AKP 主要來源于骨骼和肝臟，能夠有效促進(jìn)攝入的鈣、磷在骨骼中沉積，在骨骼發(fā)育過程中起著非常重要的作用。在本研究中，飼糧添加復(fù)合植物提取物能夠提高仔豬血清中AKP 活性；表明復(fù)合植物提取物可能能夠促進(jìn)仔豬斷奶后的骨骼發(fā)育，從而有利于早期仔豬體架的形成。AST 和ALT 活性能夠間接反映畜禽相應(yīng)臟器的功能，其活性升高暗示機(jī)體肝臟和心臟可能受到一定損傷。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著斷奶日齡的增大，各組ALT 活性顯著下降，AST 活性也呈下降趨勢(shì)，這表明隨著仔豬的生長(zhǎng)，其肝膽代謝能力趨于成熟，對(duì)各類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率提高。本研究結(jié)果揭示，飼糧添加復(fù)合植物提取物能夠提高斷奶仔豬對(duì)蛋白質(zhì)的利用率，有利于維護(hù)仔豬肝臟健康。

3.3 復(fù)合植物提取物對(duì)斷奶仔豬血清抗氧化及免疫指標(biāo)的影響 哺乳仔豬在斷奶后，容易發(fā)生氧化應(yīng)激并產(chǎn)生過量的活性氧類物質(zhì)，導(dǎo)致體內(nèi)氧化還原系統(tǒng)失衡，進(jìn)而引發(fā)一系列相關(guān)疾病的發(fā)生，影響動(dòng)物的生長(zhǎng)性能。MDA 是體內(nèi)活性氧類物質(zhì)與多不飽和脂肪酸反應(yīng)產(chǎn)生的脂質(zhì)過氧化物，產(chǎn)生過量則會(huì)有細(xì)胞毒性作用；CAT、SOD 能夠有效避免羥自由基的過度產(chǎn)生，是體內(nèi)抗氧化酶的重要組成部分。Ibtisham 等發(fā)現(xiàn)，飼糧添加3.32 g/kg 復(fù)合植物添加劑能提高蛋雞血液中CAT 和SOD 活性，降低MDA 含量，并且對(duì)肝臟中T-AOC 水平也具有顯著的改善作用；賈紅杰等報(bào)道，添加不同劑量的黃芪多糖可調(diào)節(jié)血清抗氧化酶SOD、GSH-Px 以及T-AOC 活性，同時(shí)降低MDA 含量，從而增強(qiáng)蛋雞的抗氧化功能。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，添加復(fù)合植物提取物能夠改善仔豬血清中抗氧化酶活性，顯著降低MDA 含量，表明復(fù)合植物提取物具有改善斷奶仔豬抗氧化能力的作用，可能與黃芪多糖和小檗堿能夠調(diào)節(jié)核因子E2 相關(guān)因子2/抗氧化反應(yīng)元件（NRF2/ARE）信號(hào)通路的激活密切相關(guān)。激活NRF2 的表達(dá)能夠提高體內(nèi)CAT、SOD 等抗氧化酶的活性，清除體內(nèi)過量的活性氧，從而緩解氧化損傷。前人的早期報(bào)道也證實(shí)黃芪多糖具有免疫調(diào)節(jié)作用。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，復(fù)合植物提取物組仔豬血清中IgG 含量有提高的趨勢(shì)，表明飼糧中添加復(fù)合植物提取物具有增強(qiáng)斷奶仔豬免疫，改善仔豬免疫系統(tǒng)的功能。

4 結(jié) 論

本研究結(jié)果表明，飼糧添加復(fù)合植物提取物（主要成分為黃芪多糖和鹽酸小檗堿）可顯著降低仔豬斷奶后0～14 d 的腹瀉率，具有促生長(zhǎng)效果；復(fù)合植物提取物對(duì)血清生化、抗氧化和免疫指標(biāo)均有一定改善作用；整個(gè)試驗(yàn)階段，復(fù)合植物提取物組和抗生素組在生長(zhǎng)性能、腹瀉率和血液指標(biāo)方面均無顯著性差異，具有良好的替代抗生素效果。