秦昆鵬 楊 濤 王永芳 趙玉蓉

(湖南農(nóng)業(yè)大學動物科學技術學院，長沙 410128)

近年來，有關短鏈脂肪酸在動物生產(chǎn)中的研究日漸增多。短鏈脂肪酸在機體內(nèi)主要來源于結(jié)腸內(nèi)的微生物發(fā)酵，研究發(fā)現(xiàn)其不僅能作為能量底物為機體供能，而且還對機體脂肪代謝、糖代謝、免疫等生理活動具有重要調(diào)節(jié)作用[1-4]。乙酸是動物機體內(nèi)最主要的短鏈脂肪酸之一，占體循環(huán)內(nèi)短鏈脂肪酸含量的60%，并且以游離酸(CH3COO-)的形式存在[5]。有研究報道，乙酸除了能作為能量底物和碳源參與機體內(nèi)代謝活動外，還對機體食欲調(diào)節(jié)、脂肪代謝和胰島素抵抗等具有重要影響[6-8]，并且乙酸及其鹽類在含有相同CH3COO-含量時其生物學效價一致[9]。由過往研究推測，乙酸及其鹽類對機體食欲調(diào)節(jié)和脂肪代謝的影響可能會對肉雞生長代謝產(chǎn)生影響。因此，本試驗旨在探究飼糧中添加不同水平乙酸鈉對白羽肉雞生長性能、屠宰性能、肉品質(zhì)和血清生化指標的影響，以期獲得飼糧中添加乙酸鈉對白羽肉雞的作用效果，同時也為乙酸及其鹽類在肉雞飼糧中的合理應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

食品級乙酸鈉(99%)，由深圳某生物科技有限公司提供。羅斯308白羽肉雞購自湖南某實業(yè)有限公司。

1.2 試驗設計

采用單因素試驗設計，選用1日齡羅斯308肉仔雞，預飼7 d(飼喂基礎飼糧)后選擇體重相近和精神狀態(tài)良好的肉雞288只進行隨機分組，根據(jù)飼糧不同分為6個組，分別飼喂乙酸鈉添加水平為0(對照組，基礎飼糧)、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%和0.5%的飼糧，每組6個重復(籠)，每個重復8只雞。試驗期為35 d。根據(jù)《雞飼養(yǎng)標準》(NY/T 33—2004)配制玉米-豆粕型基礎飼糧，其組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理

動物試驗在湖南農(nóng)業(yè)大學耘園基地進行。采用3層籠養(yǎng)方式飼養(yǎng)，在飼養(yǎng)試驗前對雞舍和籠具進行清洗消毒，然后用福爾馬林和高錳酸鉀進行熏蒸、通風。入雛前將圈舍升溫至32～35 ℃，此后溫度每周降低2～3 ℃，直至保持在20～22 ℃；雞舍相對濕度保持在50%～60%(預飼前3 d在65%以上)。日常管理參照《商品肉雞生產(chǎn)技術規(guī)程》(GB/T 19664—2005)，先飲水后開食，自由采食和飲水。飼養(yǎng)過程中，注意監(jiān)測環(huán)境空氣質(zhì)量，注意通風換氣，保持良好的雞舍環(huán)境；每天打掃雞舍清潔衛(wèi)生，并定期用專用消毒劑對雞舍進行噴霧消毒。

表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)

1.4 測定指標及方法

1.4.1 生長性能

試驗期間觀察試驗雞健康情況，并記錄死淘率，分別在肉雞7和42日齡空腹稱重，并準確計量試驗階段采食量，計量試驗期肉雞平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

1.4.2 屠宰性能及肉品質(zhì)

于42日齡，從每個重復中隨機挑選1羽白羽肉雞，屠宰后進行屠宰性能測定，測定方法參照NY/T 823—2004。分別取左右兩側(cè)胸肌和腿肌用于測定pH、肉色、滴水損失和系水力。pH采用MC Testo 205 pH測定儀測定，分別取屠宰后45 min和24 h的胸肌、腿肌3個點進行測定，取平均值為屠宰45 min后pH(pH45 min)和屠宰24 h后pH(pH24 h)；肉色用NR20XE肉色儀進行測定；取5 g左右肌肉置于滴水損失測定管中，于4 ℃保存，分別于24 和48 h稱重，計算24和48 h肌肉滴水損失；肌肉系水力則用肉品系水力測定儀MJ-1000進行測定。

1.4.3 血清生化指標

于42日齡，從每個重復中隨機挑選1羽白羽肉雞，頸靜脈采血，4 000 r/min離心分離血清，-20 ℃保存待測。采用酶標儀測定血清中甘油三酯(TG)(單試劑GPO-PAP法)、總膽固醇(TC)(單試劑GPO-PAP法)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)(雙試劑直接法)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)(雙試劑直接法)和葡萄糖(GLU)(己糖激酶法)含量以及谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)(賴氏法)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)(賴氏法)活性。試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，采用LSD法進行多重比較，P<0.05為差異顯著，P>0.05為差異不顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧添加乙酸鈉對白羽肉雞生長性能的影響

由表2可知，與對照組相比，飼糧添加不同水平乙酸鈉對白羽肉雞ADG、ADFI和F/G均無顯著影響(P>0.05)，各乙酸鈉添加組白羽肉雞生長性能之間也均無顯著差異(P>0.05)。

表2 飼糧添加乙酸鈉對白羽肉雞生長性能的影響

2.2 飼糧添加乙酸鈉對白羽肉雞屠宰性能和肉品質(zhì)的影響

2.2.1 飼糧添加乙酸鈉對白羽肉雞屠宰性能的影響

由表3可知，與對照組相比，飼糧添加不同水平乙酸鈉對白羽肉雞屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率均無顯著影響(P>0.05)，各乙酸鈉添加組白羽肉雞屠宰性能之間也均無顯著差異(P>0.05)。

2.2.2 飼糧添加乙酸鈉對白羽肉雞肉品質(zhì)的影響

由表4可知，與對照組相比，飼糧添加不同水平乙酸鈉對白羽肉雞胸肌亮度(L*)和黃度(b*)值、pH24 h以及24和48 h滴水損失均無顯著影響(P>0.05)，但飼糧添加0.2%、0.4%和0.5%乙酸鈉可以顯著降低胸肌pH45 min(P<0.05)，0.1%和0.3%乙酸鈉添加組胸肌pH45 min與對照組相比無顯著差異(P>0.05)；與對照組相比，飼糧添加0.1%、0.2%、0.3%和0.5%乙酸鈉顯著提高胸肌紅度(a*)值(P<0.05)，飼糧添加0.3%、0.4%和0.5%乙酸鈉顯著提高胸肌系水力(P>0.05)，而飼糧添加0.1%和0.2%乙酸鈉對胸肌系水力無顯著影響(P>0.05)。

表3 飼糧添加乙酸鈉對白羽肉雞屠宰性能的影響

表4 飼糧添加乙酸鈉對白羽肉雞胸肌肉品質(zhì)的影響

由表5可知，與對照組相比，飼糧添加不同水平乙酸鈉對白羽肉雞腿肌pH45 min、pH24 h、亮度、紅度和黃度值以及24和48 h滴水損失均無顯著影響(P>0.05)；飼糧添加0.3%、0.4%和0.5%乙酸鈉顯著提高腿肌系水力(P<0.05)，飼糧添加0.1%和0.2%乙酸鈉對腿肌系水力無顯著影響(P<0.05)。

2.3 飼糧添加乙酸鈉對白羽肉雞血清生化指標的影響

由表6可知，飼糧添加乙酸鈉對白羽肉雞血清TG、TC、LDL-C、HDL-C含量以及ALT活性存在顯著影響(P<0.05)。與對照組相比，0.4%和0.5%乙酸鈉添加組血清TG含量顯著提高(P<0.05)，其中0.4%乙酸鈉添加組血清TG含量最高，且顯著高于0.1%、0.2%和0.3%乙酸鈉添加組(P<0.05)，0.5%乙酸鈉添加組血清TG含量顯著高于0.1%乙酸鈉添加組(P<0.05)。與對照組相比，0.1%、0.2%、0.4%和0.5%乙酸鈉添加組血清TC含量顯著提高(P<0.05)，0.2%和0.5%乙酸鈉添加組血清TC含量顯著高于其他組。與對照組相比，各乙酸鈉添加組血清LDL-C含量顯著提高(P<0.05)，其中0.2%和0.5%乙酸鈉添加組血清LDL-C含量顯著高于其他各組(P<0.05)，0.4%乙酸鈉添加組血清LDL-C含量顯著高于0.1%乙酸鈉添加組(P<0.05)。0.2%、0.4%和0.5%乙酸鈉添加組血清HDL-C含量顯著高于對照組、0.1%和0.3%乙酸鈉添加組(P<0.05)，而0.1%和0.3%乙酸鈉添加組血清HDL-C含量與對照組相比差異不顯著(P>0.05)，0.3%乙酸鈉添加組血清HDL-C含量顯著高于0.1%乙酸鈉添加組(P<0.05)。與對照組相比，0.4%和0.5%乙酸鈉添加組血清ALT活性顯著提高(P<0.05)，0.1%、0.2%和0.3%乙酸鈉添加組血清ALT活性無顯著差異(P>0.05)。與對照組相比，飼糧添加不同水平乙酸鈉對白羽肉雞血清GLU含量和AST活性無顯著影響(P>0.05)。

表5 飼糧添加乙酸鈉對白羽肉雞腿肌肉品質(zhì)的影響

表6 飼糧添加乙酸鈉對白羽肉雞血清生化指標的影響

3 討 論

3.1 飼糧添加乙酸鈉對白羽肉雞生長性能的影響

動物的生長性能和采食量緊密相關，采食量的多少直接決定了養(yǎng)分攝入量，進而影響動物生長性能。目前有不少關于乙酸對動物生長性能和攝食影響的報道。Canibe等[10]報道，飼喂含不同乙酸含量的液體發(fā)酵飼料對仔豬的生長性能并無顯著影響；張治國[11]報道，飼糧添加0.1%～0.4%乙酸對小鼠和大鼠的ADFI無顯著差異；楊春雷等[12]報道，用醋酸酸化飼糧分別至pH為3.0、4.0和5.0后飼喂斷奶仔豬，可以顯著提高仔豬ADG和健康狀況。但也有報道乙酸鹽對試驗動物采食量及ADG具有負面影響。武楓林等[13]報道，水牛正常條件下飼喂24 h后頸靜脈分別灌注500 mL的1和2 mol/L乙酸鈉，發(fā)現(xiàn)低水平乙酸鈉在0～3 h和12～24 h階段對水牛采食量有顯著抑制作用，高水平乙酸鈉則全天對水牛采食量有顯著抑制作用。王云云等[14]報道，分別給昆明小鼠每天腹腔注射0.3和0.5 kg/L的乙酸鈉，在4周內(nèi)，小鼠的采食量、飼料轉(zhuǎn)化率、增重率和絨毛發(fā)育程度被顯著抑制，并且上調(diào)了厭食激素[膽囊收縮素(CCK)、瘦素(LEP)和酪酪肽(PYY)]和攝食調(diào)控因子[Janus激酶2/信號轉(zhuǎn)導及轉(zhuǎn)錄激活蛋白3(JAK2/STAT3)] mRNA的表達。Frost等[15]報道，靜脈和回腸輸注醋酸鹽(500 mg/kg BW)都可以抑制C57BL/6小鼠的食欲，降低小鼠采食量。Cuche等[16]給雌性大白豬回腸持續(xù)輸注1 h(2.4 mL/min)含60%乙酸的復合短鏈脂肪酸(pH 6.8,0.5 mmol/L)可以顯著提高血漿中厭食激素PYY的含量，并且抑制胃排空，在輸注完成后的15 min后血漿中PYY含量回歸基礎水平。本試驗的結(jié)果與Canibe等[10]和張治國[11]的報道一致，飼糧添加0.1%～0.5%乙酸鈉對白羽肉雞生長性能無顯著影響。關于乙酸鈉對于試驗動物采食量和ADG影響的研究結(jié)果存在差異，但也可以發(fā)現(xiàn)規(guī)律，在飼糧中添加適量的乙酸鈉對試驗動物生長性能無顯著影響或促進，而對試驗動物靜脈輸注或回腸輸注乙酸鈉則可以顯著降低采食量及ADG。這可能與乙酸鈉半衰期較短以及通過攝食攝入的乙酸可以被小腸上皮細胞迅速吸收代謝或經(jīng)門靜脈進入肝臟內(nèi)代謝，最后才進入血液，血液中的乙酸含量不足以對動物采食造成影響有關。對試驗動物直接靜脈或回腸輸注乙酸鈉可以短時間內(nèi)使動物血漿內(nèi)乙酸含量升高，乙酸可以通過血腦屏障，在下丘腦神經(jīng)元內(nèi)轉(zhuǎn)化為乙酰輔酶A。該過程會釋放大量一磷酸腺苷(AMP)進而使腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)磷酸化，AMPK磷酸化進而磷酸化乙酰輔酶A羧化酶(ACC)，導致丙二酰輔酶A水平降低，下丘腦丙二酰輔酶A水平的降低與抑食因子POMC19表達的提高以及促食神經(jīng)肽Y(NPY)和刺豚鼠相關蛋白(AgRP)表達抑制有關[15]。

3.2 飼糧添加乙酸鈉對白羽肉雞屠宰性能和肉品質(zhì)的影響

肉雞養(yǎng)殖的生產(chǎn)效益與肉雞的屠宰性能和肉品質(zhì)有直接關系，如何改善肉雞的屠宰性能和肉品質(zhì)日益受到關注。通過在飼糧中添加功能活性成分或新型飼料原料等營養(yǎng)調(diào)控手段來提高肉雞胴體品質(zhì)是常見的措施。本試驗在了解了乙酸生物學功能之后，推測乙酸可能對肉雞脂肪代謝產(chǎn)生影響，進而對肉雞屠宰性能和肉品質(zhì)產(chǎn)生影響。本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼糧添加乙酸鈉對白羽肉雞屠宰性能并無顯著影響，但對白羽肉雞的肉品質(zhì)有顯著影響。即飼糧添加0.2%、0.4%和0.5%乙酸鈉顯著降低胸肌pH45 min；飼糧添加0.3%、0.4%和0.5%乙酸鈉顯著提高胸肌和腿肌系水力；飼糧添加0.1%、0.2%、0.3%和0.5%乙酸鈉顯著提升胸肌紅度值?；铙w禽肉一般為中性偏堿的狀態(tài)，屠宰后由于肌肉中肌糖原的無氧酵解生成乳酸，使pH迅速降低[17]。飼糧添加乙酸鈉使白羽肉雞肌肉pH下降的可能原因是乙酸進入體內(nèi)會轉(zhuǎn)化為乙酰輔酶A，乙酰輔酶A既可以作為底物直接參與三羧酸循環(huán)供能，減少肌糖原的消耗，也可以作為糖異生的底物生成GLU，使肌糖原增加。還有研究指出，營養(yǎng)干預會影響肌肉肌纖維的組成，肌肉肉品質(zhì)和肌纖維的組成密切相關。Lebedová等[18]報道，限飼顯著提高育肥豬肌肉ⅡB型肌纖維比例，顯著降低Ⅰ型肌纖維比例。ⅡB型肌纖維直徑大，占比越高肌纖維橫截面積越大，系水力越低，肉質(zhì)越差，而Ⅰ型肌纖維占比越高則紅度越好，系水力越高[19]。也有報道指出，肌肉橫截面積變大和肌糖原的減少相關[20]，故飼糧添加乙酸使白羽肉雞肌肉紅度質(zhì)提高、系水力增強的一個可能原因是充足的營養(yǎng)供給對肉雞肌肉的肌纖維組成產(chǎn)生了積極影響，提高了Ⅰ型肌纖維比例，降低了ⅡB型肌纖維比例，肌纖維橫截面積變小，從而使肌肉紅度值變高，系水力變強。

3.3 飼糧添加乙酸鈉對白羽肉雞血清生化指標的影響

短鏈脂肪酸對動物的生理活動具有重要影響，在維持機體能量平衡及代謝穩(wěn)態(tài)、機體免疫調(diào)節(jié)以及脂肪代謝等方面具有重要作用。有研究指出，乙酸對動物脂肪代謝具有重要調(diào)控作用[21]。Jocken等[22]報道，1 μmol/L乙酸鹽處理人多能脂肪源干細胞(hMADS)導致絲氨酸650位點磷酸化的激素敏感性脂肪酶(HSL)相對量減少，從而抑制了細胞脂解作用。Hong等[23]報道，乙酸鹽處理小鼠前脂肪細胞系(3T3-L1)可以激活G蛋白偶聯(lián)受體43(GPR43)，使氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)的表達量提高，從而促進脂肪細胞的分化，同時還抑制異丙腎上腺素誘導的脂解作用。本試驗探究了飼糧添加乙酸鈉對白羽肉雞血清中脂肪代謝相關生化指標的影響，結(jié)果表明乙酸鈉的添加使白羽肉雞血清中TG、TC、LDL-C和HDL-C的含量上升。血清中TG、TC、LDL-C和HDL-C的含量與機體脂肪代謝密切相關，脂肪攝入過高和機體脂肪沉積過多都有可能導致其含量升高[24]。乙酸鈉的添加可能抑制了白羽肉雞體內(nèi)HSL誘導的或異丙腎上腺素誘導的脂解作用，并促進了脂肪細胞的分化，從而使肉雞肝臟和機體脂肪沉積增加，進而影響了血清生化指標。另外，乙酸進入體內(nèi)可以轉(zhuǎn)化為乙酰輔酶A，可以作為脂肪合成的原料[25]，在肉雞肝臟內(nèi)可以直接參與脂肪的從頭合成及膽固醇的從頭合成，從而促進體脂沉積。乙酸還可以抑制肝X受體(LXR)的表達[21]，而LXR可以促進肝臟對HDL-C的吸收[26]，即飼糧添加適宜水平的乙酸鈉可能通過抑制LXR表達，導致肝臟對HDL-C的吸收減少，從而使血清中HDL-C含量升高[26]。

在乙酸與胰島素抵抗的研究上表明，乙酸可以緩解胰島素抵抗。Kimura等[27]報道，乙酸可以改善小鼠肌肉及肝臟組織胰島素敏感性，促進小鼠糖酵解及能量消耗相關基因的表達，增強小鼠對GLU的吸收利用。Mitrou等[28]報道，攝入乙酸可以改善GLU耐受量，降低患者骨骼肌胰島素敏感性，增強骨骼肌對GLU的吸收和利用，降低血液中胰島素含量。本研究中，飼糧添加乙酸鈉并未顯著影響白羽肉雞血清GLU含量，即乙酸鈉對正常白羽肉雞血糖調(diào)節(jié)能力無顯著影響。

ALT和AST是肝功能檢測最常見的指標。ALT主要分布在肝細胞內(nèi)，AST在肝細胞、心臟細胞和骨骼肌細胞均有分布，如果肝臟受損或損壞，肝細胞中的轉(zhuǎn)氨酶便進入血液，血液中ALT和AST活性升高，提示肝臟疾病信號[29]。本試驗中，飼糧添加0.4%和0.5%乙酸鈉使白羽肉雞血清中ALT活性顯著上升，這說明飼糧添加0.4%和0.5%乙酸鈉使肝臟受到了一定程度的損傷。

4 結(jié) 論

綜上所述，飼糧添加乙酸鈉對白羽肉雞生長性能和屠宰性能無顯著影響，添加適宜水平的乙酸鈉可以一定程度改善肉質(zhì)，但過量添加可能會使血脂升高、肝臟受損。其中，飼糧添加0.3%乙酸鈉改善了白羽肉雞肌肉紅度值和系水力，但對血清TG、TC和HDL-C含量無顯著影響，并且未導致肝損傷，是較為適宜的添加水平。