◎ 沈 婧

（蘇州市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)院，江蘇 蘇州 215000）

有機(jī)磷農(nóng)藥是農(nóng)藥巨頭之一，至今為止，全球范圍內(nèi)的有機(jī)磷類農(nóng)藥產(chǎn)品數(shù)量已達(dá)上百種。有機(jī)磷類為殺蟲類農(nóng)藥中的三大支柱之一，占據(jù)了整個(gè)農(nóng)藥市場(chǎng)的半壁江山[1]。而農(nóng)藥的使用使得蟲害的抗藥性快速上升，從而導(dǎo)致農(nóng)民對(duì)農(nóng)藥的使用量越來(lái)越大，對(duì)環(huán)境、人類產(chǎn)生一定程度的不良影響。大量數(shù)據(jù)表明，被使用于農(nóng)作物的所有農(nóng)藥中，僅有遠(yuǎn)少于1%的農(nóng)藥真正達(dá)到了殺蟲的目的，其余農(nóng)藥或其殘留物附著于農(nóng)作物上或進(jìn)入土壤、大氣層中，而進(jìn)入大氣層的有害物質(zhì)則會(huì)通過(guò)循環(huán)系統(tǒng)流入地表水體，最終污染整個(gè)農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)。農(nóng)作物是人類生存下去的根基，農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留受到人們的高度重視。人們對(duì)“舌尖上的安全”的重視程度顯著提高，促使國(guó)內(nèi)國(guó)外對(duì)農(nóng)藥最大殘留限量的要求越來(lái)越苛刻[2]。我國(guó)毒蟲畏這種殺蟲劑的使用頻率較高，如使用在大豆、胡蘿卜、大米和甘藍(lán)等作物的種植過(guò)程，而且在動(dòng)物源性食品中也均有檢出，但我國(guó)對(duì)殺蟲劑在食品中的限量標(biāo)準(zhǔn)相較落后許多。

毒蟲畏（Chlorfenvinphos）屬于有機(jī)磷類中的一種，是內(nèi)吸土壤殺蟲劑，用于防治危害農(nóng)林牧業(yè)生產(chǎn)的有害生物，如根蠅、根蛆和地老虎等，流入水體循環(huán)中可能對(duì)水生環(huán)境產(chǎn)生一段時(shí)間的不良作用，對(duì)其中的水生生物有極高的威脅[3]。據(jù)國(guó)外報(bào)道，毒蟲畏還可以用于畜牧業(yè)，防治牛、羊體外的寄生蟲。當(dāng)其被合理運(yùn)用于公共衛(wèi)生管理，同樣可以預(yù)防治理蚊幼蟲。毒蟲畏殘留物多數(shù)為毒蟲畏（Z型）和毒蟲畏 （E型）兩種異構(gòu)體的混合物（Z型∶E型的標(biāo)準(zhǔn)比例為8.5∶1.0），琥珀色乳油狀液體[4]。毒蟲畏廣泛適用于谷物類農(nóng)作物，包括稻類、麥類、旱糧類和雜糧類，此外，GB 2763—2021中規(guī)定的谷物類檢測(cè)范圍還包括成品糧。很多國(guó)外標(biāo)準(zhǔn)制定了毒蟲畏的最高殘留限量，以此來(lái)限制毒蟲畏的使用，從而減少其已經(jīng)或可能產(chǎn)生的危害[5]。本研究以毒蟲畏為研究對(duì)象，建立了相對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)中步驟更為簡(jiǎn)單的氣相色譜測(cè)定大米中毒蟲畏殘留量的方法，保證了檢測(cè)結(jié)果的精密度以及檢出限定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。該方法適用于一般理化實(shí)驗(yàn)室展開對(duì)糧谷類食品的檢測(cè)，最低定量限能夠滿足當(dāng)前食品安全標(biāo)準(zhǔn)GB 2763—2021中的管理要求，能夠?yàn)槲覈?guó)食品安全提供可靠的檢測(cè)技術(shù)理論 支持。

1 材料與方法

1.1 儀器與設(shè)備

安捷倫GC 7890B氣相色譜儀，配有火焰光度檢測(cè)器（企業(yè)內(nèi)部設(shè)備編號(hào)：SSJ-506-602），線性范 圍＞107。毒蟲畏殘留物多數(shù)為毒蟲畏（Z型）和毒蟲畏（E型）兩種異構(gòu)體的混合物，而氣相色譜正適合用于在短時(shí)間（十幾分鐘）內(nèi)分離性質(zhì)相近、較難分離的同分異構(gòu)體，對(duì)于樣品濃度的要求不是很嚴(yán)格，能夠完成低濃度的檢測(cè)。

輔助設(shè)備：渦旋儀VORTEX 3 S025；離心機(jī)5804；水浴氮?dú)獯蹈慑仭?/p>

1.2 實(shí)驗(yàn)材料

毒蟲畏標(biāo)準(zhǔn)品，購(gòu)于Be Pure公司，CAS號(hào)：470-90-6，化學(xué)式為C12H14Cl3O4P，企業(yè)內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)編號(hào)：22-04-048。此溶液的儲(chǔ)存條件是0～8 ℃條件下避光儲(chǔ)存，有效期兩年，需要時(shí)用乙腈稀釋成各級(jí)適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

提取試劑：乙腈，分析純。毒蟲畏屬于脂溶性化學(xué)物質(zhì)，易溶于有機(jī)溶劑。實(shí)驗(yàn)室首選方便簡(jiǎn)單的批量樣品前處理方法，則選用QuEChERS方案，提取試劑為乙腈。

凈化管：300 mg PSA/300 mg C18/45 mg Carb/900 mg MgSO4。PSA填料是一種吸附劑，具有較強(qiáng)的離子交換能力，被用于去除金屬離子、有機(jī)酸、色素和酚類等，同時(shí)對(duì)農(nóng)藥殘留物又無(wú)吸附作用；C18粉末對(duì)非極性組分有吸附作用；Carb石墨化炭黑，去除表面活性劑，能夠充分地去除色素；MgSO4吸水。

復(fù)溶上機(jī)試劑：乙酸乙酯，色譜純。氣相色譜中選用的溶劑如無(wú)特殊情況，不能含有鹵族元素，否則溶劑會(huì)被燒掉生成酸，從而對(duì)檢測(cè)器形成一定的破壞，影響檢測(cè)效果，最好只含有C、H、O元素，如乙酸乙酯（C4H8O2），因此由乙腈提取出的樣品應(yīng)進(jìn)行溶劑置換。

有機(jī)項(xiàng)濾膜：0.22 μm。

1.3 樣品的前處理

1.3.1 提取

稱取5 g粉碎后的大米試樣于50 mL塑料離心管中，用移液槍加入10 mL乙腈，蓋緊離心管蓋子，確保其中液體不會(huì)漏出。將離心管置于渦旋儀上渦旋混勻后，置于振蕩儀上振蕩5 min后，放入離心機(jī)以 5 000 r·min-1離心5 min。

1.3.2 凈化

用移液槍吸取離心管內(nèi)8 mL乙腈層上清液加到一次性塑料凈化管中，置于渦旋儀上渦旋混勻1 min后，放入離心機(jī)以5 000 r·min-1離心5 min。

1.3.3 溶劑置換

用移液槍準(zhǔn)確吸取離心管內(nèi)2 mL上清液于干凈10 mL一次性塑料離心管中，在40 ℃水浴中氮?dú)獯抵两桑尤? mL乙酸乙酯將其復(fù)溶，蓋緊離心管蓋子，確保其中液體不會(huì)漏出，置于渦旋儀上渦旋均勻后，復(fù)溶液過(guò)微孔濾膜后用于測(cè)定。

1.4 氣相色譜條件

色譜柱：HP-5，30 m×0.32 mm×0.25 μm；進(jìn)樣口溫度：230 ℃，不分流進(jìn)樣；載氣為高純氮?dú)?；進(jìn)樣口為恒流模式；程序升溫如表1所示。

表1 升溫程序表

1.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

按表2準(zhǔn)確移取毒蟲畏標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液，用基質(zhì)空白提取液逐級(jí)稀釋成一系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，上機(jī) 測(cè)定。

表2 標(biāo)準(zhǔn)系列溶液配制表

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖及其線性

配制濃度為1 mg·kg-1的毒蟲畏標(biāo)品，通過(guò)1.3中的條件進(jìn)行進(jìn)樣，得到毒蟲畏標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖如圖1所示。由于毒蟲畏殘留物多數(shù)為毒蟲畏（Z型）和毒蟲畏（E型）兩種異構(gòu)體的混合物，故單標(biāo)品進(jìn)樣也得到兩個(gè)峰，Z型∶E型的比例為8.2∶1.0（Z型∶E型的標(biāo)準(zhǔn)比例為8.5∶1.0），計(jì)算時(shí)以加合峰計(jì)。

圖1 毒蟲畏標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖

按1.4操作，5個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液各進(jìn)一針，計(jì)算目標(biāo)化合物標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的相關(guān)系數(shù)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)工作曲線如圖2、3、4所示。毒蟲畏（E）：y=219.169 2x+ 1.027 0，R=0.999 87，滿足R2≥0.99；毒蟲畏（Z）：y=1 808.952 7x-9.255 6，R=0.999 84，滿足R2≥0.99；E型與Z型的毒蟲畏加合峰標(biāo)準(zhǔn)工作曲線為y=2 020.897 5x- 1.997 7，R=0.999 2，滿足R2≥0.99。

圖2 毒蟲畏標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

圖3 E型毒蟲畏標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

圖4 Z型毒蟲畏標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

2.2 準(zhǔn)確度（回收率）及其精密度

使用陰性大米樣品依次加標(biāo)，按照檢驗(yàn)方法進(jìn)行樣品處理，使毒蟲畏的最終加入濃度均為0.1 μg·mL-1、0.5 μg·mL-1、1.0 μg·mL-1這3個(gè)水平，上機(jī)。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，得到目標(biāo)化合物的濃度，計(jì)算回收率及其精密度（n=5），結(jié)果見表3。根據(jù)目標(biāo)化合物被測(cè)物的的峰面積響應(yīng)值，得到這3個(gè)水平的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）分別為0.68%、1.05%、1.57%。

表3 準(zhǔn)確度（回收率）及其精密度結(jié)果表

2.3 檢出限

按最新標(biāo)準(zhǔn)GB 2763—2021中規(guī)定，糧谷類中毒蟲畏的最大殘留限量為0.01 mg·kg-1，因此按1.2的方法制備陰性基質(zhì)，加標(biāo)以制備含目標(biāo)化合物的濃度（X）為0.01 mg·kg-1的待測(cè)試樣，經(jīng)提取、凈化后濃縮成待測(cè)液濃度為0.02 μg·mL-1。待測(cè)液上機(jī)，進(jìn)樣1 μL，進(jìn)行色譜分析，計(jì)算色譜圖中毒蟲畏的兩個(gè)目標(biāo)化合物信噪比（S/N），即目標(biāo)化合物產(chǎn)生的信號(hào)與噪聲的比例，E型毒蟲畏的S/N為3.5，Z型毒蟲畏的S/N為15.7，譜圖如圖5所示。

圖5 信噪比圖譜圖

3 結(jié)論

使用有機(jī)溶劑提取出附著于樣品表面的農(nóng)藥，再通過(guò)凈化管吸附其中的雜質(zhì)、色素、油脂后上機(jī)測(cè)定。使用氣相色譜測(cè)定大米毒蟲畏殘留量的方法前處理簡(jiǎn)單，只要去除不溶性物質(zhì)以及高沸點(diǎn)物質(zhì)即可，適用于實(shí)驗(yàn)室對(duì)農(nóng)藥殘留檢測(cè)的前處理一般方法，僅需要配有火焰光度檢測(cè)器的通用氣相色譜儀進(jìn)行上機(jī)分析，滿足目前GB 2763—2021的要求。