于 杰

(吉林省吉林市龍?zhí)秴^(qū)結(jié)核病防治所 吉林 吉林 132000)

近年來隨著結(jié)核病治療投入不斷強化，使結(jié)核病發(fā)病率呈現(xiàn)下降趨勢，但是在數(shù)量上依然具有較高的發(fā)病率，而早期對結(jié)核病實施診斷較為重要，能利于結(jié)核病患者后期治療，目前臨床對于結(jié)核病一般以結(jié)核菌培養(yǎng)作為診斷的“金標準”[1]，該種診斷方式的診斷準確性較高，能夠為后續(xù)的診斷和治療工作提供重要的參考依據(jù)；通過對患者開展結(jié)核菌培養(yǎng)，能夠明確診斷患者的病情，尤其對于通過涂片檢查，結(jié)果提示陰性患者的肺結(jié)核患者來說，通過開展結(jié)核菌分離培養(yǎng)試驗，能夠明確疾病，并且能夠滿足患者診斷需求，為疾病的治療和診斷均提供重要信息，還能夠利于早期發(fā)現(xiàn)疾病、早期清除傳染源。但在臨床實際工作中，多數(shù)患者的檢驗結(jié)果仍呈現(xiàn)陰性，而研究認為，主要和患者的痰液性狀、保存條件等方面存在一定關(guān)聯(lián)[2-3]。本文探究痰液性狀和保存條件對結(jié)核菌培養(yǎng)陽性率的影響，見下文。

1 資料與方法

1.1基線資料

將痰液檢驗患者400例作為此次研究的主要對象，抽取患者痰液樣本400份，根據(jù)不同性狀分為黏液痰、干酪痰、唾液、血性痰四種性狀，每個性狀100份，采用不同的溫度進行保存，例如-18攝氏度、4攝氏度、25攝氏度、30攝氏度，研究均在2020年1月至2020年12月期間完成。納入標準：所有患者簽署知情同意書；(2)臨床資料完整。排除標準：臨床資料不完整。

黏液痰患者中男性60例、女性40例，年齡21～60歲，平均值(40.52±2.56)歲；干酪痰患者中男性61例、女性39例，年齡21～61歲，平均值(40.82±2.71)歲；唾液患者中男性62例、女性38例，年齡21～62歲，平均值(40.75±2.01)歲；血性痰患者中男性63例、女性37例，年齡21～63歲，平均值(40.96±2.45)歲。以上四組在上述基線資料的比較中，差異無統(tǒng)計學意義，(P>0.05)。

1.2方法

患者的痰液性狀一共包括四種，即①黏液痰、②干酪痰、③唾液、④血性痰，每種性狀各100份樣本，而患者的保存條件也包括四種，即分為-18攝氏度、4攝氏度、25攝氏度、30攝氏度四種，保存時間分別為0d、3d、7d、14d、21d，對上述痰液樣本的細菌涂片結(jié)果進行分析和比較，以明確痰液性狀和保存條件對于標本的影響。

痰結(jié)核菌培養(yǎng)方法：痰結(jié)核菌分離培養(yǎng)采用氫氧化鈉堿進實驗進行，濃度為4%，樣本的培養(yǎng)需在接種酸性羅氏培養(yǎng)基之前，于37℃溫度下孵育，時間為8周，再得出相關(guān)結(jié)果。而對于不同保存條件的標本，其實驗方法包括：不同樣本需要在不同環(huán)境下進行培養(yǎng)，再選擇痰結(jié)核菌進行分離培養(yǎng)實驗，從而得出結(jié)果。

1.3觀察指標

分析不同性狀痰液陽性培養(yǎng)率、不同溫度不同時間下的陽性培養(yǎng)率。

1.4統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

2.1陽性培養(yǎng)率的對比

在黏液痰40例陽性標本、干酪痰84例陽性標本、唾液7例陽性標本、血性痰24例陽性標本，其中以干酪痰所占比較高，和其他三組比較，具有顯著差異(P<0.05)。如表1:

表1 陽性培養(yǎng)率的對比(n；%)

2.2不同溫度不同時間下的陽性培養(yǎng)率的對比

在零下18攝氏度的溫度下保存，不同時間段受檢者的不同性質(zhì)痰液(黏液痰、干酪痰、唾液、血性痰)的陽性培養(yǎng)率進行比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；而在4℃的溫度下，治療后14天、21天的陽性培養(yǎng)率和其他溫度下的結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；在25攝氏度的溫度下保存，治療后第7天、第14天、第21天的陽性培養(yǎng)率和其他溫度相比，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；在30℃的溫度下保存，不同時間段的陽性培養(yǎng)率相比，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。如表2：

表2 比較不同溫度不同時間下的陽性培養(yǎng)率(n；%)

3 討論

近年來，我國空氣質(zhì)量整體上呈現(xiàn)污染情況，而空氣污染和環(huán)境變化，均可增加發(fā)病風險，肺結(jié)核作為一種因環(huán)境改變而導(dǎo)致的常見病，研究認為，對于該類疾病進行早期診斷十分必要，能夠早期作出診斷，從而明確治療[4]。目前臨床對于肺結(jié)核的診斷方式較多，其中對患者的結(jié)核菌進行培養(yǎng)十分重要，能夠明確診斷。其中痰液標本的檢查效果較好，其檢出率與涂片檢查相比較高，在對患者采取結(jié)核菌培養(yǎng)實驗過程中，需積極處理患者的痰液標本，并按照流程進行各項操作，選擇適宜的痰液性狀和保存條件，避免不同保存時間和患者的痰液性狀對檢查結(jié)果造成影響[5-6]。部分學者在研究過程中，在進行結(jié)核菌培養(yǎng)時，選擇不同性狀的痰液，能夠?qū)罄m(xù)治療以及后續(xù)檢測結(jié)果造成一定影響，而相關(guān)研究表明，在不同性狀的痰液中，干酪痰的陽性培養(yǎng)率相比其他性質(zhì)痰液更高，其中唾液的陽性率最低。

痰液性狀對結(jié)核菌培養(yǎng)陽性率的影響對結(jié)核菌分離培養(yǎng)實驗來十分重要，而研究發(fā)現(xiàn)，痰液樣本質(zhì)量對培養(yǎng)結(jié)果準確性具有影響[7]，在進行研究過程中，痰液樣本的數(shù)量為400份，結(jié)果提示干酪痰的陽性率最高、唾液的陽性率最低，故此應(yīng)以干酪痰作為首選的實驗標本，從而顯著提高痰液培養(yǎng)陽性檢出率。而在進行痰液取樣過程中，需要對相關(guān)規(guī)范嚴格遵守，預(yù)防培養(yǎng)失敗情況發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn)，不同條件下對于痰液標本進行保存，其對于陽性率能夠造成較大的影響，而在不同溫度下進行樣本培養(yǎng)，能夠獲得不同的檢驗結(jié)果[8]。影響因素如下：(1)溫度固定時對比：如果溫度在-18攝氏度左右，當樣本保存時間不同，容易影響標本檢測的陽性率，兩者之間結(jié)構(gòu)物顯著差異，若溫度在4攝氏度、25攝氏度及30攝氏度時，溫度作為固定值實施對比，不同保存時間的結(jié)果顯示，在保存時間為0天、3天以及7天的樣本中，其不同溫度的陽性率進行比較發(fā)現(xiàn)，無顯著差異之外，21d和28d時，并且隨著保存溫度的升高，使得患者樣本的陽性率也隨之下降，而在28d，30攝氏度的樣本陽性率也顯著降低[9]；(2)保存時間為固定值的對比：固定量作為時間，對不同溫度下對于樣本的保存陽性率的比較，結(jié)果提示，若標本的保存時間相同，隨著保存溫度不斷增加，患者陽性率呈現(xiàn)下降趨勢，尤其是在28天和21天時。本研究結(jié)果顯示，黏液痰40例陽性標本、干酪痰84例陽性標本、唾液7例陽性標本、血性痰24例陽性標本，其中以干酪痰所占比較高，和其他三組比較，具有顯著差異(P<0.05)。在零下18攝氏度的溫度下保存，不同時間段受檢者的不同性質(zhì)痰液(黏液痰、干酪痰、唾液、血性痰)的陽性培養(yǎng)率進行比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；而在4℃的溫度下，治療后14天、21天的陽性培養(yǎng)率和其他溫度下的結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；在25攝氏度的溫度下保存，治療后第7天、第14天、第21天的陽性培養(yǎng)率和其他溫度相比，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；在30℃的溫度下保存，不同時間段的陽性培養(yǎng)率相比，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，由上述可見，其中干酪痰的培養(yǎng)陽性率和其他性質(zhì)的痰液進行比較，差異有統(tǒng)計學意義，是由于研究過程中，在低溫環(huán)境下，患者的痰液性狀能良好進行保存，能夠避免因外界環(huán)境因素的影響使得結(jié)果呈陽性，而在痰液標本實施培養(yǎng)過程中，需要及時進行培養(yǎng)，預(yù)防由于長時間而導(dǎo)致的異常[10]。在-18攝氏度保存溫度下，各個痰液標本檢出情況無顯著差異，說明，在不同時間段內(nèi)，其結(jié)核菌的陽性結(jié)果存在差異性，而保存溫度越高，則表示結(jié)核菌的陽性率存在的差異越明顯，因此在選擇過程中，需要選擇低溫進行保存，早期實施結(jié)核菌陽性培養(yǎng)，在進行培養(yǎng)過程中需要以干酪痰為主,盡量避免選擇唾液；同時，痰液標本需要保持在-18攝氏度的溫度下，從而提高培養(yǎng)結(jié)果準確率，為患者后期治療提供有利依據(jù)，改善預(yù)后。

綜上所述，結(jié)核菌的陽性培養(yǎng)過程中應(yīng)當優(yōu)先選擇干酪痰，同時痰液標本盡可能保存在-18攝氏度的低溫環(huán)境下，對于標本需要早期進行培養(yǎng)。