謝先福
(青海省海東市互助縣畜牧獸醫(yī)站 810500)
抗生素在過去扮演著非常重要的作用,不僅能夠促進動物生長發(fā)育,還可以抑制細菌類疾病的發(fā)生,尤其在幼齡動物腹瀉率方面的控制效果較好。2020年7月,我國開始禁止在飼料生產中使用抗生素,大量替代抗生素產品的試驗被科研人員廣泛研究。較多的抗生素替代產品主要為微生態(tài)制劑類、植物提取物類、酸化劑類、抗菌肽類。其中植物提取物的替抗效果較為理想。植物提取物具有安全、高效、綠色、低殘留、低毒性等特點。植物提取物中的生物活性成分往往具有抗菌、消炎、抗癌、抗氧化、調節(jié)免疫、保護肝臟、保護神經等功效[1]。其中,蘆丁是植物中一種黃酮類活性物質,含量較為豐富,幾乎存在于植物任何部位。大量研究發(fā)現(xiàn),蘆丁可以很好地應用于畜禽養(yǎng)殖生產中,在替抗方面取得不錯的效果。蘆丁在家禽養(yǎng)殖生產中應用,可以有效提高肉雞的生長性能[2];能夠改善蛋雞的蛋品質及加工質量[3]。蘆丁在小鼠中應用,可以促進小鼠腸道形態(tài)發(fā)育,促進免疫器官的生長發(fā)育,清除體內多余的活性氧,增強機體抗氧化功能[4]。蘆丁在反芻動物生產中應用,可以改善反芻動物瘤胃內環(huán)境,提高代謝消化能力,進而提高反芻動物的生產性能[5];蘆丁還可以促進奶牛機體內蛋白質的代謝,促進氨基酸合成[6]。蘆丁在生豬養(yǎng)殖生產中應用,可以改善豬肉的風味、嫩度、營養(yǎng)成分等肉品質指標,通過抑制肌內脂肪的合成及蛋白質的氧化提高肉品質[7]。但目前,蘆丁在肉羊養(yǎng)殖生產中的研究結果甚少。因此,本研究以藏羊為研究對象,探討其養(yǎng)殖生產中使用不同水平的蘆丁對其血清抗氧化指標的影響,并確定蘆丁在肉羊養(yǎng)殖中最適的添加劑量,為蘆丁在肉羊生產中的合理應用提供理論數(shù)據(jù)作為支撐。
本試驗使用的蘆丁有效含量大于90%,購自寧波某醫(yī)藥有限公司。
本研究選擇體重差異不顯著、體況良好、健康無病的肉羊32只,按照單因子隨機試驗設計原則,將肉羊分成4組,每組8只肉羊。對照組的肉羊只飼喂基礎飼料,不飼喂蘆丁;試驗1組肉羊飼喂含有100mg/kg的蘆丁的基礎飼料;試驗2組的肉羊飼喂含有200mg/kg的蘆丁的基礎飼料;試驗3組的肉羊飼喂含有300mg/kg的蘆丁的基礎飼料,其他飼養(yǎng)條件一致。試驗期包括預試驗7d,正式試驗期60d。試驗結束后,檢測各組肉羊血清中總抗氧化能力、谷胱甘肽過氧化物酶、超氧化物歧化酶、過氧化氫酶活性及丙二醛含量。試驗設計見表1。
表1 試驗分組及處理
試驗羊的基礎飼料根據(jù)《肉羊飼養(yǎng)標準》NY/T816—2004進行配制,基礎原料組成及營養(yǎng)成分含量見表2所示。
表2 飼料原料組成及營養(yǎng)成分含量
試驗開始前,對羊養(yǎng)殖場地使用消毒劑衛(wèi)可進行清洗、消毒,通風晾干一周后再進行養(yǎng)殖試驗。試驗開始前,對所有藏羊編號、驅蟲處理。試驗預試驗期間,所有試驗羊采食基礎飼料,待適宜養(yǎng)殖環(huán)境后,進行正式的養(yǎng)殖試驗。試驗期間,羊自由采食、自由飲水。養(yǎng)殖場地的溫度、濕度、通風等環(huán)境條件盡量保持適宜。蘆丁與基礎精料均勻混合后再飼喂給藏羊。羊采食苜蓿作為粗飼料,精粗比4∶6。養(yǎng)殖期間,養(yǎng)殖人員每日觀察羊的采食情況,發(fā)病情況,發(fā)現(xiàn)發(fā)病的羊及時治療。
試驗第60天時,所有羊禁食12h后,采集空腹羊的血液,使用真空管采集10mL血液,靜置2~4h后,使用離心機離心,4000r/min 離心5min,使用移液槍吸取上冊的血清-20℃保存,用于測定羊血清抗氧化指標。
試驗主要檢測羊的血清中的總抗氧化能力、過氧化氫酶、丙二醛、超氧化物歧化酶及谷胱甘肽過氧化物酶,檢測方法參考南京建成生物工程研究所的試劑盒,按照試劑盒說明書計算以上抗氧化指標的數(shù)值。
試驗的抗氧化指標數(shù)據(jù)先用Excel21計算,并做簡單統(tǒng)計整理,之后再采用SPSS24統(tǒng)計學軟件進行單因子方差分析,方差齊性后,統(tǒng)計各指標的顯著性,并使用LSD方法對組內數(shù)據(jù)進行兩兩比較,數(shù)據(jù)結果以均值±標準差呈現(xiàn),且P值小于0.05表示此指標數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計學顯著性。
試驗羊基礎飼料中添加不同水平的蘆丁對其血清抗氧化指標的影響見表3。由表3可知,在羊養(yǎng)殖中使用不同水平的蘆丁對其血清中總抗氧化能力和過氧化氫酶活性未產生顯著性的影響(P>0.05)。與對照組相比,羊養(yǎng)殖中使用200和300mk/kg的蘆丁可以顯著提高藏羊血清中超氧化物歧化酶活性,分別比對照組提高了23.80%、38.59%(P<0.05),而使用100mg/kg的蘆丁度羊血清中超氧化物歧化酶活性未產生顯著影響,但有提高的趨勢(P>0.05)。與對照組相比,羊養(yǎng)殖中使用200和300mk/kg的蘆丁可以顯著提高羊血清中谷胱甘肽過氧化物酶活性,分別比對照組提高了54.95%、76.39%(P<0.05),而使用100mg/kg的蘆丁度羊血清中谷胱甘肽過氧化物酶活性未產生顯著影響,但有提高的趨勢(P>0.05)。與對照組相比,羊養(yǎng)殖中使用200和300mk/kg的蘆丁可以顯著降低羊血清中丙二醛含量,分別比對照組降低了27.12%、31.06%(P<0.05),而使用100mg/kg的蘆丁對藏羊血清中丙二醛含量未產生顯著影響,但有降低的趨勢(P>0.05)。結果表明,在羊養(yǎng)殖生產中使用200mg/kg的蘆丁就可以顯著改善機體的抗氧化能力。
表3 試驗羊基礎飼料中添加不同水平的蘆丁對其血清抗氧化指標的影響
本研究中,使用200mg/kg 和300mg/kg的蘆丁對羊血清中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶活性具有顯著的增強作用,且顯著降低了血清中丙二醛含量,表明在羊養(yǎng)殖中使用200mg/kg的蘆丁可以有效改善羊機體的抗氧化功能。王海波等[8]等研究發(fā)現(xiàn),在肉羊養(yǎng)殖中使用適量(50mg/kg 、100mg/kg)的蘆丁可以提高肉羊血清中谷胱甘肽過氧化物活性,與本研究結果類似。蘆丁提高動物機體的抗氧化能力是由于蘆丁屬于黃酮類化合物,而黃酮類具有較強的抗氧化功能及免疫調節(jié)功能。黃酮類化合物可以清除動物機體內的活性氧,抑制脂質氧化,提高氧化酶活性,清除自由基,抑制自由基合成酶的生成,進而提高了動物機體的抗氧化能力。
本試驗條件下,在羊養(yǎng)殖生產中使用適宜水平的蘆丁可以提高藏羊血清中超氧化物歧化酶活性和谷胱甘肽過氧化物活性,并顯著降低了血清中丙二醛含量,且蘆丁在羊養(yǎng)殖生產中的適宜添加水平為200mg/kg。